学习记忆过程中磷酸化的CREB在大鼠脑纹状体内的表达

目的探讨大鼠在学习记忆过程中磷酸化的转录因子环磷酸腺苷反应单元结合蛋白(cAMP responsive element binding protein,CREB)在脑纹状体内的表达.方法将动物首先在Y迷宫中进行学习记忆训练,然后应用免疫组织化学方法检测磷酸化的CREB(phosphorylated CREB,pCREB)在脑纹状体内的表达.结果大鼠经电Y迷宫训练后,脑纹状体内侧的边缘区内即有明显的pCREB阳性表达,而假训练组或对照组的边缘区内均无明显的pCREB阳性表达.此外,在海马、前额叶皮质和扣带回等处也有较多的pCREB阳性表达.结论大鼠进行电Y迷宫厌暗学习时,脑纹状体边缘区内磷酸化的转录因子pCREB参与学习记忆的信号转导过程.     

学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区的表达

目的研究大鼠在学习记忆过程中即刻早期基因c-fos、c-jun在纹状体边缘区内的表达。方法将动物首先在Y-宫中进行学习记忆训练,然后应用免疫细胞化学方法检测c-Fos、c-Jun蛋白在纹状体边缘区内的表达。结果大鼠经迷宫训练1h后,纹状体边缘区内即有c-Fos、c-Jun蛋白的明显表达,尤其c-Jun在边缘区的表达较纹状体其他部位为集中。迷宫训练组动物纹状体边缘区内c-Fos、c-Jun蛋白的表达数量明显高于假训练组或对照组(P<0.01)。此外,在马、扣带回等处也有c-Fos、c-Jun蛋白的阳性表达。结论大鼠进行Y-迷宫厌暗学习时,纹状状边缘区内的即刻早期因c-fos、c-jun参与学习记忆的信号转导过程。     

pERK1／2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化

目的明确pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化。方法55只健康成年SD大鼠,分为正常对照组,Y迷宫训练组,假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0h、1h、3h、6h、24h亚组,每组动物各5只。训练组动物接受Y-迷宫光电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pERK1/2阳性神经元分布及表达的变化。结果正常对照组pERK1/2免疫阳性神经元分布较少,但在双侧视上核、室旁核表达很丰富,其次在小脑分子层和浦肯野细胞层、杏仁核、纹状皮层表达较多,海马部位偶见2~5个阳性神经元,有较多阳性纤维着色,在纹状体整个区域无阳性神经元表达。在训练后0h纹状体尾壳核和边缘区[(31.2±4.8)个]出现表达,在海马CA2、CA3区出现较多阳性神经元胞体[(44.2±4.2)个],皮层大部、杏仁核的表达也有明显增强,而训练后1h、3h、6h上述各区仍有持续增强,训练后24h表达降至正常,纹状体边缘区阳性神经元消失,海马部位仅有个别阳性神经元[(3.8±3.3)个],P值均小于0.01。假训练组各时间点在海马、纹状体尾壳核、边缘区等部位均无或仅有个别阳性细胞或阳性纤维,与训练组相比差异显著。结论正常状态下pERK1/2在全脑分布较为局限,且表达强度较低。Y迷宫学习可诱导海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pERK1/2的表达,而且pERK1/2参与了Y迷宫的习得、短期记忆的形成、短期记忆向长期记忆的转换和长期记忆的形成等学习记忆的各个阶段。     

pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化

目的明确pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化.方法 55只健康成年SD大鼠,分为正常对照组,Y迷宫训练组,假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0h、1h、3h、6h、24h亚组,每组动物各5只.训练组动物接受Y-迷宫光电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pERK1/2阳性神经元分布及表达的变化.结果正常对照组pERK1/2免疫阳性神经元分布较少,但在双侧视上核、室旁核表达很丰富,其次在小脑分子层和浦肯野细胞层、杏仁核、纹状皮层表达较多,海马部位偶见2～5个阳性神经元,有较多阳性纤维着色,在纹状体整个区域无阳性神经元表达.在训练后0h纹状体尾壳核和边缘区[(31.2±4.8)个]出现表达,在海马CA2、CA3区出现较多阳性神经元胞体[(44.2±4.2)个],皮层大部、杏仁核的表达也有明显增强,而训练后1h、3h、6h上述各区仍有持续增强,训练后24h表达降至正常,纹状体边缘区阳性神经元消失,海马部位仅有个别阳性神经元[(3.8±3.3)个],P值均小于0.01.假训练组各时间点在海马、纹状体尾壳核、边缘区等部位均无或仅有个别阳性细胞或阳性纤维,与训练组相比差异显著.结论正常状态下pERK1/2在全脑分布较为局限,且表达强度较低.Y迷宫学习可诱导海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pERK1/2的表达,而且pERK1/2参与了Y迷宫的习得、短期记忆的形成、短期记忆向长期记忆的转换和长期记忆的形成等学习记忆的各个阶段.     

大鼠纹状体边缘区内烟碱型乙酰胆碱受体mRNA的表达

目的研究纹状体边缘区内有无乙酰胆碱受体（ｎＡＣｈＲ）的分布。方法用地高辛标记的 ｎＡＣｈＲ ｃＤＮＡ作为探针， 与大鼠脑切片进行原位杂交。结果大鼠脑纹状体内可见较多的ｎＡＣｈＲ阳性神经元，其中尾壳核中可见较多中等大小 的多极阳性神经元，在尾壳核和苍白球之间的边缘区部位，可见较多阳性梭形细胞，呈密集的带状分布。结论纹状体边 缘区内存在 ｎＡＣｈＲ ｍＲＮＡ的表达，推测边缘区内的 ｎＡＣｈＲ阳性神经元对调节边缘区的学习记忆功能有重要作用。     

CREB和NMDA受体在致痫大鼠学习记忆功能改变中的变化及意义

目的 探讨核转录因子环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和兴奋性氨基酸NMDA受体亚型NR1在癫痫后学习记忆功能改变中的变化及意义.方法 制备戊四氮点燃大鼠癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)和慢性癫痫(chronic epilepsy,CEP)模型,采用交替电刺激Y迷宫试验动态观察大鼠癫痫后学习记忆功能变化.RT-PCR方法检测大鼠海马组织CREB和NR1 mRNA的表达,免疫组化染色观察大鼠海马磷酸化的CREB蛋白水平表达变化.结果 SE大鼠致痫成功后24 h交替电刺激Y迷宫试验错误次数增多(P＜0.05),30 d恢复正常.CEP大鼠24 h和30 d错误次数均有所增加(P＜0.05).同时伴有海马组织NR1 mRNA和CREB mRNA表达的下调(P＜0.05)及磷酸化CREB蛋白水平表达量的下降(P＜0.05).结论 海马组织NMDA受体和CREB的表达变化可能参与了癫痫大鼠学习记忆功能改变的病理生理过程.     

大鼠全脑缺血后纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y表达的变化

目的 研究全脑缺血再灌流后纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y等神经递质的表达变化。方法 在四管结扎造成的大鼠全脑缺血模型上,用组织化学和免疫组化方法观察纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y等阳性细胞的分布。结果 正常大鼠脑纹状体内有一氧化氮合酶及NPY阳性神经元的分布,全脑缺血再灌流后,边缘区中的NADPH-d阳性细胞明显增多。但缺血再灌流后第5天时阳性细胞数量回落,到第7天时恢复至正常对照组水平。全脑缺血再灌流7 d后,边缘区中NPY阳性反应消失,未见NPY阳性细胞。尾壳核中仍可见少量NPY阳性细胞。结论 纹状体边缘区中NOS阳性细胞对缺血有耐受性。全脑缺血后动物的学习记忆功能下降可能跟边缘区内NPY神经元缺失有关。     

