氨基胍对视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护性作用

视神经损伤是眼科常见疾病,多并发于颅脑外伤,预后不良,常致患者失明。由于视神经损伤的发病机制尚未完全明了,所以迄今为止其治疗仍是国内外眼科界的一大难题。现将视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）凋亡及氨基胍（Aminogunidine,AG）对其保护性作用做一综述。     

重组人促红细胞生成素对视神经不完全损伤后视网膜神经元的保护作用

目的探讨重组人促红细胞生成素（recombinat human erythropoietin,rhEPO）对大鼠视神经（optic nerve,ON）不完全损伤后视网膜神经元凋亡的抑制作用和对视功能修复的影响。方法雄性Long Evans大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只。制作ON不完全损伤模型。实验组和对照组按ON夹伤后不同时间分为伤后1d、3d、5d、7d、14d5个时间点。实验组伤后即时、3d、5d、7d,按5000U·kg^-1体重腹腔内注射rhEPO;对照组注射等量生理盐水。伤后1d、3d、5d、7d、14d取材。取材前行闪光视觉诱发电位检测。应用TUNEL法检测视网膜神经元的凋亡。结果伤后7d、14d对照组视网膜凋亡细胞密集分布于视网膜节细胞层及内、外核层。实验组7d、14d视网膜凋亡细胞明显减少,视网膜节细胞层的凋亡细胞与对照组相比有非常显著差异（P〈0.01）。2组闪光视觉诱发电位潜伏期各时间点组间比较无显著性差异（P〉0.05）。伤后1d、3d、5d、7d实验组P1-N2波振幅和对照组相比无显著性差异（P〉0.05）;伤后14d时有显著差异（P〈0.05）。结论rhEPO对ON不完全损伤后视网膜神经元的凋亡具有抑制作用,可以促进视功能的恢复。     

视神经损伤对视网膜结构的形态学研究

研究正常视网膜神经节细胞（RGC）核的形态。分类和视神经不完全损伤对其影响；建立视神经不全损伤豚鼠模型，术后3月，测量RGC核的平均体积和体密度，视网膜各层的厚度；正常豚鼠RGC核按其体积大小分成大、中、小3群，其平均体积分别为36．35μm3、185、3μm3、80.0μm3，所占比例分别为20．9％，28．6％，49．5％，外伤3月后每群节细胞核的平均体积不大，但所占比例分别为1．74％，14．2％，84．1％；细胞核体密度从7．2％下降到3．7％；视网膜各层厚度均有下降，以内视网膜层的变化最敏感；进行RGC核体积分型能更好地体现节细胞对损伤的反应；大型节细胞对外伤最敏感。     

兔视神经损伤后视网膜神经节细胞线粒体跨膜电位的变化观察

目的观察兔视神经损伤后视网膜神经节细胞（retinal ganglion cell,RGC）线粒体跨膜电位（mitochondrial transmembrane potentials,△ψm）的变化。方法选用新西兰白兔32只,分为对照组和损伤组,损伤组再根据损伤后不同时间分为3d、7d、14d组,共4组,每组8只兔16眼。采用Rh123染色,流式细胞术测定RGC△ψm。结果正常新西兰白兔RGC△ψm为3836.67±21.32。在损伤后3d、7d、14d,视网膜细胞△ψm分别为3055.41±7.74、1822.07±18.66、2617.38±7.37。各时间点的△ψm均明显低于正常对照组,且各时间点间△ψm差异有统计学意义（P〈0.05）。结论△ψm在RGC凋亡早期的观测中有一定的意义,并且能进行定量分析研究。     

