食品中沙门菌检测方法进展

沙门菌（Salmonella）是一类广泛分布于自然界，对人类和动物具有极大危害的革兰阴性肠道致病菌。目前全世界已分离出2000多个血清型，我国已发现216个。蛋、家禽和肉类产品是沙门菌病的主要传播媒介，感染主要取决于沙门菌的血清型和食用者的身体状况，受威胁最大的是小孩、老年人及免疫缺陷个体。根据国际惯例，要求对易受沙门菌污染的食品进行分类管理，以使大多数食物不含沙门菌，从而有效预防控制沙门菌病。     

食品中沙门菌快速检测方法的探索

目的：建立食品中沙门菌的快速检测方法。方法：以传统方法（即国标法：GB4789．4—2003）和新建立的方法（以下简称改良法）对600件各类食品进行沙门菌的检测，比较两种检测方法的时效性、假阳性率、假阴性率和敏感度。结果：使用改良法检测食品中的沙门菌比传统方法快至少47h。改良法达到了传统方法的敏感度。改良法使用的生化鉴定试剂比传统法少得多。检测食品中的沙门菌，改良法的阳性率为8．8％，高于传统法的7．3％。结论：新建立的快速方法能缩短检测时间，节省培养基和生化试剂，尤其是节省了大量的工作量，使用该新方法有利于环境保护，能大大提高工作效率。     

食品中沙门菌的检测

目的：检测超市奶类和肉类制品中沙门菌的污染情况,初步评价检测食品中沙门菌的检测方法。方法：样品经增菌后,用科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法对超市的奶类和肉类制品中的沙门菌进行平行检测,并对其灵敏性和特异性、符合率进行比较分析。结果：检测320份奶类制品和肉制品,科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法阳性样品数分别为23份、26份、20份,其阳性率分别为7.2%、8.1%、6.3%。科玛嘉显色培养基培养的敏感性和特异性分别为100%、99%,与国标法的符合率达99.1%。ELISA法的敏感性和特异性分别为100%、98%,与国标法符合率98.1%。ELISA法与科玛嘉显色培养基培养的符合率为99.1%。157份奶类制品,科玛嘉显色培养基培养、ELISA法、国标法检测阳性样品数分别为6、6及5份,阳性率分别为3.8%、3.8%和3.2%,有2份检测结果不一致。163份肉类制品,阳性样品分别为17、20、15份,阳性率分别为10.4%、12.3%和9.2%,有5份肉食品检测结果不一致。结论：科玛嘉显色培养基培养、ELISA法和国标法对超市的奶类和肉类制品中的沙门菌进行平行检测,符合率高。利用科玛嘉显色培养基培养、ELISA法,可以快速、方便地对食品中沙门菌的污染进行批量初筛,科玛嘉显色培养基鉴别培养特异性好,更适合食品沙门菌的分离与初筛检测。     

食品中沙门菌整合子与耐药性关系研究

目的：研究食品中沙门菌的整合子携带情况及整合子与耐药性之间的关系。方法：PCR检测细菌总DNA中1、2、3类整合酶基因，确定细菌携带整合子的情况。整合子阳性菌档进一步检测整合子的可变区，分析插入基因盒的序列。结果：69株大肠菌中25株携带1类整合子，集中分布在对4种以上抗生素耐药的菌株中。插入基因盒主要是dfr(甲氧苄氨嘧啶)和aadA(氨基糖甙类)基因盒，各种基因盒组合中最常见的是difrl—aadA1。结论：细菌的多重耐药性与整合子携带高度一致，但是单个菌株的耐药谱与整合子的耐药基因盒缺乏对应关系。     

沙门菌培养基的研制与分析

目的：选择抑制大肠埃希菌、枸橼酸杆菌生长的物质,制成培养基供沙门菌检验专用,提高沙门菌的分离效率。方法：采用大肠埃希菌噬菌体、枸橼酸杆菌噬菌体和结晶紫作为抑菌剂,研制出一种新型的沙门菌固体琼脂培养基。结果：60株各型沙门菌试验菌株均可在新型培养基上生长。与SS琼脂培养基配对,对537份健康人粪便检验,沙门菌的检出率前者为2．42％,后者为0．93％（X^2=6．125,P〈0．025）,且保存一周后的培养基不影响沙门菌的检出率;新型培养基对已知大肠埃希菌和构橡酸杆菌的抑制率分别为94．74％和46．43％;在琼脂平板上就能够区别迟缓发酵乳糖的菌株,沙门菌的菌落特征明显,易于辨认。结论：沙门菌专用培养基明显优于SS琼脂,对提高沙门菌检出率起到一定的作用。     

