腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨腺苷预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用和机制.方法:制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型.将大鼠随机分为3组,用Zeal Longa 5级评分法进行神经功能评分;观察各组脑组织HE染色的病理结构.结果:神经功能评分AP组各亚组均小于IR组各亚组(P均<0.05),但大于F组各亚组(P均<0.05);F组各亚组HE染色无脑缺血再灌注损伤的病理改变,AP组各亚组脑组织HE染色的病理改变均较IR组各亚组轻.结论:腺苷预处理能减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤所引起的神经功能缺损症状.     

参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响

目的探讨参附注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注Bcl-2、Bax的表达的影响.方法用免疫组织化学方法与医学图像分析检测假手术组、模型组及参附注射液组大鼠大脑皮层Bcl-2、Bax蛋白表达的阳性表达指数.结果与假手术组比较,模型对照组Bcl-2、Bax蛋白的阳性表达指数升高(P＜0.05).与模型对照组比较,参附注射液组Bcl-2蛋白的阳性表达指数升高(P＜0.05),Bax蛋白的阳性表达指数降低(P＜0.05).结论参附注射液可增强Bcl-2的表达、抑制Bax的表达.这可能是参附注射液防护大鼠脑缺血再灌注损伤的机制之一.     

奥拉西坦对大鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2及 Bax表达的影响

目的：探讨奥拉西坦对大鼠脑缺血再灌注损伤后 Bcl-2及Bax蛋白表达的影响。方法利用大脑中动脉线栓法建立大鼠缺血再灌注模型,随机分为假手术组、生理盐水组、奥拉西坦小剂量组、奥拉西坦大剂量组。应用免疫组织化学法检测再灌注24 h后大鼠脑组织Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果与假手术组比较,生理盐水组大鼠的Bcl-2和Bax蛋白表达明显增加（P＜0.01）,与生理盐水组比较,药物组Bcl-2表达显著增多（P＜0.01）, Bax表达显著减少（P＜0.01）,奥拉西坦大剂量组较奥拉西坦小剂量组的Bcl-2表达增多（ P＜0.05）、 Bax表达减少（ P＜0.05）。结论局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、 Bax表达增强,奥拉西坦能通过上调Bcl -2蛋白和下调Bax蛋白起到脑保护的作用。     

红花注射液预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察红花注射液预处理后局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中水、Na+、Ca2+含量的变化,探讨红花注射液预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。SD大鼠40只,随机分为对照组、假手术组、模型组、红花预处理组,每组10只。用Zeal Longa 5级评分法进行神经功能评分;测定各组大鼠脑组织中水、Na+、Ca2+含量。结果:红花预处理组神经功能评分均低于模型组(P<0.05),但高于对照组和假手术组(P<0.05)。对照组和假手术组大鼠脑组织中水、Na+、Ca2+含量比较差异无统计学意义(P>0.05);模型组水、Na+、Ca2+含量明显高于对照组和假手术组,红花预处理组低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:红花注射液预处理可以抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织水肿和Ca2+超载作用,从而对脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

清热化瘀方对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察清热化瘀方对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法将模型大鼠随机分组,运用免疫组化法分别观察其缺血再灌注后第6、12、24小时Bcl-2和Bax的数据。结果缺血再灌注6h时Bcl-2表达最高,以后随时间逐渐下降。而Bax在缺血再灌注后第6小时开始出现,随时间增加。清热化瘀方能增加Bcl-2表达,降低Bax表达（P〈0.05）。结论清热化瘀方能通过上调Bcl-2,下调Bax和增加Bcl-2/Bax表达比来降低大脑缺血再灌注大脑的凋亡细胞的数量。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2和Bax的表达