超声微泡造影剂联合美金胺增强视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞保护作用

目的 探讨超声微泡造影剂联合美金胺对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞( RGC)的保护作用.方法 将Sprague-Dawley(SD)雄性成年大鼠40只随机分为正常对照组(A组),假手术组(B组),空白对照组(C组),玻璃体腔单独注射美金胺组(D组),玻璃体腔注射美金胺加超声微泡组(E组)5个组,每组8只大鼠,再将各组随机分为视神经损伤后1、2周2个亚组,各亚组4只大鼠.A组不做任何处理;B组只暴露视神经,不进行钳夹,玻璃体腔注射生理盐水,立即用超声波辐照大鼠眼球;C～E组建立视神经钳夹伤模型后,处理方式分别为C组玻璃体腔注射生理盐水,D组玻璃体腔注射美金胺,E组玻璃体腔注射超声微泡造影剂及美金胺,立即用超声波辐照大鼠眼球.视神经损伤1、2周时,各组行逆行荧光金标记RGC并计数;闪光视觉诱发电位(F-VEP)检测,记录P100波潜伏期及振幅;荧光电子显微镜下观察视网膜细胞形态学改变.结果 逆行荧光金标记RGC结果显示,各处理组视网膜定向铺片上均可见金黄色着染的RGC.A、B组RGC数间差异无统计学意义(q=0.018,0.011;P=0.986,0.873);C～E组RGC数均较A组减少,差异具有统计学意义(F=85.944,P=0.012);D组RGC数多于C组,差异具有统计学意义(q=1.721,1.924;P=0.043,0.037);E组RGC数明显高于C、D组,差异具有统计学意义(q=1.128,1.482,P=0.027,0.008;q=1.453,1.855,P=0.031,0.010).F-VEP检测发现,A、B组P100波潜伏期及振幅间差异无统计学意义(q=0.008,0.019,P=0.981,0.946;q=0.072,0.052,P=0.737,0.851) ;C～E组P100波潜伏期较A组延长,振幅较A组降低,差异具有统计学意义(F=134.312,106.312;P=0.017,0.009).荧光电子显微镜下观察发现,A、B组大鼠视网膜各层结构完整,排列整齐,RGC排列紧密整齐,细胞核均匀深染,胞核大小一致.C～E组大鼠的视网膜不同程度水肿变厚,RGC有不同程度的排列紊乱,空泡化及细胞数目减少.结论 超声微泡造影剂联合美金胺能抑制视神经损伤后大鼠RGC的丢失,促进其视功能的恢复,对视神经损伤大鼠的RGC具有保护作用.     

依托咪酯通过PKC/NF-κB信号通路增加成年大鼠视神经损伤后RGC存活

目的　探讨依托咪酯对成年大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌ,ＲＧＣ）的保护作用及其机制。方法　应用大鼠视神经眶内段切断模型,荧光金逆行标记存活ＲＧＣ;腹腔注射依托咪酯或玻璃体内注射蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉ-ｎａｓｅＣ,ＰＫＣ）抑制剂Ｇ６９７６干预,应用ＰｅｐＴａｇ非同位素ＰＫＣ检测试剂盒检测视网膜ＰＫＣ活性,应用免疫印迹法分析视网膜核转录因子-κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢ,ＮＦ-κＢ）水平。结果　依托咪酯显著增加大鼠视神经损伤后７ｄＲＧＣ存活数量（Ｐ＜０．０５）,而且显著降低视网膜ＰＫＣ活性和ＮＦ-κＢ水平（均为Ｐ＜０．０５）。Ｇ６９７６同样显著增加大鼠视神经损伤后７ｄＲＧＣ存活数量（Ｐ＜０．０５）,联合应用依托咪酯和Ｇ６９７６,其存活ＲＧＣ数量与单纯应用依托咪酯差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;Ｇ６９７６显著降低视网膜ＮＦ-κＢ水平（Ｐ＜０．０５）。结论　依托咪酯可显著增加大鼠视神经损伤后ＲＧＣ存活数量,其机制可能与抑制ＰＫＣ／ＮＦ-κＢ信号通路有关。     

Direct optic nerve and retinal injury caused by retrobulbar injections

The authors report on 2 patients with direct damage to the optic nerve and retina: In a 25-year-old deaf-mute patient a peripheral iridectomy was performed after lid and retrobulbar anesthesia. The amaurosis noticed immediately after surgery was caused by direct injury to the optic nerve. A 69-year-old patient with high myopia was treated with retrobulbar steroid injections. The globe was perforated and a series of 4 retinal defects from the periphery to close to the optic nerve head were created. An unhealed retinal detachment developed. The importance of informing the patient preoperatively about these extremely rare complications of retrobulbar injections is emphasized.     

