门诊女性STD患者感染EB病毒PCR检测结果分析

目的:了解泸州地区门诊女性STD患者生殖道感染EB病毒的现况。方法:采用聚合酶链反应(PCR)技术检测386例门诊女性STD患者生殖道EB病毒。结果:在386例患者中,有91例被检出感染了EB病毒,其阳性检出率为23.58%(91/386);其中单纯感染EB病毒者15例,在EB病毒感染者中阳性率为16.48%(15/91);混合感染者76例,阳性率为83.52%(76/91)。结论:女性STD患者对EB病毒具有易感性,用PCR技术进行检测具有简便、快捷、准确、特异性高的特点,检测的结果可作为诊断生殖道感染EB病毒的依据。     

荧光定量PCR检测人乳头瘤病毒6/11型女性生殖道感染

[目的]了解女性阴道炎患者人乳头瘤病毒6/11型(HPV6/11)的感染情况。[方法]应用荧光定量PCR(FQ-PCR)技术检测108例门诊患者阴道分泌物中HPV6/11的病毒拷贝数。[结果]共检出HPV6/11阳性44例,阳性率为40.74%;21～40岁年龄组感染阳性率较高。[结论]女性生殖道HPV6/11感染以中青年为主。FQ-PCR检测HPV敏感、快速、准确,对临床具有较大的指导意义。     

多重PCR检测在严重脓毒症感染患儿应用的临床意义

目的研究多重PCR检测在严重脓毒症感染患儿中的应用及临床意义,为指导临床治疗提供依据。方法选取2014年10月-2015年10月医院诊治192例严重脓毒症并发感染患儿资料进行分析,患儿入院后进行常规方法检测,利用多重PCR技术定量检测患儿脑脊液EB病毒(EBV)、单纯疱疹病毒(HSV)、巨细胞病毒(CMV)以及肺炎支原体(MP)的核酸含量,并与脑脊液中特异性抗体结果进行比较,分析多重PCR在严重脓毒症并发感染患儿中的应用效果。结果入选192例患儿,84例阳性,阳性率为43.8%,且患儿主要集中在(3~6)岁年龄段;84例患儿脑脊液DNA阳性主要分布在EBV,占46.4%,其次分布HSV,占28.6%;84例患儿中,22例重型,62例轻型,重型患儿EBV-IgM、HSV-IgM、CMV-IgM以及MP-IgM水平,显著高于轻型患儿(P0.05);192例患儿中,45例IgM阳性,145例IgM阴性;患儿中多重PCR检测184例阴性,84例阳性。结论严重脓毒症并发感染患儿采用多重PCR技术临床诊断效果理想,能成为脓毒症患儿常规检测手段,为提高临床诊断效果具有重要意义。     

379例女性泌尿生殖道感染者病原体研究

对江门地区379例女性泌尿生殖道感染者病原体研究发现，解脲支原体(UU)阳性102例(26．9l％)，淋球菌(NG)阳性99例(26．12％)，沙眼衣原体(CT)阳性49例(12．93％)，合并感染UU、NG及CT的有75例(19．79％)。其他病原体检测发现真菌阳性56例(14．78％)，滴虫阳性18例(4。75％)。结果提示：女性泌尿生殖道感染的常见病原体主要是解脲支原体和淋球菌，其次为真菌、沙眼衣原体、滴虫。     

脑膜炎奈瑟菌检测及基因分群

目的 建立多重聚合酶链反应(PCR)技术对脑膜炎奈瑟菌(Neisseria meningitidis,Nm)的快速诊断及分群方法.方法 应用多重PCR技术对本实验室保存的70株已鉴定Nm进行核酸鉴定及基因分群,同时检测23例流行性脑脊髓膜炎(简称流脑)疑似病例脑脊液标本中脑膜炎奈瑟菌特异性DNA片段.用传统的细菌培养法和血清凝集法作对照,比较其特异性.结果 68株Nm的多重PCR检测结果与血清分群结果一致,2株血清未能分群的Nm经多重PCR检测为C群;23例流脑疑似病例脑脊液标本经多重PCR检测有5例为C群,1例为A群,1例为B群,阳性检出率为30.43％.传统的病原分离培养、生化鉴定和血清学鉴定出4例为C群,阳性检出率为17.39％.结论 多重PCR技术对脑膜炎奈瑟菌检测的特异性优于传统的细菌培养法以及血清凝集法.     