目的：研究大鼠脑缺血再灌注后凋亡相关基因Bcl-2和Bax在缺血皮层表达的变化。方法：线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，免疫组化法观察Bcl-2和Bax的表达变化。结果：再灌注2h后皮层神经元Bcl-2表达开始明显上调，为高峰，之后开始下降。缺血再灌注后早期Bax在皮层神经元的表达明显增强，随着再灌注时间的延长，其表达不断增加，24－48h达高峰。Bcl-2／Bax的比率在再灌注开始时升高，再灌注6h达高峰，随后开始下降。结论：Bcl-2和Bax的比率改变与缺血再灌注后的神经元存亡相关。     

环磷腺苷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的：观察环磷腺苷葡胺（Meglumine Ademosine Cyelophosphate）对其干预作用，并阐述预处理诱导脑缺血耐受的机制。方法：制作大脑中动脉缺血2小时后再灌注损伤模型。SD大鼠54只，随机分为假手术组（SG组）、致死性缺血再灌注组（IR组）、腺苷预处理组（AI组），依术后处死动物时间的不同，每组再分为3个亚组（SG：1、3、5d，IR：1、3、5d，AI：1、3、5d）。结果：采用干湿重法测定脑组织含水量，全自动生化分析仪测定脑组织含钙量。观察预处理对缺血2h再灌注损伤24h、72h、120h的影响。结果①IR组钙含量术后1、3、5天均高于SG组（P〈0．05）；AI组各亚组钙含量均低于同期IR组（P〈0．05），AI 1d组钙含量与SG组相比无显著性差异（P〉0．05）。②IR组脑组织含水量于再灌注后1、3、5d均高于SG组（P〈0．05）；AI组脑组织含水量均低于同期IR组（P〈0．05），AI 1d组脑组织含水量与SG组相比无显著性差异（P〉0．05）。结论：①环磷腺苷预处理均能显著减少大鼠局灶性脑缺血后脑组织钙含量；②环磷腺苷预处理还能减轻大鼠局灶性脑缺血后脑水肿。     

腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后胶质源性神经营养因子表达的影响

目的观察腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注后胶质源性神经营养因子表达的影响。方法制作大鼠大脑中动脉缺血2h后再灌注损伤模型。SD大鼠60只，随机分为假手术组（F组）、缺血再灌注组（IR组）、腺苷预处理组（AP组），依术后处死动物时间的不同，每组再分为4个亚组2、6、24、72h组（F26,24,72h，IR2、6、24、72h，AP2、6、24、72h），每个亚组5只动物。结果用免疫组化法检测脑缺血再灌注组织中胶质源性神经营养因子（GDNF）表达。结果F组GDNF阳性细胞表达极弱，IR组和AP组在脑缺血再灌注后2h在缺血半暗带周围出现GDNF弱阳性表达，6h后GDNF阳性细胞表达增多，24h GDNF阳性细胞表达达到高峰，72hGDNF阳性细胞表达开始减少。AP各亚组GDNF阳性细胞数与F和IR各相应亚组GDNF阳性细胞数比较差异有统计学意义（P〈0．05），IR各亚组GDNF阳性细胞数与F各相应亚组GDNF阳性细胞数比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论腺苷预处理能显著增强大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞的蛋白合成和分泌功能、增加脑组织中胶质细胞源性神经营养因子的表达。     

黄芪对大鼠脑缺血再灌注损伤c-fos和Bcl-2表达及细胞凋亡的影响

目的探讨黄芪对脑缺血再灌注损伤大鼠神经细胞凋亡和凋亡基因c-fos、Bcl-2表达的影响。方法 40只Wistar大鼠,体质量180～220 g,随机分为黄芪组、缺血4 h再灌注1 h组(Ⅰ组)、缺血4 h再灌注12 h组(Ⅱ组)、缺血4 h再灌注24 h组(Ⅲ组)和对照组。线栓法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型。切片分别行HE染色,应用免疫组织化学染色检测神经细胞凋亡基因c-fos、Bcl-2蛋白表达。结果对照组、Ⅰ组脑细胞未见明显变化,Ⅱ组轻度脑细胞水肿,Ⅲ组脑细胞明显水肿,黄芪组损伤区范围变小,肿胀减轻。与对照组比较,其余各组脑细胞c-fos和Bcl-2阳性表达率增高(P<0.01);黄芪组c-fos和Bcl-2阳性表达率较Ⅱ、Ⅲ组降低(P<0.01)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和黄芪组细胞凋亡指数较对照组明显增加(P<0.01);黄芪组较Ⅱ、Ⅲ组明显降低(P<0.01)。结论黄芪在脑缺血再灌注损伤后可抑制c-fos表达、增加Bcl-2表达,减轻脑细胞凋亡。     