食品中沙门菌分布特征及耐药性研究

目的 了解佳木斯市食品中沙门菌污染状况及耐药性，为控制食源性疾病发生提供有效依据。方法 对各类食品样本进行分离鉴定，血清学分型确定沙门菌血清型，采用微量肉汤稀释法对分离的沙门菌进行药敏试验，PCR检测耐药基因。结果 在2 711份食品中分离出沙门菌70株，检出率为2.58%;血清型主要为肠炎沙门菌和阿贡纳沙门菌；59株沙门菌具有耐药性，耐药率为84.29%,包括15株单独耐药和44株多重耐药，耐药基因gyrA、tetA和sulⅠ携带率分别为59.32%、33.90%和10.17%,与耐药表型的符合率分别为74.47%、62.50%和40.00%。结论 佳木斯市生畜肉和生禽肉受沙门菌污染较严重，沙门菌存在多重耐药现象，耐药基因gyrA和tetA与耐药表型对应性较高，耐药基因可能是影响耐药表型的重要因素。     

河北省食品中沙门菌污染状况调查分析

目的：掌握河北省食品中沙门菌的污染情况以及危险食品的种类。方法：按照国家食源性疾病监测网《2005年工作手册》规定的标准操作程序进行检验。结果：6个监测点共检测3类样品386份，检出81株沙门菌，检出率为21.0％，生肉的检出率为23．9％，水产品检出率为21．1％，婴儿配方奶粉未检出。结论：河北省食品中沙门菌的污染相当严重，生肉、水产品阳性率非常高，是重要的危险食品。     

食品中沙门菌整合子与耐药性关系

目的 研究食品中沙门菌的整合子携带情况及整合子与耐药性之间的关系。方法PCR检测细菌总DNA中1，2，3类整合酶基因，确定细菌携带整合子的情况。整合子阳性菌株进一步检测整合子的可变区，分析插入基因盒的序列。结果69株沙门菌中25株携带1类整合子。集中分布在对4种以上抗生索耐药的菌株中。插入基因盒主要是dfr（甲氧氨嘧啶）和aadA（氨基糖甙类）基因盒，各种基因盒组合中最常见的是dfrl-aadA1。结论细菌的多重耐药性与整合子携带高度一致。     

武汉市2006年食品中沙门菌污染状况监测

目的:了解武汉市2006年食品中沙门菌的污染状况,为国家食品安全监测网提供数据。方法:随机从武汉超市和集贸市场采取生畜肉、生禽肉、熟肉制品、水产品、生食蔬菜、蔬菜沙拉样品共172份,经过两步增菌后,用HE和科玛嘉沙门菌选择性平板分离,可疑菌株再进行API生化条和血清学鉴定。结果:从31份样品中分离出沙门菌,检出率18.02%,其中以生牲畜肉最高(37.14%),熟肉制品次之(21.21%)。结论:武汉市2006年食品沙门菌污染严重,应加强食品安全监督。     

科玛嘉显色培养基和XLD、SS、HE分离食品中沙门菌效果比较

目的比较沙门菌科玛嘉显色培养基（简称CAS,下同）、XLD、SS和HE培养基在分离食品中沙门菌的效果。方法使用73株沙门菌分别接种CAS、XLD、SS和HE培养基,观察生长和显色情况。同时使用上述4种培养基对153份食品进行沙门菌的分离鉴定,比较其分离效果。结果所有接种的沙门菌在CAS上均生长,并具有典型的菌落特征。从153份食品标本中共分离出26株沙门菌。CAS分离沙门菌的敏感性为84．62％,特异性为94．49％,与SS和HE比较有非常显著性差异（P〈0、005）。在CAS上生长的非沙门菌可疑菌落主要有气单胞菌属和变形杆菌。结论CAS分离食品中沙门菌具有高敏感性和特异性,是理想的沙门菌选择性培养基。推荐使用CAS和XLD同时作为食品中沙门菌的分离培养基。     

