中药有效成分保护脑缺血再灌注损伤的研究进展

<正>脑缺血再灌注损伤(CIRI)的机制主要是兴奋性氨基酸神经毒性、神经元超微结构的变化、氧化应激、炎症反应、钙离子超载等〔1,2〕。中药有效成分可从多个方面发挥保护脑缺血再灌注损伤的作用,其作用机制值得进一步研究。1抑制兴奋性氨基酸引起的神经毒作用兴奋性氨基酸(EAA)主要包括谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)。脑缺血再灌注损伤主要与Glu的大量     

脑缺血时谷氨酸兴奋毒性及药理学对抗策略

脑缺血引起中枢神经系统兴奋性氨基酸(EAA),特别是谷氨酸(Glu)大量释放、重摄取受阻及突触后膜EAA受体的过度激活是造成神经元损伤的重要原因,被称为“兴奋毒性”学说,是近年来缺血性脑损伤神经机理研究的热点。现就脑缺血时Glu的释放、重摄取、受体激活、兴奋毒性机理以及对抗其神经毒性的药理学策略等方面综述如下。     

局灶脑缺血再灌注脑温对抑制性氮基酸的影响

目的 研究轻度、亚低温对局灶脑缺血抑制性氨基酸的影响。方法 建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,诱导目标脑温,用HPLC荧光法检测脑组织GABA含量。结果 轻度高温组GABA短暂增高后下降,亚低温组GABA持续增高。结论 轻度高温使脑内GABA水平下调,在加重缺血神经元损伤方面起着不容忽视的作用：亚低温使GABA水平持续上调,在保护缺血神经元方面起重要作用。     

缺血预处理对大鼠脑组织及血清氨基酸水平的影响

目的 观察缺血预处理(CIP)对大鼠脑组织及血清天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(Gly)水平的影响。方法 将90只SD大鼠随机分为3组各30只,A组短暂性阻断双侧颈总动脉行CIP处理,B组不阻断血流,C组不处理。CIP后1、3、6、12、24 h,采用高效液相色谱法检测脑组织及血清中的Glu、Asp、GABA、Gly。结果 与B、C组同时点比较,A组脑组织与血清中Glu、Asp、GABA、Gly均增高(P均<0.05或0.01),1 h或3 h达高峰,3 h或6 h后开始逐渐下降,24 h恢复正常水平。结论 CIP后大鼠脑组织及血清Glu、Asp、Gly、GABA升高,这可能是早期脑缺血耐受机制的启动因素。     

地西泮对大鼠不同脑温脑缺血组织γ-氨基丁酸的影响

目的研究轻度高温、常温、亚低温状态下,地西泮对大鼠脑缺血组织γ-氨基丁酸（GABA）的影响。方法建立大鼠可复流大脑中动脉闭塞模型,诱导目标脑温,用HPLC荧光法检测脑缺血组织GABA含量。结果与常温假手术组比较,常温脑缺血对照组GABA无显著改变,而常温地西泮组GABA显著增高（P〈0.01）。与常温脑缺血对照组比较,常温及轻度高温地西泮组GABA无显著改变,而亚低温地西泮组GABA显著增高（P〈0.001）。与常温地西泮组比较,轻度高温地西泮组GABA无显著改变,而亚低温地西泮组GABA显著增高（P〈0.001）。结论常温脑缺血时,GABA无显著增高,可能对缺血脑组织产生不利影响。在常温及轻度高温状态下给予地西泮,均不能显著增高缺血脑组织GABA水平,且GABA水平随脑温的升高而稍有降低,没能显示出地西泮有“抑制性保护”作用,其“抑制性保护”作用似乎有限。亚低温状态下给予地西泮,可显著增高缺血脑组织GABA水平,显示出地西泮有“抑制性保护”作用,因此亚低温可能有利于增强地西泮的神经保护作用。     

