rhG-CSF和rhSCF对正常猴外周血白细胞和CFU-GM数的影响

为了观察重组人干细胞因子 (rhSCF)和 (或 )粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF)动员外周血干细胞的效果 ,本研究将 15只正常成年猕猴分成 3组 ,每天 1次 ,连续 14天分别皮下注射赋形剂、rhG CSF 10 μg/ (kg·d)和rhSCF5 0 μ/ (kg·d) +rhG CSF 10 μ/ (kg·d)。结果表明 ,单独给rhG CSF组的外周血白细胞数最高值在给药后第 7天出现 ,为给药前值的 4 11% ,其后很快下降。联合给药组外周血白细胞数最高值在第 9天出现 ,为给药前值的 5 38% ,第 7至第 9天的外周血白细胞数在 5 35 % - 5 38%之间。单独给药组外周血CFU GM最高值在给药后第 5天为给药前值的 937% ,联合给药组在第 9天为 1175 %。结论 :rhG CSF对外周血干 /祖细胞有明显的动员作用 ,rhSCF +rhG CSF联合动员的效果优于rhG CSF单用     

珍珠液对体外培养人瘢痕成纤维细胞生长的抑制

背景:研究发现,珍珠液有促组织细胞再生、消除瘢痕等功效.目的:观察珍珠液对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖的影响.设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2008-09/12在广西医科大学医学实验中心完成.材料:瘢痕组织组织标本来自广西医科大学整形外科患者.珍珠液是珍珠的水解液,含有多种氨基酸、多肽、维生素、矿物质和天然酶等.购自北海国发生物有限公司.方法:参考Veelken方法进行成纤维细胞原代及传代培养,反复传代去除非成纤维细胞成分后,建立人皮肤瘢痕细胞系.取对数生长期的人皮肤瘢痕成纤维细胞3～5代,用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于96孔塑料培养板,密度为0.5×10~4/孔,每孔加入100μL的细胞悬液和100μL的DMEM培养基,常规培养24h后吸弃原培养液,实验分组:珍珠液组:加入已经配置的含珍珠液质量浓度为125.00,62.50,31.30,15.60,7.80,3.90,1.95,0.98mg/L的培养基200μL;对照组:每孔只加200μL的培养基.主要观察指标:MTT法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成纤维细胞凋亡情况.结果:珍珠液对成纤维细胞的半效抑制浓度IC_(50)为15mg/L,除0.98mg/L质量浓度外,其余质量浓度均能有效地抑制成纤维细胞的生长,且呈剂量依赖性抑制成纤维细胞的生长,珍珠液的浓度越高,对成纤维细胞的抑制率越大.剂量IC_(50)=15mg/L培养的成纤维细胞体积缩小、胞质少、密度变小,凋亡细胞多、呈棕黄色.对照组成纤维细胞体积大、胞质丰富、密度大.珍珠液作用后的细胞凋亡指数高于空白对照组(P＜0.01).结论:珍珠液能抑制体外培养皮肤瘢痕成纤维细胞的生长,并诱导其凋亡.     

抑制Hedgehog信号通路对肝细胞癌细胞生长和迁移的影响

目的探讨Hedgehog（Hh）信号通路在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）细胞中的作用及其机制。方法选取2株HCC细胞系HepG2和Hep3B分成6组,分别为HepG2空白对照组、HepG2/GDC-0449组、HepG2/GANT61组、Hep3B空白对照组、Hep3B/GDC-0449组、Hep3B/GANT61组。HepG2/GDC-0449组、Hep3B/GDC-0449组采用GDC-0449（靶向SMO）,HepG2/GANT61组、Hep3B/GANT61组采用GANT61（靶向GLI1/2）Hh信号通路抑制剂处理。采用实时PCR检测HCC细胞Patched1、Smoothened、Glioma1、vimentin和E-cadherin mRNA表达水平,采用Western blot实验检测Patched1、Smoothened、Glioma1蛋白表达水平,采用克隆形成实验观察存活克隆计数与死亡细胞计数。结果 HepG2/GDC-0449组和HepG2/GANT61组与HepG2空白对照组比较,Hep3B/GDC-0449组和Hep3B/GANT61组与Hep3B空白对照组比较,Patched1、Smoothened和Glioma1mRNA及蛋白表达均下调,存活克隆计数减少,死亡细胞计数增多,E-cadherin mRNA表达水平增高,vimentin mRNA表达水平降低（P〈0.05）;HepG2/GANT61组较HepG2/GDC-0449组抑制作用更明显,Hep3B/GANT61组较Hep3B/GDC-0449组抑制作用更明显（P〈0.05）。结论 GDC-0449和GANT61 2种抑制剂均可有效抑制HepG2和Hep3B细胞增殖、迁移和上皮间叶细胞转化,增加细胞凋亡,其中GANT61抑制作用更明显。抑制Hh信号通路可有效影响HCC细胞的生长和迁移。     

