肝癌细胞血行播散与术后复发或转移的关系

目的探讨血液甲胎球蛋白信使核糖核酸（ａｌｐｈａｆｅｔａｌｐｒｏｔｅｉｎｍｅｓｅｎｇｅｒＲＮＡ,ＡＦＰｍＲＮＡ）阳性肝癌患者与术后复发或转移的联系。方法应用巢式逆转录多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,ＲＴＰＣＲ）检测术后２４小时,４８小时及１周肝癌患者周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ,并随访１～２年。结果术前及术后１周内血液ＡＦＰｍＲＮＡ持续阳性的肝癌患者１２例中,术后１年内出现复发或转移性癌灶６例,术后２年内复发或转移９例;而随访的血液ＡＦＰｍＲＮＡ阴性的肝癌患者１９例中仅有５例在术后１年内复发,在２年内复发８例,无肝外远处器官转移（１年时,二者差异无显著意义,Ｐ＞００５;２年时,二者差异有显著意义,Ｐ＜００５）。结论术后血液ＡＦＰｍＲＮＡ持续阳性的肝癌患者更容易复发或产生远处转移。     

肝癌术后检测血液AFP mRNA及AFP的临床意义

探讨检测患者血液甲种胎儿蛋白信使核糖核酸及甲种胎儿蛋白对判断肝癌术后复发或转移的临床意义。方法 应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测３４例肝癌患者术后２周，４周及６周时周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ及ＡＦＰ的变化，并随访１年。结果 ３４例手术切除的肝癌患者中，术后６周时周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ及仍呈阳性１３例，术后６周内血流ＡＦＰ持续阳性２１例。     

肝癌切除手术前后周围静脉血液中AFPmRNA的变化及其意义

目的 探讨肝癌革除手术前后周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ的变化及其意义。方法 应用巢式ＲＴ－ＰＣＲ检测术后４８小时、７２小时及术后１周肝癌患者周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ，并观察变化。结果 ２８例术前血液中ＡＦＰｍＲＮＡ阴性的肝癌患者中有４例术后４８小时转为阳性（１４．３０％），但术后１周时复转阴性；而１６例术前血液中ＡＦＰｍＲＮＡ阳性的肝癌患者中有４例（２５．００％）术后７２小时转为阴性。结论 手     

原发性肝癌经无水酒精瘤内注射治疗后血液AFPmRNA变化的研究

目的探讨在Ｂ型超声引导下,以无水酒精行肝癌局部注射对原发性肝癌的治疗作用。方法应用巢式逆转录多聚合酶链反应检测无水酒精局部注射治疗前后,肝癌患者周围静脉血液中ＡＦＰｍＲＮＡ变化。结果９例肝癌患者中术前有４例血液ＡＦＰｍＲＮＡ阳性（４／９）;无水酒精瘤内注射治疗３～５次后（２周）,血液ＡＦＰｍＲＮＡ阳性者减至１例（１／９）。结论无水酒精瘤内注射治疗原发性肝癌可以预防或阻止肝癌远处器官转移的发生。     

巢式逆转录多聚酶链反应检测周围静脉血中肝癌细胞的敏感性

本研究拟应用巢式逆转录多聚酶链反应（巢式ＲＴＰＣＲ）检测不同稀释比例的周围静脉血液中存在的肝癌细胞，并探讨其敏感性。１．材料和方法：（１）细胞系选择：选择能分泌ＡＦＰ的人肝癌细胞株ＳＭＭＣＬＩＮＭ（由本校病理解剖教研室提供），进行体外传代培养，显...     

nm23-H1基因mRNA在人肝细胞癌中的表达

目的　研究人肝细胞癌中肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达状况,并探讨其表达水平与肿瘤各项临床病理指标间的相关性。方法　应用半定量ＲＴＰＣＲ 方法检测分析人肝细胞癌组织、相应癌旁肝组织中ｎｍ２３Ｈ１ 的ｍＲＮＡ表达。结果　１５ 例肝癌及癌旁肝组织ＲＴＰＣＲ结果均为阳性,未见ｎｍ２３Ｈ１ 基因表达缺失或较大变异;肝癌组织中ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于相应癌旁组织（ Ｐ＝ ０－０３５）;ＡＦＰ阳性组ｎｍ２３Ｈ１ ｍＲＮＡ表达水平明显高于ＡＦＰ阴性组（ Ｐ＝０－００５） 。结论　人肝细胞癌中ｎｍ２３Ｈ１ 基因ｍＲＮＡ的异常表达可能与肿瘤的恶性生物学特征密切相关。     

