肠出血性大肠埃希菌O104:H4病原学及其防治研究进展

2011年5-7月在德国北部暴发一起肠出血性大肠埃希菌(enterohemorrhage,Escherichia coli,EHEC)O104:H4感染的疫情,该疫情从德国北部起始,很快就席卷整个德国并蔓延至欧洲、北美国家.EHEC O104:H4是新世纪以来出现的又一新发传染病,其致病性强,传播速度快,引起全世界的关注.迄今中国尚无此病的报道,但在全球化的今天,了解并充分防范已成共识.据此,该文就EHEC的病原学、快速检测法、所引起的主要疾病发病机制及临床症状、预防措施等方面的研究进展进行综述.     

肠出血性大肠杆菌O157：H7的研究进展

肠出血性大肠杆菌是近十几年才认识的一种新的致泻性大肠杆菌，自1982年在美国俄勒冈州和密执安州报道两例由大肠杆菌(E．coli)O157：H7引起的出血性肠炎流行以来，许多国家和地区相继报告有此类病例的发生和流行，我国在1987年首次发表此菌     

荧光定量PCR快速检测食品中肠出血性大肠杆菌O104

目的建立针对肠出血性大肠杆菌O104的荧光定量PCR快速检测方法。方法针对O104的wzx保守基因,设计特异性引物和探针,采用倍比梯度稀释法检测该体系的灵敏度,以另外34株肠道致病菌评价检测方法的特异性;建立了肠出血性大肠杆菌O104感染食品的检测模型以验证方法的适用性。结果建立了荧光定量PCR快速检测肠出血性大肠杆菌O104的方法。每次检测最低限为12.0copies,特异性为100%。结论该法缩短了检测时间,并有良好的灵敏性和特异性,在疾病防控及食品卫生行业中具有应用前景。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7病原学及流行病学特征

肠出血性大肠杆菌O157∶H7是一种新型的致病性大肠杆菌,肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻是近年来新发现的危害严重的肠道传染病。除了引起腹泻、出血性肠炎外,还可发生溶血性尿毒综合征（HUS）、血栓性血小板减少性紫癜（TTP）等严重的并发征,后者病情凶险,病死率高[1]。     

德国肠出血性大肠杆菌O104:H4暴发疫情带来的思考

2011年4月以来,德国多个地方肠出血性大肠杆菌(EHEC)O104:H4感染和溶血性尿毒综合征(HUS)疫情暴发。本文概述本次疫情的概况以及德国政府采取的应对措施,并从机构协作、信息公开、流行病学发挥的作用、症状监测重要性四个方面讨论对我国口岸卫生检疫工作的启示。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7的研究进展

肠出血性大肠杆菌是近十余年来才认识到的一种新的致泻性大肠杆菌。其中Ｏ１５７：Ｈ７是与人出血性结肠炎有关的主要血清型，能造成血性腹泻和其它严重并发症。本文就近年来肠出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的临床和实验室检查等有关研究进展进行综述。     

2011年德国肠出血性大肠杆菌O104：H4疫情流行病学调查及启示

2011年5-7月德国发生一起肠出血性大肠杆菌(EHEC)O104(:)H4感染引起的暴发疫情,并波及欧盟其他13个国家及美国、加拿大等地,报告EHEC感染和溶血性尿毒综合征(HUS)病例4400余例[1].自发现疫情以来,德国联邦公共卫生机构罗伯特·科赫研究所(Robert Koch Institute,RKI)联合联邦及有关州卫生部门及医疗、研究机构开展了一系列流行病学调查,掌握了疫情特征,逐步查明病因,为采取控制措施提供了重要依据[1-3].     

熔解曲线分析方法甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7

目的:采用熔解曲线分析技术,建立一种快速、简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7方法。方法:选取肠出血性大肠杆菌O157:H7编码脂多糖基因(rfbE)和编码鞭毛抗原基因(fliC)作为检测靶基因,建立荧光PCR反应体系。结果:通过多种标准菌株试验,结果显示所建立的熔解曲线分析法可特异性地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7;纯培养的灵敏度达到2.8×101cfu/ml;检测108例临床样本,其中18例肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性,3例为肠出血性大肠杆菌O157:非H7阳性,与常规培养方法的符合率达到100%。结论:本方法可简便、准确地甄别肠出血性大肠杆菌O157:H7,结果可靠,通过进一步增加反应体系中引物的数量可同时对肠出血性大肠杆菌其他血清型进行鉴定。     

2008-2012年南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7监测结果

目的 了解南宁市肠出血性大肠杆菌0157:H7在人群及外环境中的感染情况,为防制工作提供依据.方法 2008-2012年采集南宁市现症腹泻患者、动物宿主粪便标本、市场生熟食品和苍蝇标本,经mEC增菌后用SMAC分离,纯化菌株经生化鉴定、血清分型等方法进行检测.结果 在2 139份腹泻患者标本中未检出阳性标本;在3 088份外环境标本中检出阳性标本20份.南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7感染阳性率呈现逐年下降趋势;不同动物粪便肠出血性大肠杆菌O157:H7阳性率不同,以牛粪检出阳性率最高.结论 南宁市肠出血性大肠杆菌O157:H7仍有散在的动物感染,应加强对动物粪便的管理及肠出血性大肠杆菌O157:H7的监测工作.     

