抗纤复方对纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响

目的 :探讨抗纤复方对体外培养纤维肝大鼠肝细胞基底膜基质生成的影响。方法 :常规培养正常与 DMN纤维肝大鼠肝细胞 ,然后改用抗纤复方原液与抗纤复方药物血清温育肝细胞 48小时后 ,免疫组化 S-P法显色细胞纤维连接蛋白( FN)、层连蛋白 ( LM)和 IV型胶原蛋白 ( IV-C)的变化。结果 :正常肝细胞基底膜基质合成处于抑制状态 ,肝纤维化时肝细胞基底膜基质合成增加。抗纤复方能显著抑制纤维肝肝细胞 F N,L M及 IV-C的表达 ,抗纤复方药物血清效果优于原液。结论 :抗纤复方具有抑制 DMN纤维肝肝细胞基底膜基质的异常合成作用。     

抗纤Ⅰ号复方药物血清对肝星状细胞 L型钙通道的影响

目的:应用膜片钳全细胞技术研究抗纤Ⅰ号复方药物血清对单个肝星状细胞L型钙通道的影响,并进一步探讨该药防治肝纤维化的机制.方法:制备大鼠含抗纤Ⅰ号复方药物血清,分别用药物血清和CCl4处理大鼠肝星状细胞(HSC),孵育24h后,应用膜片钳全细胞技术观察细胞L型钙通道.通过正交设计方法,研究不同浓度CCl4、抗纤Ⅰ号复方药物血清及其作用的先后顺序和二者作用的时间间隔对肝星状细胞L型钙通道的影响.结果:不同浓度抗纤Ⅰ号复方药物血清、CCl4及其作用的前后顺序对细胞L型钙电流的影响有显著性(P＜0.05),两因素作用的时间间隔对结果没有显著性(P＞0.05).CCl4在5～20mmol/L范围内能显著增加肝星状细胞L型钙电流峰值,5%～40%抗纤Ⅰ号复方药物血清明显降低肝星状细胞L型钙电流峰值(P＜0.05).结论:抗纤Ⅰ号具有防治肝纤维化的作用,其机理可能与其调节肝星状细胞L型钙通道有关.     

抗纤复方影响大鼠肝贮脂细胞生成Ⅰ、Ⅲ型胶原的比较研究

用免疫细胞化学染色法观察抗纤复方药物血清对大鼠正常肝传代贮脂细胞和纤维肝原代贮脂细胞Ⅰ,Ⅲ型胶原表达的影响,并对Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达量进行比较分析。结果：传代贮脂细胞Ⅲ型胶原增加显著,而纤维肝贮脂细胞Ⅰ型胶原增加明显,抗纤复方能显著抑制贮脂细胞表达胶原,且对传代贮脂细胞Ⅲ型胶原和纤维肝原代贮脂细胞Ⅰ型胶原抑制作用更明显。     

抗纤复方对大鼠纤维化肝贮脂细胞自分泌转化生长因子β1的影响

本文采用血清药理学方法,以貂肺上皮细胞 (Mvllu)生长抑制MTT法,观察了抗纤复方对大鼠纤维化肝原代培养贮脂细胞自分泌产生TGFβ_1的影响,检测培养上清中TGFβ_1活性,并以小牛血清、正常鼠血清和秋水仙碱药物血清为对照。结果表明抗纤复方药物血清和秋水仙碱药物血清均能明显抑制贮脂细胞产生TGFβ_1,但抗纤复方的抑制作用更明显。提示抗纤复方能抑制贮脂细胞产生TGFβ_1,阻断肝纤维化时的贮脂细胞自分泌放大过程,从而减少胶原等ECM的合成。     

保肝抗纤胶囊防治大鼠肝纤维化的实验研究

目的:研究保肝抗纤胶囊治疗肝纤维化的作用。方法:建立 CCl_4高脂低蛋白复合因素所致的大鼠肝纤维化模型,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组、肝脾康组、保肝抗纤高剂量组、保肝抗纤低剂量组,观察用药后血清学及病理变化。结果:保肝抗纤胶囊能提高肝纤维化大鼠生存率,降低血清Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及血清透明质酸(HA)值,并能改善肝组织病理学变化。结论:保肝抗纤胶囊有保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死、阻止纤维组织增生、促进纤维组织降解的作用。     

抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞整合素信号及凋亡的影响

目的:探讨抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及整合素信号通路的下游信号分子FAK在其中的作用。方法:将传代培养的大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)与中药复方抗纤软肝颗粒药物血清(5%、10%、20%)共同培养48h后,应用MTT法测定细胞增殖;应用流式细胞仪测定细胞凋亡;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测FAK mRNA的表达。结果:抗纤软肝颗粒药物血清,均能显著抑制HSC-T6增殖,20%药物血清组作用最强(P<0.05);流式细胞仪测定结果显示抗纤软肝颗粒药物血清均可诱导HSC凋亡(P<0.05);抗纤软肝颗粒药物血清能够使HSC的FAK mRNA的表达下调。结论:抗纤软肝颗粒能够抑制HSC增殖及诱导凋亡HSC。其作用可能与其抑制整合素信号通路下游信号分子FAK mRNA的表达有关。     

蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化超微结构及CYP2E1表达的影响

目的:观察蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化超微结构及细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达的影响。方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、蓝莓原浆预防组(蓝莓组)、复方鳖甲软肝片预防组(复方组)、蓝莓原浆加复方鳖甲软肝片预防组(蓝莓+复方组)。猪血清复制大鼠肝纤维化模型,各预防组在造模同时给予蓝莓原浆或(和)复方鳖甲软肝片灌胃。12周后处死大鼠,观察肝组织超微结构变化,RT-PCR、Western Blot和免疫组织化学法检测大鼠肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白质的表达。结果:与模型组比,3个用药组肝纤维化程度明显减轻(P0.05),超微结构病变明显改善,肝组织CYP2E1 mRNA及蛋白质表达无明显差异。结论:蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定的预防作用,对肝细胞超微结构病变有一定的保护作用,对CYP2E1的表达无明显影响。     

复方991抗纤方对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的观察复方991抗纤方对大鼠肝纤维化模型的生化酶学改变.方法对高脂饮食CCl4造模大鼠进行干预,分为模型组、预防组、秋水仙碱组、991治疗组,检测ALT、AST、ALB、GLB、TP、PCⅢ、HA,观察各组对肝纤维化的影响.结果复方991抗纤方可明显降低血清ALT、AST水平,升高白蛋白,降低球蛋白,预防组PCⅢ和HA水平低于其他组,991治疗组明显低于秋水仙碱组.结论复方991抗纤汤有预防和治疗肝纤维化的作用.     

抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞整合素信号及凋亡的影响

目的：探讨抗纤软肝颗粒药物血清对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及整合素信号通路的下游信号分子FAK在其中的作用。方法：将传代培养的大鼠肝星状细胞系（HSC—T6）与中药复方抗纤软肝颗粒药物血清（5％、10％、20％）共同培养48h后，应用MTT法测定细胞增殖；应用流式细胞仪测定细胞凋亡；采用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测FAKmRNA的表达。结果：抗纤软肝颗粒药物血清，均能显著抑制HSC—T6增殖，20％药物血清组作用最强（P〈0．05）；流式细胞仪测定结果显示抗纤软肝颗粒药物血清均可诱导HSC凋亡（P〈0.05）；抗纤软肝颗粒药物血清能够使HSC的FAKmRNA的表达下调。结论：抗纤软肝颗粒能够抑制HSC增殖及诱导凋亡HSC。其作用可能与其抑制整合素信号通路下游信号分子FAKmRNA的表达有关。     

化痰行瘀汤对肝纤维化大鼠肝脏超微结构的影响

目的:观察化痰行瘀汤对肝纤维化大鼠肝脏超微结构的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、化痰行瘀汤低、中、高剂量组、复方鳖甲软肝片组6组,每组10只。采用皮下注射四氯化碳(CCl4)橄榄油溶液复制肝纤维化模型,采用透射电镜和扫描电镜观察各组大鼠肝脏的超微结构改变。结果:与模型对照组比较,化痰行瘀汤中、高剂量组大鼠肝细胞、库普弗细胞(KC)、星状细胞(HSC)、内皮细胞超微结构得到明显改善。结论:化痰行瘀汤能减少肝细胞损伤,阻断胶原纤维的生成,而达到抗肝纤维化的目的。     

