高质量植物基因组DNA的分离

为了从富含多酚和我糖的药用植物组织中分离出高质量基因组DNA,本文通过改良几种已经存在的分离方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。使用该方法从人参、西洋参及三七的新鲜或干燥根组织分离DNA时,A260/A280为1.8左右,分子量大小约为21.2kb,由此所得的DNA可直接用于AFLP分析,即用EcoR I/Mse I消化DNA后,用DNA的限制酶切片段经T4 DNA连接酶连接,再用巢式PCR扩增,构建出可重复的、多态性丰富的人参、西洋参、三七基因组DNA AFLP指纹图谱。结果表明,该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量和高分子量DNA,此法亦有望用于其它植物DNA的分离。     

提取道地药材基因组DNA方法的探讨

目的为研究道地药材的遗传多样性、种类鉴定和基因指纹图谱的构建等提供技术保证。方法以道地中药材板桥党参（板党）、五鹤续断药源植物的鲜嫩叶片为材料,采用改进的CTAB法从中提取出基因组DNA,检测其提取效果。结果使用改进的CTAB法从鲜叶中提取板党、五鹤续断的基因组DNA浓度较高,能满足PCR反应的要求。结论自行改进的CTAB法提取道地药材板党、五鹤续断基因组DNA效果较好。     

泰山白花丹参干叶片高质量DNA的提取

目的为了从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较了4种DNA提取方法,获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。CTAB-freeBuffer清洗,4倍CTAB抽提和固体PVP和VC防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNAA260/A280为1.86,由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药用植物组织中分离出高质量DNA。     

改良CTAB法提取石斛总DNA

植物总DNA的提取是分子生物学研究的基础,虽然提取植物总DNA的方法有很多[1～4],对石斛总DNA的提取也有一些报道[3～4],然而按这些方法所提取出来的DNA并不能达到预期的效果.     

忍冬叶片基因组DNA的提取与分析

目的:获取高质量的忍冬基因组DNA。方法:采用改良CTAB法从忍冬叶片中提取DNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切检测其质量,并与常规CTAB法比较。结果:改良CTAB法所得DNA优于常规CTAB法,电泳条带清晰,完整性好,纯度高,能被完全酶切。结论:改良CTAB法适合忍冬基因组DNA的提取。     

改良CTAB法提取连钱草基因组DNA

目的:建立高质量的连钱草基因组DNA的提取方法.方法:在传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法的基础上加以改良,比较不同浓度CTAB对提取的连钱草基因组DNA质量的影响,并对所得的DNA采用紫外分光光度计、电泳和PCR扩增等方法进行检测.结果:用2%浓度的CTAB处理所获得的基因组DNA质量较好,蛋白质残留少,RNA消...     

结核分枝杆菌DNA两种提取方法比较

目的 :比较能够满足内切酶分析的结核分枝杆菌染色体DNA提取的两种方法 ,并结合实验室条件加以改进。方法 :称取结核分枝杆菌培养物 ,灭活后以溶菌酶和蛋白酶K消化后 ,分别以CTAB/NaCl和酚 /氯仿 /异戊醇 (2 5∶2 4∶1)抽提 ,无水乙醇沉淀 ,紫外分光光度计测定DNA的含量。结果 :酚抽提法和CTAB抽提法提取的基因组DNA的得率分别为0 47± 0 0 71,0 41± 0 10 (‰ ,W/W )。A2 60 /A2 80 的值分别为 1 83± 0 12 ,1 89± 0 0 72。结论 :用CTAB/NaCl抽提结核分枝杆菌基因组DNA均能满足内切酶及杂交操作的要求 ,酚抽提法得率稍高 ,但无统计学意义。CTAB法污染少 ,省时省材 ,可代替酚抽提DNA。     

合成DNA片段的分离及连接

研究设计了一段带终止信号的DNA序列,通过DNA合成仪分为四个片段合成。本文介绍经DNA合成仪合成DNA片段后的处理,纯化及连接过程.经测定DNA的连接效率在65％左右。     

玄参总DNA提取方法的比较研究

目的探讨药材玄参总DNA的最佳提取方法。方法分别采用SDS法和CTAB法提取药材玄参总DNA,并对其进行核酸含量测定和电泳检测。结果采用SDS法提取的总DNA其OD260/OD280=1.83,而采用CTAB法提取的总DNA其OD260/OD280=1.64;DNA电泳检测显示采用SDS法提取的总DNA条带清晰,而采用CTAB法提取的总DNA出现严重的拖尾现象。结论用SDS法提取药材玄参总DNA优于CTAB法。     

