肝星状细胞及相关细胞因子在肝纤维化形成中的作用

肝纤维化(hepatic fibrosis)是指肝脏内弥漫性细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积的病理过程.肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)被认为是ECM的主要来源细胞,在肝纤维化发生发展中起着关键作用.另外,各种病因引起肝细胞损伤时,Kupffers细胞(KF),肝窦内皮细胞等分泌一系列细胞因子,通过旁分泌和自分泌方式作用于邻近的HSC,影响其增殖,趋化和ECM代谢.因此,HSC及细胞因子与肝纤维化的发生发展关系极为密切,阐明其关系,有助于以HSC为靶点的肝纤维化方面的研究,现就其关系分别综述如下.     

T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型的建立及形态学观察

目的 建立刀豆蛋白A诱导的T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型凌晨进行形态学观察。方法 BALB/C小鼠随机分组。模型组、CD4抗体处理组、CD8抗体处理组、地塞米松处理组和裸鼠组静脉注射刀豆蛋白A;CD4、CD8抗体处理组、地塞米松注射组和裸鼠组共注射5周,模型组共注射20周,分别于相应的时间点取血、取肝脏组织统一保存。检测ALT水平,进行肝脏组织苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色和Van Gieson胶原纤维染色。结果 模型组接受刀豆蛋白A刺激后,ALT水平明显高于正常对照组,而CD4抗体处理组、地塞米松处理组和裸鼠组ALT水平明显低于模型组,CD8抗体处理组ALT水平则与阳性组无明显差异。肝组织冰冻切片免疫组织化学染色提示肝组织内淋巴细胞浸润以CD4^ T淋巴细胞为主。模型组病理检查提示肝纤维化发生。结论 反复刀豆蛋白A刺激可以建立T淋巴细胞介导的小鼠免疫性肝纤维化模型。     

细胞因子对肝纤维化形成的影响

本文简介肝纤维化的概念,并就转化生长因子、血小板衍生的生长因子、肿瘤坏死因子-α、白介素、干扰素-γ、肝细胞生长因子等细胞因子在肝纤维化形成过程中的作用进行综述。     

氧化苦参碱对免疫性肝纤维化的胶原纤维合成和TGF—β1mRNA的影响

目的：研究以氧化苦参碱对小鼠免疫性肝纤维化胶原纤维合成和TGF－β1mRNA的影响。方法：将BABL／c小鼠随机分成正常对照组、阳性对照组、氧化苦参碱小剂量、大剂量治疗组,阳性对照组和氧化苦参碱治疗组每周静脉注射1次刀豆蛋白A,共20W。氧化苦参碱治疗组分别腹腔注射氧化苦参碱30mg/kg、60mg/kg。共20W,分别于注射刀豆蛋白A后5、12和20W取血低温保存;并每次处死1批小鼠取肝脏组织液氮低温保存,常规HE染色、Van Gieson胶原纤维染色,图像分析系统定量分析肝内纤维组织含量。抽提小鼠肝脏组织总RNA,RT－PCR方法扩增检测肝组织内TGF-β1、β-actin。凝胶图像分析系统扫描扩增产物的灰度值,以β-actin作为内参照,计算相对表达量。结果：氧化苦参碱治疗组血清ALT含量及肝组织内炎症活动度、纤维含量均低于阳性对照组,而且呈剂量依赖性,TGF－βmRNA相对表达量下降。结论：氧化苦参 碱有减轻小鼠肝脏炎症活动度并可能通过下调TGF－β1的表达而抑制小鼠免疫性肝纤维化的发生。     

细胞因子在肝纤维化中的作用

细胞因子在肝纤维化中的作用刘海林，杨少平，李定国，陆汉明近年来，细胞因子在肝纤维化中的作用引起了广泛重视。大量的深入研究，特别是分子生物学技术的应用，使人们对细胞因子在胶原和基质代谢中的调控作用达到了分子水平，并为临床治疗肝纤维化提供了新的可能途径。...     