抗纤方抗肝纤维化模型大鼠肝细胞损伤的实验研究

目的:探讨抗纤方阻断肝纤维化的机理。方法:从肝纤维化模型大鼠的肝组织中分离肝细胞,用抗纤方培养,并与秋水仙碱、大黄虫丸培养组进行对照观察。结果:抗纤方培养组肝细胞存活率明显高于空模组(P<0.01);抗纤方、秋水仙碱、大黄虫丸组细胞培养上清液中谷丙转氨酶的值均低于空模组(P<0.01);抗纤方、大黄虫丸组肝细胞中糖元、酸性磷酸酶含量明显高于空模组(P<0.01),而秋水仙碱则与空模组相当(P>0.05)。结论:抗纤方能保持细胞膜稳定,促进物质代谢,加快肝细胞修复再生,间接抑制胶原纤维合成,从而达到抗肝纤维化的作用。     

鳖甲煎汤抗大鼠肝纤维化作用

目的探讨鳖甲煎汤对大鼠肝纤维化的治疗作用.方法四氯化碳 (CCl4)与橄榄油配成 40 %的 CCl4橄榄油油性溶剂,按照 3 mg/kg腹腔皮下注射造模.模型对照组给予生理盐水灌胃,鳖甲煎汤低、中、高剂量组给药量分别为 6.25 g/kg、 12.5 g/kg、 25.0 g/kg.第 11周腹腔注射 10 %水合氯醛麻醉,眼球摘除取血测定肝的生化指标,取肝左叶做病理观察.结果鳖甲煎汤组能减低实验大鼠 ALT、 AST、透明质酸 (HA)、层粘蛋白 (LN)、 III型前胶原 (PCIII)水平,未见假小叶形成.相对低剂量组而言,中、高剂量组纤维增生较少,范围局限,肝细胞脂肪变性坏死较轻.鳖甲煎汤组与 CCl4模型组比较,有显著性差异 (P < 0.05).结论中药鳖甲煎汤具有一定的改善肝功能、减轻肝纤维化的作用.     

茶多酚抗大鼠肝纤维化及其机制研究

目的 :观察茶多酚抗大鼠肝纤维化作用并探讨其作用机制。方法 :大鼠随机分成 5组 ,对其中 4组的每只大鼠酒精灌胃形成酒精性肝纤维化 ,其中 3组大鼠每天同时分别以不用剂量茶多酚灌胃 ;另设对照组。在 24周时观察分析各组大鼠的肝脏组织病理情况并进行定量分析 ,同时测定大鼠的血清抗脂质过氧化指标及血清内毒素水平。结果 :经茶多酚干预的各组酒精灌胃大鼠的肝纤维化程度较单纯酒精组轻 ;抗脂质过氧化、血清内毒素指标较单纯酒精灌胃组大鼠也均有不同程度改善。结论 :茶多酚有抗大鼠肝纤维化的作用。其作用机制可能与清除过多的过氧化脂质及降低内毒素水平有关。     

丹芪和肝冲剂抗实验性肝纤维化的超微结构研究

目的:观察丹芪和肝冲剂的抗实验性肝纤维化作用。方法:用透射电镜方法,观察了用丹芪和肝冲剂治疗2及4个月后,实验性肝纤维化大鼠肝的超微结构变化。结果:用药2及4个月后肝细胞形态较病理模型组有明显改善,无明显的变性坏死现象,细胞表面微绒毛发达,纤维隔疏松,内有许多细胞突起,隔内浸润细胞明显减少,以治疗4个月变化更为明显。结论:从超微结构水平进一步证实了丹芪和肝冲剂的抗肝纤维化作用,其治疗效果在一定时间内与用药持续时间有关。     

血隆冲剂抗肝纤维化的临床与实验研究

目的：研究血隆冲剂抗肝纤维化的临床疗效及其作用机理。方法：肝硬变患者98例，随机分为两组，治疗组（58例）和对照组（40例）分别给予血隆冲剂和参柴颗粒剂治疗3个月，观察治疗前后两组患者血清透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）水平及肝脏病理组织学的改变。实验研究观察造模大鼠肝组织的羟脯氨酸含量及光、电镜下的肝脏病理改变。结果：显效率和总有效率治疗组分别为43．1％、72．4％，对照组分别为17．5％、40．0％，两组比较差异均有显著性（P＜0．01）；治疗后治疗组患者血清HA、LN水平明显降低，肝脏活组织病理检查（治疗组8例）证实肝纤维组织减少。实验研究结果证实血隆冲剂9．6g/kg组大鼠肝组织中羟脯氨酸含量明显下降；光、电镜均能发现用药组大鼠肝组织中纤维组织增生减轻。结论：血隆冲剂有抗肝纤维化作用。     

