组织胺引起的豚鼠心室肌迟后去极化和触发激动

组织胺4.85×10~(-6)mol/L使动作电位时程APD_(50)和APD_(90)分别缩短24.7%和27.3%,并产生迟后去极化(DAD)和触发激动;而对跨膜电位其它参数无明显影响.提示组织胺的致室性心律失常作用,很可能与促进心肌细胞慢钙内向电流而引起DAD和触发激动有关.     

关附甲素对心肌细胞电生理特性的影响

用细胞内微电极术结合微机自动分析,研究关附甲素(GFA)对豚鼠乳头状肌快反应动作电位的影响。结果表明GFA(2.6～260μmol/L)可依浓度降低APA和V_(max),增加V_(MT),且使V_(max)恒定出现在膜电位除极至-27 SD6 mV水平。GFA(2.6～26μmol/L)使APD_(50)、APD_(90)和ERP延长,82～260μmol/L时,APD_(50)、APD_(90)缩短,而ERP/APD_(90)增大。GFA对V_(max)的抑制作用呈明显的频率依赖性和电位依赖性,并使心肌细胞的兴奋性降低。表明GFA主要是通过对快Na通道阻滞而发挥其抗心律失常作用的。     

西咪替丁对豚鼠正常和缺氧心室肌细胞跨膜电位的影响

本文研究西咪替丁(Cim)对正常和缺氧豚鼠心室肌细胞跨膜电位的影响.结果显示,Cim 2.1×10~(-5)mol/L使豚鼠心室乳头肌APD_(50)和APD_(90)从对照的166.4±1.1和200.6±1.1ms分别延长至189.5±1.2和231.3±1.1ms;使缺氧60min时APD_(50)和APD_(90)由119.7±1.4和158.6±1.2分别延长至152.3±1.3和195.7±1.2ms,并使缺氧心肌动作电位其他参数均有所改善.提示Cim对缺氧心室肌具有保护作用,并有抗心律失常作用,其机理可能与Cim减少Ca~(2 )内流入心肌细胞有关     

外源性ATP对豚鼠缺氧心室肌跨膜电位和收缩功能的影响

本实验观察外源性 ATP 对正常和缺氧状态下豚鼠心室乳头肌跨膜电位和收缩功能的影响。在正常供氧组,ATP 对动作电位的0期去极化幅度、时程(APD_(10)、APD_(50)、APD_(80))、复极2期与3期斜率均无明显变化(P>0.05)、而收缩幅度在加入10~(-4)M ATP 后1～2分钟内有短暂减弱(P<0.01).缺氧使心室肌细胞动作电位时程(APD_(10)、APD_(50)、APD_(80))缩短和复极2期斜率增大,加入10~(-4)M ATP 能阻止上述变化进一步发展.10~(-4)M ATP 也能减慢缺氧心室肌收缩减弱的进展速度。上述结果提示,外源性 ATP 对缺氧心肌的膜电位与收缩机能具有一定的保护作用。     

低表达NADH脱氢酶[辅酶Q]铁硫蛋白4对乳鼠心肌细胞线粒体功能的影响

目的 探讨低表达NADH脱氢酶[辅酶Q]铁硫蛋白4(NDUFS4)蛋白对乳鼠心肌细胞线粒体功能的影响.方法 通过原代培养30只乳鼠心肌细胞,将培养出的心肌细胞80盘简单随机分为siRNA处理组和对照组,每组40盘细胞.siRNA处理组:在乳鼠心肌细胞上转染NDUFS4 siRNA;对照组:在乳鼠心肌细胞上转染无义siRNA.继续培养48 h后,比较两组细胞在NDUFS4蛋白的表达、线粒体膜电位、细胞活性氧簇(ROS)水平、线粒体钙离子摄取能力和线粒体呼吸控制率上的差异.结果 乳鼠心肌细胞NDUFS4蛋白表达处理组较对照组下调73.58％(P＜0.001),线粒体的膜电位处理组较对照组下降20.49％ (P＜0.05),同时ROS水平处理组较对照组上升32.11％(P＜0.001).乳鼠心肌细胞线粒体钙离子摄取能力处理组较对照组降低33.33％ (P ＜0.001),细胞最大呼吸速率处理组较对照组下降29.18％ (P ＜0.05).结论 NDUFS4在乳鼠心肌细胞线粒体中维持膜电位、ROS的生成、MPTP的开放和能量供应等过程中发挥着重要的功能.     

