益肝降脂方预处理对酒精性脂肪肝大鼠氧化应激的影响

[目的] 观察不同浓度益肝降脂方(YGJZF)在不同时段干预酒精性脂肪肝(AFLD)大鼠的氧化应激效应,分析探讨YGJZF对AFLD大鼠的抗氧化作用及其可能机制.[方法] 97只SD大鼠随机分为模型组22只、中药YGJZF组75只,据干预时段和用药浓度不同,中药组分为中药3 w-Ⅰ及Ⅱ组、中药6 w-Ⅰ及Ⅱ组、中药9 w-Ⅰ及Ⅱ组共6组.采用梯度乙醇灌胃加高脂饲喂法造模.中药各组自第3、6、9周起予等效剂量[13.95g/(kg·ｄ)]和高剂量[27.9 g/(kg·d)]灌胃,模型组均予生理盐水15 mL/kg灌胃,至12周末.于第6、9、12周末观察大鼠血清8-异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)含量,肝匀浆丙二醛(MDA)含量、黄嘌呤氧化酮(XOD)活性及病理变化.[结果] 与各相应时段模型组比较:第6周末,中药3 w-Ⅱ组大鼠血清8-iso-PGF2α含量及肝匀浆MDA含量、XOD活性明显降低(P<0.05);第9周末的中药6 w组及第12周末的中药3 w、6 w、9 w各组大鼠血清8-iso-PGF2α含量、肝匀浆MDA含量、XOD活性均明显降低(P<0.05),且均以II组更明显;第12周末,中药组各指标降低顺序为中药3 w组 > 中药6 w组 > 中药9 w组;中药3 w-Ⅰ组及9 w-Ⅰ组8-iso-PGF2α、MDA含量均较中药6 w-Ⅰ组有统计学意义(P<0.05),中药3 w-Ⅱ、9 w-Ⅱ组8-iso-PGF2α含量均较中药6 w-Ⅱ组差异有统计学意义(P<0.05),中药Ⅱ组各指标均低于中药Ⅰ组,其中中药3 w组8-iso-PGF2α和MDA、XOD,中药6 w组8-iso-PGF2α和MDA,中药9 w组XOD均存在统计学差异(P<0.05);第6、9、12周末,中药各组HE病理示肝脏脂肪变均较模型组不同程度减轻,且以Ⅱ组更明显;第12周末,中药3 w组脂肪变轻于中药6 w组,中药6 w组稍轻于中药9 w组.[结论] 中药YGJZF不同时段干预均能降低乙醇诱导SD脂肪肝大鼠氧化应激损伤,且越早期干预抗损伤效应越突出,不同程度抑制了酒精肝大鼠的病理损伤,并呈现一定时间和浓度依赖性,为临床AFLD防护的用药与时机选择提供了实验依据.     

电离辐射诱导新生大鼠大脑皮质诱导型一氧化氮合酶的表达

目的：研究诱导型一氧化氮合酶在电离辐射导致的神经细胞凋亡中的作用。方法;以单剂量２．０Ｇｙγ射线照射出生后０ｄ的Ｗｉｓｔａｒ大鼠,用ＡＢＣ法检测照射后第０．５,１,２,４,６,８,１２,２４,４８小时大脑皮质内ｉＮＯＳ的表达。结果;照射组各时间点均有不同程度的ｉＮＯＳ表达,第６小时达峰值。各对照组未见ｉＮＯＳ表达。     

降脂益肝汤治疗非酒精性脂肪肝52例

目的:观察自拟降脂益肝汤治疗非酒精性脂肪肝(NAFLD)的临床疗效。方法:将96例NAFLD患者随机分为两组。治疗组52例,给予中药降脂益肝汤,1剂/d,水煎成300ml,早晚分2次口服。2个月为1个疗程。对照组44例,患者口服凯西莱片,200mg/次,3次/d;熊去氧胆酸,200mg/次,3次/d。疗程同治疗组。结果:治疗组总有效率为88.5%,对照组总有效率为65.9%,两组总有效率比较差异有显著性(P<0.01)。结论:早期使用降脂益肝汤对NAFLD具有良好的治疗作用,安全有效。     