清热化瘀方对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察清热化瘀方对大鼠局灶性脑缺血再灌注后Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法将模型大鼠随机分组,运用免疫组化法分别观察其缺血再灌注后第6、12、24小时Bcl-2和Bax的数据。结果缺血再灌注6h时Bcl-2表达最高,以后随时间逐渐下降。而Bax在缺血再灌注后第6小时开始出现,随时间增加。清热化瘀方能增加Bcl-2表达,降低Bax表达(P<0.05)。结论清热化瘀方能通过上调Bcl-2,下调Bax和增加Bcl-2/Bax表达比来降低大脑缺血再灌注大脑的凋亡细胞的数量。     

丁苯酞注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察丁苯酞注射液对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的保护作用。方法选取雄性SD大鼠50只,随机分为假手术组(10只)、缺血再灌注组(20只)、丁苯酞注射液组(20只)。制备SD大鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注22 h,丁苯酞注射液组于缺血1 h后予丁苯酞注射液腹腔注射,假手术组和缺血再灌注组予等体积生理盐水。应用TTC染色观察脑梗死体积;免疫组织化学检测方法观察Bcl-2和Bax表达的变化。结果与缺血再灌注组相比,丁苯酞注射液组神经功能缺损程度减轻,梗死灶体积减小,Bcl表达增多,Bax表达减少。结论丁苯酞注射液对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞的凋亡有保护作用。     

腺苷预处理浓度对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的探讨不同浓度腺苷预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠内源性神经干细胞增殖的影响。方法成年雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型对照组,0.9、1.2、1.5、1.8、2.1 mg.kg-1腺苷预处理组。用线拴法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。各腺苷预处理组于术前连续3 d分别腹腔注射0.9、1.2、1.5、1.8、2.1 mg.kg-1腺苷,假手术组及模型对照组在相同时间点腹腔注射等体积生理盐水。对各组大鼠进行神经功能缺失行为学评分,并观察其巢蛋白阳性细胞的表达。结果假手术组大鼠无神经功能缺损症状,偶可见巢蛋白阳性细胞;1.5、1.8、2.1 mg.kg-1腺苷预处理组与模型对照组比较,神经功能缺失症状得到明显改善,巢蛋白表达显著增加(P<0.01);1.5 mg.kg-1腺苷预处理组与1.8、2.1 mg.kg-1腺苷预处理组的神经功能评分及巢蛋白阳性表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腺苷预处理浓度为1.5 mg.kg-1时,既能有效改善再灌注损伤引起的神经功能缺损症状,又可以很好地促进内源性神经干细胞的增殖。     

雌激素对大鼠局灶性脑缺血Bcl-2蛋白表达的影响

实验表明 [1 ,2 ] ,雌激素在缺血性脑损伤中具有神经保护作用 ,但其作用机制还不十分清楚。Bcl- 2 [3] 是凋亡抑制基因 ,在缺血性脑损伤模型中 ,主要在存活的神经细胞中表达 ,其表达峰值在缺血后 2 4 h[4 ]。本研究采用去卵巢雌性大鼠制作大脑中动脉阻断 (MACO)局灶性脑缺血模型 ,观察雌激素对脑缺血时 Bcl- 2蛋白表达的影响 ,探讨雌激素在缺血性脑损伤中的作用机制。1　材料和方法1.1　动物分组及预处理　采用健康雌性 Wistar大鼠 30只 ,3～ 4个月龄 ,体质量 2 5 0～ 30 0 g(由北京大学医学部实验动物中心提供 )。全部大鼠于脑缺血手术…     