食品中沙门菌实时荧光PCR快速检测方法的研究

目的利用荧光定量PCR技术，建立食品中沙门菌污染的快速敏感特异的检测方法。方法以沙门菌的fimY基因作为靶序列，设计一对引物和探针，以沙门菌菌株提取核酸DNA作为模板，优化引物和探针的浓度比和Mg^2＋浓度，以沙门菌和10种相关细菌考核检测体系的灵敏性、稳定性和特异性，并初步应用于样品的检测。结果本研究建立的反应体系在引物和探针的浓度为0．8μmol／L，1．0μmol／L，Mg^2＋浓度为3mmol／L时，具有良好的特异性和敏感性。在10株相关菌株的检测中，除沙门菌出现很好的阳性外，其余菌株均为阴性。在纯菌条件下，定量检测低限33cfu／ml。稳定性分析表明：同一样品重复检测3次Ct值的变异系数均小于5％。检测样品结果显示实时PCR方法较传统方法敏感、快捷、简便。结论该方法特异性强，稳定性高，操作简便快捷，适应食品微生物检验发展需要，具有较大的推广及应用价值。     

2002～2005年广西食品中沙门氏菌的监测与分析

目的了解广西食品中沙门氏菌的污染状况,初步确定易受污染的食品,为防范由沙门氏菌引起的食物中毒和食源性疾病监测提供科学依据。方法在广西南宁等6个城市建立食品污染物监测点,定期随机采集6类农贸市场的食品,检验方法按照中国疾病预防控制中心营养与食品安全所统一的沙门氏菌检验方法进行。结果2002~2005年共监测6类食品1872份,检出沙门氏菌128株,检出率为6.84%,分属6个群、19个血清型。结论在广西食品中不同程度受到沙门氏菌的污染,以生畜禽肉污染严重。应加强畜、禽类屠宰、运输、加工过程的卫生管理和监测,减少食源性疾病的发生。     

一起沙门菌食物中毒的调查分析

目的查明一起群体性食物中毒的原因及危害因素,提出预防建议。方法采用病例对照研究方法展开此次疫情调查,比较病例与对照之间不同危险因素的暴露比例,并采集留样食品、病人的排泄物进行检测。结果经现场卫生调查、流行病学调查资料、临床表现和实验室检测结果,证实这是一起由于生熟不分、加热不充分造成麻辣猪心和蚝油瓜条被沙门菌污染而引起的细菌性食物中毒,在2份留样食品(黄瓜伴麻辣猪心和蚝油瓜条)和2份病人的排泄物中均检出沙门菌。结论加强动物性食品的卫生管理是预防沙门菌食物中毒的关键环节。     

食用沙门菌污染凉拌菜引起的食物中毒调查与分析

目的及时查明一起食物中毒的原因,为预防控制类似的突发公共卫生事件提供经验。方法采用流行病学调查方法,现场采集可疑食物和污染样品,依据相关检测方法进行检测。结果调查发现该次群体发病特点为起病急骤,潜伏期短,发病曲线突然上升后又突然下降,无拖尾现象;临床症状相似,28名患者均出现腹痛、腹泻,53.6%病人出现恶心、呕吐,82.1%患者出现发热,罹患率达32.2%;冷荤间卫生差,熟食具大肠菌群污染严重,并在刀、板、熟食盆中检出沙门菌;发病者均食用过同一种食物,凉拌菜中检出沙门菌;所有患者经使用抗生素等对症治疗后均康复,无并发症和死亡。结论通过流行病学调查、实验室检测和临床诊治,确定该次群体发病是一起由于就餐者食用了沙门菌污染的凉拌菜而引起的沙门菌食物中毒。     

安顺市区沙门氏菌环境污染调查

在贵州省安顺市１９８５年水型伤寒爆发流行后，为调查该市环境中沙门氏菌污染情况，我站于１９８６～１９８８年对市区所属医院和贯城河污水及部分食物的沙门氏菌进行了监测，共采集污水及食品６１９份，沙门氏菌阳性率为４１．８４％，分属Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ１五个群１２个血清型，伤寒沙门氏菌经Ｖｉ噬菌体分型为Ｍ１型。纸片药敏试验为多重性耐药菌株。阐明了沙门氏菌流行的部分传播媒介途径。     