Nogo在视神经损伤后再生中的研究进展

哺乳动物外周神经损伤后轴突能再生很长距离。在一定条件下,中枢神经系统受损后也能部分再生。Nogo是一种已经被证实的髓鞘相关抑制因子,中枢神经损伤后Nogo释放增加、表达增强,启动神经元凋亡过程,导致神经元死亡。我们从Nogo-A,Nogo-66,可溶性NgR片段、RhoA酶与Rho-A/Rho激酶信号通道、钙离子几个方面综述Nogo的作用机制,并探讨其在视神经损伤后神经再生中的应用前景。     

细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞存活的影响

目的 研究细胞因子信号转导抑制因子3(suppressor of cytokine signaling 3,SOCS3)对视神经损伤大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活的影响,并探讨其潜在的分子机制.方法 采用视神经横断手术构建大鼠视神经损伤模型,术后分离RGCs.实验分为视神经损伤组(optic nerve transection,ONT组)和假手术组.采用Western blot和RT-PCR检测SOCS3在两组细胞中的表达.随后将SOCS3 siRNA分别转染假手术组和ONT组RGCs,实验进一步分为空白对照组、阴性对照组和SOCS3沉默组.CCK8和MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342荧光染色法和流式细胞技术检测细胞凋亡.进一步将mTOR siRNA和SOCS3 siRNA共转染RGCs,检测细胞存活和细胞凋亡.结果 视神经损伤3d后,ONT组SOCS3表达水平显著高于假手术组(P =0.049),且随损伤时间延长而升高.与空白对照组相比,SOCS3沉默可显著提高视神经损伤后RGCs的存活率[空白对照组与SOCS3沉默组分别为(49.47±7.35)％和(73.24±8.70)％],降低细胞凋亡率[2组分别为(27.25±0.75)％和(10.96±1.07)％]和细胞生长抑制率[2组分别为(23.06±1.43)％和(10.65±1.77)％].Hoechst染色也表明SOCS3沉默可改善视神经损伤诱导的细胞凋亡.同时,SOCS3沉默可显著提高视神经损伤后2周mTOR活性标志蛋白pS6的表达;且与单独沉默SOCS3相比,共同沉默mTOR和SOCS3可降低细胞存活率,提高细胞生长抑制率和细胞凋亡率.结论 SOCS3沉默可以通过上调损伤后期mTOR的活性而促进损伤RGCs的存活并抑制其凋亡.     

沉默信息调节因子1 调控胆固醇合成对大鼠视神经损伤后RGCs修复的作用机制

目的：探讨沉默信息调节因子1( silent information regulator 1, SIRT1)调控胆固醇合成在视神经损伤修复中的作用机制。
　　方法：制备视神经损伤的大鼠模型,随机数字法将70只大鼠分为正常组10只,白黎芦醇治疗组(实验组)30只和PBS缓冲液对照组(对照组)30只;再将实验组和对照组分别分为三组,每组各10只;将白黎芦醇或PBS分别注射实验组和对照组大鼠,观察视神经损伤后第7,14,21 d处死大鼠。分离视网膜,观察各组大鼠视网膜神经节细胞( retinal ganglion cell ,RGCs)的存活数量。分离术眼视神经,检测其胆固醇含量;RT-PCR法检测SIRT1、SREBP2和HMGCR的mRNA表达水平;Western blot法检测SIRT1、SREBP2和HMGCR蛋白表达水平。
　　结果：损伤模型大鼠的视网膜RGCs的存活数量以及视神经胆固醇含量均明显减少( P<0.01);SIRT1、SREBP2和HMGCR的mRNA和蛋白表达水平均下降( P<0.05),并呈时间依赖关系。三组分三个时间点,随时间延长损伤均加重,而治疗组损伤程度较对照组明显减弱。而白黎芦醇治疗组的视神经胆固醇含量以及SIRT1、SREBP2、HMGCR的mRNA和蛋白表达水平,RGCs存活数量均明显回升(P<0.01),且呈时间依赖关系。
　　结论：白黎芦醇通过上调SIRT1、SREBP-2及其下游调控基因HMGCR的表达,从而进一步促进神经元细胞的胆固醇合成以及视网膜神经节细胞的损伤后修复过程。     

