应用PC检测恶性淋巴瘤骨髓浸润及其临床意义

目的；检测恶性淋巴瘤（ＭＬ）的骨髓浸润（ＩＢＭ）并探讨其与临床分期、疗效和预后的关系。方法；以克隆性ＩｇＨ和ＴＣＴＲ．基因重排分别作为Ｂ和Ｔ细胞淋巴瘤克隆基因标志，应用ＰＣＲ基因扩增技术检测ＭＬ患者ＩＢＭ。结果；（１）３４份ＭＬ患垧骨髓标本ＩＢＭ出率为７０．６％（２４／３４），明显高于形态学检测方法（３８．６％，Ｐ〈０．０５）。（２）１９例形态学检测正常的非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓标本，ＩＢＭ阳     

非霍奇金淋巴瘤骨髓基因重排的检测及临床意义

目的探索非霍奇金淋巴瘤（NHL）骨髓免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞受体-γ（TCR-γ）基因重排在NHL的诊断、分期、指导治疗、疗效评价及预后评估方面的价值。方法对NHL患者的骨髓应用多聚酶链聚合方法和8%聚丙烯酰胺凝胶电泳及硝酸银染色来检测基因重排对比常规涂片细胞学检测。结果①对组织病理学明确诊断为NHL患者的骨髓标本行PCR检测基因重排,总阳性率为84.62%（44/52）,骨髓涂片细胞学检测骨髓浸润阳性率为30.77%（16/52）,两者比较差异有统计学意义（P〈0.001）。②NHL患者骨髓基因重排阳性率在早期（Ⅰ、Ⅱ期）和晚期（Ⅲ、Ⅳ期）标本中分别为71.43%（15/21）和93.55%（29/31）,对比差异无统计学意义（P〉0.05）。③NHL患者骨髓基因重排阳性率在低度恶性和中、高度恶性标本中分别为85.71%（6/7）和84.44%（38/45）,对比差异无统计学意义（P〉0.05）。结论对非霍奇金淋巴瘤骨髓基因重排的检测有助于临床准确分期,辅助诊断,其检测阳性率在临床分期之间及恶性度之间差异无统计学意义。     

急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片PCR检测Ig基因重…

应用多聚酶链反应技术检测１５例急性淋巴细胞白血病患者缓解期骨髓涂片中Ｉｇ基因重排，其中有５例（３３％）检测出残留白血病细胞。回顾性分析结果表明，Ｉｇ基因重排患者均在后一次完全缓解期（ＣＲ）后２￣３个月出现白血病临床复发。ＰＣＲ技术检测微量残留白血病细胞有助于预测白血病复发和指导白血病的化疗。     

间期细胞原位PCR检测B细胞系恶性淋巴瘤

目的：应用原位PCR技术检测B细胞系恶性淋巴瘤。方法：采用免疫球蛋白重链（IgH)基因第三互补决定区（CDR－Ⅲ）的引物，dig-11-dUTP标记物，应用直接原位PCR技术检测Ⅲ-Ⅳ级恶性淋巴瘤的间期淋巴细胞，结果：在初诊的15例恶性淋巴瘤患中，12例检测到IgH基因重排；4例临床表现呈现淋巴瘤性白血病患，治疗后骨髓完全缓解，2例间期细胞原位PCR仍显示有IgH基因重排，6个月复发，结论：间期细胞原位PCR技术能敏感、准确地检测Ⅲ级以上的恶性淋巴瘤，并帮助预测复发，为一有效的基因诊断方法。     

用PCR方法检测B细胞淋巴瘤克隆性IgH基因重排

用ＰＣＲ方法检测克隆性ＩｇＨ基因重排正在成为Ｂ细胞淋巴瘤基因诊断的有效手段。与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法相比，前者有明显的优点：快速简便，标本用量少并可用于石蜡切片，无放射性危害等。ＰＣＲ所用引物是辨认ＩｇＨ基因可变区（Ｖ）和连接区（Ｊ）中存在的相对保守...     