芬太尼对正常和缺氧心肌细胞动作电位的影响

本文报道了芬太尼对正常和缺氧心肌细胞动作电位的影响。浓度为60μg/L和100μg/L的芬太尼使正常心肌细胞动作电位之APD_(90)增宽,ERP延长。3μg/L、60μg/L和100μg/L的芬太尼使缺氧心肌细胞动作电位之APA和RMP增大,APD和ERP延长,ERP/APD_(90)比值增大。结果表明,芬太尼对缺氧心脏可能具有一定的抗心律失常作用。     

黄芪注射液对阿霉素中毒性小鼠心肌细胞凋亡及细胞线粒体膜电位的影响

目的观察黄芪注射液对阿霉素中毒性小鼠心肌细胞凋亡及心肌细胞线粒体膜电位的影响。方法昆明小鼠60只,随机分为黄芪注射液治疗组（大、中、小剂量组）、阿霉素模型组和正常对照组,建立阿霉素中毒性心肌损伤模型,实验结束24 h后处死小鼠,取出心脏,应用流式细胞仪分析技术检测小鼠心肌细胞线粒体膜电位及心肌细胞凋亡百分率。结果（1）阿霉素模型组的心肌细胞线粒体膜电位小于其他各组（P＜0．05）;黄芪注射液各剂量组的心肌细胞线粒体膜电位小于正常对照组（P＜0．05）。（2）阿霉素模型组心肌细胞凋亡率高于正常对照组及黄芪注射液中、小剂量治疗组（P＜0．01）,但阿霉素模型组与黄芪注射液大剂量治疗组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论黄芪注射液可通过稳定细胞线粒体膜电位,抑制心肌细胞发生异常凋亡,保护心肌细胞。     

猕猴离体心室乳突肌电生理特性研究

作者采用细胞内微电极技术,对8只四川猕猴30个离体心室乳突肌的静息电位、动作电位、超射值、动作电位时程(APD)中的APD_(20)、APD_(50)、APD_(90)、APD_(100),以及0期最大去极速度与有效不应期等电生理活动进行了测量和研究,并比较了猕猴与其他哺乳动物的各项电生理参数。结果表明它们极其相似,故推测它们具有相近的电生理学特性。     

迷走神经与心室肌细胞钙内流关系的探讨

用浮置微电极技术观察了高血钙时兔心室肌细胞跨膜电位(TMP)的变化,以及刺激迷走神经对这些变化的影响。结果表明,高血钙可使心室肌细胞动作电位时程(APD)缩短,O相上升速率([dv/dt]_(max))减慢,刺激迷走神经可消除高血钙引起的[dv/dt]_(mac)的改变,在用氯化四乙基胺(TEA)阻断K通道后,这些作用仍部分出现,并且APD_(30)及APD_(50)缩短。上述结果提示,迷走神经对心室肌细胞跨膜电位的影响,不仅能提高膜对K~+的通透性,而且还可能抑制钙内流。     

当归红芪多糖对辐射损伤心肌细胞线粒体凋亡通路的影响

目的探讨当归红芪多糖对辐射损伤氧化应激诱导的心肌细胞线粒体凋亡通路异常的影响。方法原代培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,X线照射心肌细胞建立辐射损伤模型,用不同浓度的当归红芪多糖进行干预。实验分正常对照组、辐射损伤模型组(照射剂量为6 Gy)、当归红芪多糖低剂量组(终浓度为25 mg/L)、当归红芪多糖中剂量组(终浓度为50 mg/L)、当归红芪多糖高剂量组(终浓度为100 mg/L)。MTT法检测各组心肌细胞生长抑制率;DCFH-DA荧光探针检测各组心肌细胞活性氧自由基(ROS)表达水平;激光共聚焦技术检测各组心肌细胞线粒体膜电位水平;蛋白印迹法检测各组心肌细胞内细胞色素C(Cyt C)、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量。结果与正常对照组相比,辐射损伤组心肌细胞生长抑制率明显升高、线粒体膜电位降低、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量明显升高,差异具有显著性(P0.05)。与辐射损伤组相比,当归红芪多糖各干预组心肌细胞生长抑制率均不同程度下降、线粒体膜电位有所升高、ROS表达及Cyt C、Caspase-3、Caspase-9蛋白的相对表达量均不同程度降低(P0.05)。结论辐射致心肌细胞凋亡的机制之一是线粒体凋亡通路的激活,当归红芪多糖通过调控该通路发挥心肌细胞保护作用。     