细胞因子对贮脂细胞的肝纤维化

在肝纤维化的发病过程中，贮脂细胞发挥重要的作用。ＦＳＣ的增殖、活化及其合成细胞外基质等作用涉及到诸多因素的参与，其中细胞因子对其的调控作用可能最为重要。     

肝纤维化中decorin与某些细胞因子的关系

肝纤维化由多种原因造成肝脏损伤,引起肝内细胞外基质(ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｍａｔｒｉｘ,ＥＣＭ)过度沉积。ＥＣＭ由胶原、糖蛋白及蛋白多糖(ｐｒｏｔｅｏｇｌｙｃａｎ,ＰＧ)组成。ＰＧ是肝中ＥＣＭ的主要非胶原性成分,与组织形态发生、细胞分化、运动、增殖及胶原纤维形成密切相关。ＰＧ是一群异质性大分子糖复合物,其中以ｄｅｃｏｒｉｎ与肝纤维化关系最为密切。本文就ｄｅｃｏｒｉｎ与肝纤维化中某些细胞因子(ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ,ＣＫｓ)的相互关系作一综述。1　ｄｅｃｏｒｉｎ一般特性ｄｅｃｏｒｉｎ是一种主要存在于结缔组织中…     

细胞因子与肝纤维化发病机制研究进展

本文从肝脏细胞外基质的作用及其调节、参与肝纤维化机制的主要细胞因子、细胞因子网络作用和肝纤维化过程中细胞因子水平变化四方面综述了近年国外对细胞因子与肝纤维化机制的研究进展，其中细胞因子致纤维化作用与抗纤维化作用失衡可能是肝纤维化发生发展的重要机制。     

激活素和卵泡抑素mRNA在肝纤维化形成过程中的作用

目的 观察四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导实验性肝纤维化模型大鼠肝纤维化形成过程中激活素（ＡＣＴ）βＡ、βＣ、βＥ及卵泡抑素（ＦＳ）ｍＲＮＡ的表达。方法 ４０％ＣＣｌ４皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型，注射 ＣＣｌ４后１、２、３、４、５、６、７周分批处死动物，每次 ６～１２只，采用半定量 ＲＴ—ＰＣＲ检测 ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ亚基及 ＦＳｍＲＮＡ的表达。结果 正常肝脏可检测到ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ及ＦＳ亚基ｍＲＮＡ，往射ＣＣｌ４２～３周后，βＡ水平下降至检测不到的水平，４周以后，又逐渐升高，注射 ６～７周时其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；注射ＣＣｌ４１～４周可检测到βＣ亚基ｍＲＮＡ，５～７周后其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。βＥ亚基ｍＲＮＡ在 ＣＣｌ４注射１～５周后水平下降至检测下到的水平，注射 ６～７周后其表达水平则明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。ＣＣｌ４注射后的各个时期均未检测到ＦＳ ｍＲＮＡ表达。结论 肝纤维化形成过程中ＡＣＴ、ＦＳ表达发生了不同的变化，ＡＣＴ—ＦＳ系统失衡可能参与了肝纤维化的形成。     

可溶性细胞因子对肝纤维化的调节作用

在慢性肝病的发展过程中,肝纤维化的形成是一个缓慢复杂的过程。不管其原因如何,都是肝脏受到外界刺激引起的免疫反应下,一系列的体液因子、多种细胞和细胞外基质蛋白(ECM)间复杂的相互作用的结果。在纤维化发生发展的过程中,细胞因子的地位和作用是近年来非常活跃的领域。一些与肝纤维化关系密切的细胞因子已被鉴定。1 转化生长因子β_1(Transforming Growth Factorsβ_1,TGF-β_1) TGF一β_1为双硫键联结的二聚体碱性蛋白,分子量为25KD,体内多种细胞如淋巴细胞、血小板、巨噬细胞等都可以合成与分泌TGF-β_1,其中以血小板内含量最多。TGF-β_1具有调节细胞生长和分化的作用,是细胞生长的双向调节剂。它对细胞有抑制或促进作用,取决于特定的细胞。 TGF-β_1在肝纤维化中的作用日益受到重视。Czaja     

