Nrf2基因敲除对小鼠蛛网膜下腔出血后小胶质细胞／巨噬细胞活化的影响

目的：脑内小胶质细胞／巨噬细胞（ microglia／macrophage, M／M）在蛛网膜下腔出血（ subarachnoid hemor-rhage, SAH）脑组织损伤和修复中具有重要作用。文中研究小鼠 SAH后 M／M活化及Nrf2基因敲除对M／M活化的影响。方法野生型ICR小鼠70只,来源于ICR的Nrf2基因敲除小鼠35只,采用小鼠视交叉注射自体血建立SAH模型。假手术组行同样抽血、钻孔及置针,但不行注血。实验分为4组,野生型假手术组、野生型SAH组、基因敲除假手术组、基因敲除SAH组。 SAH术后第1、3、5天取标本,用Western blot法和免疫组化法检测M／M特异性蛋白Iba1的表达;同时Western blot检测SAH后第3天Iba1蛋白表达,免疫荧光染色检测SAH后第3天CD16／32＋Iba1＋细胞数量。结果 Western blot检测结果显示野生型假手术组、野生型SAH 组第1、3、5天 Iba1蛋白表达灰度值分别为0．491±0．039、0．657±0．069、0．930±0．046和0．926±0．046,而 Iba1蛋白免疫组织化学染色平均光密度值为0．412±0．122、0．625±0．135、0．963±0．213和0．978±0．224,野生型SAH组第1、3、5天Iba1蛋白表达均较野生型假手术组明显增加（P＜0．05）,但野生型SAH组第3天与第5天Iba1表达差异无统计学意义（P＞0．05）;Western blot结果示野生型假手术组、基因敲除假手术组、野生型 SAH 组、基因敲除 SAH 组 SAH 后第3天 Iba1蛋白表达灰度值分别为1．157±0．080、1．162±0．073、1．580±0．171和1．913±0．220,CD16／32＋Iba1＋细胞数量分别为0、0、30．200±6．300和42．800±6．260（个／HP）, SAH后第3天基因敲除SAH组Iba1蛋白表达较野生型SAH组增加（P＜0．05）,且基因敲除SAH组CD16／32＋Iba1＋细胞数较野生型SAH组明显增多（P＜0．05）。结论小鼠SAH后M／M活化增加,Nrf2基因敲除促进了SAH后M／M的活化和M1极化。     

通心络对2型糖尿病合并冠心病患者GSH－PX SOD和 MDA 的影响

目的：探讨通心络对2型糖尿病合并冠心病患者谷胱甘肽过氧化物酶（ GSH－Px）、超氧化物歧化酶（ SOD）、丙二醛（ MDA）的影响。方法：60例2型糖尿病合并冠心病患者随机分为对照组和通心络组,每组30例。观察两组治疗前后患者血清氧化应激指标：GSH－P X、SOD及MDA。结果：治疗后通心络组患者血清GSH－Px、SOD活性[（213．5±53．2） mg／L,（55．37±10．36）μ／mL],较治疗前[（153．4±45．9）mg／L,（41．35±7．63）u／mL]显著升高,治疗后MDA水平[（8．2±0．83） nmoL／mL],较治疗前[（13．9±0．76）nmoL／mL]显著降低,差异有统计学意义（P＜0．01）,且治疗后通心络组与对照组GSH－Px、SOD[（186±38．6）mg／L,（48．18±7．87）u／mL]比较,差异有统计学意义（P＜0．05）,MDA[（9．54±1．07） nmoL／mL]与对照组比较差异显著（ P＜0．01）。结论：通心络能提高2型糖尿病合并冠心病患者血清GSH－Px及SOD水平,降低MDA活性,可改善氧化应激状况。     

