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以血清浓度为1%、5%和10%的RPMI-1640培养基为基础,分为以下3组不同和添加剂培养基:I号,转铁蛋白+胰岛素+亚硒酸钠;Ⅱ号,IL-2+IL-6;Ⅲ号,I号+Ⅱ号。观察不同添加剂对杂交瘤体外细胞生长和McAb产生的影响。结果I号添加剂组杂交瘤细胞数与对照组无显著差异,Ⅱ、Ⅲ号添加剂组活细胞数分别为对照组的209.1%和226.5%。I、Ⅱ、Ⅲ号添加剂组的最高McAb滴度分别为对照组的2倍 相似文献
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用甲基纤维素半固体培养基筛选杂交瘤细胞 总被引:1,自引:0,他引:1
制备单克隆抗体一个必不可少的步骤就是使融合后的细胞进行单克隆培养。融合细胞的克隆化方法主要采用有限稀释法[见:徐新来.细胞培养在杂交瘤技术中的应用见:鄂征主编.组织培养和分子细胞学技术.北京:北京出版社,1995:207~214]。由于需要反复克隆... 相似文献
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本文采用小鼠骨髓瘤细胞系(Sp2/0)与破伤风类毒素(TT)免疫的人外周血淋巴细胞(PBL)进行融合,对人—鼠杂交瘤细胞系制备人单克隆抗体的技术条件进行了探讨。按免疫时间(d)及体外刺激与否分为4组。结果表明:(1)PWM+TT体外刺激可导致B细胞总数增加,且融合率高,容易建成稳定分泌人单抗的细胞株。(2)经TT免疫的人PBL,6d就有抗TT抗体(IgG)的前体细胞出现。15d及21d时,抗TT抗体前体细胞的频率更高。(3)体内免疫7d及14d并分别经体外刺激的两组共建立5株阳性株。经双扩碓定IgG2株,IgM3株。冻存10个月后复苏、传代及适当的克隆化后仍为阳性。上清液中人Ig的分泌量为0.42~1.15μg/ml。经染色体核型鉴定,碓认为人-鼠杂种细胞。 相似文献
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由于培养基的选择对杂交瘤的表型有深刻影响,所以检测所使用的培养基是否为杂交瘤的增殖、维持生长以及抗体的产生提供了晟佳条件是很有意义的。本文作者选用了三种来自不同亲代骨髓瘤的杂交瘤系对8种培养基进行了实验,初步鉴别出了最佳的培养基配方。 相似文献
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用人源性TPO(huTPO)皮下免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0实体瘤细胞融合,建立了2株稳定分泌抗TPO单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为19D12和49A5,并对其进行了初步鉴定,采用简易正辛酸法从腹水中纯化单克隆抗体。结果:细胞融合率为82%,杂交瘤细胞染色体数目正常,分泌的抗体为IgG,腹水抗体效价为0.6 ̄1.2×10^-3,与EPO、GM-CSF无交叉反应,连续培养生物性状 相似文献
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<正> 由于人单克隆抗体(简称单抗)的同源性,使它在临床应用上比鼠单抗有更大的潜力。我国在《人用鼠源性单抗制备及质量控制考虑要点》中要求检测逆转录病毒,而对人源性单抗的使用迄今尚未有一个完善的质量 相似文献
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以血清浓度为1%、5%和10%的RPMI—1640培养基为基础,分为以下3组不同和添加剂培养基:Ⅰ号,转铁蛋白+胰岛素+亚硒酸钠;Ⅱ号,IL-2+IL-6;Ⅲ号,Ⅰ号+Ⅱ号.现察不同添加剂对杂交瘤体外细胞生长和McAb产生的影响.结果工号添加剂组杂交瘤细胞数与对照组无显著差异,Ⅱ、Ⅲ号添加剂组活细胞数分别为对照组的209.1%和226.5%。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号添加剂组的最高McAb滴度分别为对照组的2倍、4倍和8倍。这一结果表明,IL—2和IL-6具有明显的促进杂交瘤细胞生长和McAb分泌的作用,为体外连续培养、大规模生产McAb提供了有价值的实验依据. 相似文献