化浊软坚汤对免疫性肝纤维化大鼠血清学指标的影响

[目的]观察化浊软坚汤对免疫性肝纤维化大鼠血清学指标的影响,探讨其作用机制及疗效。[方法]将40只SD大鼠随机分为正常对照（正常）组、模型对照（模型）组、阳性对照组和观察组,每组10只,除正常组外,后3组大鼠造模;阳性对照组造模同时灌服复方鳖甲软肝片;观察组造模同时灌服化浊软坚汤。实验结束取大鼠血清检查肝功能[丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）]及肝纤维化指标[透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）]。[结果]观察组ALT、AST、HA、LN均较模型组明显降低（均P〈0．05）。[结论]化浊软坚汤以浊毒立论,具有抗纤维化作用。     

免疫因素在肝纤维化过程中的作用的研究进展

肝纤维化是肝脏对各种原因所致肝损伤的创伤愈合反应,是组织发生修复反应时细胞外基质(ECM)合成、降解与沉积不平衡而引起的病理过程.肝纤维化的形成涉及多种细胞、细胞因子及ECM的变化.其中肝星状细胞(HSCs)激活并转化为肌成纤维细胞是肝纤维化发生、发展的核心环节,各种致肝纤维化因素均把HSCs作为最终靶细胞,促使其转化为肌成纤维细胞而导致肝纤维化的发生.影响肝纤维化形成的因素很多,至今尚未完全阐明.临床资料表明,免疫抑制对肝纤维化的进程起明显的促进作用,在HCV和HIV联合感染或肝移植需长期应用免疫抑制药物的患者,肝纤维化进程加快.本文就免疫因素在肝纤维化形成过程中的作用的研究进展作一综述.     

蓝莓对免疫性肝纤维化大鼠肝组织TLR4,TLR9表达的影响

目的:探讨蓝莓抗氧化作用对猪血清免疫性肝纤维化大鼠肝组织Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)和Toll样受体9(TLR9)蛋白表达的影响.方法:60只♂Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、蓝莓低、中、高剂量防治组(C、D、E组)、复方鳖甲软肝片防治组(F组).除A组外,其余各组均腹腔注射猪血清制备大鼠肝纤维化模型.C、D、E、F组在造模同时分别给予蓝莓原浆或复方鳖甲软肝片灌胃,1次/d,共12wk.第12周末处死大鼠,计算大鼠肝脏指数,行肝脏病理组织学检查,测定各组大鼠血清ALT和AST水平、肝组织匀浆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,免疫印迹法(western blot,WB)和免疫组织化学法检测TLR4和TLR9蛋白质在肝脏组织中的表达.结果:各组大鼠血清ALT、AST水平无明显差异(F=4.274,0.917,P>0.05);与B组比较,D,E组肝组织匀浆SOD活性、GSH含量明显升高(F=6.662,61.472,P<0.05);肝脏指数、MDA及Hyp含量明显降低(F=3.972,42.755和41.265,P<0.05);肝纤维化程度明显减轻(F=63.339,P<0.05),胶原表达减少;E组大鼠肝组织TLR4和TLR9蛋白质表达明显减少(F=6.932和7.534,P<0.05).结论:TLR4和TLR9蛋白质表达增加可能与免疫性肝纤维化的发生发展有关.蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化有一定的预防作用.     