三氧化二砷对宫颈癌Hela细胞体外生长的影响

目的研究三氧化二砷(AsO3)对人宫颈癌Hela细胞的体外生长的影响，初步探讨其作用机制。方法MTT比色法检测细胞生长抑制作用。光镜下观察细胞凋亡形态学的变化。流式细胞术检测各期细胞分布及细胞凋亡率。结果三氧化二砷能以浓度依赖和时间依赖方式显著抑制Hela细胞生长，阻滞Hela细胞于C2／M期，并诱导凋亡。结论三氧化二砷可显著抑制Hela细胞的体外生长，诱导凋亡可能是其作用机制之一。     

油菜花粉提取物对前列腺癌细胞DU-145的体外生长抑制研究

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞DU-145的生长抑制及作用机制。方法采用不同浓度的BPE作用于体外生长的人前列腺癌细胞DU-145。通过CCK-8法检测BPE对DU-145的增殖抑制,透射电镜观察细胞形态,流式细胞术测定细胞周期的改变,RT-PCR测定促凋亡基因Bax和抑凋亡基因Bcl-2的表达。结果 BPE对DU-145细胞具有增殖抑制作用,且在一定范围内具有剂量依赖性。BPE浓度为1000μg/ml时,DU-145细胞抑制率以48h尤为显著,达到79.4%,与对照组比较,有显著性差异(P0.001)。低、中浓度的BPE作用24h后,对细胞生长抑制不明显。BPE可以引起细胞凋亡,同时改变细胞周期。随着浓度的升高,DU-145细胞G0/G1期比例明显增加,S期比例下降。BPE对细胞凋亡的影响显示阴性时,Bax表达较低,低浓度BPE使其表达大量增加;随着药物作用浓度增加,Bax表达反而降低。阴性时,Bcl-2表达较低,低浓度BPE使其表达大量增加;随着药物作用浓度增加,Bcl-2表达急剧降低。Bax/Bcl-2比值在阴性时最高,随着药物浓度升高而降低。结论 BPE对人前列腺癌细胞DU-145的体外生长具有抑制效应。     

THP与ADM对乳腺癌的体外生长抑制及诱导凋亡研究

目的比较吡柔比星(THP)和阿霉素(ADM)对乳腺癌细胞的体外抑制及凋亡诱导作用。方法采用ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)及AnnexinV凋亡检测技术比较吡柔比星和阿霉素对人乳腺癌细胞株MCF-7的体外生长抑制及细胞凋亡诱导作用。结果吡柔比星对MCF-7细胞株生长抑制作用明显高于阿霉素,其IC50仅相当于阿霉素的1/3-1/6,差异具有显著意义(P0.01);吡柔比星和阿霉素对MCF-7细胞抑制作用均有剂量依赖性,并均能在低浓度下诱导MCF-7细胞凋亡,吡柔比星处理组的细胞凋亡比例高于阿霉素组(P0.01)。结论吡柔比星较阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7具有更好的体外生长抑制和诱导细胞凋亡作用。     

蒙脱石粉体外抑制细菌生长作用的研究

临床上由于滥用抗生素．破坏肠道菌群的微生态平衡,从而破坏肠道生物屏障功能,促使肠道细菌迁移,菌群失调耐药性增加。蒙脱石（HLC）是一种天然铝和镁的双八面体硅酸盐．具有层状结构和非均匀性电荷分布。对消化道内的病毒、病菌及其产生的毒素、气体等有极强的固定、抑制作用,     

漆树酸联合紫杉醇对肝癌细胞生长抑制和凋亡的影响

目的:评价漆树酸和紫杉醇联合用药对人肝癌HepG2细胞是否具有协同作用.方法:人肝癌HepG2细胞经漆树酸和(或)紫杉醇处理后,MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪技术检测细胞凋亡,Western blot方法检测Bax、Bcl-2及Caspase-3、8、9和PARP凋亡相关蛋白的变化.结果:漆树酸和紫杉醇联合应用能够明显增强对HepG2细胞的增殖抑制,与单独用药组相比具有明显的协同作用.漆树酸联合紫杉醇可以明显诱导HepG2细胞凋亡.两药联合作用可以诱导Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比率增加,引起Caspase-3、8、9的活化,PARP的切割.结论:漆树酸和紫杉醇联合用药具有协同作用,明显增强抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞凋亡,其作用机制可能与Caspase系统活化相关.     

