音乐疗法对阿尔茨海默病小鼠空间学习记忆能力及神经免疫炎性因子的影响

目的通过Morris水迷宫测试阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力,检测AD小鼠脑海马中神经免疫炎性因子的蛋白阳性表达强度及脑组织中神经免疫炎性因子的mRNA水平,探讨音乐疗法对AD小鼠的免疫治疗作用机制。方法选取野生C57BL/6和转基因APP/V717雌性小鼠作为研究对象,实验分为对照组(C57BL/6野生雌性小鼠,n=10)、AD模型组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)和音乐治疗组(APP/V717转基因雌性小鼠,n=10)。三组均给予正常饮食,音乐治疗组每天早、中、晚各一次给予音量40～65 dB舒缓、轻柔性的音乐30 min,共治疗12 w。采用Morris水迷宫检测各组小鼠空间学习记忆能力;苏木精-伊红(HE)染色在普通光学显微镜下观察各组小鼠脑海马神经细胞损伤程度;免疫组织化学染色检测各组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度;实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α、5-羟色胺(HT)和去甲肾上腺素(NE)的mRNA水平。结果 (1)Morris水迷宫检测结果:与模型组比较,音乐治疗组空间学习记忆能力明显提高(P0.05)。(2)HE染色可见音乐治疗组小鼠脑海马神经细胞固缩坏死较模型组明显减轻。(3)免疫组织化学染色可见音乐治疗组小鼠脑海马中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度均较模型组明显降低(P0.05)。(4)实时荧光定量PCR检测可见音乐治疗组小鼠脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA水平均较模型组明显降低(P0.05),5-HT和NE mRNA水平均较模型组明显升高(P0.05)。结论音乐治疗能够提高AD小鼠的空间学习记忆能力,同时通过下调AD小鼠脑海马及脑组织中神经免疫炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的蛋白阳性表达强度和mRNA水平,上调神经免疫炎性因子5-HT和NE mRNA水平,在提高机体神经免疫治疗方面作用显著。     

炎性因子在阿尔茨海默病发病机制中的作用

阿尔茨海默病(AD)是老年人中最常见的、但病因尚未明确的渐进性神经系统退行性疾病,其主要临床表现为进行性认知功能障碍、学习记忆能力减退、日常行为异常、生活能力下降以及人格改变等症状。神经元外淀粉样β蛋白(Aβ)沉积、神经元内神经原纤维缠结(NFT)、神经突触及神经元丢失等为其主要病理学特征性变化,这些变化诱发了神经炎症反应。AD发病机制及病因复杂多样,目前主要有Aβ级联假说、tau蛋白异常磷酸化、神经炎症反应等,越来越多的研究表明炎症反应在AD发病进程中扮演重要角色。本文将对部分炎性因子[IL-1β、IL-6、IL-4、IL-10、转化生长因子β1(TGF-β1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等]与AD的关系做一综述。     

益肾调督法电针对β-淀粉样蛋白1～42诱导的阿尔茨海默病大鼠血清和脑内炎性因子的调节作用

目的探讨益肾调督法电针对阿尔茨海默病(AD)大鼠血清和脑内促炎性因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-1β和抗炎性因子IL-4、IL-10、转化生长因子(TGF)-β1的影响及炎性调节作用。方法 40只雄性Wistar大鼠随机分成对照组、假手术组、模型组和治疗组各10只。采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白(Aβ)1～42建立AD模型。对照组、假手术组和模型组不予任何治疗;治疗组选取百会、肾俞,电针20 min,1次/d,6 d为1个疗程,2个疗程间休息1 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫组化法分别检测各组血清和脑组织相关炎性因子的表达水平。结果与对照组和假手术组比较,模型组血清和海马区促炎因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β表达升高(P0.05,P0.01),抗炎因子IL-4、IL-10、TGF-β1表达下降(P0.05,P0.01);与模型组比较,治疗组各促炎因子表达下降(P0.05,P0.01),各抗炎因子表达明显升高(P0.05,P0.01)。结论益肾调督法电针刺激不仅可下调AD大鼠血清及海马区促炎因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β表达,还可上调AD大鼠血清及海马区抑炎因子IL-4、IL-10、TGF-β1表达,调节抗炎、促炎因子的失衡状态,改善AD持续性炎症反应。     