不同麻醉药物对老年非体外循环冠状动脉旁路移植术患者血清兴奋性氨基酸的影响

目的 比较不同麻醉药对老年非体外循环冠状动脉旁路移植术患者血清兴奋性氨基酸（EAA）的影响。方法 择期行非体外循环冠状动脉旁路移植术的患者120例,年龄60～75岁,ASA（美国麻醉医师协会）Ⅱ或Ⅲ级,随机分为丙泊酚复合瑞芬太尼组（P组）和七氟烷（S组）,每组60例。P组丙泊酚复合瑞芬太尼,S组吸入七氟烷维持麻醉。分别于麻醉前（T0）、术毕即刻（T1）、术后24h（T2）、48h（T3）、72h（T4）从颈内静脉采血2ml,采用反相高效液相色谱荧光法检测血清中EAA浓度。结果 组内比较T2、T3两组血清谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、甘氨酸（Gly）浓度与麻醉前均有不同程度升高（P＜0.05）;与P组比较S组Glu、Asp、Gly浓度在T2明显升高（P＜0.05）,Glu浓度在T3明显升高（P＜0.05）,T1和T4 Glu、Asp、Gly浓度与P组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 非体外循环冠脉搭桥术老年患者应用丙泊酚复合瑞芬太尼麻醉,可降低血清EAA浓度,有减少术后认知功能障碍的趋势。     

活血开窍法对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织兴奋性氨基酸的影响

目的观察活血开窍法对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织兴奋性氨基酸(EAA)的影响。方法以大鼠局灶性脑缺血再灌注模型为研究对象,于缺血2h再灌注48h,取脑组织应用高效液相色谱法测定谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)的含量。结果缺血2h再灌注48h后,模型组、药物组与正常组大鼠比较,脑组织G1u及Asp含量升高(P0.01);与模型组大鼠比较,醒脑通脉大、小剂量组脑组织中Glu、Asp含量显著降低(P0.01)。结论活血开窍法抗缺血性脑损伤的作用机制可能与其对抗脑缺血再灌注后EAA的升高有关。     

脑温对大鼠灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的　研究预高温和缺血时轻度高温、亚低温对脑缺血再灌注损伤组织脂质过氧化和缺血脑组织病变的影响。方法　 75只Wistar大鼠按不同脑温和缺血条件被随机分为生化组 (5组 ,n=7) 和病理组 (5组 ,n=8) ,采用Nagasawa脑缺血模型 ,观察脑缺血再灌注损伤组织超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、还原型谷胱甘肽 (GSH)、丙二醛 (MDA)及缺血脑组织病理变化。结果　轻度高温加重常温脑缺血组织SOD、GSH的降低和MDA的增高 ,使GSH Px呈降低趋势 ,而亚低温相反 ;预高温对常温脑缺血各项指标影响不显著。轻度高温组脑缺血病理损伤最重 ,亚低温和预高温有改善脑缺血损伤的作用。结论　高温加重而亚低温抑制脑缺血损伤 ,分别与其增加或减少内源性抗氧化酶消耗、降低或增强缺血脑组织清除氧自由基的能力有关 ;预高温对缺血脑组织有保护作用 ,未能肯定此作用与内源性抗氧化酶消耗减少和缺血脑组织清除氧自由基的能力增强有关     

急性脑缺血再灌注中极化液的保护作用实验研究

目的 观察极化液(GIK)对急性脑缺血的保护作用。方法 测定极化液组和对照组的急性脑缺血大鼠的缺血组织中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)、一氧化氮(NO)的含量。结果 GIK的应用可以有效地抑制缺血及再灌注时G1u、Asp、NO的异常增高，与对照组相比较有显著差异(P＜0．01)。结论 GIK能减轻G1u、Asp、NO的神经毒性，起到了对缺血脑组织的保护作用。     

血管内皮型一氧化氮合酶基因Glu298Asp多态性与老年心肌梗死的关系

目的　探讨老年人血管内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因Glu2 98Asp多态性的分布及其与老年人心肌梗死的关系。　方法　测定 37例老年心肌梗死患者和 172例性别、年龄相匹配对照者的身高、体重、空腹血脂等指标 ,采用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片断长度多态性 (RFLP)检测eNOS基因Glu2 98Asp多态性。　 结果　患病组Glu/Asp基因型高于对照组 (32 4 %和 18 0 % ) ,两组eNOS基因Glu2 98Asp多态性构成差异有显著性 (χ2 =3 87,P <0 0 5 )。无高血压患病亚组Glu/Asp基因型高于无高血压对照亚组 (35 0 %和 10 9% ) ,两亚组Glu2 98Asp多态性构成差异亦有显著性 (χ2 =7 4 3,P <0 0 1)。患病组 2 98Asp等位基因频率高于对照组 (16 2 %和 9 0 % ,P >0 0 5 ) ;无高血压患病亚组 2 98Asp等位基因频率亦高于无高血压对照亚组 (17 5 %和 5 4 % ) ,两组比较差异有显著性 (χ2 =6 82 ,P <0 0 1)。　结论　eNOS基因Glu2 98Asp多态性在中国老年人群中存在 ,Glu/Asp基因型和 2 98Asp等位基因可能是中国老年人心肌梗死的遗传易感指标。     