辛伐他汀预处理对脓毒症大鼠心肌细胞诱导型一氧化氮合酶表达的影响及意义

目的严重脓毒症和脓毒症休克患者经常合并心肌功能障碍,而NO的产生可能是其重要原因。文中通过观察诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)在脓毒症大鼠心肌细胞的表达,探讨辛伐他汀预处理对其表达的影响及其心肌保护作用。方法雌性Wistar大鼠45只随机分为3组(n=15):正常组(N组)、盲肠结扎穿孔组(CLP组)和辛伐他汀组(S组),辛伐他汀组喂养辛伐他汀20 mg/kg,1次/d,共2周。2周后辛伐他汀组与盲肠结扎穿孔组大鼠行盲肠结扎穿孔术。术后48 h取各组大鼠心肌组织制成石蜡切片,采用HE染色的方法观察组织病理学改变,采用免疫组化染色的方法观察心肌细胞iNOS的蛋白表达。结果 HE染色显示盲肠结扎穿孔组大鼠心肌纤维水肿、疏松、间质充血水肿,而辛伐他汀组心肌的组织病理学改变较盲肠结扎穿孔组轻。免疫组化染色显示盲肠结扎穿孔组大鼠心肌细胞iNOS蛋白表达于术后48h较正常组明显增加(P<0.05),辛伐他汀组大鼠心肌细胞iNOS蛋白表达较盲肠结扎穿孔组明显减弱(P<0.05),与正常组相比差异仍有统计学意义(P<0.05)。结论辛伐他汀可减弱脓毒症大鼠心肌细胞iNOS的蛋白表达。     

诱导型一氧化氮合酶在哮喘大鼠肺组织的表达

目的　观察哮喘大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)活性的表达 ,探讨一氧化氮在哮喘大鼠气道炎症中的作用。方法　用卵白蛋白作为致敏原制备哮喘大鼠模型 ,用 SP免疫组化染色方法检测肺组织 i NOS的表达并观察 i NOS在气道组织分布的改变。结果　哮喘大鼠肺组织 i NOS的表达阳性率 (90 % )明显高于正常对照组 (2 0 % ) (P<0 .0 0 1)。哮喘大鼠气道组织 i NOS表达阳性细胞主要位于气道上皮细胞、气道平滑肌细胞、血管内皮和平滑肌细胞、浸润的中性粒细胞和巨噬细胞 ,而淋巴细胞表达不明显。用甲基强的松龙处理后哮喘大鼠肺组织i NOS表达阳性率 (30 % )明显降低。结论　以上结果提示一氧化氮在哮喘气道炎症中起重要作用 ,用甲基强的松龙治疗哮喘可以使哮喘大鼠肺组织中 i NOS表达阳性率降低 ,提示哮喘时产生过多的一氧化氮可能有加重气道炎症的作用     

益肝降脂方治疗脂肪肝(NAFLD)临床观察133例

目的:纯中药益肝降脂方治疗脂肪肝(NAFLD)临床观察.方法:运用自拟益肝降脂方治疗脂肪肝(NAFLD)临床观察133例.结果:治愈76例,好转52例,无效5例,总有效率96.2%.结论:益肝降脂方能显著提高NAFLD的治疗效果.     

诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体的构建

目的 构建含有人诱导型一氧化氮合酶基因真核表达载体pcDNA3-iNOS。方法 采用分子生物学技术，以Hind Ⅲ和XbI I双酶切pSPORT-iNOS，电泳回收3．96kb编码人iNOS cDNA序列．克隆入真核表达栽体pcDNA3的Hind Ⅲ和XbI I位点。结果 重组真核表达载体pcDNA3-iNOS经酶切鉴定证明iNOS基因正向插入真核表达载体中，用人iNOS基因特异性引物，PCR分析重组质粒和进行碱基序列的测定均证明重组质粒中含有人iNOS基因序列。结论 构建的真核表达栽体携有人iNOS cDNA序列，并且含有巨细胞病毒强启动子、ploy(A)加接信号和neo标志基因，具有转染多种哺乳类细胞通用性，可用于iNOS基因的真核表达及调控的研究。     

人参皂苷对内毒素休克大鼠诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：制作大鼠动物模型，了解人参皂苷对内毒素休克大鼠诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。方法：SD大鼠60只，分为对照组、脂多糖组（LPS组）和人参皂苷组，观察脂多糖组和人参皂苷组大鼠血清及肾组织iNOS的变化。结果：与对照组比较，LPS组大鼠腹腔注射LPS后，血iNOS、肾组织iNOS显著增高；人参皂苷组与对照组比较，血iNOS、肾组织iNOS显著增高，但与LPS组比较，血、肾组织iNOS增高较少。结论：人参皂苷对内毒素休克大鼠具有保护作用，至少部分是通过影响诱导型一氧化氮合酶来实现的。     