门诊女性生殖道单纯疱疹病毒Ⅱ型感染情况分析

目的 了解女性泌尿生殖道感染者单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)的感染情况,为早期诊断及治疗提供依据.方法 应用荧光定量PCR技术对158例女性患者生殖道分泌物进行HSV-Ⅱ-DNA检测,同时以40名健康体检妇女作为对照组.结果 在158例生殖道感染者中有48例HSV-Ⅱ阳性,阳性率为30.4%,明显高于对照组(7.5%)...     

胃癌患者癌组织中EB病毒感染相关性分析

目的 调查唐山地区胃癌组织中EB病毒的感染状况，以分析EB病毒相关胃癌(GC)的临床病理学特征。以及EB病毒在胃癌形成过程中的作用。方法 取自唐山市工人医院(130例)、开滦医院(57例)和唐山市卫生学校附属医院(15例)病理科2001～2003年储存的胃癌患者手术切除后石蜡包埋的组织标本共202例。标本经切片和常规脱蜡处理后提取DNA，经PCR进行β-actinDNA检测，阳性标本用PCR法检测EB病毒核抗原1(EBNA1)DNA。结果 202份标本β-aetinDNA阳性166例，阳性率为82％；166例标本中EBNA1PCR阳性14例，阳性率为8．4％；166例β-actin DNA阳性的胃癌标本中，腺癌150例，非腺癌16例，残胃癌15例。经EBNA1 PCR检测EB病毒DNA阳性例数在腺癌、非腺癌和残胃癌中分别为14，0，5，阳性率分别为9．3％，0％。33．3％。结论 EB病毒感染在唐山地区胃癌形成过程中可能起到一定的作用。     

女性泌尿生殖道炎患者人乳头状瘤病毒感染研究

目的研究女性泌尿生殖道炎症患者人乳头状瘤病毒(HPV)感染状况,为预防HPV感染和宫颈癌的发生提供试验依据。方法选择2012年3月-2013年2月妇科门诊就诊的泌尿生殖道炎症患者365例,采用HPV基因分型技术对其宫颈分泌物进行HPV-DNA分析,数据采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果 365例患者中HPV-DNA阳性167例,阳性率为45.7%,共检测到16种HPV高危型和5种低危型;仅一种HPV基因型阳性的患者为122例,其中高危型为99例占81.1%,低危型为23例占18.9%,以HPV16型为最多占29.5%,其次为HPV 58型占19.7%;HPV多重感染为45例,主要以2种高危型多重感染或1种高危型和1种低危型多重感染为主,共32例占71.1%。结论女性泌尿生殖道炎症患者高危型HPV感染率较高,宜常规开展HPV基因检查,预防宫颈癌的发生。     

女性生殖道支原体感染及其对常用抗生素的耐药性分析

目的了解女性生殖道支原体感染及耐药情况。方法应用支原体培养试剂盒进行检测,对580例支原体培养阳性结果进行分析。结果女性生殖道支原体感染阳性率44.96%,其中解脲支原体(UU)阳性占90.69%,人型支原体(MH)阳性占2.07%,UU-MH阳性占7.24%,对交沙霉素、左氧氟沙星、米诺环素耐药性较低,UU-MH混合感染耐药性增高,且有多重耐药性。结论本地区女性生殖道支原体感染宜用交沙霉素、左氧氟沙星、米诺环素治疗,支原体培养和药敏试验结果有助于指导临床合理用药。     