大鼠全脑缺血后纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y表达的变化

目的 研究全脑缺血再灌流后纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y等神经递质的表达变化。方法 在四管结扎造成的大鼠全脑缺血模型上,用组织化学和免疫组化方法观察纹状体边缘区内一氧化氮合酶、神经肽Y等阳性细胞的分布。结果 正常大鼠脑纹状体内有一氧化氮合酶及NPY阳性神经元的分布,全脑缺血再灌流后,边缘区中的NADPH-d阳性细胞明显增多,但缺血再灌流后第5天时阳性细胞数量回落,到第7天时恢复至正常对照组水平,全脑缺血再灌流7d后,边缘区中NPY阳性反应消失。未见NPY阳性细胞,尾壳核中仍可见少量NPY阳性细胞,结论 纹状体边缘区中NOS阳性细胞对缺血有耐受性,全脑缺血后动物的学习记忆功能下降可能跟边缘区内NPY神经元缺失有关。     

全脑缺血后大鼠纹状体边缘区原癌基因c-fos的表达及其对学习记忆功能的影响

目的观察全脑缺血时纹状体边缘区内原癌基因c-fos的表达及其对学习记忆功能的影响。方法用Pulsinelli-Brierley四血管闭塞法造成大鼠全脑缺血模型。在缺血再灌流后不同时间用免疫组化方法观察纹状体边缘区内c-fos蛋白表达的变化,同时用Y迷宫观察动物学习记忆功能的变化。结果大鼠全脑缺血后第5天,观察到纹状体边缘区内的神经元明显缺失,c-fos蛋白一过性表达增高,动物的学习记忆能力显著降低。结论全脑缺血后导致海马以及边缘区等脑区神经元损伤,可能是造成全脑缺血后学习记忆功能障碍的原因,进一步证明纹状体边缘区的功能与学习记忆密切相关。     

惊厥性和非惊厥性癫痫持续状态对大鼠学习记忆功能的影响

目的 探讨惊厥性和非惊厥性癫痫持续状态发作对大鼠学习记忆功能的影响及其海马磷酸化的环磷腺苷反应元件结合蛋白(pCREB)的表达变化.方法 戊四氮点燃大鼠惊厥性癫痫持续状态(SE)和非惊厥性癫痫持续状态(GNCSE)两种动物模型,采用水迷宫和交替电刺激Y迷宫试验观察致痫后大鼠学习记忆功能改变.免疫组化染色观察大鼠海马pCREB蛋白水平表达变化.结果 SE大鼠致痫后近期出现水迷宫逃避潜伏期延长(P＜0.05),平台象限游泳时间及其百分比降低(P＜0.05),穿越平台次数减少(P＜0.05);电Y迷宫错误次数增多(P＜0.05),而远期均恢复正常.GNCSE组大鼠在致痫后近期水迷宫部分时段逃避潜伏期延长(P＜0.05),而平台象限游泳时间及其百分比和穿越平台次数与对照组相比均无明显差别(P＞0.05);电Y迷宫错误次数近期有所增加(P＜0.05).远期与对照组相比无明显差别.学习记忆功能下降的同时伴有海马组织pCREB蛋白水平表达的下降.结论 SE较GNCSE更易导致实验动物学习和记忆能力下降.无论哪种癫痫发作对学习记忆的影响均有一定的时限性.海马组织pCREB的表达变化可能参与了癫痫大鼠学习记忆功能改变的病理生理过程.     

学习记忆过程中即刻早期基因c—fos、c—jun在纹状体边缘区的表达

OBJECTIVE: To study the expression of immediate-early genes c-fos and c-jun in the marginal division (MrD) of rat striatum during learning and memory. METHODS: After Y-maze training in rats, the expression of immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD was investigated immunocytochemically. RESULTS: After 1 h of Y- maze training, the expression of c-Fos and c-Jun proteins was significantly enhanced in the MrD, where c-Jun protein in particular was more intensely expressed than in other parts of the striatum. The training group showed significantly higher expressions of the 2 proteins than pseudotraining group (P<0.01). In addition, positive expression was also observed in the hippocampus, cingulum cortex and other parts of the brain. CONCLUSION: Immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD participate in the signal transduction during learning and memory processes in the courses of Y-maze training of the rats.     