老年脑出血后局部亚低温治疗对应激激素变化的研究

目的研究老年人急性脑出血后局部亚低温治疗对其应激激素的影响。方法将96例老年脑出血患者随机分为局部亚低温组(47例)和常规治疗组(49例),常规治疗组单纯药物综合治疗,局部亚低温组在药物综合治疗基础上加用局部亚低温治疗,观察两组入院时、治疗后1w血浆促肾上腺皮质释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质醇(Cor)的变化以及应激性疾病的改变。结果两组经治疗1w后,应激激素(ACTH、CRH、Cor)明显下降(P<0.05),应激性疾病(高血压、高血糖和应激性溃疡)明显好转(P<0.05);但同常规治疗组相比,局部亚低温组对应激激素和应激性疾病的影响更明显(P<0.05);同样,在应激性高血糖组也得到了相同的结果。结论颅脑局部亚低温治疗可稳定下丘脑垂体肾上腺(H P A)轴,显著降低脑出血的应激反应,改善应激性疾病。     

脑泰方对缺血再灌注损伤沙鼠大脑皮层氨基酸类神经递质含量的影响

目的 :探讨脑泰方对缺血再灌注损伤沙鼠大脑皮层氨基酸类神经递质含量的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉阻断模型。利用高效液相色谱 -荧光法检测大脑皮层氨基酸含量。结果 :脑泰方可显著降低沙鼠脑缺血再灌注损伤时大脑皮层兴奋性氨基酸类神经递质(EAAs)Glu、Asp含量 (P <0 .0 1) ,并显著升高抑制性氨基酸类神经递质 (IAAs)GABA、Gly、Tau含量 (P <0 .0 1) ,提高GABA/Glu比值。结论 :调节脑组织兴奋性和抑制性氨基酸类神经递质含量的平衡可能是脑泰方抗脑缺血再灌注损伤的机制之一。     

补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠神经递质及其受体的影响

目的观察补肾活血方对血管性认知障碍模型大鼠海马组织神经递质及其受体表达的影响。方法3月龄Wistar大鼠40只,采用双侧颈总动脉永久结扎法（2-VO）制作认知障碍模型大鼠,分别给予补肾活血方和银杏叶片15d。运用高效液相色谱法检测大鼠海马组织内乙酰胆碱（ACh）、5-羟色胺（5-HT）、多巴胺（DA）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、γ-氨基丁酸（GABA）含量,免疫组化法检测其相应受体表达情况。结果与模型组相比,补肾活血方组中大鼠海马组织内ACh、5-HT、DA、GABA的含量及神经元中相应受体的表达均增高（P〈0．05或P〈0．01）,Glu、Gly的含量及神经元中相应受体的表达均降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论补肾活血方可减轻神经元损伤导致的脑内ACh、5-HT、DA含量的减少,保护大脑学习记忆能力;其机制可能与其调节血管性认知障碍模型大鼠脑内兴奋性氨基酸（EAA）／抑制性氨基酸（IAA）平衡有关。     

急性脑梗塞患者血清及脑脊液游离氨基酸递质水平的变化及临床意义

应用日立８３５－５０型氨基酸自动分析仪，对３０例发病１２小时至３天急性脑梗塞患者的血清氨基酸中兴奋在酸递质谷氨酸和天门冬氨酸水平明显升高；牛黄酸、甘氨酸递质水平下降，但差异不显著，血清中Ｇｌｕ和Ａｓｐ水平变化与脑梗塞直径呈显著正相关，与神经功能评分呈正相关。提示Ｇｌｕ和Ａｓｐ参与脑梗塞的病理过程，血清Ｇｌｕ和Ａｓｐ水平可作为临床观察其病情严重程度、梗塞面积的客观指标。     