荧光定量PCR对194例女性生殖道人乳头瘤病毒感染分型

目的 了解女性生殖道人乳头瘤病毒(HPV)感染的型别组成.方法 用荧光定量 PCR(FQ-PCR)技术对194例己确诊为HPV感染的门诊标本进行HPV 6、11型和HPV16、18型的分型检测.结果 194例女性生殖道HPV感染相关疾病患者,FQ-PCR检测HPV 6、11、 16、18型阳性总检出率为98. 1%(190/194).其中尖锐湿疣患者HPV6/11型阳性为100%(118/118), HPV16/18型阳性17.7%(21/118);重度宫颈糜烂患者HPV6/11型阳性为10%(3/30),HPVl6/18型阳性66.7%(20/30)低度子宫颈上皮内瘤样变化INl)HPV6/11型阳性为91.3%(21/23),上皮内瘤样病变Ⅱ、III(CINⅡ、Ⅲ)级病变HPV6/11型阳性为17.2%(2/13),HPV16/18型阳性为92.3%(12/13).宫颈癌患者HPV16/18型阳性为100%(10/10).正常对照组阳性率为6.7%(2/30).经χ2检验(P＜0.01),具有统计学意义. 结论 在女性生殖道UFV感染中HPV6、11、16、18占绝对优势.FQ-PCR对HPV的分型特异性强,可避免假阳性的发生,对临床诊治生殖道感染患者有很重要的临床价值.     

多重荧光定量聚合酶链反应对呼吸道感染患儿支原体和衣原体感染的诊断价值

目的 探讨多重荧光定量PCR技术(TaqMan探针法)在检测呼吸道感染住院患儿中肺炎支原体(MP)、肺炎衣原体(CP)和沙眼衣原体(CT)的应用价值.方法 构建质粒标准品,梯度稀释后进行扩增建立标准曲线检测多重荧光定量PCR方法的扩增效率,并验证其敏感性、特异性和重复性;收集151例疑似呼吸道感染住院患儿的咽拭子样本,采用多重荧光定量PCR技术检测MP、CP和CT基因片段,其中128例样本同时进行MP-IgM和CP-IgM的血清学检测,评价该方法在临床检测中的应用价值.结果 本实验中MP、CP和CT三种病原体的引物和探针的扩增效率分别达到109.20％、116.90％和112.80％,三种病原体的最低检出浓度分别为50、25和25 pg/μL,与其他已知病原体不存在交叉反应;不同批次间三种病原体的扩增Ct值的变异系数均小于3％.151份样本中,多重PCR检测出MP、CP和CT阳性率分别为23.84％(36份)、17.88％(27份)和2.65％(4份),128份样本中MP-IgM阳性检出率为22.65％;CP-IgM阳性检出率为14.06％.结论 多重荧光定量PCR方法可以为临床幼儿呼吸道感染病原体的早期检测提供快速可靠的辅助诊断依据.     

荧光定量PCR法和显色培养法检测孕妇生殖道无乳链球菌感染阳性率比较

目的比较荧光定量PCR法和显色培养法检测孕妇生殖道无乳链球菌(GBS)感染阳性率,了解检测效果,分析两种方法的优缺点,选择合适的检测方法,提高GBS检出率,保护易感人群。方法应用荧光定量PCR法和显色培养法检测998例妊娠女性孕晚期生殖道GBS感染阳性率,与原有血平板培养法比较,评价这两种检测方法的结果。结果在998例样本中,血平板培养法检测出阳性标本28例,阳性率为2.81%,显色培养法检测出阳性标本61例,阳性率为6.11%,荧光定量PCR法检测出阳性标本84例,阳性率为8.42%。荧光定量PCR法与显色培养法检测GBS阳性率与血平板培养法比较差异均有统计学意义(P<0.05),荧光定量PCR法和显色培养法检测GBS阳性率比较差异也有统计学意义(P<0.05)。结论显色培养法和荧光定量PCR法检测GBS的检出率明显高于血平板培养法,其中荧光定量PCR法检测阳性检出率高于显色培养法。筛查孕妇生殖道GBS带菌情况可指导临床医生对该菌进行预防性治疗,更好地保护易感人群,选择荧光定量PCR法更具优势。     