依那普利对自发性高血压大鼠血压、一氧化氮及诱导型一氧化氮合酶的影响

目的 :观察依那普利对自发性高血压大鼠 (SHR)血压、血清一氧化氮 (NO)及组织诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)的影响。方法 :SHR2 2只 ,随机分为生理盐水组、依那普利正常剂量组及其低剂量组 ,每天灌胃 1次 ,连续 1 5 d,实验前后测定 3组的血压 ,末次给药后摘眼球取血以及取动物脏器 ,分别测定血清 NO的含量和 i NOS的活性。结果 :灌胃 1 5 d后 ,依那普利正常剂量组的血压明显降低 (P <0 .0 1 ) ,其 NO含量为 (80 .3± 5 .5 ) μmol/L,与生理盐水组 [(1 1 0 .7± 6 .2 ) μmol/L]相比 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ;依那普利低剂量组血压亦降低 ,NO含量为 (90 .1± 2 .2 ) μmol/L,与生理盐水组相比 ,差异亦有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ,依那普利正常剂量组组织中 i NOS活性 (1 .0 2± 0 .1 2 )降低 ,低剂量组为 1 .83± 0 .32 ,两组与生理盐水组 (2 .97± 0 .88)相比 ,差异均有统计学意义 (均 P <0 .0 1 )。结论 :依那普利在有效降低血压的同时 ,可提高血清 NO的含量 ,并且可使组织中 i NOS的活性降低     

降脂益肝丸联合还原性谷胱甘肽治疗非酒精性脂肪肝38例疗效观察

目的：探讨降脂益肝丸联合还原性谷胱甘肽治疗非酒精性脂肪肝的临床疗效。方法：将74例非酒精性脂肪肝患者随机分为两组,治疗组38例采用还原性谷胱甘肽注射液和降脂益肝丸,对照组口服脂必要。治疗三个月后观察患者症状和体征的改善,化验肝功能,进行B超检测。结果：治疗组总有效率为94％,而对照组为41％,两组比较差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：降脂益肝丸联合还原性谷胱甘肽治疗非酒精性脂肪肝的疗效明显优于脂必妥。     

原位杂交法检测卵巢上皮癌中诱导型一氧化氮合酶mRNA

目的 :研究卵巢上皮性癌诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)的转录水平。方法 :原位杂交法检测 71例卵巢上皮性癌 ,13例卵巢良性肿瘤及 11例正常卵巢组织中iNOSmRNA表达水平。结果 :卵巢上皮性癌中iNOSmRNA高于正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤 ,P<0 .0 5。但卵巢上皮性癌Ⅲ ,Ⅳ期与Ⅰ ,Ⅱ期比较无显著差异 ,P>0 .0 5。分化程度比较 ,中、低分化组明显高于高分化组 ,但中、低分化组织间差异无显著性。结论 :诱导型一氧化氮合酶转录水平的升高 ,是引起诱导型一氧化氮合酶水平升高的主要原因 ,在卵巢上皮性癌发生、发展中发挥一定作用     

诱导型一氧化氮合酶对脑外伤大鼠听功能的影响

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶在弥漫性脑外伤大鼠耳蜗的表达,分析诱导型一氧化氮合酶表达与听功能变化的相关性.方法 建立弥漫性脑外伤大鼠模型并随机分组,采用听性脑干反应测定,光镜、免疫组织化学等手段,观察各组动物诱导型一氧化氮合酶表达及听功能的变化.结果 对照组大鼠耳蜗诱导型一氧化氮合酶无表达,外伤后各组内耳诱导型一氧化氮合酶表达有明显变化(P＜0.01).外伤后各组ABR V波阈值及各波潜伏期比较差异有统计学意义(P＜0.05).外伤各组内耳诱导型一氧化氮合酶表达与听功能损伤明显相关(P＜0.05).结论 弥漫性脑外伤对内耳诱导型一氧化氮合酶表达及听功能均有不同程度的影响,听功能变化可能与诱导型一氧化氮合酶表达有关.     

芪龙益肝方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素CYP2E1表达的研究

目的:研究芪龙益肝方对酒精性脂肪肝大鼠肝组织细胞色素CYP2E1表达的影响。方法:用高脂饲料喂食加白酒灌胃的方法复制酒精性脂肪肝模型。芪龙益肝方对模型大鼠治疗30 d后,检测模型大鼠肝组织细胞色素CYP2E1表达。结果:芪龙益肝方能降低大鼠肝组织细胞色素CYP2E1表达。结论:抑制CYP2E1的表达可能是芪龙益肝方治疗酒精性脂肪肝的作用机制之一。     

消瘀化痰方对非酒精性脂肪肝大鼠血清NO含量和NOS活性的影响

目的：探讨消瘀化痰方治疗非酒精性脂肪肝（NAFLD）的作用机制。方法：采用高脂饮食喂饲大鼠复制NAFLD模型,实验分组为正常对照组、模型对照组、阳性药（东宝肝泰）对照组和消瘀化痰方高、低剂量组。以高、低剂量消瘀化痰方和东宝肝泰进行干预,然后测定各组大鼠血清NO的含量和NOS的活性。结果：模型组大鼠血清NO的含量较正常组明显升高（P〈0．01）,NOS的活性明显增强（P〈0．01）。与模型组比较,各治疗组大鼠血清NO的含量和NOS的活性均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）,高、低剂量组NO的含量和NOS的活性均低于阳性药对照组（P〈0．05）。结论：消瘀化痰方可通过降低NO的含量和NOS的活性发挥抗脂肪肝作用。     