豚鼠心室肌动作电位2相与其百分时程的相关分析

对于心肌细胞动作电位(AP)2相——平台期的研究,具有重要的理论和实际意义。在AP各时相中,2相的形成机制较为复杂,其形态和时程在许多因素影响下,容易发生变化。那么如何衡量2相的时程呢?有人习惯用AP复极化50%时的时程(APD_(50))来表示2相的长短;也有人主张用APD_(20)衡量2相长短;还有人用APD_(30)来代表2相时程,等等。究竟什么样的指标较为准     

17β-雌二醇对肾上腺素诱导的心肌细胞肥大及原癌基因c-fos表达的影响

目的利用体外培养的乳鼠心肌细胞,观察17β雌二醇(17βestradiol)对肾上腺素(phenylephrine)诱导的心肌细胞肥大及其原癌基因cfos蛋白表达的影响。方法以培养的乳鼠心肌细胞为模型并分组给药后,用计算机图像分析软件测量心肌细胞表面积,免疫细胞化学方法检测心肌细胞原癌基因cfos的蛋白表达。结果17β雌二醇明显抑制肾上腺素诱导的心肌细胞表面积增大,同时减弱肥大心肌细胞原癌基因cfos的蛋白表达。结论17β雌二醇可抑制肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,其作用机制可能和抑制原癌基因cfos的蛋白表达有关。     

胡芦巴碱对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞的保护作用

目的：探究胡芦巴碱（T RG ）对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及其机制。方法原代培养SD乳鼠心肌细胞,随机分成3组：正常对照（Control组）、缺氧／复氧组（H／R组）和TRG加缺氧／复氧组（TRG＋ H／R组）;采用流式细胞术分别检测TRG对缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡和线粒体膜电位的影响;采用超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）试剂盒检测SOD活性和MDA水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测procaspase‐9、cleaved caspase‐9、procaspase‐3和cleaved caspase‐3蛋白水平。结果 TRG能够显著降低缺氧／复氧乳鼠心肌细胞凋亡率（P＜0．05）,增强SOD活性（P＜0．05）,减少MDA的生成（P＜0．05）,稳定线粒体膜电位（ P＜0．05）,促进caspase‐9和caspase‐3的活化。结论 T RG可减轻缺氧／复氧对乳鼠心肌细胞的损伤,其机制可能与抗脂质过氧化和稳定线粒体膜电位有关。     

抗心律失常药物的药理学

基础讨论心律失常起源于心肌自律性的紊乱与传导异常。有关心肌电特性的知识,大多从研究心肌细胞跨膜电位得来。图1示非自律性心肌细胞与自律性(即自动毁极性)心肌细胞胯膜电位的两种基本活动方式。     

CHOP在妊娠期肝内胆汁淤积症新生鼠心肌细胞表达水平变化

目的 探讨CHOP在孕鼠妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎鼠心肌细胞表达水平变化及意义。方法 健康清洁级孕龄14 d的SD大鼠随机分成ICP组和对照组，ICP组利用17α-乙炔基雌二醇诱导建立ICP大鼠模型，光镜观察妊娠第21天新生鼠心脏的病理改变，TUNEL检测心肌细胞凋亡、免疫荧光染色及Western Blot技术检测心肌细胞CHOP水平。结果 ICP组新生鼠心肌细胞萎缩，体积缩小，空泡样变性，核固缩；ICP组心肌细胞凋亡指数[(20.8±6.1)%]较对照组[(5.0±1.8)%]明显增高，差异有统计学意义(P<0.01)。ICP组新生鼠心肌细胞CHOP表达免疫荧光染色(IOD值108.96±21.82)较对照组(62.12±11.09)明显增加，Western Blot(IOD值1.17±0.04)较对照组(0.81±0.00)明显增加，差异均有统计学意义(P<0.01)。相关性分析结果显示，新生鼠心肌细胞凋亡率与心肌细胞CHOP表达量呈正相关(r=0.780,P<0.01),新生鼠心肌细胞凋亡率(r=0.835,P<0.01)和CHOP表达量(r=0.650,P<0.05)与孕鼠死胎率均呈正相关，且新生鼠心肌细胞凋亡率(r=0.740,P<0.01)和CHOP表达量(r=0.801,P<0.01)、孕鼠死胎率(r=0.736,P<0.01)与孕鼠总胆汁酸呈正相关。结论 CHOP在孕鼠ICP新生鼠心肌细胞中表达明显增加，孕鼠ICP时胎鼠心肌细胞凋亡可能由CHOP介导。     