人肝癌裸鼠转移模型中纤溶酶原激活物抑制剂变化与肝癌生物学特性

目的研究纤溶酶原激活物抑制剂（ＰＡＩ１）与肝细胞癌（ＨＣＣ）生物学特性的关系。方法构建ＬＣＩＤ２０人肝细胞癌裸鼠转移模型（肝癌转移模型）４０例,用ＰＡＩ１试剂盒和ＰＡＩ１单抗分别做酶活性检测和免疫组化,观测肝癌转移模型发展过程中ＰＡＩ１的变化。结果肝癌转移模型从肿瘤发生早期（２周）至晚期（５周）,血浆ＰＡＩ１从６２±１８Ａｕ／ｍｌ增至１５４±０７Ａｕ／ｍｌ,Ｐ＜００５。肿瘤组织中ＰＡＩ１从０４±０１Ａｕ／ｍｇ增至０８±０３Ａｕ／ｍｇ;血浆中ＰＡＩ１改变与肿瘤大小和ＡＦＰ变化相关（ｒ＝０９６４８和ｒ＝０９５４４,Ｐ＜００５和Ｐ＜００５）。结论肝癌转移模型肿瘤组织及血浆中ＰＡＩ１随ＨＣＣ病程进展逐步升高。ＰＡＩ１与ＨＣＣ肿瘤增长和ＡＦＰ升高有良好的相关性。ＰＡＩ１与ＨＣＣ侵袭性及预后密切相关     

抗人甲胎蛋白异质体单克隆抗体放射免疫检测原发性肝癌的临床研究

为了探讨抗人小扁豆凝集素结合型甲胎蛋白异质体单克隆抗体（ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ）对甲胎蛋白阳性肝癌细胞的特异性及亲和力，作者经周围静脉应用放射性核素１３１Ｉ标记的ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡ－ＭｃＡｂ对原发性肝癌及肝炎后肝硬变患者进行了放免显像研究。结果显示：１３１Ｉ标记的ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ能选择性地在６例甲胎蛋白阳性肝癌患者肿瘤组织内积聚，而６例甲胎蛋白阴性肝癌患者及４例肝炎后肝硬变患者肿瘤区及肝内均无放射性积聚。作者认为ＡＦＰ－Ｒ－ＬＣＡＭｃＡｂ对甲胎蛋白阳性原发性肝癌细胞具较强的特异性亲和力，有希望成为肝癌放免检测及治疗的理想载体。     

检测肝癌患者外周血癌细胞表达AFPmRNA的临床意义

目的 探讨肝癌患者外周血癌细胞表达ＡＦＰ ｍＲＮＡ的临床意义。方法 采用Ｎｅｓｔｅｄ ＲＴ－ＰＣＲ检测外周血中癌细胞表达的ＡＦＰ ｍＲＮＡ。结果 原发性肝癌患者４５例,ＡＦＰ ｍ ＲＮＡ阳性率７６％。１７例继发性肝癌患者,原发癌来自结肠癌７例,直肠癌５例,胆囊癌２例,小肠平滑肌肉瘤２例,乳腺癌１例,ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性率。原发性肝癌患者ＡＦＰ ｍＲＮＡ阳性率在ＡＦＰ大于２０μｇ／Ｌ组９０％,有肝外     