奥拉西坦治疗阿尔茨海默病的临床研究

目的 比较奥拉西坦与吡拉西坦治疗轻、中度阿尔茨海默病的疗效和安全性。方法将70例轻、中度阿尔茨海默病病人随机分入奥拉西坦治疗组（35例）与吡拉西坦对照组（35例）进行治疗,通过MMSE量表、Blessed-Roth量表对两组疗效进行评价。结果 奥拉西坦治疗组治疗前后的MMSE、Blessed-Roth评分值差异有统计学意义（P〈0.01）;吡拉西坦治疗组治疗前后评分值差异也有统计学意义（P〈0.05）。两组间治疗前后MMSE和Blessed-Roth评分的差值比较差异有统计学意义（P〈0.05）。奥拉西坦治疗组与吡拉西坦治疗组总有效率分别为63%、34%,其疗效差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论 奥拉西坦与吡拉西坦治疗轻、中度阿尔茨海默病病人均有效,但前者疗效优于后者。     

阿尔茨海默病的炎性反应和相关治疗研究进展

研究发现，阿尔茨海默病灶中存在大量的免疫活性细胞及免疫活性分子，如补体，细胞因子等，在疾病的进展过程中伴随着炎性反应和免疫功能变化，本文就近年来有关β淀粉样蛋白与炎性反应的关系与免疫相关的治疗作一文献综述。     

异丙酚对急性肺栓塞大鼠炎性因子表达的影响

目的 观察异丙酚对急性肺栓塞(PTE)大鼠炎性因子的影响.方法 大鼠分为假手术组、模型组、异丙酚低、中、高剂量(4,8,16 mg/kg)组.制备急性自体血栓PTE模型.进行血气分析;检测肺系数、湿/干重(W/D);放射免疫法检测血液中内皮素(ET)-1、血栓素B2( TXB2)含量;RT-PCR检测肺组织白介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA的表达;Western印迹方法检测IL-1、IL-6、TNF-α蛋白的表达.结果 异丙酚能显著升高PO2、PCO2水平,降低肺系数、湿/干重、ET-1、TXB2含量,降低IL-1、IL-6、TNF-αmRNA和蛋白表达(P＜0.05).结论 异丙酚能抑制炎性因子的表达,对PTE大鼠起保护作用.     

缬沙坦对高脂模型大鼠动脉粥样硬化及炎性因子的影响

目的 研究缬沙坦对高脂模型大鼠动脉粥样硬化及炎性因子水平的影响.方法 通过建立高脂血症动脉粥样硬化大鼠模型,动态、系统地监测血脂及高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6和IL-8的水平,同时采用Trizol法提取RNA,用RT-PCR法测量主动脉中hs-CRP mRNA、TNF-α mRNA和IL-6 mRNA的表达,并且观察粥样硬化动脉内膜形态学的改变.结果 缬沙坦药物治疗后,血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平较高脂模型组有所降低,但差异无统计学意义(P＞0.05).高脂模型组的hs-CRP、TNF-α、IL-6、IL-8均升高,且与正常对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05).应用缬沙坦治疗10 w后,hs-CRP和IL-6的水平均降低,与高脂模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);TNF-α和IL-8的水平均降低,但与高脂模型组比较差异无统计学意义(P＞0.05).应用缬沙坦治疗10 w后,hs-CRP mRNA,TNF-αmRNA和IL-6 mRNA表达均降低,与高脂模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05).缬沙坦药物干预组内膜病变较高脂模型比较有所减轻.结论 缬沙坦能够有效地降压的同时,能减少部分炎性因子释放的作用,发挥其抗动脉粥样硬化的作用.     

蛋白酪氨酸激酶抑制剂对炎性因子诱导滑膜细胞产生一氧化氮的影响

目的 研究炎性因子白细胞介素(IL)-1、肿瘤坏死因子(TNF)和细菌脂多糖(LPS)诱导滑膜细胞产生一氧化氮(N0)的作用以及与蛋白酪氨酸激酶(PTK)信号转导通路的关系。方法 体外培养兔关节滑膜细胞，IL-1、TNF和LPS单独或联合刺激滑膜细胞，采用Griess方法测定细胞培养液中N0的含量。PrK特异性抑制剂木黄酮、杀莠素A以及具有PrrK抑制活性的植物黄酮芹菜素用于考察PrrK信号转导通路在滑膜细胞产生N0中的作用。结果 ①LIS(1～100μg／ml)浓度依赖性地诱导滑膜细胞产生N0，而IL-1仅在1000U／ml才有显著诱导作用，TNF浓度达到1000U／ml仍无任何刺激作用：②IL-1显著增强LPS诱导滑膜细胞产生N0，TNF对LPS诱导作用则具有较弱的抑制作用；③木黄酮(6．25～．50．00μmol／L)浓度依赖性地抑制LPS单独或与IL-1协同诱导滑膜细胞产生N0，而芹菜素和杀莠素A仅有较弱的抑制作用。结论滑膜细胞是除软骨细胞外，NO局部产生的又一重要来源，炎性成分LPS是重要诱导因素之一；IL-1对LPS具有协同作用；滑膜细胞产生N0过程可能有PTK的激活，属于木黄酮敏感性PTK类型。     