Effects of arginine supplementation on splenocyte cytokine mRNA expression in rats with gut-derived sepsis

AIM: To investigate the effects of arginine (Arg)-enriched diets before sepsis and/or Arg-containing total parenteral nutrition (TPN) after sepsis or both on cytokine mRNA expression levels in splenocytes of rats with gut-derived sepsis. METHODS: Rats were assigned to four experimental groups. Groups 1 and 2 were fed with a semipurified diet, while groups 3 and 4 had part of the casein replaced by Arg which provided 2% of the total calories. After the rats were fed with these diets for 10 d, sepsis was induced by cecal ligation and puncture (CLP), at the same time an internal jugular vein was cannulated. All rats were maintained on TPN for 3 d. Groups 1 and 3 were infused with conventional TPN, while groups 2 and 4 were supplemented with Arg which provided 2% of the total calories in the TPN solution. All rats were killed 3 d after CLP to examine their splenocyte subpopulation distribution and cytokine expression levels. RESULTS: Plasma interleukin (IL)-2, IL-4, tumor necrosis factor-α(TNF-α) and interferon (IFN-γ) were not detectable 3 d after CLP. There were no differences in the distributions of CD45Ra+, CD3+, CD4+, and CD8+ cells in whole blood and splenocytes among the four groups. The splenocyte IL-2 mRNA expression in the Arg-supplemented groups was significantly higher than that in group 1. IL-4 mRNA expression in groups 3 and 4 was significantly higher than that in groups 1 and 2. The mRNA expression of IL-10 and IFN-γ was significantly higher in group 4 than in the other three groups. There was no difference in TNF-α mRNA expression among the four groups. CONCLUSION: The influence of Arg on the whole blood and splenic lymphocyte subpopulation distribution is not obvious. However, Arg administration, especially before and after CLP, significantly enhances the mRNA expression levels of Th1 and Th2 cytokines in the spleen of rats with gut-derived sepsis.     

Hepatic inflammatory cytokine mRNA expression in hepatitis C virus-human immunodeficiency virus co-infection

Summary.  Although epidemiologic studies have documented that hepatitis C virus (HCV)/human immunodeficiency virus (HIV) co-infected patients have accelerated fibrogenesis, especially those with CD4⁺ cell counts <200 cells/mm³, the pathogenic mechanisms are poorly understood. We investigated whether severe immunodeficiency in co-infection is associated with changes in intrahepatic inflammatory cytokine mRNA levels. We measured interferon (IFN)-γ, tumour necrosis factor-α, transforming growth factor (TGF)-β₁, interleukin (IL)-4, IL-10, IL-12p35 and IL-12p40 mRNA levels by real-time PCR performed on liver samples from HCV mono-infected ( n  = 19) and HCV/HIV co-infected ( n  = 24) patients. Co-infected patients had decreased intrahepatic mRNA levels of IFN-γ ( P  = 0.09), IL-4 ( P  = 0.05) and IL-12p35 ( P  = 0.04) compared with mono-infected patients, while IL-10 was increased ( P  = 0.07). In co-infected patients, IFN-γ mRNA levels increased linearly with increasing peripheral CD4⁺ cell counts by 1.23 times relative to the calibrator for every 100 CD4⁺ cells/mm³ increase ( P  = 0.02). No other cytokines were significantly associated with CD4⁺ cell counts. In conclusion, HIV-induced lymphopenia may result in hepatic inflammatory cytokine suppression in HCV/HIV co-infection. Intrahepatic IFN-γ levels are significantly reduced in patients with advanced immunodeficiency. Further studies are needed to assess whether decreased IFN-γ secretion by HCV-specific CD4⁺ cells may account for accelerated fibrogenesis in these patients.     

Changes in glutamate-cycle enzyme mRNA levels in a rat model of hepatic encephalopathy

To detect possible changes in the regulation of glutamate/-aminobutyric acid (GABA) enzymes at the level of gene expression in a thioacetamide-induced rat model of acute hepatic encephalopathy, we have examined changes in the mRNAs of four glutamate/GABA enzymes by quantitative RNA blot hybridization analysis. Such changes could reflect cell adaptation to excess ammonia or some other associated metabolic stress. The mRNA levels of glutamate dehydrogenase (GDH) decreased similarly in three different brain regions, whereas those of glutamine synthetase (GS) and glutaminase (GA) increased. The mRNA levels of glutamate decarboxylase (GAD) were unchanged. The results indicate that some effect of liver damage, presumably hyperammonemia, affected the expression of some, but not all, genes associated with ammonia and glutamate metabolism in the brain. This adaptation of gene expression to secondary effects of ammonia on brain amino acid neurotransmitter metabolism or brain energy metabolism could play a role in the physiological changes observed in hepatic encephalopathy.     