肠出血性大肠杆菌O157:H7的研究进展

肠出血性大肠杆菌是近十余年来才认识到的一种新的致泻性大肠杆菌,其中0157:H7是与人出血性结肠炎有关的主要血清型,能造成血性腹泻和其它严重并发症。本文就近年来肠出血性大肠杆菌0157:H7的临床和实验室检查等有关研究进展进行综述。     

中国部分地区大肠埃希菌O157的分子分型及变异研究

目的了解出血性大肠埃希菌（EHEC）O157的分子流行特征和遗传变异关系并完善EHECO157：H7感染性腹泻监测制度。方法采用聚合酶链反应分析毒力基因的分布情况；用脉冲场凝胶电泳技术对1988-2005年部分地区分离到的249株EHECO157：H7（其中产志贺毒素的245株，不产志贺毒素的4株）和51株O157非H7进行分子流行病学分析。结果stx2基因在我国的EHECO157：H7菌株中有着很高的分布率，部分菌株携带stx2基因变种。300株O157共分为161种带型，其中51株O157非H7菌株共有42种带型，4株O157：H7非产毒株分别为4种带型，245株EHECO157：H7共有115种带型。结论EHECO157间的基因变异较大；产stx2原毒素的菌株和5衄2毒素发生变异的菌株带型相差较大。部分菌株之间存在着一定的交叉，说明虽然这两大类菌株有其特有的流行克隆系，但是它们的克隆系之间亲缘关系较近。     

大肠埃希菌O157:H7的实时荧光PCR检测方法研究

目的建立一种敏感、特异、快速的大肠埃希菌O157:H7的检测方法,应用于突发公共卫生事件及食源性致病菌流行病学调查的检测。方法根据GenBank大肠埃希菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和TaqMan探针,对实时荧光PCR反应条件进行优化,建立实时荧光PCR检测大肠埃希菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价。结果大肠埃希菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达1×102cfu/ml。模拟污染的猪肉、羊肉、鸡肉、生食蔬菜样品,均可检出1×104cfu/ml的细菌。从细菌核酸提取至完成检测约需3 h。结论建立的实时荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、快速等优点,可用于大肠埃希菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

用最低检出限评价大肠埃希菌O157:H7的检测方法及应用研究

目的用最低检出限评价大肠埃希菌O157:H7的三种检测方法,在突发公共卫生事件及食源性致病菌流行病学调查中,将大肠埃希菌O157:H7的检测方法有机组合,提高检测的速度、灵敏度。方法将标准菌株10倍稀释,制备模拟样品,用大肠埃希菌O157:H7的三种方法进行检测,比较不同检测方法的最低检出限。结果标准菌株10倍稀释改良CHROMagar O157显色琼脂平板分离法、免疫磁珠分离法、实时荧光PCR法检测法的最低检出限分别为103、100、102cfu/ml;模拟样品中增菌前改良CHROMagar O157显色琼脂平板分离法、免疫磁珠分离法、实时荧光PCR法检测法的最低检出限分别为105、101、104cfu/ml,增菌培养后改良CHROMagar O157显色琼脂平板分离法、免疫磁珠分离法、实时荧光PCR法检测法的最低检出限分别为102、100、100cfu/ml。结论免疫磁珠分离法在增菌前和增菌培养后的检出限为最低,增菌培养后实时荧光PCR法的检出限也达到了最低,适用于食物中毒及食源性疾病的快速诊断。用改良CHROMagar O157显色琼脂平板分离法进行检测,易造成漏检。将免疫磁珠分离法、实时荧光PCR法有机组合,可以大大提高检测的速度,灵敏度,并且可获得菌株。     

我市首次分离到O157:H7大肠杆菌分离株的生化特征、毒力因子与耐药性的探讨

目的：了解金华市外环境中O157：H7大肠杆菌分离株中生化特征、毒力因子的携带与耐药情况。方法：直接分离接种于O157显色培养基。结果：从51份样品中分离出2株O157：H7大肠杆菌,对这2株O157：H7大肠杆菌分离株进行PCR毒力因子的测定,携带eaeA、stx2毒力因子。结论：药敏试验结果显示,这两株O157：H7大肠杆菌分离株对利福平类、四环素耐药。     

Sporadic Occurrence of Enteroaggregative Shiga Toxin–Producing Escherichia coli O104:H4 Similar to 2011 Outbreak Strain

We describe the recent detection of 3 Shiga toxin–producing enteroaggregative Escherichia coli O104:H4 isolates from patients and 1 from pork in the Netherlands that were genetically highly similar to isolates from the 2011 large-scale outbreak in Europe. Our findings stress the importance of safeguarding food supply production chains to prevent future outbreaks.     

大肠杆菌O157∶H7双重荧光PCR方法的建立与应用

摘要:目的　建立快速检测食品中大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR 方法。方法　针对大肠杆菌O157︰H7菌体抗原O和鞭毛抗原H的特异性基因rfbE（O157）和fliC（H7）筛选设计引物和探针,优化反应条件,建立可特异性检测大肠杆菌O157︰H7的双重荧光PCR方法,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行评价,对模拟样品和实际样品进行初步验证。结果　利用建立的方法对2株大肠杆菌O157︰H7及12株非大肠杆菌O157︰H7进行检测,O157︰H7菌株检测结果均为rfbE和fliC阳性,非O157︰H7菌株检测结果均为阴性,rfbE和fliC基因的特异性均为100%;2基因的检测灵敏度可达1.16×102 CFU/ml;批内、批间变异系数均小于3.5％;模拟样品立即检测,2个基因的最低检出限（2.7×102 CFU/ml）和细菌纯培养时接近;实际样品检测结果与我国检验检疫行业标准（SN/T 0973-2010）的检测结果一致。结论　建立的荧光定量PCR 方法特异性及重复性好,灵敏度高,可快速准确鉴定大肠杆菌O157︰H7菌株。