大鼠局灶性脑缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡与Bcl-2、Bcl-xl蛋白检测

目的：探讨Bcl-2、Bcl-xl与神经细胞凋亡在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织中的表达。方法：栓线法阻断健康雄性大鼠大脑中动脉(MCA)血流2h后再灌注,分别于再灌注0．5h,3h,6h,12h,24h和48h断头取脑,在前联合处连续切片,分别进行TUNEL染色及Bcl-2、Bcl-xl蛋白免疫组化染色。以假手术组作对照。结果：①脑缺血区部分神经细胞发生凋亡,再灌注0．5∽48h,凋亡细胞逐渐增多,凋亡指数随再灌注时间的延长而逐渐升高。至48h时达高峰。②Bcl-2、Bcl-xl蛋白在脑缺血再灌注早期开始表达,36∽h达到高峰,24h开始逐渐降低,至48h时与对照组差异无统计学意义。③凋亡细胞,Bcl-2及Bcl-xl蛋白均分布在脑缺血梗死灶的周边,梗死中心区及正常区无表达。结论：局灶性脑缺血再灌注损伤过程中神经细胞凋亡起着重要的作用,而Bcl-2及Bcl-xl抑制神经细胞的凋亡。     

环磷腺苷预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的观察环磷腺苷葡胺(Meglumine Ademosine Cyelophosphate)对其干预作用,并阐述预处理诱导脑缺血耐受的机制.方法制作大脑中动脉缺血2小时后再灌注损伤模型.SD大鼠54只,随机分为假手术组(SG组)﹑致死性缺血再灌注组(IR组)、腺苷预处理组(AI组),依术后处死动物时间的不同,每组再分为3个亚组(SG1、3、5 d,IR1、3、5 d,AI1、3、5 d).结果采用干湿重法测定脑组织含水量,全自动生化分析仪测定脑组织含钙量.观察预处理对缺血2 h再灌注损伤24 h、72 h、120 h的影响.结果①IR组钙含量术后1、3、5天均高于SG组(P＜0.05);AI组各亚组钙含量均低于同期IR组(P＜0.05),AI 1 d组钙含量与SG组相比无显著性差异(P＞0.05).②IR组脑组织含水量于再灌注后1、3、5 d均高于SG组(P＜0.05); AI组脑组织含水量均低于同期IR组(P＜0.05),AI 1 d组脑组织含水量与SG组相比无显著性差异(P＞0.05).结论①环磷腺苷预处理均能显著减少大鼠局灶性脑缺血后脑组织钙含量;②环磷腺苷预处理还能减轻大鼠局灶性脑缺血后脑水肿.     

曲美他嗪对大鼠局灶性脑缺血再灌注Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA表达的影响

目的观察曲美他嗪（TMZ）对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞Caspase-3 mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响。方法成年健康Wistar大鼠45只,随机分为假手术对照组（n=5）、脑缺血再灌注组（n=20）、TMZ预处理组（n=20）。应用线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注模型。采用原位杂交方法检测脑组织Caspase-3 mRNA、Bcl-2m RNA表达的变化。结果Bcl-2 mRNA在缺血再灌注3h表达增强（P〈0.05）,6h显著增强（P〈0.01）,24h减弱（P〈0.05）,48h消失（P〉0.05）。TMZ组的Bcl-2 mRNA表达量多于缺血再灌注组,差异有统计学意义（P〈0.05）。Caspase-3 mRNA在再灌注3h表达增强（P〈0.05）,6h显著增强（P〈0.01）,24h更加明显（P〈0.01）,48h减弱（P〈0.05）。TMZ组的Caspase-3 mRNA表达量显著少于缺血再灌注组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论TMZ可能通过诱导Bcl-2的表达和抑制Caspase-3的生成而发挥抗凋亡作用。     