应用Doctor——851软件系统对在位心肌细胞跨膜电位进行实时分析

1985年以来,作者使用博士—851软件系统对在位心肌细胞跨膜电位进行了实时分析。改进的博士—851软件系统特点是:单、双道记忆示波,不同的采样速度,多种分析处理方式等。通过对鳝鱼、龟、鲢鱼、鸽子等多种动物心肌跨膜电位的实时处理,结果表明,比先前的报告(?)精度高,更省时,应用范围更广。     

改良的乳鼠心肌细胞分离与培养新方法

目的 探讨一种简单有效的SD大鼠乳鼠心肌细胞分离与培养方法.方法 取出生24 h以内的大鼠心室,0.08％的胰蛋白酶反复消化多次,离心收集心肌细胞,差速培养后5-溴脱氧尿嘧啶核苷纯化心肌细胞.用全细胞膜片钳方法,记录心肌细胞动作电位,并用激光共聚焦显微镜观察钙瞬变、线粒体膜电位.结果 心肌细胞存活率大于93％,心肌细胞纯度大于96％,细胞形态良好,出现节律性搏动,钙瞬变波形稳定、规律,动作电位和线粒体膜电位均正常.结论 本研究方法分离心肌细胞存活率高、活性好,是一种简单、高效的心肌细胞原代培养方法,可广泛应用于各种研究.     

去甲肾上腺素预处理早时相线粒体跨膜电位的变化

目的 研究去甲肾上腺素(NA)预处理早时相心肌细胞线粒体跨膜电位的变化,为探讨预适应早时相作用机制提供依据.方法 原代培养乳鼠心肌细胞,随机分为3组进行干预处理.Ⅰ组是对照组(control group,CON),Ⅱ组是缺氧处理对照组(hypoxia group,HP),Ⅲ组是去甲肾上腺素预处理组(noradrenaline preconditioning group,NAPC).Ⅰ组不给任何药物干预,也不进行缺氧处理,培养40 min;Ⅱ组不给任何药物干预,直接进行缺氧处理40min;Ⅲ组预先给予终浓度为0.2μg/ml去甲肾上腺素孵育10min后,再进行缺氧处理40min,各组用流式细胞仪检测罗丹明123(Rhodamine 123)标记的线粒体的荧光强度.结果 3组的荧光强度值通过方差分析比较(F=461.3,P＜0.05),HP组与NAPC组的荧光强度比CON组明显降低(6.24 ±0.13)%,(6.55 ±0.17)% vs.(8.32 ± 0.19)%,P＜0.05,表明HP组与NAPC组心肌细胞线粒体的跨膜电位明显降低,说明细胞能量代谢能力下降;NAPC组荧光强度比HP组高(6.55 ±0.17)% vs.(6.24 ±0.13)%,P＜0.05,表明NAPC组心肌细胞线粒体的跨膜电位较高,说明NA预处理过的细胞能量代谢能力较强.结论 NAPC组的心肌细胞线粒体的荧光强度较HP组明显升高,表明去甲肾上腺素预处理早时相跨膜电位降较高,NA 触发了细胞保护效应,使心肌细胞对损伤性刺激的耐受力增强.     

β-细辛醚对缺血—再灌注损伤心肌细胞的保护作用

[目的]观察石菖蒲有效成分β-细辛醚对缺血-再灌注损伤(MI-RI)心肌细胞的保护作用.[方法]培养原代乳鼠心肌细胞,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)复制心肌细胞MI-Rl模型,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,紫外分光光度法测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的含量,利用流式细胞术(FCM)检测线粒体膜电位(MMP)平均荧光强度.[结果]β-细辛醚能显著提高MI-RI模型细胞存活率,降低培养液中LDH、CK的含量,提高MMP值(均P＜0.05).[结论]β-细辛醚时MI-RI心肌细胞具有保护作用,其作用机理可能与减轻细胞膜损伤,降低线粒体膜通透性有关.     

酒石酸锑钠对家兔离体心肌细胞电生理特性的影响

家兔10只,取出其窦房结-心房肌标本,用酒石酸锑钠(SAT)灌流后,起搏细胞动作电位幅值、O相平均去极速率及舒张期去极速率增加,动作电位时程(APD_(25)、APD_(50)、APD_(90)缩短;心房肌细胞动作电位幅值及收缩幅值增加,APD_(25)、APD_(50)、APD_(90)及收缩时程延长,心率增加:此外,还观察到各种心律失常现象。酒石酸锑钠(SAT)的上述作用可能与它使细胞内Ca~(2+)增高有关。