两种提取白桂木基因组DNA方法的比较研究

[目的]寻找适合白桂木基因组DNA的提取方法。[方法]采用改良的CTAB法及试剂盒法提取白桂木基因组DNA。用紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法检测白桂木DNA纯度、浓度,比较两种方法的适用性。[结果]试剂盒法能够较好去除多糖及其他次生代谢产物。[结论]试剂盒法更适合从白桂木中提取高质量的DNA。     

高质量的丹参叶片DNA的提取方法研究

目的从富含多酚和多糖的泰山白花丹参干叶片中分离出适用于AFLP分析的高质量基因组DNA。方法比较4种DNA提取方法，获得了一种以CTAB法为基础的分离高质量完整DNA的简便、快速方法。此法包括：CTAB-free buffer清洗，4倍CFAB抽提和固体PVP和Vc防止氧化。结果使用该方法从泰山白花丹参干叶片中分离的DNA OD260／OD280为1．86，由此法所得的DNA可直接用于AFLP分析。结论该技术可有效地从富含多酚和多糖的药周植物组织中分离出高质量DNA。     

大口鲇(Silurus meridionalis)核基因组DNA研究初探

目的 报道大口鲇不同群体个体核基因组DNA的大小。方法 采用笔者改进后的酚抽提法纯化核基因组DNA。结果 得到基因组DNA电泳图谱。结论 大口鲇不同群体个体基因组DNA大小相同。保存在-27℃冰箱中的核基因组DNA降解较少。     

金银花药材脱氧核糖核酸(DNA)提取方法的研究

目的:研究金银花药材总脱氧核糖核酸(DNA)的提取方法。方法:对经典的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法进行了改良,采用改良的CTAB法提取金银花药材的总DNA,通过紫外吸收、琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和浓度。结果:用改良的CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280比值在1.76-1.85之间,干药材提取率为89.8-325.4μg/g。结论:用改良CTAB法提取的基因组DNA纯度高,符合分子生物学的要求。     

多聚酶链反应产物DNA的简便、快捷纯化法

在分子生物学领域中，常常需要对DNA样品作有效的分离、纯化。由于许多实验过程中所涉及的DNk量甚微，因此要求所使用的方法既能达到纯化的目的，又不至于将十分微量、珍贵的DNA样品丢失。作者在进行多聚酶链反应（PCR）产物DNAN序过程中，需要纯净的DNA作为测序反应系统的模板。在这一系列的工作中作者发现，直接用PCR产物进行测序难以获得清晰的凝胶图谱。为此，作者采用一种细小的玻璃微珠（glass-milk）分离纯化PCR产物，以获得较纯净的DNA，然后将此DNA应用于测序反应，效果满意，现介绍如下。1材料与方法本文所进行的PC…     

四种微量全血DNA提取方法的比较

目的比较加热去蛋白法、碘化钠法、TT溶血法、氯化胺法四种方法提取人微量全血基因组DNA的纯度及总量的差异.方法收集静脉全血0.5ml,共356人份,分别采用上述四种方法提取基因组DNA,用紫外分光光度仪及琼脂糖凝胶电泳检测其纯度和总量,计算采用x±s,结果经统计学t检验处理.结果四种方法提取的基因组DNA纯度用OD260/OD280表示分别为:加热法1.569±0.158;碘化钠法1.517±0.093;TT溶血法1.789±0.161:氯化胺法1.815±0.051.四种方法提取的基因组DNA总量分别为:加热法(9.34±3.59)μg;碘化钠法(7.82±4.23)μg;TT溶血法(20.98±3.56)μg;氯化胺法(22.07±4.53)μg;加热法与碘化钠法比较,TT溶血法与氯化胺法比较,P＞0.05,无显著性差异;TT溶血法、氯化胺法分别与加热法、碘化钠法比较,P＜0.05,有显著性差异.结论从提取的基因组DNA纯度和总量来比较,氯化胺法与TT溶血法是四种提取人微量全血基因组DNA方法中较好的两种.     

植物药材总DNA提取

目的 为获得高质量的DNA，研究木质部较发达的根，根茎类以及茎木类药材的DNA提取方法。方法 总DNA的提取过程包括用Tris缓冲液洗净，CTAB抽提和纯化。结果 对升高，Chong木，木香，乌药，芍药和木通等进行了DNA提取，能较好的去除色素，多糖等干扰PCR物质。结论 本法使用常用试剂，成本低，易于推广，为药材DNA分子鉴别的应用奠定了基础。