慢性肝病患者血清一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶水平检测

目的检测慢性肝病患者血清一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）水平,分析作为肝细胞损伤程度分级的辅助指标。方法采用硝酸还原酶法、分光光度法与自动生化仪化学法测定60例正常对照组、35例慢性轻度乙肝、38例慢性中度乙肝、26例慢性重度乙肝、30例肝炎肝硬化和39例原发性肝癌患者血清中NO、iNOS的含量及肝功能指标,并进行相关分析。结果慢性重度乙肝组血清NO、iNOS水平〉慢性中度乙肝组〉肝炎肝硬化组〉原发性肝癌组〉慢性轻度乙肝组〉正常对照组。慢性轻度乙肝组NO、iNOS水平与ALT、ALP正相关（P〈0.05）、慢性中度乙肝组与STB、SDB、ALP正相关（P〈0.05）,与ALT呈显著正相关（P〈0.01）、慢性重度乙肝组与STB、SDB、ALP、ALT呈显著正相关（P〈0.01）,与ALB呈负相关（P〈0.05）;肝炎肝硬化组及原发性肝癌组与STB、SDB、ALP呈显著正相关（P〈0.01）,与TBA、ALT正相关（P〈0.05）,与ALB显著负相关（P〈0.01）。结论血清NO、iNOS水平在慢性肝炎由轻度发展到中度、重度乃至肝硬化、肝癌过程中的不同阶段存在显著差异,与肝功能指标存在相关性,可作为辅助性指标,结合其他肝功能指标作为肝细胞损伤程度的血清学分级。     

前列腺癌和前列腺增生症中诱导型一氧化氮合酶的表达

目的测定诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌三者中及前列腺癌不同病理分级、临床分期中的表达情况。方法应用链霉菌素抗生物蛋白一过氧化酶方法，分别用诱导型一氧化氮合酶多克隆抗体对正常前列腺、前列腺增生症、前列腺癌行免疫组织化学染色，采用免疫组织化学染色评分方法对诱导型一氧化氮合酶表达阳性切片行定性评分。结果诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺几乎无表达，在前列腺增生症低表达，在前列腺癌高表达，三者差异具有显著性（P〈0．01）；但诱导型一氧化氮合酶在不同病理分级、临床分期前列腺癌中的表达强度差异无显著性（P〉0．05）。结论诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺无表达、在前列腺增生症低表达、在前列腺癌高表达，表明其与前列腺增生症和前列腺癌的发生有关。     

诱导型一氧化氮合酶在糖尿病大鼠坐骨神经中的表达及其与传导速度的关系

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶在糖尿病大鼠坐骨神经中表达的动态变化及其对神经传导速度的影响.方法 建立糖尿病大鼠动物模型,分别在成模后第1、3、6个月时测定坐骨神经传导速度和诱导型一氧化氮合酶表达量.结果 (1)与正常对照组相比,诱导型一氧化氮合酶表达在糖尿病各组均明显增强(P<0.05);(2)坐骨神经传导速度:与正常对照组相比,糖尿病模型1个月、3个月时大鼠坐骨神经传导速度未见明显下降,第6个月时则明显下降(P<0.05).结论 诱导型一氧化氮合酶在糖尿病大鼠坐骨神经中的表达增强,推断诱导型一氧化氮合酶在糖尿病周围神经病变的发病机制中起一定作用.     

吗啡预处理的晚期心肌保护作用及其与诱导型一氧化氮合酶的关系

目的　探讨吗啡预处理的晚期心肌保护作用以及诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)在此过程中的作用。方法　建立在体小鼠冠状动脉阻断的心肌缺血再灌注模型。吗啡预处理 2 4h后 ,小鼠心肌缺血 4 5min ,再灌注 12 0min。用氯化三苯四唑 ( 2 ,3,5 triphenyltetrazoliumchloride ,TTC)染色确定梗死心肌范围。心肌梗死范围以梗死心肌 (IS)占缺血区心肌 (AAR)的重量百分比表示。并观察选择性iNOS抑制剂 (S methylthioureasulfate ,SMT)和iNOS基因敲除对吗啡预处理心肌保护作用的影响。结果　缺血再灌注后野生对照组IS/AAR为 4 3%± 5 % ,2 4h前给予吗啡可以使IS/AAR显著降低至 2 2 %± 4 % (P <0 0 5 )。吗啡预处理后再给予SMT可以取消吗啡的心肌保护作用。吗啡预处理对iNOS基因敲除小鼠完全没有心肌保护作用。结论　吗啡预处理具有晚期心肌保护作用。iNOS介导了吗啡预处理的晚期心肌保护作用