宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变关系的研究

目的研究宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP基因及蛋白水平改变的关系。方法以我院收治的70例宫颈癌患者为观察组,另选正常宫颈组织70例为对照组。分别对两组对象的宫颈组织进行DNA提取、总RNA提取、cDNA合成、PCR反应扩增。并检测HPV感染、Rap1GAP基因外显子E11和E19缺失率、Rap1GAP mRNA表达及Rap1GAP蛋白表达情况。结果观察组患者HPV感染明显高于对照组（P〈0.05）。观察组HPV阳性和阴性组E11和E19的缺失率比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。Rap1GAP mRNA、Rap1GAP蛋白在观察组HPV阳性组组织中的表达率、阳性表达率明显低于HPV阴性组（P〈0.05）。宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关（r=0.578）,与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关（r=0.554）。结论宫颈癌中HPV感染与Rap1GAP mRNA的表达呈正相关,与Rap1GAP蛋白的阳性表达呈正相关。     

HPV-16、HSV-2、EBV感染及PCNA表达与宫颈癌关系研究

[目的 ]探讨HPV - 16、HSV - 2、EBV感染及增殖细胞核抗原表达与宫颈癌的关系。[方法 ]采用免疫组化SP法分别检测 5 4例宫颈癌和 2 0例正常宫颈的HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白及PCNA表达情况。 [结果 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白在宫颈癌组织和正常宫颈表达率分别为 5 7.4 %、38.9%、5 5 .6 %和 5 %、5 %、10 % (P <0 .0 5 ) ;PCNA在宫颈癌和正常宫颈表达率为81.5 %和 15 % (P <0 .0 5 ) ,而且随着宫颈癌病理分级的增高 ,其表达的阳性率也增高 ,强度增强 ;HPV - 16阳性组的PCNA表达高于阴性组 (P <0 .0 5 ) ,HSV - 2、EBV阳性组和阴性组的PCNA表达无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;3种病毒混合感染者的PCNA表达均为阳性。 [结论 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV感染会促进宫颈癌的发生     

宫颈癌组织中CDC6的表达及其与HPV_(16/18)感染的相关性

目的 研究细胞分裂周期蛋白6(CDC6)在宫颈癌组织中的表达及其与人乳头瘤病毒16/18(HPV16/18)感染的相关性. 方法 采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变CIN I 20例、CIN Ⅱ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例进行CDC6的检测,同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况. 结果 ①宫颈癌组织中CDC6的阳性率高于CIN和正常宫颈组织(P<0.05),且CDC6阳性表达率与病理分级、淋巴转移有关(均P<0.05),而与年龄分组、临床分期进展无关(均P>0.05).②HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高,两两比较均P<0.05,但阳性表达率与年龄、临床分期、病理分级、淋巴转移无关(均P>0.05).③宫颈癌组织中CDC6与HPV16/18感染呈正相关(rs=0.386,P<0.05).结论 宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6表达的改变可能与HPV16/18感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生.CDC6的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查和预后判断的有利指标.     

HPV感染对宫颈鳞癌组织Fas/FasL表达的影响

[目的]探讨人乳头状瘤病毒（HPV）感染对宫颈癌组织Fas/FasL（Fas配体）表达的影响。[方法]用免疫组化链霉菌抗生物素过氧化物酶（SP）法检测55例宫颈鳞癌和27例宫颈炎组织HPV及Fas、FasL蛋白的表达。[结果]在宫颈鳞癌和宫颈炎组,HPV感染率分别为76.4%和85.2%（P〉0.05）,Fas表达阳性率分别为50.9%和75.0%（P〈0.05）,FasL分别为72.7%和83.3%（P〉0.05）。在宫颈癌HPV感染和未感染组,Fas表达阳性率分别为40.6%和61.9%（P〈0.05）;FasL分别为76.2%和21.4%（P〈0.05）。在宫颈炎HPV感染和未感染组,Fas表达阳性率分别为67.2%和96.7%（P〈0.05）;FasL分别为75.0%和45.2%（P〈0.05）。[结论]HPV感染可能会使宫颈癌细胞Fas基因表达下调,FasL表达上调,使癌细胞发生免疫逃避,从而促进宫颈癌的发生。     

肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌的表达及其与HPV感染的关系

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中的蛋白表达以及人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7和HPV18E6/E7感染对其表达的影响。方法采用免疫组化SP法检测70例浸润性宫颈癌、15例原位癌、20例正常宫颈组织中KAI1蛋白的表达,采用PCR扩增-琼脂糖凝胶电泳法检测浸润性宫颈癌组织中HPV16E6、E7和HPV18E6/E7的DNA状况。结果宫颈浸润癌及原位癌组织中的KAI1蛋白表达与正常宫颈上皮中的表达相比明显下调(P<0.05),原位癌与浸润癌中的表达差异无统计学意义;HPV16E6、E7和HPV18E6/E7在浸润性宫颈癌中的阳性率分别为67.1%、54.3%和12.9%,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染与宫颈癌中的KAI1蛋白表达无相关性。结论肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中呈下调表达,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染不影响其表达。     

53BP1在宫颈癌组织中的表达及其与P53和HPV感染的关系

目的 探讨P53结合蛋白1(53BP1)在各级宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈癌组织中的表达及其与P53、HPV感染的关系.方法 选取临床资料完整的60例宫颈癌、30例CIN和20例正常宫颈组织,分别采用免疫荧光法检测53BP1核聚形成情况、RT-PCR检测53BP1 mRNA的表达、免疫组化SP法检测P53蛋白和凯普HPV-DNA分型检测HPV感染情况.结果 53BP1核聚水平在20例正常宫颈组织均表达稳定型,30例CIN中70.0％表现为低DDR型,30.0％表现为高DDR型,60例宫颈癌中除2例缺失型外均表达高DDR型或强DDR型;53BP1 mRNA在宫颈癌组织中相对表达量明显低于正常宫颈组织(P＜0.05);P53蛋白在宫颈癌及CIN中的阳性率明显高于正常对照组(P =0.000,P=0.02);53BP1核聚类型与HPV感染以及P53蛋白表达情况均呈正相关(r =0.433,P=0.001;r=0.478,P=0.000),53BP1 mRNA表达水平与HPV感染呈负相关(r=-0.443,P=0.000).结论 53BP1作为抑癌基因参与了宫颈癌的发生发展,它的表达与HPV感染以及P53蛋白表达密切相关,提示其可能在HPV感染引起宫颈癌的发生发展中具有一定的作用.     

宫颈癌及癌前病变患者高危型HPV16感染与HLA-Ⅰ表达的关系

目的探讨宫颈癌及癌前病变患者高危型人乳头状瘤病毒16(HPV16)感染与人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)表达的关系。方法选取2014年4月~2016年4月我院行手术切除术或妇科检查的123例宫颈病变患者为研究对象,利用聚合酶链式反应(PCR)检测患者HPV阳性检出率,采用免疫组织化学S-P方法检测组织中HLA-Ⅰ蛋白表达水平,分析HLA-Ⅰ与宫颈癌及癌前病变患者高危型HPV16感染之间的关系。结果宫颈炎组织中HPV16阳性检出率为8.33%,明显低于宫颈内上皮瘤变(CIN)组织中HPV16阳性检出率(31.25%),差异有统计学意义(P0.05),CIN组织中HPV16阳性检出率为31.25%,明显低于宫颈鳞癌(CSCC)组织中阳性检出率(79.10%)(P0.05);宫颈炎组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率为95.83%,明显高于CIN组织阳性表达率(40.63%)(P0.05),CIN组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率为40.63%,明显高于CSCC组织中阳性表达率(19.40%)(P0.05);宫颈癌组织中HLA-Ⅰ蛋白阳性表达率与宫颈癌组织分化、临床分期以及淋巴结转移密切相关(P0.05);相关性分析结果显示,HPV16感染与HLA-Ⅰ蛋白表达呈显著负相关(r=-0.748,P0.05)。结论 HLA-Ⅰ表达及高危型HPV16感染与宫颈病变进展为宫颈癌密切相关,且HLA-Ⅰ蛋白表达与HPV16感染呈明显负相关。     