Expression of c-fos and c-jun proteins in the marginal division of the rat striatum during learning and memory training

Background A new brain region, the marginal division (MrD) , was discovered at the caudal margin of the neostriatum. The MrD was shown to be involved in learning and memory in the rat. The aim of this study was to investigate the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the striatum during learning and memory processes in the rat, immunocytochemical and Western blot methods were used to examine Y-maze trained rats.Methods The rats were divided into three groups, namely the training, pseudotraining, and control groups. After Y-maze training, the expression of the immediate-early genes c-fos and c-jun in the MrD of the rats was investigated using immunocytochemical and Western blot methods.Results After one hour of Y-maze training, the expression of c-jun and c-fos proteins was significantly enhanced in the MrD; the c-jun protein, in particular, was more intensely expressed in this region than in other parts of the striatum. The expression of these two proteins in the training group was significantly higher than in the pseudotraining and control groups. In addition, positive expression was also found in the hippocampus,cingulum cortex, thalamus, and in other areas. Western blot disclosed two immunoreactive bands for the anti-c-fos antibody (47kD and 54kD) and two immunoreactive bands for the anti-c-jun antibody (39kD and 54kD). Conclusions These results indicate that the immediate-early genes c-fos and c-jun participate in signal transduction during the learning and memory processes associated with Y-maze training in rats.     

P物质和受体在纹状体边缘区内的分布及其与学习记忆功能的关系

目的 研究纹状体边缘区内的P物质和受体的分布特点及其与学习记忆功能的关系。方法 用免疫组化。原位杂交方法研究纹状体边缘区内P物质及其受体的分布特点，再用受体基因封闭方法结合迷宫行为试验研究P物质受体与边缘区学习记忆功能的关系。结果 纹状体边缘区内有大量的P）物质免疫阳性纤维及受体蛋白和NK1mRNA的分布，封闭纹状体边缘区内的P物质受体基因后，大鼠的学习记忆能力显著下降。结论 纹状体边缘区内的P物质和受体对纹状体边缘区的学习记忆功能有重要作用。推测这种作用是P物质通过其受体NK1调节边缘区中的5-HT等神经递质来实现的。     

缺氧对大鼠纹状体边缘区AChE和NADPH—d含量的影响及其与学习记忆的关系

目的 观察大鼠缺氧后纹状体边缘区（MrD)的病理改变及乙酰胆碱酯酶（AChE）和还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d）的含量改变，探讨缺氧对纹状体边缘区的损害及与学习记忆的关系。方法 建立40只大鼠缺氧模型（予氧含量为8％、氮气含量为92％的混合气，4h/d，连续5d）并对其进行Y迷宫实验，缺氧5d后处死动物观察其脑组织切片HE染色和AChE和NADPH－d组织化学染色情况并与对照组比较。结果 （1）大鼠缺氧前后Y迷宫实验成绩差异显著。（2）AChE组化结果显示，正常大鼠纹状体可见大量AChE阳性反应纤维和少量阳性细胞，MrD内AChE染色略谈；缺氧后纹状体其他部分AChE染色无明显变化，而MrD则明显加深。（3）NADPH－d组化反应显示，MrD内NADPH－d阳性细胞多呈梭形，纹状体内阳性细胞数较其他区域多；缺氧后阳性细胞形态变化不明显，但数目明显少于正常对照。结论 缺氧可导致大鼠学习记忆功能下降以及MrD内AChE、NADPH－d染色的明显改变。这些改变较纹状体其他区域更为明显，表明MrD对于缺氧较敏感，缺氧后AchE和NSADPH的减少可能与学习记忆功能的下降有关。     

N-甲基-D-门冬氨酸2B受体mRNA在纹状体边缘区的表达

目的 通过研究N-甲基-D-门冬氨酸（N-methyl-D-asparate, NMDA）2B受体是否在纹状体边缘区表达,从而在基因分子方面确定边缘区在学习记忆过程中的作用。方法 用地高辛标记多相探针方法,原位检测大鼠纹状体边缘区内NMDA 2B受体表达。结果 原位杂交结果发现NMDA 2B受体mRNA阳性信号在纹状体内分布不均匀,主要见于尾壳核,在尾壳核和苍白球间的边缘区部位可见中等大小梭形神经元,呈密集的带状分布,而苍白球只有少量的阳性胞体。结论 大鼠纹状体边缘区可以合成NMDA 2B受体,推测边缘区的学习记忆功能与NMDA受体有关。     