晶状体损伤对视神经损伤后再生影响的研究

目的观察单纯视神经损伤及视神经损伤联合晶状体损伤后视神经中Nogo-A mRNA及Nogo-A的表达,探讨晶状体损伤促进视神经损伤后再生的机制。方法 66只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组,6只)、单纯视神经损伤组(B组,30只)和视神经损伤联合晶状体损伤组(C组,30只)。分别于造模后7d、14d、21d处死大鼠2只(A组)、10只(B组)、10只(C组),光镜下观察视神经的病理变化,免疫组织化学染色检测Nogo-A表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、半定量分析不同组视神经Nogo-A mRNA的表达。结果大鼠正常视神经中表达Nogo-A mRNA及Nogo-A,但表达量较低;损伤视神经后7d Nogo-A mRNA的表达量显著升高,至伤后21d B组及C组均维持较高的水平。B组损伤后7d Nogo-A表达阳性的细胞数开始增多(136.80±3.94),与A组比较差异有统计学意义(P<0.05),并保持高表达;C组损伤后21d Nogo-A的表达较B组低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论视神经损伤后髓鞘相关抑制因子Nogo-A表达增高,晶状体损伤促进视神经再生的机制可能与Nogo-A有关。     

银杏叶提取物对兔视神经夹伤后视网膜视神经节细胞的保护作用

目的:研究EGb761对视神经夹伤后兔视网膜视神经节细胞(RGC)的保护作用。方法:大白兔24只,右眼为实验组,左眼为对照组,制作视神经夹伤模型。右眼球后注射EGb761(60mg/kg),左眼球后注射等容量平衡盐液BSS。于伤后4,7,14d取材,应用病理图像分析仪计数RGC;并进行髓鞘碱性蛋白(MBP)的免疫组化染色分析。结果:伤后3~14d,两组RGC数目均下降,差异有统计学意义(P<0.01);实验组RGC数目明显高于盐水组,差异有统计学意义(P<0.01);伤后两组均有MBP阳性表达,BSS组表现为强阳性;实验组MBP表达呈下降趋势,14d表达呈弱阳性;BSS组表达也随时间有所减弱,但14d时表达仍明显;不同时间点实验组RGC阳性率均低于BSS组,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:EGb761能降低视神经夹伤后MBP的含量,提高RGC的存活数量。     

小鼠视神经损伤后的视功能评估

目的 通过闪光-视网膜电图(f-ERG)和视动反应(OMR)评估小鼠视神经钳夹(ONC)损伤后视功能的变化。方法 30只6～8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠,按照随机数字表法分为正常对照(NC)组、ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组,每组小鼠各6只。NC组不做特殊处理,ONC组小鼠在同一天进行双眼ONC 10 s造模。在相应时间点进行f-ERG和OMR检查,然后处死小鼠取视网膜进行视网膜免疫荧光染色铺片实验,观察各组小鼠视网膜神经节细胞(RGC)存活率的变化。比较NC组与ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠在不同光刺激强度下f-ERG的a波与b波波幅变化,以及随着视神经损伤时间延长,OMR测得的小鼠视力变化,评估小鼠视神经损伤后的视功能。结果 与NC组相比,ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠RGC存活率均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。NC组、ONC 3 d组、ONC 5 d组、ONC 7 d组以及ONC 14 d组小鼠f-ERG的a波与b...     

