庆大霉素体外诱导豚鼠前庭感觉细胞产生的一氧化氮

近来的研究表明活性氧物质 (ROS)和一氧化氮(NO)均可造成内耳某些病理变化。ROS的产生可导致包括各种耳毒性在内的病理改变。然而 ,关于氨基糖苷类的耳毒反应中 ,ROS和 NO之间的相互作用还知之甚少。因此本研究旨在弄清庆大霉素 (GM)在内耳病理变化中的作用 ,从而更全面地了解氨基糖苷类药物的耳毒性的机制。为了证实 GM刺激后内耳特别是前庭感觉细胞是否产生 NO,我们使用了膜渗透性 4 ,5 -双乙酸二胺荧光素 (DAF- 2 DA) ,一种可渗入内耳细胞的脂类化合物 ,并被细胞内脂酶水解为二胺荧光素 (DAF-2 ) ,后者可与 NO反应生成三唑荧…     

庆大霉素体外诱导豚鼠前庭感觉细胞产生的一氧化氮

近来的研究表明活性氧物质(ROS)和一氧化氮(NO)均可造成内耳某些病理变化。ROS的产生可导致包括各种耳毒性在内的病理改变。然而，关于氨基糖苷类的耳毒反应中，ROS和NO之间的相互作用还知之甚少。因此本研究旨在弄清庆大霉素(GM)在内耳病理变化中的作用，从而更全面地了解氨基糖苷类药物的耳毒性的机制。为了证实GM刺激后内耳特别是前庭……     

豚鼠前庭感觉细胞中同时检测一氧化氮和活性氧基

近来有相当多的证据提示一氧化氮(NO)和与其有关的活性氧基(ROS)在某些内耳疾病中起到关键作用,例如听觉器官外伤、迷路炎、氨基糖苷类抗生素与顺铂的耳中毒以及内淋巴积水。很多关于ROS在氨基     

前庭感觉细胞的神经分布

为了探讨前庭感觉细胞的神经分布特点及其生理学意义,对１０只（１６耳）健康豚鼠应用透射电春前庭感觉上皮区及上皮下区的前庭神经分布情况。发现前庭神经纤维分为３种类型：（１）脱髓鞘型：占大多数,分支及侧支较多,终止于１型感觉细胞神经杯（２）髓鞘型：数量少,分支及侧分支少,终止于１型感觉细胞神经杯。（３）小直径型：直径在１μｍ以下,径睡较长。还发现不是起源于神经杯的传入、传和神经纤维,它们可由进入感觉上皮     

前庭感觉细胞的神经分布

为了探讨前庭感觉细胞的神经分布特点及其生理学意义,对10只（16耳）健康豚鼠应用透射电镜观察其前庭感觉上皮区及上皮下区的前庭神经分布情况。发现前庭神经纤维可分为3种类型：①脱髓鞘型：占大多数,分支及侧支较多,终止于Ⅰ型感觉细胞神经杯。②髓鞘型：数量少,分支及侧支少,终止于Ⅰ型感觉细胞神经杯。③小直径型：直径在1μm以下,径路较长。还发现不是起源于神经杯的传入、传出神经纤维,它们可由进入感觉上皮内不久的神经纤维形成,对其生物学意义进行了讨论。根据Ⅰ、Ⅱ感觉细胞神经分布特性的差别,对它们在传递从外界感受到的信息过程中的不同特性及其生理学意义进行了讨论。     

豚鼠壶腹嵴感觉细胞损伤与修复过程对前庭功能的影响

为观察庆大霉素损伤后豚鼠壶腹感觉细胞损伤与修复对前庭功能的影响，探讨前庭感觉上皮细胞损伤后自发修复与前庭功能恢复的关系。实验组动物连续１２天皮下注射１２５ｍｇ／ｋｇ庆大霉素，应用正旋摆支实验和旋转实验连续观察前庭功能的变化，结合没存活时间动物水平半规管腹嵴的扫描电观察和半薄切片壶腹嵴顶部不工毛细胞的定量分析，结果示：停药第２２天的１０只动物中有４只动物前庭功能有一定程度的恢复，但仍有明显前庭功能低     

前庭感觉细胞的细胞骨架三维结构

借助于皂素灌注法用扫描电镜以及免疫组化技术研究了豚鼠前庭感觉细胞的细胞骨架结构，中丝已被证实存在于感觉细胞中，中丝常见于细胞核周围，并贯穿于胞浆中，连接核膜至胞浆膜、表皮板或其它细胞器。这些发现提示了中丝对于细胞及细胞核提供了机械性支撑作用。微管主要在细胞的核上部分出现，且其走向与细胞体的主轴相争行，它直接与表皮板相接触。这些发现提示微管对细胞提供了机械性支撑，并可能与感觉细胞的传导系统紧密相关。肌动蛋白丝稠密地附着于表皮板部位，它们也广泛分布于细胞浆中；在胞浆周围区域表现为稠密的网络。这些发现…     