丹参酮ⅡA抑制体外巨核细胞生长和诱导Meg-01细胞凋亡

丹参酮ⅡA是从中药丹参提取的药物,含有邻醌结构,此化合物易被还原为二酚类衍生物,并进一步被氧化为醌.在生物体内的代谢产物参与机体的生物化学反应,而表现出多种药理作用.比如抑制血小板聚集,改善血液循环,还有抗炎、抗菌、抑制自由基、抗氧化、性激素样活性等多方面的作用.近来研究还发现丹参酮ⅡA有直接杀伤肿瘤细胞,诱导细胞分化和凋亡的作用.但是,丹参酮ⅡA对巨核细胞生长和凋亡的影响,国内外还未见到有关报道.因此,我们主要观察丹参酮ⅡA体外对巨核细胞生长的影响及诱导巨核细胞系Meg-01细胞凋亡的作用.     

体外培养和冷冻保存对微囊化细胞生长和内皮抑素表达的影响

背景：微囊化基因工程细胞移植治疗需要制备大量的细胞活性良好、重组蛋白表达量高的生物微胶囊，体外培养和冷冻保存足生物微胶囊制备过程中两个重要的环节。目的：考察体外培养时间和冷冻保存对微囊化细胞在动物体内生长和内皮抑素表达的影响及体外培养时间对微囊化细胞冷冻保存的影响。设计、时间及地点：于2006—04／10在大连化学物理研究所生物医用材料实验室完成实验。材料：海藻酸钠与聚赖氨酸为美困Sigma公司产品。方法：将微囊化的重组内皮抑素绌胞分装于24孔板中；每孔分装0．1mL微胶囊，加入DMEM／F12培养液2mL。微囊化细胞在37℃、体积分数为0．05的CO2培养箱中培养。每2d采用MTT法测微囊内的活细胞密度，并收集培养上清测内皮抑素表达量。主要观察指标：微囊化细胞生长情况和内皮抑素表达量。结果：体外培养时阃对微囊化细胞在动物体内生长、内皮抑素表达和微囊稳定性具有较大的影响，体外不培养和培养4d的微囊化细胞在小鼠腹腔内生长良好、内皮抑素表达量高，并且微囊稳定性好，而体外培养8d的微囊化细胞在移植后的第26天破裂。体外培养时问对微囊化细胞冷冻保存也具有较大的影响，体外培养4和8d的微囊化细胞存液氮中冷冻保存40d，复蓐后细胞生长良好、内皮抑素表达量高，而冻存前未经过体外培养的微囊化细胞，复苏后细胞几乎全部死亡。结论：生物微胶囊在体外比较适宜的培养时间为4d。并且冷冻保存对微囊化细胞在动物体内生长、内皮抑素表达和微囊稳定性没有显著的影响。     

生物活性玻璃对体外人成骨细胞生长周期的影响

背景：生物活性玻璃是一种修补骨缺损和促进骨生长的生物活性材料，很多实验关注其促进成骨细胞增殖的作用及机制，经作者柃索未见对人成骨细胞生长周期改变的报道。目的：认识生物活性玻璃对体外人成骨细胞生长周期的影响。设计、时间及地点：成骨细胞生长周期，体外培养观察实验，于2005-10／2006-03在江苏省血液病研究所，旅州大学附属一院血液病研究所血栓室完成。材料：取人工全髋关节置换中股骨头中内松质骨9例，人工全膝关节置换中股骨髁松质骨3例。生物活性玻璃条件培养液为美国Gibco公司产品，DMEM培养液为杭州四季青生物工程材料有限公司产品。方法：将生物玻璃晶体加入DMEM培养液内，37℃水浴24h获得生物活性玻璃离子产物。含有生物活性玻璃离子产物的DMEM培养液作为实验组培养液，不含牛物玻璃离子产物的培养液作为对照组培养液。再将人松质骨源性成骨细胞以培养液培养，测定成骨细胞生长周期：用2种培养液分别培养成骨细胞7d。主要观察指标：用MTT比色法获得细胞生长指数；流式细胞仪测定每天成骨细胞DNA合成前期、DNA合成期、DNA合成后期的百分比近而侧得细胞增殖活性指标、DNA合成期细胞比率和增殖指数。结果：Si离子的浓度存生物活性玻璃条件培养液内是对照培养液的26．12％（P〈001），Ca是88．03％（P〈0．01），P是73．23％（P〈0．01）。细胞生长指数存培养第2天时即出现明显的差异（P〈0．01），实验组成骨细胞生长数较对照组多。对照组人成骨细胞生长周期约4d，实验组在培养2d时细胞的DNA合成期细胞比率和增殖指数比对照组高（P〈0．05），提示实验组人成骨细胞生长周期缩短。结论：生物活性玻璃能促进成骨细胞的增殖，使细胞快速进入DNA合成前期、合成期及合成后期，缩短了成骨细胞生长周期。     