人宫颈癌组织中Survivin蛋白及人乳头瘤病毒16、18感染检测

目的:检测人宫颈癌组织中Survivin蛋白及高危人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,并探讨其在宫颈癌癌变过程中的作用.方法:选取13例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及42例宫颈癌(鳞癌36例,腺癌6例;临床分期:Ⅰ、Ⅱ期34例,Ⅲ、Ⅳ期8例;病理分级:Ⅰ、Ⅱ级22例,Ⅲ级20例;有淋巴结转移12例,无淋巴结转移30例)组织,另取8例正常宫颈组织作为对照.分别采用免疫组织化学法检测Survivin蛋白表达情况,原位杂交法检测HPV16、18感染情况.结果:正常宫颈组织中Survivin蛋白的阳性表达率为0,CIN为53.84%,宫颈癌组织中为95.23%,3组间差异有统计学意义(P＜0.05);正常宫颈组织中HPV16、18的感染率为12.50%,与CIN(46.15%)和宫颈癌(85.71%)组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌组织中Survivin蛋白表达率与病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(P均＜0.05).宫颈癌组织中Survivin蛋白表达率与HPV16、18感染率呈正相关(P＜0.05).结论:在宫颈细胞的恶变和进展过程中,Survivin的表达及HPV16、18感染可能起协同作用.     

人乳头状瘤病毒、EB病毒感染与子宫颈癌关系研究

[目的]探讨人乳头状瘤病毒(HPV)、EB病毒(EBV)在宫颈组织的感染及与宫颈癌发病的关系.[方法]用免疫组织化学染色方法(LSAB)检测50例宫颈癌与20例正常宫颈组织HPV、EBV的表达,并探讨其与临床病理参数的关系.[结果]宫颈癌组织HPV和EBV的阳性表达率分别为44.00％和52.00％,二者均明显高于正常...     

雌激素受体亚型与人乳头状瘤病毒感染状态在宫颈病变进展中作用的研究

[目的]探讨雌激素受体(ER)亚型及人乳头状瘤病毒(HPV)感染在不同程度宫颈病变中的相互作用及其对宫颈病变进展的影响。[方法]应用免疫组化方法检测ERα/ β两种亚型及HPV16 -L1/E7两种蛋白在6 6例不同程度宫颈病变组织中的表达。[结果]宫颈癌组的HPV16 -L1(- ) /HPV16 -E7( )者(42 .9% )及ERβ阳性率(6 1.9% )高于非宫颈癌组(13.3%和33.3% ) ,差异有显著性(P =0 .0 19和P =0 .0 2 9) ,并且HPV的表达状态与ERβ的表达相关。[结论]ERβ可能通过影响HPV在宿主细胞中的感染状态对宫颈病变的发展起一定影响。     