谷胱甘肽对微囊藻毒素-LR所致小鼠肾脏氧化损伤的保护作用研究

目的：研究谷胱甘肽（GSH）对微囊藻毒素‐LR（MC‐LR）致小鼠肾脏氧化损伤的保护作用。方法用随机数字表法将40只健康清洁级昆明小鼠分为5组,分别为生理盐水组、GSH对照组、MC‐LR染毒组、GSH低剂量＋ MC‐LR染毒组、GSH高剂量＋MC‐LR染毒组,每组8只（雌雄各半）,经腹腔注射染毒,每日1次,持续15 d ,取出肾脏用于病理观察及检测过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH‐Px）活力和谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量。结果与生理盐水组比较,MC‐LR染毒能引起MDA含量[（2．31±0．22）nmol／mg prot]明显升高（P＝0．000）,以及GSH含量[（0．68±0．02） mg／g prot]、CAT活力[（320．54±38．99）nmol／mg prot]、SOD活力[（180．93±15．30）U／mg prot]、GSH‐Px 活力[（295．11±42．40）U／mg prot]下降（P＜0．05）;而外源性加入GSH干预后,与MC‐LR染毒组比较,GSH高剂量＋MC‐LR染毒组MDA含量[（1．94±0．12）nmol／mg prot]明显下降（P＜0．05）,GSH 低、高剂量＋ MC‐LR染毒组 GSH 含量[（1．01±0．08）mg／g prot、（1．08±0．16）mg／g prot]、CAT活力[（383．46±21．98）nmol／mg prot、（428．50±28．61）nmol／mg prot]均明显升高（P＜0．05）, GSH高剂量＋MC‐LR染毒组SOD活力[（222．01±11．51）U／mg prot]、GSH‐Px活力[（358．37±20．29）U／mg prot]活力均明显升高（P＜0．05）。结论 MC‐LR可能通过促进肾脏细胞发生脂质过氧化反应而引起导致肾脏氧化损伤,而加入GSH则可能通过减少脂质过氧化物质,提高抗氧化物活力,清除氧自由基而达到一定的肾脏保护作用。     

ISCOM 型白血病瘤苗联合1-甲基色氨酸免疫治疗荷瘤小鼠疗效观察

目的：探讨免疫刺激复合物（ISCOM ）型白血病肿瘤疫苗（简称瘤苗）联合1-甲基色氨酸对荷瘤小鼠的治疗作用。方法皂苷溶液中加入脂肪酶蛋白（1 mg／mL ）7℃反应12 h ,加入80μL 脂类混合物溶液和5 mL 皂苷溶液（1 mg／mL ）制备ISCOM 型白血病瘤苗。 C57BL／6小鼠分为模型组、ISCOM 型白血病瘤苗组、1-甲基色氨酸组和联用组（ISCOM 型白血病瘤苗＋1-甲基色氨酸）,小鼠注射 FBL-3细胞建立白血病荷瘤小鼠模型,模型组给予等量生理盐水,其余各组接受对应药物治疗4周后,记录体质量,NK 细胞、Mφ细胞和细胞毒 T 淋巴细胞（CTL）细胞杀伤活性、血清 IL-10和 IL-12表达水平。结果联用组瘤质量低于1-甲基色氨酸组和 ISCOM 型白血病瘤苗组[（0．64±0．26）g vs ．（2．49±0．91）g ,P＜0．01;（0．64±0．26）g vs ．（1．28±0．73） g ,P＜0．05）];联用组 M φ细胞杀伤活性显著高于1-甲基色氨酸组[（55．69±13．69）％ vs ．（69．47±14．79）％,P＜0．01）];联用组NK 细胞杀伤活性显著高于1-甲基色氨酸组[（38．41±8．27）％ vs ．（67．22±12．74）％,P＜0．01];联用组 CTL 细胞杀伤活性高于1-甲基色氨酸组和 ISCOM 型白血病瘤苗组[（43．77±8．89）％ vs ．（69．68±11．44）％,P ＜0．01;（58．87±9．45）％ vs ．（69．68±11．44）％,P＜0．05）];联用组 IL-10均显著低于1-甲基色氨酸组、ISCOM 型白血病瘤苗组[（76．2±6．82）pg／L vs ．（98．3±13．4） pg／L ,P＜0．01;（76．2±6．82）pg／L vs ．（202．3±44．5）pg／L ,P＜0．01）];联用组 IL-12高于1-甲基色氨酸组、ISCOM 型白血病瘤苗组[（381．2±47．3）pg／L vs ．（332．1±30．2）pg／L ,P ＜0．05;（381．2±47．3）pg／L vs ．（291．2±17．3）pg ／L ,P＜0．01）。结论ISCOM 白血病瘤苗联合1-甲基色氨酸具有较佳的抗瘤活性,其机制可能是通过介导 IL-10和 IL-12的表达。     