一起莫斯科沙门菌引起食物中毒的病原学毒力检测和分子分型鉴定

目的查明新邵县一起食物中毒病因,对分离的病原菌进行表型检验和毒力基因的鉴定、耐药性检测,利用分子分型技术探讨其多态性,为今后预防和控制类似事件提供借鉴。方法依照WS271-2007《感染性腹泻诊断标准》和文献报道的方法对检出的沙门菌进行生化试验、血清分型、耐药性检测;并用PCR方法进行毒力基因检测,运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术对分离的菌株进行同源性分析。结果 2份病人血培养为阴性,3份病人肛拭检出生物学性状和药敏试验一致、均带有侵袭性invA基因的莫斯科沙门菌,PFGE图谱显示为同一克隆。结论结合流行病学资料、临床表现、病原菌分离鉴定、毒力基因检测和分子分型分析,确定本次食物中毒是由莫斯科沙门菌污染食物引起。     

一起布利丹沙门菌食物中毒的调查

目的 查明导致本次食物中毒事件的食物种类、致病因子及传染源.方法 在临床诊断病例中,随机抽取50例作为病例组,随机选择参加宴席且无任何临床症状的50人作为对照组,开展病例对照研究,并分析导致本次事件的危险食物.结果 本次食物中毒的罹患率为43.4%(132/304),86.0%(43/50)的病例和34.0%(17/50)的对照食用过猪头肉凉拌粉条(OR=12.0,95%CI:4.4～32),进一步对食用过猪头肉凉拌粉条者分析其剂量反应关系,趋势x2=21.06,P=0.00.94.0%(47/50)的病例和68.0%(34/50)的对照食用过蘑菇炖鸡(OR=7.4,95%CI:2.0～27),不存在剂量反应关系.病例组和对照组食用其余食物的差异无统计学意义(P>0.05).对猪头肉凉拌粉条和蘑菇炖鸡与发病之间的关系进行叉生分析,以两种食物均未食用者作为参照,结果 表明,单食用两种食物之一者发病危险度的点值估计均升高,但差异均无统计学意义;而两种食物均食用者发病风险大大增加(OR=38,95%CI:4.5～320),差异有统计学意义.19份标本检测肠道致病菌中3份病例肛拭子和1份猪头肉凉拌粉条检出布利丹沙门菌.结论 该事件是因参加宴席的人食用被布利丹沙门菌污染的猪头肉凉拌粉条或蘑菇炖鸡引起的细菌性食物中毒,其原因可能为食品加工过程不规范所致.

Abstract：

objective To identify the bacterial pathogen in food and the source of infection that might be responsible for a food poisoning outbreak.Methods All the probable cases that had attended the banquet in a villige of Sichuan province who had developed fever(≥37.5℃),diarrhea (≥3 times/dav)and vomiting since August 1,2009,were identified.A case-control study was conducted to identify the foods that might be responsible for this food poisoning event.50 cases were randomly selected from the probable cases and 50 controls were randomly selected from those without the symptoms.Results The attack rate of this food poisoning event was 43.4%(132/304).86.0%(43/50)of the cases and 34.0%(17/50)of the controls had eaten pork-mixed-vermicelli(OR=12.0,95%CI:4.4-32).Data from further tests showed that dose-effect relation existing between eating pork mixing vermicelli behavior and the incidence rates(Chi-square trend:x2=21.06,P=0.00)of the disease.94.0%(47/50)of the cases and 68.0%(34/50)of the controls had eaten mushroom braising chicken(OR=7.4.95%CI:2.0-27).Data from the crossover analysis showed that there appeared an effect modification between behaviors of eating pork-mixed-vermicelli and eating mushroom braising chicken.Three cases were detected carrying Salmonella blegdam from their anus swabs and the same bacteria type was also detected in the pork-mixed-vermicelli. Conclusion This outbreak of salmonellosis was caused by Salmonella blegdam contaminated pork-mixed-vermicelli or mushroom braising chicken during food processing.     

应用免疫层析法检测食品中的沙门菌

〔目的〕建立一种简便快速的胶体金免疫层析法 (GICA)用于检测食品中的沙门菌。〔方法〕抗沙门菌多抗用抗原吸收法封闭与其他肠道杆菌的交叉反应 ,标记胶体金溶胶制成探针 ,采用多膜复合的方法制备免疫层析条。〔结果〕该层析条可检出人工染菌的畜禽肉、牛奶和米饭等食品中的沙门菌 ,灵敏度为 2 .1× 10 6cfu/ml,用常见溶液和自来水处理染菌食品样品 ,检测结果无异。〔结论〕该方法简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,适合现场检测之用。