HCCR-1、P53在宫颈癌及其癌前病变中的表达及其临床意义

[目的]探讨人宫颈癌致癌基因-1（human cervical cancer oncogene-1,HCCR-1）、P53在宫颈癌及其癌前病变组织中的表达及临床意义。比较人乳头状瘤病毒（human papillomavirus ,HPV）检测与免疫组化法检测HCCR-1蛋白诊断宫颈上皮内瘤样变（cervical intraepithelianeoplasia ,CIN ）和宫颈癌的敏感度和特异度。[方法]采用免疫组化SP法检测 HCCR-1和P53在具有 HPV-DNA检测结果的40例宫颈癌、30例CIN Ⅰ、30例CINⅡ～Ⅲ和10例正常宫颈组织标本中的表达。[结果]① HCCR-1蛋白在正常宫颈组织中无表达,随着宫颈上皮病变的升级而呈现增高的趋势,各组间差异有统计学意义（ P ＜0．05）。②CIN Ⅰ、CIN Ⅱ～Ⅲ和宫颈癌P53表达阳性率显著高于正常宫颈（ P ＜0．05）。③ HCCR-1、P53在宫颈组织中的表达 HCCR-1、P53在宫颈组织的表达相关系数较低（ r ＝0．220,P ＝0．021）,可认为两者没有相关性。④ HCCR-1、HR-HPV在宫颈组织的表达明显呈正相关（ r ＝0．9,P ＝0．000）。⑤免疫组化法检测 HCCR-1诊断CIN和宫颈癌的敏感度和特异度分别为71％和100％。[结论]在宫颈病变进展的过程中受多基因调控。 HCCR-1与突变型p53蛋白的表达随病理级别进展均呈逐步增加的趋势,在宫颈病变的发生发展中可能起着重要的作用。免疫组化法检测宫颈组织中 HCCR-1蛋白表达有望成为宫颈病变的诊断辅助工具。     

宫颈癌中p53、p21WAF1/CIP1、MDM2的表达及其与HPV16感染的关系

目的：探讨子宫颈鳞状细胞癌中p53、p21^WAF1／CIP1、MDM2的表达及其与HPV16感染的关系。方法：采用免疫组化Envision二步法检测p53、p21^WAF1／CIP1及MDM2在43例子宫颈鳞状细胞癌、20例子宫颈上皮内瘤变（CIN）和15例正常对照组中的表达，高危HPV16DNA的检测应用原位杂交法。结果：HPV16、p53、p21^WAF1／CIP1和MDM2在子宫颈癌中的阳性表达率分别为46．51％、34．88％、30．23％、25．58％；在CIN中的阳性表达率分别为45％、5％、60％、15％；HPV16在对照组中的阳性表达率为6．67％，p53、p21^WAF1／CIP1和MDM2未见阳性表达。HPV16、p53、p21^WAF1／CIP1在3种不同组织中表达差异有统计学意义（P〈0．05），MDM2在3种不同组织中表达差异无统计学意义（P〉0．05）。p53、p21^WAF1／CIP1和MDM2在子宫颈癌HPV阳性组和阴性组间表达差异无统计学意义（P〉0．05），p21^WAF1／CIP1蛋白表达与p53有关（P〈0．05），MDM2蛋白表达与p53无关（P〉0．05）。结论：在HPV16感染的子宫颈癌中，p53的转录功能仍然存在。     

p63和Ki-67蛋白在子宫颈上皮内瘤变中的表达及其临床意义

目的: 探讨子宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中p63和Ki-67蛋白的表达及其临床意义。方法: 选择126例子宫颈活检组织标本,采用免疫组织化学技术检测p63、Ki-67和人乳头状瘤病毒(HPV)表达,其中12例正常子宫颈组织为对照组,CIN1 40例、CIN2 31例、CIN3 33例及浸润性癌组织10例。对浸润性癌用原位杂交技术(ISH)加做低危型和高危型HPV DNA检测。结果: 对照组组织中p63呈阴性,但在增厚的鳞状上皮可出现阳性细胞。在CIN1、CIN2、CIN3和浸润性癌组织中,p63阳性率分别为80.0%、96.8%、100.0%和10/10,Ki-67蛋白阳性率分别为0.0%、27.5%、64.5%、54.5%和8/10,HPV阳性率分别为33.3%、17.5%、51.6%、39.4%和3/10,差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。在浸润性癌组织中低危型和高危型HPVDNA阳性率分别为5/10和8/10。p63在CIN组织中表达强度随病理分级明显增强,且与HPV感染有相关关系(P < 0.05)。结论: p63和Ki-67蛋白联合检测,有助于子宫颈癌前病变的筛查、早期诊断和治疗。     

宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义

目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈病变的关系.方法 用荧光定量PCR法检测15例正常宫颈,57例宫颈尖锐湿疣,78例宫颈上皮内瘤变（CIN）,43例宫颈尖锐湿疣合并CIN,13例宫颈癌的HPV感染情况.结果 本组宫颈病变中HPV感染率92.72％,单一型HPV感染率89.52％,高危型HPV感染率98.25％;宫颈尖锐湿疣以HPV52感染为主（41.18％）;CIN以HPV16感染为主（41.67％）;尖锐湿疣合并CIN感染HPV58者占25.00％,感染HPV16和HPV52的各占15.00％; 60.00％宫颈癌感染HPV16;多重型HPV感染以HPV亚型双重感染为主.结论 HPV检测对于宫颈病变的筛查及临床分流监测有重要价值.     

人乳头状瘤病毒和EB病毒在子宫颈上皮内瘤变中的表达

目的:探讨人乳头状瘤病毒(HPV)和EB病毒(EBV)在子宫颈上皮内瘤变(CIN)中的表达.方法:采用原位杂交对130例CIN(CIN1 50例,CIN2 40例,CIN3 40例)、子宫颈癌10例、子宫颈湿疣样病变10例、子宫颈正常黏膜10例的HPV(高危型16/18、低危型6/11)和EBV进行检测.结果:HPV16/18在CIN1、CIN2、CIN3的阳性表达率分别是44.0%、37.5%和62.5%,子宫颈癌为8/10,子宫颈湿疣样病变为10/10,子宫颈正常黏膜为3/10,差异有统计学意义(P<0.01).HPV6/11在CIN1、CIN 2、CIN3的表达率分别是36.0%、52.5%和70.0%,在子宫颈癌中的表达是6/10,子宫颈湿疣样病变9/10,子宫颈正常黏膜3/10,差异有统计学意义(P<0.01).HPV16/18和HPV6/11在CIN1、CIN2、CIN3中联合表达率分别为26.0%、22.5%和50.0%,子宫颈癌为6/10,子宫颈湿疣样病变为7/10,子宫颈正常黏膜为2/10,差异有统计学意义(P<0.01).EBV在CIN1、CIN2、CIN3的阳性表达率分别是24.0%、12.5%和22.5%,子宫颈癌为3/10,子宫颈湿疣样病变为0/10,子宫颈正常黏膜为0/10,差异无统计学意义(P>0.05).结论:HPV感染是引起CIN的主要致病因子,临床上往往是多种亚型混合感染.EB病毒在CIN和子宫颈癌表达的意义仍有争议.     

P16INK4A在宫颈癌及癌前病变脱落细胞中表达的临床意义及其与HPV16、18型的关系

目的:观察p16INK4A能否作为宫颈癌、宫颈癌前病变标志物及其与HPV16、18型的关系.方法:采用免疫组织化学S-P方法,检测p16INK4A在宫颈脱落细胞中表达.同时,采用FQ-PCR技术检测HPV16、18型DNA.结果:9例宫颈鳞状细胞癌P16INK4A表达均为阳性;45例LSIL,44例P16INK4A表达为阳性,仅1例为阴性;38例的HSIL均为阳性;30例中ASC有10例阳性,20例正常宫颈及40例慢性宫颈炎,P16INK4A染色均为阴性.HPV16、18型DNA阳性率分别为8/9、31.1%、68.4%、33.3%.40例慢性宫颈炎HPV16、18型DNA阳性1例,正常宫颈细胞未检测出HPV16、18型DNA.结论:HPV16、18型DNA阳性率及阳性标本拷贝数愈高,P16INK4A表达的强度愈强.p16INK4A有望成为宫颈癌前病变诊断标志物.