生长抑制因子4基因表达对K562细胞生长的影响

目的 研究生长抑制因子4（ING4）基因表达对K562细胞增殖的影响。方法 将经过定点突变技术人源化改造的ING4（鼠→人）生长抑制因子4基因酶切并连接到pAdTrack-CMV转移质粒上，然后与腺病毒质粒pAdEasy-1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack—CMV—hING4，将它转染QBI-293A细胞后收获重组腺病毒Ad—hING4（以下简称为Ad-ING4）。将Ad-ING4感染K562细胞，光学显微镜下观察病毒感染前后细胞形态的变化，免疫细胞化学分析凋亡因子的改变，激光扫描共聚焦显微镜观察K562细胞的凋亡，流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡率。结果 成功构建了人ING4腺病毒质粒，获得高滴度的重组腺病毒Ad-ING4，用它感染K562细胞72h后，FCM法测定细胞凋亡率为19．7％，与空病毒对照组相比差异有统计学意义（P〈0．01），ING4基因能下调K562细胞bcl-2的表达并上调bax的表达，多种方法检测结果表明ING4基因能抑制K562细胞生长，诱导凋亡。结论 重组腺病毒Ad—ING4可以显著抑制K562细胞的生长。     

康复一号注射液对体外肿瘤细胞生长的影响

康复一号注射液对体外肿瘤细胞生长的影响陈惠英，张苏玲，刘文虎（南京８１医院，２１０００２）康复一号注射液是从中药内提取的一种新颖抗肿瘤药物。为了进一步探讨其对肿瘤治疗作用。本文通过该药对体外肿瘤细胞形态学变化，肿瘤细胞增殖率及肿瘤细胞克隆形成了解对肿...     

西拉普利和维拉帕米对高血压病患者糖代谢和胰岛素影响的对比研究

目的;观察西拉普利和维拉帕米对高血压病患者糖代谢和胰岛素水平的影响。方法：对４８例轻,中度高血压病患者随机分为两组,分别予拉普利和维拉帕米治疗６周,治疗前后均行口服葡萄糖耐量试验和胰岛素释放试验。     

葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响

背景:成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有重要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的:观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法:取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10-3～10-10mol/L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论:细胞经葛根素处理后10-5～10-9mol/L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加(P<0.05),第3天增殖最快(P<0.01),第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.01),其中以10-6mol/L组最显著(P<0.01)。然而葛根素10-3mol/L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少(P<0.05)。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度(10-5～10-8mol/L)下刺激骨形成;在高浓度(10-3～10-4mol/L)下抑制骨形成。     

葛根素在体外对成骨细胞增殖和分化的影响

背景：成骨细胞是骨代谢平衡过程中的关键功能细胞,植物雌激素对成骨细胞的增殖和分化有熏要影响,葛根素作为植物雌激素的一种,在体外以较大范围浓度对成骨细胞功能的影响仍少见报道。目的：观察葛根素在体外对大鼠成骨细胞增殖和分化功能的影响。方法：取新生Wistar大鼠的颅盖骨,对成骨细胞进行分离、培养、纯化及鉴定。将培养的成骨细胞随机分为对照组、10^-3-10-10mol／L不同浓度葛根素组,观察不同浓度葛根素对体外培养的成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性表达的影响。结果与结论：细胞经葛根素处理后10～-10-9gmol／L组成骨细胞增殖活性较对照组明显增加（P〈0．05）,第3天增殖最快（P〈0．01）,第4天开始下降;诱导第4天,各组碱性磷酸酶活性与对照组相比,差异均有显著性意义（P〈0．01）,其中以10μmol／L组最显著（P〈0．01）。然而葛根素10μmol／L组成骨细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性表达较对照组均减少（P〈0．05）。提示葛根素对成骨细胞的影响存在剂量依赖性,并且具有双向性,即在低浓度（105--10-8mol／L）下刺激骨形成：在高浓度（10^-3-10^-4mol／L）下抑制骨形成。     