黄体酮在大鼠视神经损伤再生中的保护作用

目的　探讨黄体酮对外伤引起的视网膜及视神经损伤后再生的作用及机制。方法　８０只大鼠随机分为正常组（不作任何处理）、假损伤组（只暴露视神经,不夹伤）、损伤１组（行视神经不完全损伤处理,伤后即刻给予腹腔注射生理盐水）、损伤２组（行视神经不完全损伤处理,伤后１ｈ给予腹腔注射黄体酮注射液）。分别于损伤后１ｄ、３ｄ、７ｄ、１４ｄ将各组５只大鼠右眼球摘除,取视网膜组织,ＨＥ染色光学显微镜观察视网膜形态学变化,免疫组织化学染色观察视网膜组织中谷氨酸转运体-１（ｇｌｕｔａｍａｔｅｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ-１,ＧＬＴ-１）及活化Ｐ３８-ＭＡＰＫ（ｐ-ｐ３８）的表达变化。结果　经黄体酮治疗的损伤２组各个时间点大鼠视网膜细胞核排列整齐,稀疏程度及空泡化较轻,视网膜形态改变轻微。免疫组织化学染色检测损伤１组视网膜ＧＬＴ-１在损伤后１ｄ、３ｄ、７ｄ、１４ｄ表达的平均光密度值分别为０．３６８±０．０３３、０．１５１±０．０２７、０．１０６±０．０３１和０．０７６±０．０２０,损伤２组分别为０．４６１±０．０１１、０．２３１±０．０２１、０．１３２±０．０２２和０．１０３±０．０１３,各时间点损伤２组较损伤１组均有所增加,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。损伤１组视网膜ｐ-ｐ３８在损伤后１ｄ、３ｄ、７ｄ表达的平均光密度值分别为０．４５９±０．０２９、０．３２４±０．０２３和０．２０１±０．０２４,损伤２组分别为０．３３９±０．０１９、０．２４５±０．０１４和０．１５４±０．０３２,各时间点损伤２组较损伤１组均明显降低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　黄体酮对外伤性视网膜及视神经损伤均具有保护作用。     

Recovery of vision after presumed direct optic nerve injury

Immediate loss of light perception after direct optic nerve injury is usually irreversible. Our patient sustained presumed direct optic nerve injury because of a shotgun injury with loss of light perception, absent pupillary response, and absent visual-evoked potential. A small pupillary response was noted 12 days after injury, light perception returned by 15 days, and visual acuity was 20/100 at 4 months. A variety of pathophysiologic mechanisms may lead to visual loss after direct optic nerve injury. It is important to recognize that blindness is not always permanent in these cases despite the results of initial clinical and electrophysiologic testing.     