血吸虫病肝纤维化过程中肝脏前胶原mRNA的表达变化研究

目的阐明血吸虫病肝纤维化过程中,肝脏前胶原基因表达的动态变化规律。方法应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ核酸分子杂交技术,检测血吸虫感染小鼠在肝纤维化过程中肝脏前胶原ｍＲＮＡ表达量的变化。结果小鼠感染血吸虫后６周时,肝内α１（Ⅰ）和α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量即有显著增加,８周时,α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量已达高峰,α１（Ⅲ）和α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达高峰在１０周时出现。１２～１６周时,三者的表达量略有下降,２０周时均又回升。在整个肝纤维化过程中,α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ呈优势表达,α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ次之,α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达量较前二者稍低,但其表达水平的增幅最大。结论肝脏前胶原ｍＲＮＡ表达水平的检测能敏感地反映肝纤维化的趋向,α１（Ⅵ）前胶原ｍＲＮＡ的表达在肝纤维化形成中可能起重要作用。     

保脾手术对晚期血吸虫病肝纤维化及相关细胞因子的影响

目的探讨保脾手术对晚期血吸虫病肝纤维化及相关细胞因子的影响。方法新西兰兔50只随机分为正常对照组（NCG）10只、模型对照组（MCG）12只、全脾切除组（TSG）14只、脾大部切除组（SSG）14只。后3组（MCG、TSG、SSG）先制作血吸虫病肝纤维化模型。感染后15周,NCG组和MCG组行假手术,TSG组行全脾切除术,SSG组行脾大部切除术（保留1/3脾组织）。观察各组家兔感染后8、15、21周血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）水平的动态变化和术前、术后6周肝组织转化生长因子β1（TGF-β1）、Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达变化。结果感染尾蚴后8周,模型家兔血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均较正常对照组显著升高（P均〈0.01）;至感染后15周（术前）,血清TNF-α、IL-6、IL-1β已显著回落（P均〈0.01）;术后第6周不同手术方式之间比较,血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平差异无统计学意义（P〉0.05）。术前模型组家兔肝组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达显著高于正常对照组（P〈0.01）;术后6周,不同手术方式之间比较,肝组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原表达差异无统计学意义（P〉0.05）。结论晚期血吸虫病行保脾手术不会加重肝纤维化,可能与晚期血吸虫病TGF-β1、TNF-α、IL-6、IL-1β水平已显著回落,此时切脾不影响这些细胞因子水平有关。     

AST/PLT和GGT/PLT比值对肝纤维化的诊断价值

目的探讨AST/PLT和GGT/PLT比值对肝纤维化的诊断价值。方法比较慢乙肝组和正常对照组,不同炎症分级(G)和纤维化程度分期(S)的慢乙肝病例组间血常规、肝功能和血清肝纤维化常规四项指标(HA、CⅣ、PCⅢ和LN)的差异。结果不同程度的S1~4和G1~4的AST/PLT、GGT/PLT、HA、CⅣ、PCⅢ和LN 6项指标与正常人比较,差异均非常显著(P<0.001)。AST/PLT和GGT/PLT比值的阳性率在不同程度的S和G之间均无显著性差异。肝纤维化常规四项指标中阳性率以HA为佳,与前两比值之间无显著差异。结论AST/PLT和GGT/PLT对肝纤维化的诊断有一定价值,但需排除其他原因引起AST、GGT增高和PLT(血小板计数)减少。