大鼠纹状体边缘区与海马学习记忆功能的行为学比较研究

目的 探讨MrD与海马这两个不同脑区在大脑学习记忆功能上的区别和作用地位。方法 在Y迷宫训练大鼠后即刻或24h后化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧穹窿海马伞(fornix/fimbria，FF)，训练后6d再观察化学损毁双侧MrD组、MrD对照组、切断双侧FF组和FF对照组大鼠在Y迷宫中学习记忆的行为表现；或在化学损毁大鼠双侧MrD或切断双侧FF下后7d，在Morris水迷宫中检测上述各组的学习记忆能力。结果 在Y迷宫测试的正确反应次数方面，训练后即刻或24h后损毁双侧MrD组与MrD对照组比较均明显减少；训练后即刻切断双侧FF组与FF对照组比较也明显减少，但训练24h后切断双侧FF组与FF对照组比较则无显著意义的差别。在Morris水迷宫试验中，损毁双侧MrD组和切断双侧FF组与各自的对照组比较，平均逃避潜伏期延长，穿环次数减少，但两者之间则无显著意义的差别。结论 MrD与海马均与大鼠的空间学习记忆功能有密切关系；但在Y迷宫逃避性学习方面，海马仅参与陈述性记忆的早期阶段，而MrD则与早、晚两个阶段均有关。提示MrD和海马在学习记忆功能方面可能不同，MrD可能涉及更复杂的记忆过程。     

Effects of kainic acid that damages the marginal division of rat striatum on hippocampal long-term potentiation]

OBJECTIVE: To investigate the relationship between the marginal division (MrD) of the striatum and other brain regions associated with learning and memory. METHODS: Long-term potentiation (LTP) was induced by high-frequency stimulation of the perforant path-dentate gyrus, and changes in hippocampal LTP after destruction of the marginal division with kainic acid were observed. RESULTS: High-frequency stimulation of the perforant path produced significant increases in the peak amplitudes of the population spike (PS) in normal rats and those receiving saline treatment. In rats with damaged MrD, the increase in PS and the excitatory postsynaptic potential were less obvious compared with normal or saline-treated rats, indicating that the LTP of the hippocampus was attenuated by damage of the MrD. CONCLUSION: Damage of the MrD impacts the LTP formation in the hippocampus.     

人脑纹状体边缘区参与听觉数字工作记忆的功能磁共振研究

目的本实验拟通过正常人的功能磁共振研究,检测人脑纹状体边缘区是否参与了听觉数字工作记忆的过程。方法选取13名健康志愿者分别进行听觉数字工作记忆和听觉非记忆任务作业,同时进行功能磁共振检查,检测脑区在不同任务下的激活情况。结果11名受试者通过了数字工作记忆任务作业。功能磁共振结果显示受试者在进行听觉数字工作记忆时具有左侧优势的双侧前额叶皮层和左侧纹状体边缘区均有激活,出现高信号区,其他脑区激活不明显。而在进行听觉非记忆任务作业时,受试者的前额叶和边缘区均无明显激活。结论左侧纹状体边缘区与前额叶一起参与了人脑的听觉数字工作记忆过程,边缘区可能是一个联系着其他学习记忆相关脑区的皮层下中枢。     

人脑纹状体边缘区参与听觉数字工作记忆的功能磁共振研究

目的：本实验拟通过正常人的功能磁共振研究，检测人脑纹状体边缘区是否参与了听觉数字工作记忆的过程。方法：选取13名健康志愿者分别进行听觉数字工作记忆和听觉非记忆任务作业，同时进行功能磁共振检查，检测脑区在不同任务下的激活情况。结果：11名受试者通过了数字工作记忆任务作业。功能磁共振结果显示受试者在进行听觉数字工作记忆时具有左侧优势的双侧前额叶皮层和左侧纹状体边缘区均有激活，出现高信号区，其他脑区激活不明显。而在进行听觉非记忆任务作业时，受试者的前额叶和边缘区均无明显激活。结论：左侧纹状体边缘区与前额叶一起参与了人脑的听觉数字工作记忆过程，边缘区可能是一个联系着其他学习记忆相关脑区的皮层下中枢。