视神经夹持损伤模型大鼠视网膜和视神经小胶质细胞的活化

背景 外伤性视神经病变(TON)是继发于外力创伤下的急性视神经损伤,预后较差.小胶质细胞作为中枢神经系统中重要的免疫细胞,参与了中枢神经系统疾病与多种眼科疾病的病理生理过程.然而,小胶质细胞在TON的病理发展及损伤修复过程中的作用尚不明确. 目的 比较大鼠视神经夹持损伤后视神经与视网膜中小胶质细胞的形态变化、激活数量、分布情况及活化水平的差异. 方法 将35只SPF级健康雌性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠按照随机数字表法分为正常对照组,造模后6h、3d、7d、14 d、30 d组和假手术组,每组5只大鼠.造模后各时间点组用夹持钳以50 g的夹持力在大鼠眼球后约2 mm处钳夹视神经10s,建立大鼠视神经夹持模型,假手术组大鼠行相同的手术操作但不夹持视神经,正常对照组不做任何处理.分别于上述时间点制备大鼠视神经和视网膜冰冻切片,采用lectin-FITC荧光标记抗体检测各组大鼠视神经和视网膜中的小胶质细胞数量和激活的小胶质细胞数量. 结果 正常对照组和假手术组大鼠视网膜中小胶质细胞主要位于内丛状层(IPL),少部分位于内核层(INL)和神经节细胞层(GCL),外核层(ONL)和外丛状层(OPL)未见小胶质细胞分布.正常对照组大鼠视网膜小胶质细胞的细胞体较小,以分支状为主,突触细长,可见二级分支.各模型组大鼠视网膜中小胶质细胞主要位于GCL和IPL,小胶质细胞在GCL的数量明显多于假手术组,小胶质细胞多为阿米巴状,部分呈半激活态,少见分支静息态.正常对照组、假手术组及造模后6h、3d、7d、14 d和30 d组大鼠视网膜中小胶质细胞数分别为6.40-±-1.52、7.20±2.05、12.00±3.54、14.00±4.06、18.00±4.36、18.40±3.13和10.80±1.92,造模后各时间点大鼠视网膜中小胶质细胞数量均明显多于正常对照组,造模后30 d小胶质细胞数量明显少于造模后7d和14d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);造模后3、7和14d组大鼠视网膜中激活小胶质细胞数量明显多于假手术组,差异均有统计学意义(P=0.024、0.009、0.023).正常对照组和假手术组大鼠视神经中小胶质细胞较小,呈棒状或分枝状,分布均匀且稀疏.造模后各时间点组小胶质细胞较假手术组细胞体积增大,呈阿米巴状并分布在近视神经夹持部位.造模后6h、3d、7d、14d大鼠视神经中小胶质细胞数量明显多于正常对照组,差异均有统计学意义(P=0.007、0.001、0.003、0.014).造模后30 d大鼠视神经中小胶质细胞数量明显少于造模后3d、7d和14 d组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).造模后6h、3d和7d组大鼠视神经中活化小胶质细胞数量明显多于假手术组,差异有统计学意义(P=0.005、0.004、0.030),造模后14d、30 d大鼠视神经中活化的小胶质细胞数量较造模后3d组明显减少,差异均有统计学意义(P=0.021、0.004),造模后6h组视神经中激活态小胶质细胞增加并持续到造模后14d.结论 大鼠视神经夹持损伤后一定时间内视网膜及视神经中小胶质细胞增加并活化,视神经中小胶质细胞的活化及其衰减均早于视网膜,视神经中小胶质细胞活化程度更明显.     

Traumatic optic nerve avulsion and central retinal artery occlusion following rugby injury

Optic nerve avulsion (ONA) secondary to finger gouging is a rare complication. A case is reported of a 14-year-old boy who had an acute loss of vision after being poked in his left eye during a game of rugby union. He was later diagnosed with ONA, and this was associated with central retinal artery occlusion, which was rarely reported in the literature. His progress was complicated by a delayed onset of neovascular glaucoma. This is the first report of ONA secondary to a rugby injury and highlights the need for clinicians to be aware of the potential for loss of sight from gouging.     

视神经损伤再生修复的视觉诱发电位研究

目的探讨视神经损伤后不同时期视觉诱发电位检查的刺激模式空间频率、P100波幅变化与视神经损伤再生修复之间的联系,探讨将视觉诱发电位技术应用于视神经损伤再生修复评估的可行性。方法分析因眼外伤致视神经受损23例（29眼）的视觉诱发电位资料,实验确定刺激模式空间频率及P100波幅作为检测指标,以受检者的视力表视力为参照,记录全部受检眼的检测结果,在此基础上,分析视神经损伤后不同时期视觉诱发电位变化与视神经再生修复之间的关系。结果一定的视觉刺激模式空间频率大小与视神经损伤再生修复表现出一致性,P100波幅与视力水平呈正相关。视神经损伤后前3个月,再生修复眼视觉诱发电位检测结果呈现动态变化,如视力恢复、刺激模式空间频率减小及P100波幅增大预示视神经损伤再生修复;若视力减退、刺激模式空间频率增大（或无变化）及P100波幅减小（或无变化）则提示视神经损伤严重,无明显再生修复。结论视觉诱发电位技术可用于视神经损伤再生修复的客观评估。