基因重排检测技术的建立及其在淋巴瘤诊断中的应用

目的:建立基于克隆性分析技术的B和T淋巴细胞产生的抗原受体分子基因重排检测技术,探讨B淋巴细胞免疫球蛋白及T淋巴细胞受体基因重排在恶性淋巴瘤临床诊断中的应用. 方法: 从组织蜡块中切取组织片5～10张,提取基因组DNA,PCR扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显示基因重排结果. 结果:20例良性淋巴组织反应性增生病例中, 淋巴细胞IgH及TCR基因重排均为阴性;18例T细胞非何杰金氏淋巴瘤中TCRγ基因重排12例, TCRβ基因重排3例,未见有IgH基因重排;32例B细胞性非何杰金氏淋巴瘤标本中有28例IgH基因重排阳性,有2例TCRγ和IgH基因重排均阳性;3例未确诊的疑难病例均为IgH基因重排;IgH及TCR基因重排检出率在淋巴瘤组与良性组之间,差异有显著意义(P<0.05). 结论:应用PCR法检测B淋巴细胞IgH和T淋巴细胞TCR基因重排可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段,且适用于石蜡标本以进行回顾性研究.     

应用PCR检测石蜡包埋骨髓活检标本B淋巴细胞克隆性增生

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测慢性Ｂ细胞性白血病、多发性骨髓瘤及Ｂ细胞恶性淋巴瘤骨髓浸润的石蜡包埋骨髓活检标本克隆性免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排共１９例，其中１６例检测出ｌｇ基因单克隆性重排，总阳性率为８４％。非肿瘤大致正常骨髓标本和急性粒细胞白血病骨髓标本则出现多克隆性弥漫带或无扩增产物。以上结果表明：石蜡包埋骨髓活检标本来源的ＤＮＡ可用于ＰＣＲ检测单克隆性ＩｇＨ基因重排。     

非霍奇金淋巴瘤骨髓微小病灶的检测及其临床意义

应用分子生物学技术，研究非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）骨髓微小病灶（ＢＭＭＤ）的临床意义。方法通过聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术和ＰＣＲ加限制性内切酶图谱分析（ＰＣＲ／ＲＥ）法，分别检测３５例ＮＨＬ病人骨髓标本的免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）和Ｔ细胞受体γ链（ＴＣＲγ）基因克隆性重排，从而发现其ＢＭＭＤ。结果ＢＭＭＤ总阳性率为６６％（２３／３５），ＩｇＨ阳性率为５１％（１８／３５），ＴＣＲγ为４９％（１７／３５），双项阳性率（ＩｇＨ和ＴＣＲγ同时阳性）为３４％（１２／３５），而骨髓涂片的骨髓浸润阳性率为２６％（９／３５）。本方法的骨髓浸润检出率明显高于骨髓涂片。实验发现，全组多数ＮＨＬ病人已有ＢＭＭＤ，而且Ⅰ、Ⅱ期病人也有５８％发生ＢＭＭＤ。ＢＭＭＤ与ＮＨＬ的恶性程度和全身症状相关，与临床分期、近期疗效、病死率和复发率的关系，虽无明确统计学意义，但有较明显的变化趋势。结论ＮＨＬ基本是一个全身性疾病；ＢＭＭＤ可能有助于预后判断。     

非霍奇金淋巴瘤IgH基因重排分析及其意义

目的 探讨免疫球蛋白重链(IgH)基因重排的检测在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的诊断价值.方法 用半巢式和混合聚合酶链式反应(PCR)方法,联合使用IgH FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)检测44例B-NHL患者、1例未分型淋巴瘤、15例T-NHL患者和5例淋巴结反应性增生患者IgH基因克隆性重排情况.结果 ①采用FR3A引物,44例B-NHL有37例出现克隆性IgH基因重排,检测率为84%(37/44);采用FR2A引物,有27例出现克隆性IgH基因重排,检测率为61% (27/44);采用FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3)与J区(JHb、JHc)引物,有34、33例出现克隆性IgH基因重排,检测率为77%、75% (34/44、33/44);结合FR3A、FR2A、FR1家族特异性引物Mixtures(VH1、VH2、VH3),总检测率为95%(42/44).②15例T-NHL有4例出现克隆性IgH基因重排,而5例LRH未出现克隆性IgH基因重排.③1例免疫组化未分型的NHL经PCR检测后明确了分型,为B细胞性淋巴瘤.结论 联合采用多对引物可提高检测阳性率;IgH基因克隆性重排检测对鉴别B细胞淋巴瘤和淋巴结反应性增生以及T细胞淋巴瘤有重要意义.     

