肉桂提取物醇质体透皮吸收研究

目的 合成一长链肽47肽。方法 采用Fmoc/t-Bu正交保护多肽固相合成策略,使用9-芴甲氧羰基（Fmoc）保护氨基酸的α-氨基,用Liberty微波多肽合成仪,每个耦合循环用20%哌啶脱除Fmoc保护基团,连续添加氨基酸,并用茚三酮法检测反应终点,有效检测反应的进度,最后用82.5%的三氟乙酸将多肽从树脂上切割下来,得到47肽粗品。经过反相高效液相制备系统纯化得到多肽纯品,用反相高效液相分析仪和傅里叶高分辨质谱仪验证该产物。结果 高分辨质谱仪验证了该产物,纯品质量分数达98%。结论 微波可促进多肽特别是长链肽的合成。     

哑铃型树枝状多肽大分子的合成

目的：合成哑铃型树枝状多肽大分子。方法通过引入小分子化合物Fmoc-Gly-OH作为连接臂,高产率得到双端氨基化聚乙二醇（NH2-CH2-COO-PEG2000-OOC-CH2-NH2）;然后再分别以双芴甲氧羰基保护的赖氨酸〔Fmoc-Lys（Fmoc）-OH〕、芴甲氧羰基及叔丁氧羰基保护的赖氨酸〔Fmoc-Lys（Boc）-OH〕为支化单元,采用液相发散法合成了表面富含氨基的哑铃型PEG/赖氨酸树枝状大分子共聚物。结果和结论利用1H NMR和MS对中间产物及终产物的结构和相对分子质量进行表征,结果表明成功合成了哑铃型树状多肽大分子,为其在生物医学领域的应用打下基础。     

固相合成抗凝血药比伐卢定及合成条件的优化

目的:研究使用Wang树脂与Fmoc保护策略固相合成抗凝血药比伐卢定(bivalirudin)的实验方法?方法:比伐卢定的合成经过了逐步偶联?TFA裂解?脱保护?HPLC纯化等一系列步骤?为了优化反应条件,选择了不同氨基酸取代度的树脂(0.29?0.48?0.59 mmol/g)和不同的缩合试剂(HBTU?DCC?HATU)进行试验?结果:成功得到了纯度为98%的比伐卢定?活性测定表明,不同方法合成的比伐卢定均具有与标准样品相当的抗凝活性,并且显示:①氨基酸取代度为0.3~0.4 mmol/g的Wang树脂可以得到产率及纯度均较高的产品,取代度太大(>0.5 mmol/g)得到的产品副产物多?纯度低;②用HBTU/HOBt为缩合试剂具有操作方便?成本经济?合成效率高等优点?根据以上实验结果选择优化条件,用5 g Wang树脂合成克级单位的比伐卢定,得到的粗品产率可达84%,纯度可达68%以上?结论:通过固相合成的方法,考察了不同氨基酸取代度?不同缩合试剂及规模大小对合成比伐卢定的产率?纯度及活性的影响,对比伐卢定的大量合成具有一定的指导作用?     

Fmoc固相合成法合成黑色素细胞刺激素(MSH)的工艺研究

目的: 研究9-芴甲氧羰基(Fmoc)固相合成法合成黑色素细胞刺激素(MSH)工艺的步骤及其影响因素. 方法: 采用Fmoc保护α-氨基,以TBTU/HOBT/DIEA为缩合剂合成MSH. 用色谱仪和质谱仪对合成的多肽进行纯化、鉴定. 结果: 多肽合成的得率可达63%,经反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)对合成的多肽进行纯化后可得纯度为98.67%的目标肽. 通过基质辅助激光解吸附电离飞行质谱仪(MALDI-MS)检测所合成多肽的分子质量为1663.88 ku,与其理论分子质量1664.08 ku相符. 结论: 该合成法具有快捷、简便、高效地合成多肽MSH的特点,适合大批量生产.     