Nrf2-ARE信号通路在外伤性脑损伤神经保护作用的机制研究

目的 初步探讨Nrf2-ARE通路在外伤性脑损伤保护作用的机制.方法 采用基因敲除大鼠制作创伤性脑损伤模型.将72只实验大鼠分为假手术组（Nrf2＋/＋）、脑损伤组（Nrf2＋/＋）、假手术组（Nrf2-/-）和脑损伤组（Nrf2-/-）,每组18只.损伤36 h后,采用TUNEL法检测神经细胞凋亡及ELISA蛋白羰基试剂盒检测蛋白质氧化损伤程度.结果 假手术组（Nrf2＋/＋）大鼠与假手术组（Nrf2-/-）大鼠相比,脑组织蛋白羰基浓度及神经细胞凋亡率均无显著差异（P ＞ 0.05）;而脑损伤组（Nrf2＋/＋）大鼠及脑损伤组（Nrf2-/-）大鼠的脑组织蛋白羰基浓度及神经细胞凋亡率分别比假手术组（Nrf2＋/＋）大鼠与假手术组（Nrf2-/-）大鼠高,差异有统计学意义（P ＜ 0.01）,但脑损伤组（Nrf2-/-）大鼠的相关指标较脑损伤组（Nrf2＋/＋）明显增高,差异有统计学意义（P ＜ 0.01）.结论 Nrf2-ARE通路可能通过减低外伤性脑损伤中脑组织蛋白羰基的浓度,减少神经细胞的凋亡,从而发挥神经保护作用.     

美金刚对脂多糖致 C57 BL／6 J 小鼠空间学习记忆能力下降的影响

目的：认知功能障碍的发病机制尚不明确。探讨美金刚对脂多糖所致C57BL／6J小鼠空间学习记忆能力的影响。方法36只C57BL／6J小鼠随机列表法分为对照组、脂多糖组、美金刚组,每组12只。3组分别连续7 d腹腔注射等容量等渗盐水,脂多糖和美金刚混合溶液。于第8天进行Morris水迷宫实验,记录登台潜伏期及平均靶象限活动时间。取海马组织测定淀粉样蛋白β（amyloid βprotein, Aβ）、糖原合成激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）及雷帕霉素靶蛋白（mammalian tar-get of rapamycin, mTOR）的含量。结果脂多糖组较对照组登台潜伏期显著延长[（71．01±13．21）s vs （50．56±9．89）s, P＜0．05]、平均靶象限活动时间显著缩短[（42．58±7．85） s vs （63．74±12．43） s, P＜0．05]、海马Aβ及GSK-3β表达显著增加[（1．75±0．43） vs （1．27±0．23）,（184．0±18．6）％ vs （100．0±12．1）％, P＜0．05],但mTOR明显下降[（75．0±13．5）％ vs （100．0±10．3）％, P＜0．05];美金刚组较脂多糖组登台潜伏期显著缩短[（61．45±7．65）s vs （71．01±13．21）s, P＜0．05]、平均靶象限活动时间显著延长[（58．25±9．02）s vs （42．58±7．85）s, P＜0．05]、海马Aβ及GSK-3β、mTOR明显下调[（1．35±0．28） vs （1．75±0．43）,（92．4±10．8）％vs （184．0±18．6）％,（97．0±14．3）％vs （75．0±13．5）％, P＜0．05]。结论美金刚可改善脂多糖所致小鼠空间学习记忆能力下降,可能与海马组织中GSK-3β及mTOR的表达变化有关。     

妊娠期高血压患者胎盘绒毛组织氧化应激状态的改变

【目的】探讨妊娠高血压患者胎盘绒毛组织氧化应激状态的改变。【方法】收集42名妊娠期高血压、子痫前期患者与20名正常妊娠足月孕妇胎盘绒毛组织。检测胎盘绒毛组织中谷胱甘肽过氧化物酶（glutathioneperoxidase,GSH—PX）、超氧化物歧化酶（superoxidedisinutase,SOD）活性和同型半胱氨酸（homocysteicacid,Hey）。【结果】妊娠期高血压疾病组胎盘绒毛组织GSH—PX活性[（21．52±7．67）U／mg]显著低于正常妊娠组【（25．13±21．26）U／mg,P〈0．01】,妊娠期高血压疾病组SOD活性[（218．32±15．46）U／mg]显著低于正常妊娠组[（245．63±28．31）U／mg,P〈0．01】,妊娠期高血压疾病组Hey[（15．37±3．61）μmol/mg]显著高于正常妊娠组【（13．95±2．38）μmol／mg,P〈0．01],且妊娠高血压疾病组Hcy与SOD呈负相关（r=-0．825,P〈0．05）。【结论】妊娠期高血压疾病胎盘绒毛组织中氧化物质增多,抗氧化酶活性降低,氧化还原系统平衡失调,呈现氧化应激状态。     