Slug基因表达抑制对体外胰腺癌细胞生物行为的影响

目的探讨siRNA干扰Slug基因表达对胰腺癌转移、血管生成和生长的影响。方法用脂质体转染法将表达siRNA-Slug的真核表达载体pGenesil-1-Slug-siRNA(pSlug-siRNA)和空载体pGenesil-1-Neg-siRNA(pNeg-siRNA)导入AS-PC-1细胞,G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆。采用RT-PCR技术检测不同处理组细胞中Slug mRNA表达水平,Western-blot测定Slug蛋白表达水平。观察Slug沉默后及对体外胰腺癌细胞侵袭作用的影响;鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)试验及CAM移植瘤实验检测Slug沉默对血管生成的影响,MTT比色法检测细胞存活率。结果pSlug-siRNA组细胞内Slug表达被有效沉默。重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验显示,pSlug-siRNA组、对照组、pNeg-siRNA组穿透基底膜细胞数分别为(38±6.56)、(164±15.39)、(159.67±8.96)个/高倍镜(×200),差异分别有统计学意义(P0.05)。体外实验表明,AsPC-1细胞内Slug表达沉默后,血管密度明显降低,血管生成被抑制,细胞存活率明显降低。结论RNA干扰Slug基因抑制胰腺癌细胞生长、侵袭转移和血管生成,Slug可能成为胰腺癌基因治疗的新靶点。     

不同浓度胰岛素对体外培养新生鼠心肌细胞生长和增殖的影响

背景：小鼠高胰岛素血症模型研究发现，高胰岛素可引起心肌肥厚的发生。 目的：观察胰岛素对体外培养的新生鼠心肌细胞增殖和肥大的浓度效应。 设计、时间及地点：细胞学体外观察，于2006—01／2007-03在新乡医学院解剖学与组织胚胎学重点学科实验室完成。 材料：1—3d龄Wistar新生鼠20只，胰岛素为美国sigma公司产品。 方法：采用胰蛋白酶消化法和差速贴壁法体外分离培养和纯化新生鼠心室肌细胞，分别加入10^-8，10^-7，10^-6mol／L胰岛素处理48h，并设立空白对照组，细胞周期分析选取10^-7mol／L胰岛素组。 主要观察指标：显微测量细胞直径、细胞活力和细胞计数，免疫细胞化学染色观察心肌细胞中细胞周期素E的变化。 结果：各组心肌细胞活力均在90％以上。与空白对照组比较，10^-8，10^-7，10^-6mol／L胰岛素组心肌细胞长径和短径均显著增加（t=2．7815，P〈0．01）；10^-8，10^-7mol／L胰岛素组心肌细胞数目无明显变化（P〉0．05），10^-6mol／L胰岛素组心肌细胞数目显著下降（f=1．9762，P〈0．05）；10^-7mol／L胰岛素组心肌细胞内细胞周期素E阳性颗粒吸光度值明显下降（t=2．1743，P〈0．05），平均灰度值明显增加（t=-2．4587，P〈0．05）。 结论：10^-8～10^-6mol／L胰岛素具有促进新生鼠心肌细胞肥大的作用，但无法促进心肌细胞增殖。     

维拉帕米对先天性心脏病左室心钠素的影响

在２２例先天性心脏病患者（ＣＨＤ）行右心导管检查中，通过检测应用维拉帕米（ＶＰ）前后的右室血浆心钠素（ＡＮＦ）浓度和血流动力学变化。结果显示：①应用ＶＰ前ＡＮＦ与平均肺动脉压（ｍＰＡＰ）明显正相关；②应用ＶＰ后伴肺动脉高压（ＰＡＨ）的ＣＨＤ患儿ＡＮＦ浓度与ｍＰＡＰ均明显降低；而肺动脉压正常患儿无明显变化。③ＶＰ对平均右房压，平均右室压和平均心率均无影响，本文提示钙拮抗剂－维拉帕米可降低ＣＨＤ伴ＰＡ