王树脂固相法人工合成生长抑素

目的：人工合成生长抑素。方法：以侧链保护的氨基酸为原料,用王树脂作为反应载体,在固相合成反应器中手工合成14个氨基酸的多肽生长抑素,并探讨影响合成的因素。结果：王树脂固相法合成生长抑素的纯度高达70%以上。结论：标准化的合成流程对生成抑素的人工合成有一定价值。     

肿瘤抗原MAGE-3预测CTL表位的合成与鉴定

目的 合成并鉴定已预测出的４个ＭＡＧＥ－３ ＨＬＡ－Ａ２限制性ＣＴＬ表位多肽,为后续研究奠定基础。方法 采用固相合成法合成多肽,经ＲＰ－ＨＰＬＣ纯化、纯度分析,用质谱进行定性鉴定。结果 ４个合成肽的纯度都在９５％以上,经质谱分析,各肽的分子量测定值与理论值相符,结论 所得多肽为高纯度的目标肽,为后续研究提供了可靠的保证。     

穿膜肽TAT的固相合成及体外活性研究

目的 以固相合成法合成穿膜肽TAT,并对合成产物进行活性评价.方法 采用Na-芴甲氧羰基(fluorenyl-methyloxyloxycarbonyl,FMOC)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成穿膜肽TAT.应用高效液相色谱和质谱仪测定其纯度及相对分子质量;荧光显微镜观察穿膜肽TAT介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green flutescent pro-tein,pEGFP)质粒在体外培养人脐静脉内皮细胞中的转染效果以评价穿膜肽TAT的生物活性;MTT法检测穿膜肽TAT与质粒DNA复合物对人脐静脉内皮细胞生长活性的影响.结果 高效液相色谱和质谱鉴定所制备穿膜肽TAT的纯度为96.6%,相对分子质量1 880.它能够携带质粒DNA穿过细胞膜进行基因转染,并对细胞活性无明显影响.结论 采用Fmoc固相肽合成法可以成功地合成有生物活性的穿膜肽TAT.     

氯化血红素-空气催化氧化体系应用于利那洛肽的合成

目的 使用氯化血红素催化氧化的方法合成利那洛肽.方法 采用9-芴甲氧头羰基(Fmoc)固相合成策略,以Wang树脂为载体和三苯甲基(Trt)为保护基的半胱氨酸合成利那洛肽线性肽,使用氯化血红素-空气催化氧化体系一步氧化法构建3对二硫键,并与传统的空气、二甲基亚砜和碘(I2)氧化法进行了对比.结果和结论 相对于传统氧化法,氯化血红素催化氧化法可更快速、更高效地得到目标利那洛肽,为多肽合成中的二硫键形成提供一种新的方法.     

肿瘤靶向性细胞穿膜肽的固相合成及体外活性研究

目的采用固相合成法合成以基质金属蛋白酶为靶点的肿瘤靶向性细胞穿膜肽,用5-羧基四甲基罗丹明对其进行荧光标记,并对合成的产物进行生物活性和细胞毒性评估。方法采用N-芴甲氧羰基(Fmoc)作为α-氨基酸的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成肿瘤靶向性细胞穿膜肽,并在有耦合剂HATU和DMF的情况下,加入5-羧基四甲基罗丹明进行荧光标记,应用高效液相色谱分析仪和质谱仪测定其纯度和分子量;荧光显微镜观察穿膜肽对体外培养的肝癌细胞株SMMC-7721和正常肝脏细胞株LO2的穿膜效果,以评价穿膜肽的生物学活性;MTT比色法检测穿膜肽对SMMC-7721细胞活性的影响。结果所合成的细胞穿膜肽经高效液相色谱法鉴定纯度为96.05%,经质谱鉴定相对分子量为3504.9。这种穿膜肽对正常肝脏细胞株LO2无明显穿膜作用,但对肝癌细胞株SMMC-7721有较强的穿膜作用,并且对细胞活性无明显影响。结论采用Fmoc固相肽合成法成功合成细胞穿膜肽;所合成的细胞穿膜肽具有肿瘤靶向性。     

血清胸腺因子(FTS)的合成和活性测定

采用芴甲氧羰基（Fmoc）固相肽合成法（Fmoc～SPPS）合成了血清胸腺因子（FTS），用中压液相阴离子柱一步纯化，经HPLC分析纯度，通过质谱和氨基酸序列测定鉴定合成产物。根据FTS恢复胸腺切除小鼠的脾细胞对免疫抑制荆AZ敏感的特性测定合成FTS的活性。结果表明：化学合成血清胸腺因子的产率为94．7％；纯化后其纯度达到93．7％；质谱测定其相对分子质量为876．6，与理论分子量相符。氨基酸序列测定为NH2／Glu—Ala—Lys—Ser—Gin—Gly—Gly—Ser—Asn，与设计序列一致。实验显示在合成FTS的浓度为10^-14mol／L时尚有部分活力，在10^-13mol／L时能够完全恢复胸腺切除小鼠的脾细胞对AZ的敏感性。     