GSH对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞中MDA、IL-1β和TNF-α的影响

目的：探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对缺氧／复氧培养大鼠心肌细胞损伤后MDA、IL-1β和TNF-α的影响。方法：将原代培养的乳鼠心室肌细胞分为对照组、模型组和GSH组,GSH组缺氧、复氧前均给予160mg／L浓度GSH,缺氧2h,复氧1h。复氧1h后,用比色法检测丙二醛（MDA）含量,用RT-PCR法检测细胞内IL-1βmRNA和TNF-αmRNA水平。结果：与对照组相比,模型组MDA水平、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA表达显著升高（P ＜ 0．01）。GSH预处理可以减轻MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的上调（P ＜ 0．01 vs 模型组）。MDA、IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的表达在各组间均呈正相关（P ＜ 0．05）。结论：在缺氧／复氧损伤的过程中,炎性细胞因子和氧自由基的作用相互联系,还原型谷胱甘肽能清除氧自由基,抑制IL-1βmRNA和TNF-αmRNA的升高,从而保护缺氧／复氧损伤的心肌细胞。     

胆总管结扎所致肝损伤中Nrf2对细胞信号传导和基因表达的影响

目的 研究核因子相关因子 2（Nrf2）在胆汁淤积中的作用。方法 野生鼠（WT）和Nrf2基因敲除小鼠(KO)给予胆总管结扎手术,应用蛋白杂交技术观察丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号传导途径的变化;应用RNA酶保护测定（RPA）技术测定基因变化。结果 在BDL组血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）显著升高;纤维粘连蛋白的表达在KO鼠明显增多;p-JNK、p-stat3、p-AKT、p-p38在WT鼠的BDL组的活化强度较大。Nrf2的靶基因NQO1,谷胱甘肽S 转移酶(GST)的同工酶（GST-Ya,GST-pa）在WT鼠的BDL组明显上调,而在KO鼠中则被抑制。TGF-β1、TIMP-1、胶原蛋白1在KO鼠的BDL组上调幅度较大。结论 在胆总管结扎后胆汁淤积所致肝损伤中,Nrf2对MAPK信号传导和炎症、纤维化过程均有影响,部分通过上调抗氧化基因的表达起到细胞保护作用。     

不同剂量罗哌卡因臂丛神经阻滞对学龄前儿童急诊手外伤缝合术的临床评价

目的：观察不同剂量罗哌卡因在学龄前儿童臂丛神经阻滞中的应用效果。方法随机选取急诊手外伤缝合术学龄前儿童40例,在全身麻醉复合臂丛神经阻滞下进行,根据罗哌卡因的不同使用量分为 A组（1 mg／kg ,n＝20）和B组（2 mg／kg , n＝20）,比较每组患儿切皮时体动反应、是否行伤口局部加注利多卡因、丙泊酚用量、手术时间、术后患儿苏醒时间。结果两组患儿手术时间比较,差异无统计学意义（P＞0．05）,A组有体动反应例数和加注利多卡因例数均为8例,与B组（2例）相比差异均有统计学意义（均 P＜0．01）,罗哌卡因用量A组显著小于B组[（14．5±5．5）mg vs ．（31．6±7．2）mg ,P＜0．01],丙泊酚用量A组显著大于B组用量[（75．6±15．2）mg vs ．（32．7±8．6）mg ,P＜0．01],苏醒时间A组显著大于B组[（11．2±3．3）min vs ．（5．9±2．3）min ,P＜0．01]。结论臂丛神经阻滞罗哌卡因2 mg／kg临床效果优于1 mg／kg。     