半重叠PCR检测急性淋巴细胞白血病骨髓移植后残留白血病的临床意义

目的：观察急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia，ALL）骨髓移植（bone marrow transplantation，BMT）后残留白血病情况，评价BMT效果。方法：对16例ALL患者在BMT前后的不同时期，用半重叠多聚酶链反应（polymerasc chain reaction，PCR）方法检测免疫球蛋白重链（immunoglobin heavychain，IgH）和T细胞受体γ链（T-cell reception γ。TCRγ）单克隆性基因重排情况，了解微小残留白血病（minimal residual disease，MRD）阳性率。结果：BMT前MRD阳性率为81．2％，BMT后3个月时MRD阳性率显著降低为37．5％（P〈0．05）。而异基因骨髓移植（allo-BMT）与自体骨髓移植（auto-BMT）之间在3个月时MRD阳性率无显著性差异。结论：半重叠PCR方法检测ALL-MRD敏感性及特异性极高，对auto-BMT前骨髓的净化处理有指导意义；时BMT后（包括auto-BMT和auo-BMT）效果的评价、BMT后疗效的追踪观察以及BMT后化疗方案的制定均具有重要的临床意义，是BMT后长期随访、判断预后、预测复发的理想指标。     

34例淋巴瘤骨髓浸润患者治疗与预后分析

目的 探讨淋巴瘤骨髓浸润患者的治疗与预后。方法 34例淋巴瘤骨髓浸润患者分为单纯化疗组、化疗+放疗组、大剂量化疗+自体干细胞移植组进行治疗,长期随访,分析其预后状况。结果 全组中位生存期为20个月;1年和3年生存率分别为76.47％和26.47％,最初疗效为完全缓解和部分缓解患者的1年和3年生存率均大于未缓解患者(P<0.05);大剂量化疗+自体干细胞移植组的3年生存率大于单纯化疗组和化疗+放疗组(P<0.05)。结论 淋巴瘤骨髓浸润患者的生存率与最初疗效有关;大剂量化疗+自体干细胞移植能提高其生存率,改善预后。     

血小板计数、乳酸脱氢酶及可溶性白细胞介素-2受体水平评估恶性淋巴瘤患者骨髓浸润的临床价值

目的 探讨影响恶性淋巴瘤患者骨髓浸润（BMI）的危险因素,评估血小板计数（PLT）、乳酸脱氢酶（LDH）及可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）水平对BMI的预测价值。方法 选取2018年6月-2022年6月河北省人民医院收治的98例恶性淋巴瘤患者,根据是否发生BMI分为BMI组（22例）、非BMI组（76例）。采用单因素及多因素Logistic逐步回归分析患者发生BMI的危险因素,通过绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估PLT、LDH及sIL-2R水平对恶性淋巴瘤患者BMI的预测效能。结果 单因素及多因素Logistic逐步回归分析结果显示,PLT升高［O^R=0.980（95% CI：0.964,0.996）］是恶性淋巴瘤患者发生BMI的保护因素（P <0.05）,高龄［O^R=1.155（95% CI：1.046,1.276）］、临床分期（Ⅲ、Ⅳ期） ［O^R=5.829（95% CI：1.939,17.522）］、LDH升高［O^R=1.022（95% CI：1.009,1.035）］、sIL-2R升高［O^R=1.001（95% CI：1.000,1.002）］是恶性淋巴瘤患者发生BMI的危险因素（P <0.05）。ROC分析结果显示,当PLT ≤ 186.565×10⁹/L时,预测恶性淋巴瘤患者BMI的曲线下面积（AUC）为0.683,敏感性为77.3%（95% CI：0.579,0.843）,特异性为64.5%（95% CI：0.536,0.809）;当LDH ≥ 263.875 u/L时,AUC为0.754,敏感性为68.2%（95% CI：0.535,0.809）,特异性为80.3%（95% CI：0.646,0.890）;当sIL-2R ≥ 2554.500 u/mL时,AUC为0.670,敏感性为63.6%（95% CI：0.473,0.757）,特异性为63.2%（95% CI：0.494,0.774）;3者联合预测的AUC为0.824,敏感性为81.8%（95% CI：0.692,0.920）,特异性为81.6%（95% CI：0.669,0.906）。结论 PLT降低、LDH和sIL-2R升高是恶性淋巴瘤患者发生BMI的独立影响因素,可将其用于恶性淋巴瘤患者发生BMI的辅助预测手段,且3者联合可进一步提升预测效能。     