5-吡啶基-10,15,20-三甲苯基卟啉及其类似物的合成与表征

目的与方法以吡咯、对甲基苯甲醛、对甲氧基苯甲醛和醛基吡啶为原料,制备3个不对称卟啉化合物：5-（3′-吡啶基）-10,15,20-三甲苯基卟啉（1）,5-（3′-吡啶基）-10,15,20-三甲氧苯基卟啉（2）,5-（4′-吡啶基）-10,15,20-三甲氧苯基卟啉（3）。采用元素分析、电喷雾质谱、核磁共振以及电子吸收光谱和荧光发射光谱对目标化合物进行表征。结果与结论目标化合物1、2、3的电喷雾质谱（ESI-MS）分别在658.7、706.5和706.5出现一个归属于[M＋H]＋的分子离子峰,实验结果与理论计算基本一致;目标化合物1、2、3的电子吸收光谱分别在419、422和422 nm出现一个归属于卟啉环的特征Soret吸收,在450-700 nm之间出现归属于卟啉环的特征Q-带吸收。     

瞿麦中环肽化合物的TLC与HPLC鉴别简

目的 建立用高效液相色谱法和薄层色谱法鉴别瞿麦中的环肽化合物的方法.方法 用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分别对瞿麦的正丁醇提取物进行萃取,对收集的Ⅱ（15-19）部位经Sephadex LH-20柱色谱分离,Ⅱc部位再次进行硅胶柱色谱分离,其中Ⅱc11为甲醇洗脱部位（204-209）,其中含有环肽成分.结果 高效液相色谱法成功分离出瞿麦中的环肽成分,薄层色谱也显示出环肽的斑点.结论 本实验建立的高效液相色谱条件与薄层的分离鉴别方法适用于初步鉴定瞿麦的环肽成分.     

中药罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位氨基酸HPLC指纹图谱分析

目的：构建中药罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位氨基酸指纹图谱,为明确其氨基酸组成及建立其质量控制方法提供实验依据。方法用2,4-硝基氟苯柱前衍生法建立罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位水解氨基酸的HPLC指纹图谱,优化衍生条件。结果衍生剂量为1%（体积分数）2,4-二硝基氟苯（2,4-dinitrofluorobenzene,DNFB ）乙腈溶液1.0 mL、衍生温度为60℃、衍生时间为60 min时,衍生化完全;样品水解氨基酸中谷氨酸和精氨酸的质量分数较高,均大于5%;HPLC指纹谱图共确定24个共有峰,10批样品相似度在0．99-1．00之间。结论本方法稳定、可靠,重复性好,明确了罗仙子抗动脉粥样硬化活性部位的氨基酸组成,并初步建立了该部位的质量控制方法。     

戈壁天冬中的木脂素和酚酸类化学成分

目的 研究天门冬属植物戈壁天冬中的化学成分。方法 使用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、制备液相色谱及薄层色谱等多种色谱分离技术对戈壁天冬全草95%乙醇提取物进行分离纯化,利用理化常数和多种波谱技术对化合物进行了结构鉴定。结果 从戈壁天冬中分离鉴定了9个化合物,其中6个是木脂素类化合物,分别为(+)-松脂素（1）,(-)-丁香脂素（2）,(+)-丁香脂素-4'-O-β-D-葡萄糖苷（3）,(-)-表丁香脂素（4）,(+)-nyasol（5）,(+)-4'-O-methylnyasol（6）;3个酚酸类化合物,分别为阿魏酸（7）,异阿魏酸（8）,咖啡酸（9）。结论 所有化合物均为首次从本植物中分离得到,其中化合物1~4和8为首次从天门冬属植物中分离得到。      

微波辅助合成芳烃钌（Ⅱ）配合物[（η^6-C6H5）Ru（PIP）Cl]Cl·2H2O

目的探讨应用微波辅助合成技术制备芳烃钌（Ⅱ）化合物[（η6-C6H6）Ru（PIP）Cl]Cl.2H2O（3）。方法首先以RuCl3.nH2O、1,3-环己二烯和1,10-邻菲啰啉为原料微波辐射下制备得到芳烃钌前体[（η6-C6H6）RuCl2]2（1）和2-苯基-咪唑并[4,5f][1,10]菲啰啉（PIP,2）,然后,在二氯甲烷溶液中,微波辐射1与2制备芳烃钌（Ⅱ）配合物3;采用ESI-MS、IR、1H-NMR、13C-NMR对目标配合物进行表征。结果 60℃条件下,化合物1与2在二氯甲烷溶液微波辐射30 min,制备得到了芳烃钌配合物3,反应产率为90.3%;目标产物经ESI-MS、IR、1H-NMR和13C-NMR表征,实验值与理论值基本一致。结论与传统加热方法相比,微波辅助合成芳烃钌配合物明显缩短了反应时间,提高了反应产率。     