左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类和单胺类神经递质含量变化的影响

目的 观察左归丸、右归丸对老年大鼠海马、杏仁核氨基酸类神经递质Asp、Glu、Gly、GABA和单胺类神经递质5-HT、NE含量变化的影响，探讨老年机体神经元的神经递质的变化，以及左归丸、右归丸延缓老年大鼠神经内分泌调控退化的作用机制。方法 以自然衰老大鼠为动物模型，分设4组：青年对照组、老年对照组、老年左归丸组、老年右归丸组。采用HPLC-荧光法，检测各组大鼠海马、杏仁核Asp、Glu、gly、GABA含量变化；采用ELISA法，检测5-HT、NE含量变化。结果 与青年对照组相比，老年对照组大鼠海马、杏仁核Asp、Glu、Gly、GABA含量有不同程度升高，而与老年对照组相比，两用药组含量有不同程度降低。同时，老年对照组大鼠海马NE含量减少，左归丸组能提高老年大鼠海马NE含量。而各组大鼠5-HT含量无明显差异。结论 左归丸、右归丸通过不同程度地纠正老年大鼠海马和杏仁核脑区氨基酸类和单胺类神经递质的紊乱状态，使兴奋性和抑制性神经递质趋向平衡，从而有助于改善大脑边缘系统，延缓机体衰老。     

局部亚低温对脑出血的临床疗效和甲状腺轴功能的影响

目的研究局部亚低温治疗急性重症出血患者临床疗效及其对甲状腺激素的影响。方法随机将78例脑出血患者分为治疗组38例和对照组40例,治疗组在药物综合治疗基础上加用局部亚低温治疗,对照组为单纯药物综合治疗,观察两组治疗前、治疗后7、15d血浆甲状腺激素的变化及治疗前及治疗后30、90d临床神经功能评分及Barthel指数评分。结果局部亚低温组血浆FT3、FT4、TSH第7、15天逐渐恢复正常,明显优于对照组(P<0.05)。治疗30、90d后局部亚低温组临床ESS神经功能评分及Barthel指数评分明显高于对照组(P<0.05)。结论局部亚低温组治疗可改善脑出血患者甲状腺轴功能紊乱,并能促进患者神经功能恢复,明显改善预后。     

TLR4基因Asp299Gly及TLR2基因Arg753Glu、Arg677Trp多态性与中国湖北汉族炎症性肠病无相关性

目的:研究TLR4基因Asp299Gly及LTLR2基因 Arg753Glu及Arg677Trp多态性在中国汉族人群中的分布,探讨其与炎症性肠病的相关性．方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法,检测120例中国湖北汉族炎症性肠病患者与110例正常对照者TLR4 基因ASp299Gly及TLR2基因Arg753Glu及 Arg677Trp基因型,分析该基因多态性与炎症性肠病以及临床亚型的相关性．结果:炎症性肠病患者和健康对照者均未检测出TLR4基因ASp299Gly及TLR2基因 Arg753Glu及Arg677Trp突变型．结论:TLR4基因Asp299Gly及TLR2基因 Arg753Glu及Arg677Trp基因多态性与中国湖北汉族人群炎症性肠病的易感性无相关性．     

亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护作用机制

目的探索亚低温对脑缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)组、模型组、I/R+亚低温组、I/R+rt-PA组、I/R+亚低温+rt-PA组,每组各6只。通过构建大鼠的缺血再灌注模型,进行神经功能半定量缺损评分;大鼠血脑屏障渗透实验,比较各组血脑屏障保护作用的差异;免疫组化检测大鼠脑组织中t-PA和组织型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达;Western blot检测p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达。结果两个亚低温处理大鼠模型组神经损伤情况均低于模型组(P0. 05);亚低温治疗可以降低血脑屏障的通透性; rt-PA组和I/R+rt-PA组大鼠脑组织中t-PA和PAI-1的表达量明显增加,其余各组表达量均较低; rt-PA组和I/R+rt-PA组的p-MEK1/2和p-ERK1/2表达量显著增加,而亚低温处理后可明显降低p-MEK1/2和p-ERK1/2表达量。结论亚低温对脑缺血再灌注损伤的保护作用与降低血脑屏障的通透性、降低大鼠脑组织缺血再灌注后t-PA和PAI-1的表达以及降低p-MEK1/2和p-ERK1/2含量有关。