儿科重症监护室单一和多重呼吸道病毒感染对比分析

目的 探讨儿科重症监护室(PICU)患儿单一和多重呼吸道病毒感染情况的差异.方法 收集406例入住汕头大学医学院第二附属医院PICU合并有呼吸道感染患儿的咽拭子样本,采用多重PCR及常规PCR对咽拭子行16种呼吸道病毒检测,分析阳性病例的病毒感染情况及与患儿临床特征的关系.结果 406例样本中病毒检测阳性者252例,阳性率62.1％.阳性样本中,以其中鼻病毒(HRV)检出率最高,为105例(41.7％),其次为呼吸道合胞病毒(RSV)[63例(25.0％)]和腺病毒(HADV)[48例(19.0％)];单一病毒感染177例(70.2％),多重病毒感染75例(29.8％),包括66例双重病毒感染,9例三重病毒感染.多重病毒感染最多的病毒组合是HRV+RSV(16例).单一病毒感染和多重病毒感染的患儿中存在基础疾病的病例数分别为46例和6例,两者差异有统计学意义(x2=10.409,P＜0.01);而二者在性别、年龄、住院时间、上下呼吸道感染人数及小儿危重症评分上差异均无统计学意义(x2=3.430,Z=0.315,Z=0.336,x2=0.041,P均＞0.05).结论 呼吸道病毒是PICU中呼吸道感染性疾病的主要病原体之一;存在基础疾病的患儿以单一病毒感染为主,多重病毒与单一病毒感染对于疾病严重程度的影响没有明显差异.     

多重PCR技术检测儿童急性呼吸道感染DNA病毒方法的建立与应用

目的建立多重PCR技术检测儿童急性呼吸道感染DNA病毒的方法,以便及时监测并快速诊断急性病毒性呼吸道感染。方法参照NCBI数据库病毒核酸序列设计多重PCR引物,优化反应条件,并对392份儿童呼吸道标本进行检测,验证多重PCR反应的敏感度及特异性。结果采用多重PCR引物对人博卡病毒(h BOV)、KI多瘤病毒(KI)、腺病毒(Ad V)、WU多瘤病毒(WUPy V)、人细小病毒B19(HPVB19)5种DNA病毒进行扩增,分别获得404、324、248、77、128 bp片段,均无非特异性扩增条带,与设计相符;392份儿童呼吸道标本多重PCR扩增出190阳性标本,阳性率为48.46%(190/392),6个月~3岁以内婴幼儿阳性率70.00%(112/160)为最高。结论本研究初步建立了应用多重PCR技术快速检测儿童呼吸道标本中DNA病毒敏感性、特异性好的方法,6个月~3岁以内婴幼儿检出率高。     

女性生殖道尖锐湿疣传播途径的探讨

应用分子生物学技术——多聚酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)对临床和组织学确诊的女性生殖道尖锐湿疣(湿疣)、部分湿疣病人的内裤拭子和正常妇女阴道壁拭子的人类乳头瘤病毒DNA(HPV-DNA)进行检测。结果显示:尖锐湿疣病人绝大部分是由HPV感染所致(98.25％),湿疣病人的内裤拭子HPV-DNA阳性率为73.68％,正常妇女阴道壁拭子HPV-DNA阳性率为54.00％。结果提示:性交不是尖锐湿疣传播的唯一途径,病人污染物的接触和生殖道HPV的亚临床感染是尖锐湿疣传播中不可忽视的途径。     

女性泌尿生殖道感染患者支原体检测及药敏结果分析

目的分析女性泌尿生殖道感染患者支原体检测及耐药性情况。方法利用法国生物梅里埃公司生产的支原体IST2试剂盒进行支原体检测和药敏试验。结果926例女性泌尿生殖道感染患者中,支原体培养阳性453例,阳性率为48．9％。其中解脲脲原体（Uu）、人型支原体（Mh）及Uu＋Mh混合感染的阳性例数（率）分别为312（33．7％）、10（1．1％）、131（14．2％）。药敏结果显示,支原体对强力霉素、交沙霉素和原始霉素的敏感性最好,对环丙沙星的耐药率最高。菌株存在多重耐药现象,且9种抗生素中都有耐药株出现。结论女性泌尿生殖道感染患者支原体检出率较高,临床医师诊治前应尽可能进行支原体培养及药敏试验,以便合理、规范指导用药。     

三种检测泌尿生殖道沙眼衣原体方法的比较

目的　比较三种泌尿生殖道沙眼衣原体实验室检测方法。　方法　用单克隆抗体免疫荧光法 (IFA)、细胞培养法 (CC)和聚合酶链法 (PCR)平行检测 10 7例非淋泌尿生殖道炎症患者男性尿道或女性宫颈上皮细胞 ,比较三种方法的阳性检出率、敏感性、特异性和试验效率等。　结果　 10 7例标本经 IFA、CC、PCR检测 ,分别有 16 .8%、19.6 %、2 0 .6 %阳性 ;以细胞培养法结果为标准 ,IFA和 PCR的敏感性分别为 81.0 %和 10 0 % ;特异性均为 98.8% ;试验效率分别为 95 .3%和 99.1%。三种方法平行检测相同标本结果无差异。　结论　这三种方法均可应用于沙眼衣原体的诊断。     