活血化痰方对非酒精性脂肪肝大鼠炎性因子的影响

[目的]观察活血化痰方对非酒精性脂肪肝（NAFLD）大鼠炎性因子的影响。[方法]将30只大鼠随机分为正常对照组、模型组和活血化痰方组。检测各组大鼠血清中白细胞介素（IL）-6、IL-10及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。[结果]与正常对照组比较,模型组血清中IL-6、TNF-α水平增高,血清中IL-10含量降低;与模型组相比,活血化痰方组血清中IL-6、TNF-α水平显著降低,血清中IL-10含量显著升高。[结论]活血化痰方可能通过降低血清中IL-6、TNF-α水平,提高血清中IL-10含量,调节体内炎性因子的变化,从而使NAFLD渐愈。     

三七总皂苷分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2及神经生长相关蛋白表达的影响

目的 探讨三七总皂苷(tPNS)分期治疗对脑出血大鼠微管相关蛋白-2(MAP-2)及神经生长相关蛋白(GAP-43)表达的影响.方法 大鼠随机分为 5 组:正常对照组、假手术组、脑出血模型组、脑出血后 12 h治疗 A 组、脑出血后 72 h 治疗 B 组.治疗 A 组于脑出血后 12 h、治疗 B 组于脑出血后 72 h开始以三七总皂苷70 mg/(kg·d)腹腔注射,连用 4 d.其余各组皆同时注射等量生理盐水.大鼠于造模后 7 d、14 d、21 d 每个时间点分别处死,干湿重法测脑含水量,脑组织切片行MAP-2、GAP-43 免疫组化.结果 治疗组大鼠肢体功能较脑出血模型组好,且治疗A组神经功能评分在7 d、14 d、21 d优于治疗B组(P<0.05);治疗组可明显改善脑水肿,7 d时治疗A组脑含水量低于治疗B组(P<0.05).治疗组血肿周边MAP-2及GAP-43表达皆高于脑出血模型组(P<0.05);且治疗A组在7 d、14 d、21 d 3个时间点表达高于治疗B组(P<0.05).结论 tPNS可以减轻大鼠脑出血后的脑水肿并积极上调MAP-2和GAP-43表达;早期给予tPNS治疗脑出血大鼠较晚期运用可能对大鼠康复更有利.     

炎性因子对妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的 研究炎性因子白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)对人冠状动脉平滑肌细胞 (HCASMC)分泌妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)的影响.方法 一期:分别加入20μg/L的IL-1β(IL-1β组)、10μg/L的IL-6(IL-6组)和0μg/L的炎性因子(对照组),孵育2、4、8、24、36 h后,分别收集细胞上清液;二期:分别采用 IL-1β(0、5、20、40μg/L)和IL-6(0、5、10,50μg/L)刺激HCASMC,6 h后收集细胞和细胞上清液.采用ELISA法检测 细胞上清液内PAPP-A的表达量.结果 一期;IL-1β组PAPP-A表达量在2 h时开始增加,8、24、36 h其浓度显著高于对照组,并随时间的延长而不断增加;IL-6组PAPP-A的表达量在2 h开始增加,4、8、24、36 h其浓度显著高 于对照组,并随时间的延长而不断增加.二期:随着IL-1β和IL-6剂量的增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中IL-1β组20μg/L和40μg/L均显著高于0μg/L时的浓度;IL-6组10μg/L和50μg/L均显著高于0μg/L时 的浓度.结论 IL-1β和IL-6可使HCASMC分泌PAPP-A增加,并呈时间和剂量依赖性.     

阿尔茨海默病发病机制中炎性反应的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是一种常见于老年人的中枢神经系统退行性变疾病,以进行性认知功能障碍、精神行为异常及生活能力减退等为主要表现,是痴呆病中最常见的类型.由β-淀粉样肽(β-Amyloid peptide,Aβ)沉积形成的老年斑(Senile plaques,SPs)、高度磷酸化Tau蛋白聚集形成的神经元纤维缠结(Neurofibrillary tangles,NFTs)及神经元丢失构成AD脑组织中典型的神经病理形态改变[1].     