参附注射液对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马Bcl-2、Bax蛋白的表达及参附注射液对其的影响。方法成年雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、参附注射液治疗组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞((middle cerebral artery oc-clusion,MCAO)再灌注模型,应用TTC染色检测脑梗死体积,免疫组织化学法检测海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果缺血组大鼠海马CA1区Bcl-2、Bax蛋白的表达较假手术组明显增加(P<0.01),给予参附注射液处理后,Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.01),Bax蛋白表达减少(P<0.05),差异均有统计学意义。结论参附注射液可以通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,这可能是其发挥脑保护作用的机制之一。     

依达拉奉对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2的影响

目的 本试验通过观察依达拉奉对Bcl-2的影响,探讨它的保护作用及作用机制.方法 Wistar 雌、雄性大鼠共42只,随机分为假手术组、盐水对照组及依达拉奉用药组,对照组及用药组再进一步分为6h、24h、48h,根据Koizumi线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO).用免疫组化方法检测Bcl-2的蛋白表达的变化.结果 假手术组几乎无Bcl-2蛋白的表达,盐水组Bcl-2蛋白表达6h开始升高,于24h达到高峰并于48h开始下降.6h时,用药组Bcl-2蛋白表达较盐水组减少,但差异不明显(P>0.05);24h时,用药组较盐水组明显减少(P<0.01);48h时,用药组Bcl-2蛋白表达较盐水组减少,仍有明显差异(P<0.05).结论 依达拉奉可抑制Bcl-2激活,达到脑保护作用.     

雌激素对去卵巢大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及Bcl-2表达的影响

目的:探讨雌激素对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡与Bcl-2表达的影响.方法:雌性Wistar大鼠30只均于脑缺血手术前7 d切除双侧卵巢,随机等分为假手术组、手术对照组及雌激素用药组.采用大脑中动脉阻断制成局灶性脑缺血模型.缺血2 h再灌注24 h后断头取脑,应用TUNEL染色及SP免疫组织化学方法观察并测定梗死灶体积、凋亡细胞数及Bcl-2的表达.结果:假手术组未发现脑梗死灶和凋亡细胞及Bcl-2阳性细胞.雌激素用药组较手术对照组脑梗死体积缩小((59.32±8.95)mm3 vs(96.93±11.63)mm3,P＜0.05),凋亡细胞数减少((96±12)个vs(126±9)个,P＜0.05);Bcl-2表达增强(P＜0.05).结论:雌激素通过上调Bcl-2的表达抑制脑细胞凋亡,具有脑保护作用.     

活血化瘀汤预处理对大鼠局灶缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :探讨活血化瘀汤作为预处理药物对大鼠脑局灶缺血再灌注损伤的保护作用。方法 :采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞 (MCAO)模型。雌性SD大鼠 138只 ,随机分为对照组 ,假手术组 ,灌药 1～ 4组 ,共 6组。灌药组于缺血再灌注前以不同浓度及持续时间进行灌药预处理。缺血 2h后再灌注 2 4h ,测定大鼠神经功能缺损程度 ;检测脑匀浆 ,血清氧化亚氮 (NO)含量、大鼠脑光镜、电镜病理损伤及脑水含量。结果 :灌药组大鼠神经功能缺损及脑水肿程度较对照组轻 (P <0 .0 5 ) ,灌药组脑匀浆NO含量比对照组低 (P <0 .0 5 ) ;灌药组血清NO含量较对照组高 (P <0 .0 5 ) ;光镜及电镜病理损伤较对照组轻。结论 :活血化瘀汤作为预处理药物通过增加血清NO含量 ,降低脑匀浆NO含量 ,对大鼠局灶缺血再灌注损伤具有保护作用