大连地区1911例成年女性HPV亚型感染状况调查

目的:调查大连地区成年女性生殖道人乳头瘤病毒(HPV)亚型的感染状况,为宫颈癌的筛查及防治提供理论依据.方法:采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术对大连地区1 911例成年女性HPV的感染情况进行定性检测并加以分型.结果:在1 911例成年女性中,共检出HPV阳性374例,阳性率为19.57％,其中单一、双重、三重和四重基因型感染者分别为288例(占77.00％)、59例(占15.78％)、22例(占5.88％)和5例(占1.34％);单纯低危型感染67例(占17.91％),单纯高危型感染271例(占72.46％),低危型与高危型混合感染36例(占9.63％).共检出21种基因型,包括高危型HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83和低危型HPV6、11、42、43基因型,在高危型中以HPV16检出率最高(阳性率为5.65％),其次为HPV58(阳性率为3.03％)和HPV52(阳性率为2.93％);在低危型中以HPV43检出率最高(阳性率为2.83％),其次为HPV6(阳性率为1.41％)和HPV42(阳性率为0.99％).结论:大连地区1 911例成年女性HPV感染阳性374例,以单一基因型和单纯高危型感染为主;共检出21种基因型,高危型和低危型分别以HPV16和HPV43检出率最高.对成年女性开展HPV基因分型检测对于HPV感染和宫颈癌的诊断、治疗具有重要意义.     

女性人类免疫缺陷病毒感染与宫颈人乳头瘤状病毒感染的相关性分析

目的探讨分析女性人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,HIV)与宫颈人乳头瘤状病毒(Human papillomavirus,HPV)感染的相关性。方法选择2014年6月-2016年6月自愿接受HPV筛查的HIV阳性女性161例为HIV阳性组,将自愿接受HPV筛查的HIV阴性女性180例为HIV阴性组,采取PCR与膜杂交法检测受试者宫颈脱落细胞以及宫颈黏液标本,并进行HPV病毒基因分型,分析HIV阳性患者HPV感染对细胞免疫影响。结果 HIV阳性组高危型HPV感染率为38.51%,低危型HPV感染率为15.53%,HPV多重感染率为19.25%;HIV阴性组高危型HPV感染率为16.11%,低危型HPV感染率为5.56%,HPV多重感染率为7.78%。HIV阳性组高危型HPV感染率、低危型HPV感染率以及HPV多重感染率均显著高于HIV阴性组(P0.05)。在HIV阳性患者中,合并HPV感染患者其CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平显著低于未合并HPV感染患者(P0.05);合并HPV感染患者CD8~+水平显著高于未合并HPV感染患者(P0.05);HIV阳性合并HPV阳性患者获得性免疫缺乏综合征(Acquired Immune Deficiency Syndrome,AIDS)临床分期较HIV阳性HPV阴性患者更为严重(P0.05)。结论HIV阳性女性较HIV阴性女性感染HPV病毒的风险更高,可能与机体T淋巴细胞免疫抑制以及AIDS临床分期有关,应将HIV感染女性作为HPV感染的高危人群进行筛查,以及时确定预防和治疗方案。     

直接免疫荧光法与多重逆转录聚合酶链反应对呼吸道感染常见病毒的诊断价值

目的 探讨直接免疫荧光法(DFA)和多重逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对呼吸道常见病毒人鼻病毒(HRV)感染患者分泌物的检测,判断其临床诊断价值.方法 选取2010年2月-2011年12月收集的急性呼吸道感染患儿鼻咽分泌物210例,分别用DFA和RT-PCR进行检测,对两组测定方法的检测结果进行判定.结果 多重RT-PCR检出112份阳性标本,阳性率为53.33％,DFA检测出89份阳性标本,阳性率为42.38％,两组比较,差异有统计学意义(x2=27.623,P＜0.01).结论 DFA检测方法可以广泛适用于临床检测中;多重RTPCR检测方法的敏感性高,检测病毒的范围广,可以做亚型鉴定方法,适用于呼吸道病毒流行病学的调查研究.