阿尔茨海默病患者尿液中相关神经丝蛋白含量的诊断价值

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者尿液中Alzheimer相关的神经丝蛋白(AD7c-NTP)的含量在AD诊断中的价值. 方法 收集就诊于我院门诊AD患者及健康体检者的尿液标本450例,其中AD组共257例,轻度131例、中重度126例,健康对照组193例,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定尿样标本中AD7c-NTP水平. 结果 轻度、中重度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量为(1.94±0.74)μg/L和(3.92±0.86)μg/L,健康对照组为(0.65±0.80)μg/L,轻度和中重度AD组比较,差异均有统计学意义(t=1.727,P＜0.001),三组比较差异有统计学意义(F=-13.520,P＜0.001).轻度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量与MMSE呈负相关(r=-0.23,P=0.006),而中重度AD组尿样标本中AD7c-NTP含量与MMSE无明显的相关性(r=0.59,P=0.113).根据ROC曲线,确定1.50 μg/L为尿AD7c-NTP诊断AD的切点,对应的灵敏度和特异度分别为90.6％和91.8％,ROC曲线下面积为0.94,95％可信区间为0.91～0.97. 结论 尿AD7c-NTP含量检测可作为AD辅助诊断的方法之一.     

调脂药物对高脂模型大鼠炎性因子的影响

目的 探讨调脂药物瑞舒伐他汀和非诺贝特对高脂模型大鼠治疗前后炎性因子水平及动脉粥样硬化(AS)的影响.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为4组,正常对照组10只、高脂模型对照组10只、瑞舒伐他汀药物干预组10只和非诺贝特药物干预组10只,正常对照组给予正常饮食,高脂模型对照组和药物干预组给予高脂饮食,8 w末高脂模型建立,第9周开始高脂模型对照组和药物干预组分别给予生理盐水、瑞舒伐他汀、非诺贝特灌胃,第18周末处死大鼠,检测血脂及高敏-C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)的水平,并观察主动脉血管内皮病理形态学的变化.结果第8周成功建立高脂模型,第18周与高脂模型对照组比较,瑞舒伐他汀干预组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、hs-CRP、TNF-α、IL-8的水平明显降低(P＜0.05),非诺贝特组干预后可中度降低甘油三酯(TG),明显降低hs-CRP的水平(P＜0.05). 病理形态学变化:瑞舒伐他汀药物干预组与高脂模型对照组比较内膜增生不明显,泡沫细胞减少.结论瑞舒伐他汀对AS有抑制作用,在降低血脂的同时,可能与抑制炎症有关.非诺贝特组可降低TG,有轻度抗炎作用.     

去松果体对β-淀粉样蛋白神经毒性的影响

目的 探讨松果体功能减退致褪黑素（ＭＴ）分泌减少对β－淀粉样蛋白（Ａβ）神经毒性的影响及其初步机制。方法 将ＳＤ６周大鼠随机分为２组,实验组摘除松果体,对照组给假手术,２组均在术后４０ｄ给予Ａβ１－４０ １０μｇ右侧海马注射,７ｄ标本用Ｎｉｓｓｌ、ＨＥ、改进甲醇刚果红染色,ＴＵＮＥＬ原位标记方法检测海马神经元病理变化。结果 以图像分析仪测量Ｎｉｓｓｌ染色神经细胞带丢失情况,发现实验组丢失长度「（６     

红景天对阿尔茨海默病模型大鼠行为学及海马区突触相关蛋白的影响

目的探讨红景天对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠行为学能力及海马组织突触后致密蛋白(PSD-95)、shank-1蛋白表达的影响及其治疗AD的可能作用机制。方法采取腹腔注射D-半乳糖+灌胃AlCl3+一次性注射东莨菪碱法制备AD大鼠模型,用红景天采取灌胃方式对实验大鼠进行干预,并以喜得镇作为对照,观察其干预效果。用Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,采用免疫组化法检测大鼠海马区PSD-95、shank-1蛋白水平的变化。结果模型组与空白组相比,学习记忆能力明显减退(P<0.01),PSD-95、shank-1蛋白水平下降(P<0.01);中药组与模型组相比,学习记忆能力显著改善(P<0.01),PSD-95、shank-1蛋白水平提高(P<0.01);中药组和西药组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论红景天明显增高AD大鼠海马组织中PSD-95、shank-1蛋白水平,从而影响突触可塑性,这可能是其改善AD大鼠学习记忆功能的作用机制之一。     

辛伐他汀对急性心肌梗死患者早期血脂和炎性因子的影响

血脂异常是冠心病的危险因素已被广泛证实,积极进行调脂治疗是防治冠心病重要且有效的措施,但仍无法阻止一部分患者的急性冠脉事件发生,表现为急性心肌梗死(AMI)或心绞痛频发的临床征象.     