丹参对离体培养纤维化后肝细胞的细胞化学定量研究

应用形成学，细胞化学和图像分析方法观察丹参对离体培养纤维化后肝细胞的影响。实验结果表明丹参有恢复肝细胞结构，使肝细胞内MAO.SDH.G-6-P.ATPase和5-N等酶活性增强，稳定细胞膜，使培养上清液中GPT.GOT和LDH含量减少，Ca~(2 )含量增加，说明丹参可通过保护肝细胞，使受损的肝细胞结构恢复，增强细胞内酶活性和膜结构稳定性，起到防治肝纤维化的作用。     

肝复康胶囊对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用

目的:探讨中药肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞的保护作用.方法:采用四氯化碳致大鼠肝纤维化模型,观察肝复康对肝功能及肝细胞损伤超微结构的影响.结果:肝复康明显改善肝细胞变性及炎细胞浸润等情况,同时明显降低血清转氨酶活性、升高血清白蛋白,降低白球蛋白比例;电镜观察表明肝复康对实验性肝纤维化大鼠肝细胞线粒体等细胞器的损伤有保护作用.结论:肝复康能明显减轻四氯化碳所致的肝细胞损伤,保护肝细胞,改善肝功能.     

虫草多糖对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠脂质过氧化及肝细胞再生的影响

目的:观察虫草多糖对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的药理作用.方法:采用DMN大鼠肝纤维化模型,分为正常组(N,n=6)、模型组(M,n=11)、虫草多糖组(C,n=8)、秋水仙碱组(Q,n=9).造模4周,虫草多糖(60 mg·kg-1)和秋水仙碱(0.1 mg·kg-1)灌胃给药3周,模型与正常组国时给予等量灭菌水.观察血清ALT,AST,GGT活性及Alb,TBil含量;肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;肝脏病理及胶原染色;肝组织SOD活性及MDA,GSH,GSH-Px含量;肝脏组织增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达.结果:模型组血清ALT,AST,GGT,TBil显著升高,Alb显著降低,虫草多糖组血清AST,TBil显著降低,Alb显著升高;模型组肝组织Hyp显著升高,虫草多糖、秋水仙碱组则显著降低;HE染色:模型组正常肝小叶结构破坏,肝细胞水肿,汇管区结缔组织增生,虫草多糖及秋水仙碱组上述病理变化显著减轻.胶原染色:模型组肝小叶纤维间隔形成,见较多完整假小叶;虫草多糖、秋水仙碱组胶原沉积减少.模型组肝组织SOD,GSH-Px,GSH显著降低,MDA显著增高,虫草多糖及秋水仙碱组GSH,GSH-Px活性显著增高.模型组肝组织PCNA蛋白表达显著升高,虫草多糖及秋水仙碱组则显著降低.结论:虫草多糖可显著抑制DMN诱导的大鼠肝纤维化及脂质过氧化损伤.     

柴胡皂苷d抗肝纤维化大鼠脂质过氧化作用的研究

目的:探讨柴胡皂苷d(SSd)对肝纤维化过程中脂质过氧化的影响。方法:采用腹腔注射二甲基亚硝胺(DMN)10 mg.kg^-1诱导大鼠肝纤维化,以柴胡皂苷d(1.8 mg.kg^-1)同时预防给药4周,检测正常组、模型组和SSd组大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、IV型胶原(IV-C)及丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝组织中MDA的含量和SOD的活性。结果:SSd能显著降低肝纤维化大鼠血清ALT,AST水平和HA,LN,IV-C的含量,并可提高肝组织中SOD的活性,降低血清和肝组织中的MDA的含量。结论:SSd具有很明显的保护肝细胞、抗肝纤维化的作用,其机制可能与抗脂质过氧化有关。