半重叠式多重引物PCR和基因扫描技术在T细胞淋巴瘤诊断中的应用

[目的]探讨半重叠式多重荧光多重引物PCR和基因扫描技术在T细胞淋巴瘤诊断中的应用.[方法]从普通石蜡切片组织标本中提取基因组DNA,用半重叠式多重荧光多重引物PCR扩增,利用DNA测序仪对其产物进行基因扫描分析.[结果]37例T细胞淋巴瘤中27例检测出有克隆性重排;25例B细胞淋巴瘤中2例呈阳性;10例何杰金氏淋巴瘤和7例反应性增生病例均呈阴性.[结论]在T细胞受体γ基因重排克隆性检测中,半重叠式多重荧光多重引物PCR及基因扫描技术具有样本来源便利,灵敏度高,特异性强,耗时短等优点,可作为T细胞淋巴瘤的诊断及鉴别诊断的辅助检测手段.     

恶性组织细胞增生症骨髓铁染色的观察

用铁染色的方法观察了20例恶性组织细胞增生症（简称恶组）20例伤寒、15例结核、10例SLE病人的骨髓涂片中细胞内铁及网状细胞贮存铁。恶组病人的细胞内铁平均为51．7±16．9％，明显高于伤寒（24．9±14．0％）、结核（24．2±20．9％）、SLE（30．5±18．7％）病人（p＜0．01）；恶组病人的网状细胞贮存铁均为阴性，伤寒、结核、SLE病人的网状细胞贮存铁分别为65．0％、66．7％、70．0％。认为观察细胞内铁和网状细胞贮存铁可以作为诊断恶组的一项有价值的辅助指标。     

巢式PCR检测恶性淋巴瘤患儿骨髓人细小病毒B19DNA

目的：用巢式聚合酶链反应（PCR）技术检测恶性淋巴瘤患儿骨髓中人细小病毒B19感染状态。方法：收集住院期间29例患有恶性淋巴瘤的患儿骨髓标本，对照组为非血液系统疾病的患儿骨髓标本26例行病例对照研究，用巢式PCR检测B19－DNA。结果：29例恶性淋巴瘤患儿骨髓中B19－DNA阳性9例，阳性率为31．0％，与对照组比较差异非常显（P＜0．01）；结论：提示恶性淋巴瘤患儿是B19－DNA的易感群体。化疗及免疫功能低下的淋巴瘤患儿发生B19感染易引起持续感染慢性贫血。     

TCRβ克隆性基因重排分析在NHL诊断中的应用

目的采用PCR方法检测非霍奇金淋巴瘤的TCRβ基因重排,对贵州地区部分以往通过形态学和免疫学表现诊断的非霍奇金淋巴瘤重新在分子水平进行分析,探讨我省以往非霍奇金淋巴瘤诊断中存在的问题以及免疫受体蛋白基因重排在T-NHL和B-NHL的诊断和鉴别诊断中的价值.方法采用PCR方法,使用TCRβ引物,以5例淋巴结反应性增生病例作为阴性对照,检测63例NHL患者TCRβ基因克隆性重排情况,其中T-NHL33例,B-NHL30例.结果TCRβ基因重排在T-NHL中检测阳性26例,阳性率66.7%(22/33),在B-NHL中检测阳性7例,阳性率23.33%(7/30).经统计学处理TCRβ基因重排在T、B-NHL中的检出率有显著性差异(P<0.05).结论PCR方法检测NHL中TCRβ基因重排具有敏感、特异的优点,在T-NHL和B-NHL的的诊断和鉴别诊断中具有重要价值.可作为淋巴细胞来源的良、恶性病变的一种辅助诊断手段.     

Detection of IgH and T-cell receptor gene rearrangement in leukemia by PCR amplification and its clinical application

Therearragementoftheigheavychain(IgH)andT--cellreceptor(TCR)genecanserveasmarkersoftheclonalityoflymphoblasticleukemia.Polymerasechainreaction(PCR)--basedmethodprovidesanopportunityforustoexaminetherearrangedgeneswithanimprovementinsensitivityandspecificityovertraditionalmethodsll].InthisreportwediscusstheuseofasimplePCRxbasedapproachbyacombineddetectionoflgH,TCRVYI--JYandTCRV82--D83generearrangementsin45patientswithacutelymphoblasticleukemia(ALL)patientsandasimpledetectionofthelgH…