纤溶酶原激活物抑制物1与肝细胞癌

目的研究纤溶酶原激活物抑制物１（ＰＡＩ１）在肝细胞癌（ＨＣＣ）蛋白和ｍＲＮＡ水平的表达及其与ＨＣＣ生物学特性的关系。方法取ＨＣＣ石蜡标本４８例,肝良性肿瘤石蜡标本１２例（对照组）做免疫组化染色;液氮冻存ＨＣＣ标本２０例,肝血管瘤５例（对照组）做免疫印迹杂交。结果肝癌细胞与癌周细胞及对照组肝细胞相比,ＰＡＩ１抗原蛋白和ｍＲＮＡ表达显著升高,差异有显著意义,Ｐ值分别＜００１和＜０．０５。术后２年内死亡病例与生存病例相比,ＰＡＩ１阳性率有显著意义的升高,Ｐ＜００５。ＰＡＩ１和纤溶酶原激活物（ｕＰＡ）及其受体（ｕＰＡＲ）同时阳性患者与同时阴性患者相比,前者侵袭性病例较后者升高有显著性意义（Ｐ＜００５）。结论ＨＣＣ中ＰＡＩ１蛋白和ｍＲＮＡ表达明显增高。ＰＡＩ１与ＨＣＣ浸润转移和预后密切相关。     

肝癌患者外周血AFP mRNA表达的临床意义

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)患者外周血AFP mRNA表达在血行播散中的意义.方法:抽取30例HCC患者外周静脉血5ml,应用RT-PCR对血中AFP mRNA进行扩增检测,并与各对照组比较.结果:30例HCC患者中,AFP mRNA的阳性率为46.7%(14/30);AFP mRNA的表达阳性率与肝癌TNM分期、肿瘤大小、有无门脉癌栓及有无肝外转移有显著的相关性(P＜0.05),而与血清AFP水平无关(P＞0.05).结论:AFP mRNA是反映原发性肝癌患者血中是否存在肝癌细胞的灵敏指标.     

树突状细胞诱导的抗肿瘤免疫抑制肝癌病人术后复发和转移

目的 研究肿瘤抗原激活的树突状细胞（DC0在肝癌病人体内诱导的抗肿瘤免疫能否抑制肝癌术后复发和转移。方法 分离肝癌根治性切除术后病人外周血DC,以人肝癌细胞系HepG2细胞粗提物激活DC,以粒（巨噬）细胞集落刺激因子（GM－CSF）和白介素－4（IL－4）联合刺激DC,DC回输病人,检测肝癌病人外周血AFP mRNA。结果 在AFP mRNA阳性组织中,治疗组11例中仅1例AFP mRNA仍为阳性,而对照组11例中9例AFP mRNA仍为阳性;在AFP mRNA阴性组中,治疗组13例AFP mRNA仍全部为阴性,而对照组13例中4例AFP mRNA为阴性。结论 肿瘤抗原激活的DC在肝癌病人体诱导的抗肿瘤免疫能够抑制术后肝癌复发和转移。     

肝癌病人手术期间不同部位血液AFP mRNA定量检测及其意义探讨

目的 研究肝细胞性肝癌(HCC)病人手术期间不同部位血液甲胎蛋白信使核糖核酸(AFP mRNA)的水平变化，分析其与临床病理学特征和复发转移的关系。方法 18例HCC和6例非HCC肝肿瘤病人，于切除肿瘤前后抽取门静脉、肝静脉和外周静脉血各5m1，肝炎、肝硬化病人各10例取外周血5m1。应用TaqMan实时定量逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)检测AFP mRNA水平。结果 术前外周血AFP mRNA相对HCC的灵敏度为72．2％，特异性为76.9％，准确率为75．0％。HCC病人术后各部位血液AFP mRNA水平明显高于术前相应部位水平。血液AFP mRNA水平与肿瘤大小、分化程度、有无肝内播散、包膜完整性以及血清AFP浓度均无关，而有门静脉癌栓的病人术后肝静脉血AFP mRNA水平明显高于无癌栓者。术后2个月内复发者，术后门静脉和外周静脉血AFP mRNA水平明显高于末复发者。结论 TaqMan实时定量RT—PCR法检测HCC病人血液AFP mRNA有较高的敏感性和特异性。手术可能促进部分HCC细胞和肝细胞脱落入血。动态监测外周血AFP mRNA水平对术后早期复发有预测价值。     