高氧致新生大鼠急性肝损伤及对肝组织中Nrf2表达的影响

目的 研究持续吸入高浓度氧气对新生大鼠的肝损伤,探讨转录因子NF-E2相关因子2（Nrf2）在损伤肝组织中的动态表达及意义。方法 足月SD 新生大鼠100只随机分为空气组 (N组) 和高氧组 (O 组),每组50只。高氧组出生后立即置入氧体积分数>95%的持续高氧环境中饲养,正常对照组则持续空气中饲养。两组分别于暴露高氧或空气中4、7、14 d 随机抽取8只,麻醉后取肝组织,比较两组肝细胞凋亡指数,检测Nfr2在肝组织中的表达。结果 肝细胞凋亡指数及Nrf2的表达于各时点高氧组均高于正常组 （P<0.01）。高氧组7、14 d与高氧组4 d比肝细胞凋亡指数及Nrf2的表达差异有统计学意义 （P<0.01）。结论 持续高浓度氧气吸入可致新生大鼠肝损伤,Nrf2表达增加,启动机体自身抗氧化机制。     

Nrf2激活对新生大鼠高氧致肺损伤的保护作用

目的 观察NF-E2相关因子2（Nrf2）激动剂对高氧致新生大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨Nrf2激活是否对高氧致新生大鼠肺损伤具有保护作用。方法 将足月顺产SD 新生大鼠90只随机分为空气对照组( N组)、高氧组( O 组)和Nrf2组,每组各30只。O 组和Nrf2组新生鼠于出生后第1 d、第2 d分别腹腔注射生理盐水0.2 mL或Nrf2激动剂莱菔硫烷0.2 mL（30 mg/kg）,N组不予任何干预。O组和Nrf2组新生大鼠于第1次注射后置入氧体积分数>95%的高氧环境中持续饲养4 d,N组则持续于空气中饲养。3组新生大鼠麻醉后取肺组织,采用TUNEL染色比较3组新生大鼠肺泡细胞的凋亡指数(AI),采用免疫组化染色检测Nfr2在肺组织中的表达。结果 O组新生大鼠肺泡细胞AI值〔(28.8±3.0)%〕高于N组〔(0.7±0.6)%〕和Nrf2组〔(7.2±0.8)%〕,差异有统计学意义（P<0.01）。O组(926.80±130.51)和Nrf2组(1 038.40±151.12)肺组织Nrf2表达差异无统计学意义（P>0.05),但与N组(30.03±9.99)比较均明显增高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 Nrf2激动剂可减少高氧致新生大鼠肺泡细胞凋亡,对高氧引起的肺损伤具有一定的保护作用。     

人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和人类线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达和意义

 目的 检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2（Nrf2）、人类线粒体转录因子A (TFAM)的表达, 并分析其表达与Gleason评分的关系。方法 用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman correlation coefficients统计方法分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达均与Gleason评分正相关（P值为0.0052,0.0003）; Nrf2与TFAM的表达也有相关性（P=0.0006）。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。     

川芎嗪激活核因子相关因子-2 (Nrf-2)抑制高脂饮食喂养的Apo-E基因敲除小鼠的动脉粥样硬化

 目的  观察川芎嗪能否通过激活核因子相关因子-2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf-2)从而减轻氧化应激所致的动脉粥样硬化损伤。方法  40只雄性载脂蛋白E(apolipoprotein-E,Apo-E)基因敲除小鼠随机分为4组,分别给予普通饮食+生理盐水腹腔注射(n=10)、高脂饮食+生理盐水腹腔注射(n=10)、高脂饮食+川芎嗪每天100 mg/kg体重腹腔注射(n=10)、普通饮食+川芎嗪每天100 mg/kg体重腹腔注射(n=10)。每天1次,持续8周,HE染色法观察主动脉粥样硬化改变,ELISA法检测血清和主动脉组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽S转移酶(glutathione S transferase,GST)水平,Western blot法检测主动脉组织Nrf 2的蛋白表达,real-time PCR检测主动脉组织Nrf-2的mRNA表达。结果   川芎嗪可显著降低高脂饮食喂养的Apo-E基因敲除小鼠主动脉斑块面积、内膜/中膜厚度比,增加血清和主动脉组织SOD和GST含量,增加主动脉组织中的总Nrf-2蛋白和核Nrf-2蛋白含量,增加Nrf-2 mRNA相对表达量。结论  川芎嗪通过促进Nrf-2 mRNA的表达和核内转位,提高主动脉组织Nrf-2的因子浓度,进而促进下游各种抗氧化蛋白的表达,从而减轻氧化应激所致的动脉粥样硬化。     

芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤创面愈合及其相关因子表达的影响

目的:研究芦荟对大鼠浅度烫伤创面愈合及表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:建立大鼠浅度烫伤模型,制备芦荟凝胶。实验动物分两组:自然愈合组(对照组);芦荟凝胶组(试验组)。通过免疫组化染色及图像分析,测定伤后2、6、10、18、24d的创面愈合率及创面组织中EGF、bFGF的表达。结果:1创面愈合率:芦荟凝胶组在10、18、24d各时相点的创面愈合率较自然愈合组高,差异有显著性(P<0.05)。尤以24d时相点更明显(P<0.01)。2EGF的表达:芦荟凝胶组总体的EGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后10、18d时EGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。3bFGF的表达:芦荟凝胶组总体的bFGF表达量高于自然愈合组,差异有显著性(P<0.05)。芦荟凝胶组伤后18、24d时bFGF表达高于自然愈合组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:芦荟凝胶外涂对大鼠浅度烫伤的愈合有促进作用,其机制可能与促进EGF、bFGF的表达有关。     

木犀草素对EA.hy926细胞Nrf2信号通路的激活作用及H2O2致氧化损伤的保护作用

目的 研究木犀草素对人脐静脉内皮EA.hy926细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的影响,及对H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护作用。方法 将细胞分成对照组、H2O2处理组、阳性药物(莱菔硫烷)组、不同浓度(5、10、20、40μmol/L)木犀草素组和不同浓度木犀草素(5、10、20、40μmol/L)+H2O2组,采用ARE荧光素酶报告基因、Western blotting和qRT-PCR确证木犀草素对Nrf2信号通路的影响;荧光标记流式细胞仪检测内源性活性氧(ROS)水平;MTT法评价木犀草素对H2O2诱导的EA.hy926细胞的保护作用。结果 木犀草素能够剂量依赖性地增强ARE荧光强度,上调Nrf2及其下游基因血红素加氧酶-1(HO-1)、抗氧化酶NAD(P)H醌氧化还原酶-1(NQO1)和谷氨酸半胱氨酸连接酶调节亚基(GCLM)的蛋白和mRNA表达,降低内源性ROS水平;采用木犀草素和H2O2协同处理细胞,可表现出保护作用。结论 木犀草素可以激活EA.hy926细胞Nrf2信号通路,抑制H2O2诱导的细胞毒性,对EA.hy926细胞具有氧化损伤保护作用。     

三叶因子1、2和环氧合酶-2在胃癌组织中的表达

目的研究三叶因子1(TFF1)、三叶因子2(TFF2)和环氧合酶-2(COX-2)在正常胃黏膜组织、癌旁组织和胃癌组织中的表达情况,探讨TFF1、TFF2表达与胃癌发生的关系。方法采用SP免疫组化方法检测30例正常胃黏膜组织、50例癌旁组织和50例胃癌组织中TFF1、TFF2和COX-2的表达。结果在正常胃黏膜组织、癌旁组织和胃癌组织中,TFF1、TFF2表达呈逐渐减弱趋势(P<0.01),而COX-2的表达呈逐渐上升趋势(P<0.01),TFF1、TFF2的表达强度与后者呈负相关(P<0.01)。结论 COX-2的表达增加抑制TFF1、TFF2的表达,细胞增殖与凋亡失衡,最终导致胃癌的发生。     

bFGF和TNF-α在颈椎后纵韧带骨化中的作用

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和肿瘤坏死因子(TNF-α)在颈椎后纵韧带中的表达水平及在骨化发病机制中的作用。方法：采用免疫组织化学法,对30例骨化颈椎后纵韧带标本进行bFGF和TNF-α检测,与40例正常颈椎后纵韧带标本进行对照,再利用SPSS10.0行FISHER精确检验,分析有无统计学意义。结果：正常对照组bFGF表达10例阳性,30例阴性,阳性率25%;颈椎后纵韧带骨化组bFGF表达24例阳性,6例阴性,阳性率80%,差异有统计学意义(P＜0.05)。正常对照组TNF-α表达32例阳性,8例阴性,阳性率80%;颈椎后纵韧带骨化组TNF-α表达10例阳性,20例阴性,阳性率33.3%,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：bFGF的异常高表达和TNF-α的低表达促进了颈椎后纵韧带骨化的发生,这两种因子的异常表达在该病发病机制中有重要作用。     