手术创伤对成年鼠和老年鼠海马区炎性因子表达的影响

目的 探讨手术创伤对老年鼠和成年鼠肝部分切除术后海马区炎性因子表达的影响.方法成年和老年SD大鼠随机分为对照组、麻醉组、手术组.对照组SD大鼠不做特殊处理.麻醉组实验动物单纯接受1.5％ ～ 2％异氟醚麻醉,行气管插管和机械通气.手术组SD大鼠行肝部分切除术.检测术后1、3、7d海马区白介素(IL)-1β,IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA和蛋白表达变化.结果 成年鼠海马区IL-1β和IL-6 mRNA仅在手术后第1天(P＜0.001)明显增高,但老年鼠海马区IL-1β和IL-6 mRNA增多持续到手术后3 d(P ＜0.001).IL-1β和IL-6蛋白仅老年鼠在术后第1天表达增加(P＜0.01,P＜0.05),第3天无统计学差异.TNF-α mRNA仅在老年鼠手术后1d明显增加(P ＜0.001),在成年鼠没有明显改变(P=0.095).结论 与成年鼠相比,老年鼠海马区炎性因子表达更强烈,持续时间更长.     

人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病大鼠脑片模型tau蛋白磷酸化的影响

目的 观察人参皂苷Rg1对阿尔茨海默病（AD）大鼠脑片模型中磷酸化tau蛋白（P-tau）及钙调神经磷酸酶（CaN）表达的影响,探讨人参皂苷Rg1是否通过上调CaN表达从而抑制AD模型大鼠脑片tau蛋白磷酸化。方法 制备5周龄雄性SD大鼠脑片（含皮质和海马）,随机分为4组：对照组、模型组和人参皂苷Rg1组,人参皂苷Rg1＋他克莫司（FK506）（一种CaN抑制剂）组,每组10张脑片。各组脑片首先置于人工脑脊液中孵育1h,之后人参皂苷Rg1组和人参皂苷Rg1＋FK506组分别加入人参皂苷Rg1作用2h,然后除对照组外的各组分别加入冈田酸作用3h。干预结束后脑片经多聚甲醛固定后做冰冻切片,采用免疫组织化学染色、图像分析技术等方法检测各组大鼠脑片P-tau、CaN的表达水平。结果 与对照组比较,模型组各脑区P-tau表达水平增加（P＜0.05）,CaN表达水平减少（P＜0.05）;与模型组比较,人参皂苷Rg1组各脑区P-tau表达水平减少（P＜0.05）,CaN表达水平增加（P＜0.05）;与人参皂苷Rg1组比较,人参皂苷Rg1＋FK506组P-tau表达水平增加（P＜0.05）,CaN表达水平减少（P＜0.05）。结论 人参皂苷Rg1可能通过上调CaN蛋白表达途径抑制AD大鼠脑片模型tau蛋白磷酸化,从而发挥抗痴呆作用。     

华中五味子酮对阿尔茨海默病样大鼠脑组织蛋白热稳定性的影响

目的 观察华中五味子酮对β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的阿尔茨海默病(AD)模型鼠脑组织蛋白稳定性的影响. 方法 36只SD大鼠随机分为3组:空白对照组、AD模型组和华中五味子酮干预组,每组12只.采用侧脑室内注射Aβ溶液的方法 建立AD大鼠模型,予五味子酮油灌胃干预.Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力;提取大鼠脑组织蛋白,检测各组蛋白在固定温度下,随时间改变的340 nm处的吸光度(OD)值. 结果 五味子酮干预组与AD模型组比较,从第2天开始其逃避潜伏期缩短(P＜0.05).在340 nm处,随加热时间延长(55 ℃,恒温),五味子酮干预组OD值增高速度快于对照组(P＜0.05). 结论 五味子酮可改善Aβ诱导的AD模型大鼠学习记忆能力下降,对大鼠脑组织蛋白热稳定性具有保护作用.