中国南海海绵Ircinia sp.中化学成分的研究

目的:对采自广西涠洲岛海域海绵Ircinia sp.进行化学研究以获得结构新颖的新化合物。方法:运用高速逆流色谱、凝胶渗透色谱、硅胶柱色谱和半制备型高效液相色谱等多种技术分离纯化,再通过氢谱、碳谱和质谱等谱学解析方法鉴定出单体成分的结构。结果:从海绵Ircinia sp.中分离鉴定出5个化合物,分别命名为cholest-7-en-6R-methoxy-3S,5R-diol(1),cholest-7-en-3S,5R,6R-triol(2),cholest-7,22-dien-6R-methoxy-3S,5R-diol(3),鲨肝醇(4)和邻苯二甲酸正丁酯(5)。结论:化合物1～3为首次从该属海绵中分离得到。     

柱前衍生高效液相色谱法测定瓜蒌皮中游离氨基酸含量

目的:建立柱前衍生高效液相色谱法(RP-HPLC)测定瓜蒌皮中游离氨基酸含量的方法。方法 :采用异硫氰酸苯酯(PITC)为柱前衍生试剂,高效液相色谱法色谱柱为(Atlantis dC18 Column(3μm,4.6 mm×150 mm,Waters),流动相A:甲醇-乙腈(1∶2),流动相B:0.15 mol/L乙酸钠,流速1.0mL/min,梯度洗脱,柱温35℃,吸收波长254 nm。结果:各种氨基酸均能达到基线分离。结论:柱前衍生高效液相色谱法作为瓜蒌皮药材中游离氨基酸的测定手段之一,准确可靠。     

不同动物皮制胶中氨基酸成分及相似度分析

目的：系统比较不同动物皮制胶中氨基酸的组成、含量及相似度,为阿胶的真伪辨别提供方法学的借鉴及理论依据。方法：运用阿胶制备工艺,采用猪皮、牛皮和驴皮3种动物皮制备阿胶。采用HPLC异硫氰酸苯酯柱前衍生化法测定阿胶胶原蛋白中氨基酸的组成,并利用相似度软件分析其相似度,从而确证不同动物皮制备阿胶的差异性。结果：不同动物皮制的阿胶除不能检测到胱氨酸之外,其余18种氨基酸均能检测到,且氨基酸相似度均〉0．990;进一步分析氨基酸的总量和纯度,猪皮、牛皮、驴皮胶中氨基酸总量依次为54．50％、79．70％、82．10％,具有显著的差异。但《中国药典》（2010版）载的鉴别驴皮胶的4种特征氨基酸在各胶中均显示较高的含量,且牛皮胶中的含量已达到《中国药典》规定。结论：仅依靠氨基酸的组成或特征氨基酸的含量测定鉴别驴皮胶真伪具有一定的风险性,可考虑参考胶原蛋白总量的差异性。     

氨基酸类神经递质对神经系统的影响及其含量测定方法的研究

氨基酸类神经递质是脑内重要的一类神经递质,调控人脑的功能,神经系统疾病,如阿尔茨海默病与脑内氨基酸关系密切。目前应用较为广泛的氨基酸含量测定方法有高效液相色谱法、氨基酸分析仪测定法、色谱-质谱联用法,气相色谱法等,但这些测定方法都有一定的局限性,因此快速选择并确立一种合适的氨基酸和多肽类神经递质的高效测定方法显得尤为重要。该文综述了近年来血液与组织样品中氨基酸类神经递质的含量测定方法,以期为更多的研究者提供参考。     

1种新型喹诺酮类衍生物的合成与表征

目的 设计合成7,8-二甲氧基-2（1H）-喹啉酮-3-甲酸甲酯.方法 以简单易得的香兰素为原料,通过乙酰化、硝化、甲基化、还原及缩合5步反应进行合成.结果 合成得到的目标化合物经1H-NMR、13C-NMR、IR确证为7,8-二甲氧基-2（1H）-喹啉酮-3-甲酸甲酯.结论 7,8-二甲氧基-2（1H）-喹啉酮-3-甲酸甲酯是一种具有潜在药理活性的新型喹诺酮衍生物,未见文献报道.