纳米二氧化钛对小鼠心肌细胞DNA的损伤及叔丁基对苯二酚的拮抗作用

 目的  探讨纳米二氧化钛(nano-titanium dioxide,Nano-TiO2)对小鼠心肌细胞DNA的损伤作用,并进一步研究核因子NF-E2相关因子（nuclear factor erythroid 2 related factor 2,Nrf2）诱导剂叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)是否可降低此种损伤。方法  30只ICR小鼠随机分为6组:对照组,Nano-TiO2 低(0.5 g/kg)、中(1 g/kg)、高(2 g/kg)剂量组,tBHQ组,tBHQ+ Nano-TiO2组。Nano-TiO2灌胃给予,tBHQ腹腔注射,均1次/天,连续7天。末次染毒后24 h处死小鼠,取新鲜心脏组织,胰酶消化法制备心肌细胞悬液,采用单细胞凝胶电泳技术检测心肌细胞DNA损伤程度。 结果  (1)对照组心肌细胞核呈圆形荧光团,强度均匀,大小较一致,无明显拖尾。不同剂量Nano-TiO2染毒后,各组均存在不同数量的DNA受损心肌细胞,出现彗星拖尾现象,且其尾部的拖尾程度及荧光强度随Nano-TiO2剂量的增加而增强。经CASP软件分析,低、中、高剂量Nano-TiO2组尾部DNA含量(tail DNA percent,TD)分别为28.45±1.70、35.08±0.81、39.94±4.46,明显高于对照组(23.96±2.59),差异有统计学意义(P<0.01),并有良好的剂量 效应关系(r=0.9947)。低、中、高剂量Nano-TiO2组彗星尾矩(olive tail moment,OTM)较对照组均有明显增加且差异有统计学意义(P<0.05),并有良好的剂量-效应关系(r=0.9886)。(2) tBHQ组心肌细胞细胞核呈圆形,无拖尾;Nano-TiO2中剂量(1 g/kg)组细胞拖尾明显,但给予tBHQ可明显降低Nano-TiO2所致的细胞核拖尾程度;与Nano-TiO2组相比,tBHQ +Nano-TiO2组两项指标TD及OTM均明显降低,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论  Nano-TiO2可剂量依赖性地引起心肌细胞DNA损伤,而Nrf2诱导剂tBHQ可拮抗Nano-TiO2所致心肌细胞DNA损伤。     

Modulation of NRF2 and UGT1A expression by epigallocatechin-3-gallate in colon cancer cells and BALB/c mice

Background Green tea is an important source of flavonoids in human diets and epidemiological data correlate green tea consumption with a reduced cancer risk. Given its complicated properties at effective concentrations, we put epigallocatechin-3-gallate （EGCG） that previously reported on its anti-proliferative activities against several cancer cell lines on our research agenda to further examine the mechanism of its chemopreventive potential. Methods RNA interference （RNAi） expression vector pSilencer 3.1-H1 was used to construct recombinant nuclear factor erythroid 2 related factor 2 （Nrf2）-targeting RNAi plasmids. EGCG （5 μg/ml） was added into the culture fluid of cells before and after transfection. RT-PCR and Western blotting were used to detect the expression of uridine 5＇-diphosphate-glucuronosyltransferase （UGT）IA in cells. Forty male BALB/c mice were assigned to four groups： a normal unexposed control and three groups treated with varying doses of EGCG. Four weeks later, the mice were sacrificed, and their colon tissues were subjected to mRNA and protein expression of Nrf2 and UGT1A via RT-PCR and Western blotting analysis. Results EGCG up-regulated the expression of Nrf2 and increased the level of UGT1A in cells. The blockade of Nrf2 activity via RNA intervention largely attenuated the induction of UGT1A expression by EGCG. In mice, the mRNA and protein levels of Nrf2 and UGT1A detected by RT-PCR and Western blotting increased （both P 〈 0.05 compared with the control）. This increase in Nrf2 expression also had a positive correlation with an increased UGT1A expression. Conclusions EGCG mediated its effect in part by inducing the NRF2 signaling pathway and increasing UGT1A expression. Both in vitro and in vivo studies demonstrated the role of NRF2 and UGT1A expression in the potential use of EGCG as a possible chemopreventive agent and supported further study of EGCG for cancer treatment.