肝癌细胞血行播散对术后复发及远处转移的影响

目的 对照研究周围静脉血液中甲胎蛋白(AFP)mRNA阳性及阴性肝癌患者术后肿瘤复发和远处转移情况.方法 应用巢式RT-PCR检测术后24、48 h及1周、4周肝癌患者周围静脉血液中AFP mRNA水平,并术后随访1、2、3年.结果 12例术前及术后1周内血液AFP mRNA持续(+)的肝癌患者中,有7例在术后1年内产生了复发或转移性病灶(7/12,58.3%);所有患者在术后2年内均发生了肝癌复发和远处转移(12/12,2年复发率为100%).而在随访的19例血液AFPmRNA(-)肝癌患者中,有5例(5/19,26.3%)在术后1年内复发,4例在术后第2年复发(9/19,2年复发率为47.3%),1例术后第3年复发(10/19,3年复发率为52.6%),未出现肝外远处器官转移.术后1、2,3年复发率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 术后血液AFP mRNA持续(+)的肝癌患者较AFP mRNA阴性肝癌患者更容易产生复发或转移.     

Genetic detection and clinical applications in patients with hepatocellular carcinoma

This paper provides a review of the known genetic diagnostic indicators of liver cancer. The correlation between the genetic diagnosis and clinical outcome in patients with hepatocellular carcinoma (HCC) has been widely reported, based on the detection of liver-specific mRNA or tumor DNA in the blood. Our results suggest that an alteration of alpha-fetoprotein (AFP) mRNA in peripheral blood from HCC patients during the perioperative period might permit the prediction of early recurrence after surgery. The presence of circulating HCC cells may be indicative of metastasis if liver-specific AFP mRNA is detected in the peripheral blood. However, some studies showed that sensitive RT-PCR might possibly give rise to false positivity because nontumor hepatocytes would also express low levels of AFP mRNA. Recently, quantification of AFP mRNA for HCC cell detection using real-time PCR or semiquantitative RT-PCR has proven useful in the prediction of metastasis/recurrence. On the other hand, circulating liver tumor DNA such as p16 and p15 methylation and mitochondrial mutations in the plasma and serum of liver cancer patients might be useful for monitoring, similar to the tumor markers. In future, HCC-specific genes and genes sensitive to radiation and chemotherapy are expected to have wide-spread clinical applications.     

Prospective evaluation of circulating hepatocytes by alpha-fetoprotein mRNA in humans during liver surgery.

OBJECTIVE: The objective of this study was to analyze the specificity of detecting liver tumor cell dissemination by alpha-fetoprotein (AFP) mRNA in peripheral blood. SUMMARY BACKGROUND DATA: Alpha-fetoprotein mRNA has been used for the detection of circulating micrometastatic tumor foci of hepatocellular carcinoma (HCC); however, the interpretation of the results has been equivocal. METHODS: Sixty-four consecutive patients with malignant HCC (n = 20), liver metastases (n = 27), or nonmalignant (n = 17) liver diseases undergoing partial or total hepatectomy and orthotopic liver transplantation were included in this prospective study from January to July 1995. Peripheral blood samples were obtained before surgery, during surgery, and after surgery (range, 6-15 months). Total mRNA was extracted from nucleated cells, and cDNA synthesis and polymerase chain reaction amplification (nested polymerase chain reaction in one tube) were performed with specific AFP primers. RESULTS: Preoperative AFP mRNA was detected in 20 patients (17%), of which 5 of 20 had HCC. Intraoperative assessment showed positive AFP mRNA values in a total of 34 patients (53%) with various causes, of which 8 of 20 (40%) had HCC, 17 of 27 (63%) had other malignancies, and 9 of 17 (53%) had nonmalignant diseases. Recurrent tumor in patients with HCC occurred in four cases after surgery (range, 6-15 months) and did not correlate with AFP mRNA positivity before surgery, during surgery, or after surgery. CONCLUSIONS: Alpha-fetoprotein mRNA in peripheral blood is not a specific marker of circulating micrometastases from HCC, especially in the context of surgical treatment of HCC.