豚鼠壶腹嵴感觉细胞损伤与修复过程对前庭功能的影响

为观察庆大霉素损伤后豚鼠壶腹感觉细胞损伤与修复对前庭功能的影响,探讨前庭感觉上皮细胞损伤后自发修复与前庭功能恢复的关系。实验组动物连续12天皮下注射125mg/kg 庆大霉素,应用正旋摆动实验和旋转实验连续观察前庭功能的变化,结合不同存活时间动物水平半规管壶腹嵴的扫描电镜观察和半薄切片壶腹嵴顶部不同类型毛细胞的定量分析。结果示:停药第22天的10只动物中有4只动物前庭功能有一定程度的恢复.但仍有明显前庭功能低下,其中两只存活至100天。前庭功能无进一步恢复。停药后第1、3天,Ⅰ型毛细胞明显减少。停药后第22天、100天.Ⅰ型毛细胞数目仍然很少,Ⅱ型毛细胞明显增多(其中包括在形态上类似Ⅱ型毛细胞的新生的感觉细胞)。将正常和停药后不同时间豚鼠两种类型毛细胞数量变化与相对应半规管功能进行相关分析,水平半规管壶腹嵴顶部Ⅰ型毛细胞数与豚鼠半规管功能呈显著正相关,而Ⅱ型毛细胞数与半规管功能无显著相关性。本研究不能说明庆大霉素损伤后再生修复的前庭感觉细胞具有恢复正常生理功能的作用。     

前庭感觉细胞糖衣膜的合成和相关结构

几乎所有上皮细胞均显示一层碳水化合物外套或所谓糖衣膜。以前已有记录糖衣膜存在于内耳细胞,尤其是感觉细胞的静纤毛。近来研究发现糖衣膜使静纤毛集合成束。这对毛束运动和防止纤毛融合是很重要的。曾有记载糖衣膜与感觉细胞的传导系统有密切关系。这些研究的主要焦点集中在糖衣膜上。至于内部的细胞器和糖衣膜的联系及其合成过程,目前仍一无所知。糖衣膜的超微结构及其特殊有关的合成过程是采用豚鼠前庭感觉细胞用鞣酸染色技术进行研究。(鞣酸染色术较钌红染色术为佳,鞣酸染色不仅对糖衣膜本身而且对糖衣膜     

内淋巴囊阻断对前庭感觉细胞纤毛的影响

梅尼埃病早期前庭感觉细胞形态学改变及其机制尚不清楚,作者以内淋巴积水动物模型为对象,用高分辨率SEM观察了前庭毛细胞纤毛表面糖萼及纤毛间连接成分的超微改变。经后颅凹硬膜进路阻断右侧内淋巴管,左侧对     

豚鼠内耳前庭毛细胞自发再生

近年的研究表明哺乳动物出生后前庭耳石器毛细胞可以再生。本项研究采用扫描电镜技术，以豚鼠为研究对象，首次证实豚鼠不仅耳石器毛细胞而且半规管壶腹嵴毛细胞也可以自发再生。再生毛细胞散在分布于前庭上皮内，而某些脊椎动物再生毛细胞聚积在生长区内。结果提示豚鼠所有的前庭器，包括耳石器和壶腹嵴都保持着自发的毛细胞再生。     

老年豚鼠前庭神经的超微结构观察

本文以正常青年豚鼠为对照,观察老年豚鼠前庭神经的超微结构改变。     

老年豚鼠前庭功能变化的研究

对50只青年豚鼠和20只老年豚鼠进行前庭功能检查,发现老年组旋转试验和冰水试验的眼震持续时间明显短于青年组,而冰水试验的眼震潜伏期无显著差异。表明老年豚鼠前庭器不仅有超微结构退行性变,而且功能也随之发生改变。提示对老年病人行前庭功能检查时应考虑到其前庭功能减退这一因素。     

弹性蛋白酶及透明质酸酶对蛙前庭感觉细胞纤毛连接系统的影响

前庭感觉细胞纤毛连接系统可分为“侧方连接”及“顶连接”两种类型,其形态学研究已有不少报道,但该系统的功能特性尚不甚清楚。该文通过纤毛连接系统的选择性改变探讨其形态与功能间的关系。用18只牛蛙,取出前庭末梢器,将其分别置于林格氏液1.6及120分钟(对照组),透明质酸酶(pH3.8)及弹性蛋白酶(pH7.4)内10～60分钟(实验组)。部分标本作常规固定,漂洗,过锇酸后固定,扫描电镜观察。部分标本切下其后半规管及壶腹神经,微量自控注射器与后半规管相连,产     

豚鼠Ⅰ型前庭毛细胞改良分离法

目的 探索一种能提供更多数量并更长时间保留豚鼠单离Ⅰ型前庭毛细胞细胞活性的分离方法.方法 将耳廓反射正常的杂色豚鼠48只随机分为胶原酶Ⅳ 常用分离法组(A组)、胰蛋白酶 常用分离法组(B组)、胶原酶Ⅳ 改良分离法组(C组)和胰蛋白酶 改良分离法组(D组),每组12只,分别用0.25%胶原酶Ⅳ和0.05%胰蛋白酶结合文献报道常用液体和改良液体外加机械分离法分离豚鼠前庭Ⅰ型毛细胞,通过光镜、膜片钳、胞内钙成像等方法观察、鉴定和评价Ⅰ的活性.结果 A组平均每耳分离出存活单离Ⅰ型前庭毛细胞25个,3 h后存活细胞约14个,6 h后存活细胞约8个,3 h静息膜电位平均为-55±10 mV,胞内钙离子浓度平均为105±15 nmol/L;B组平均每耳分离开存活单离Ⅰ型前庭毛细胞40个,3 h后存活细胞约19个,6 h后存活细胞约6个,3 h静息膜电位平均为-60±10 mV,胞内钙离子浓度平均为95±10 nmol/L;C组平均每耳分离出存活单离Ⅰ型前庭毛细胞24个,3 h后存活细胞约为17个,6 h后存活细胞约11个,3 h静息膜电位平均为-55±10 mV,胞内钙离子浓度平均为95±15 nmol/L;D组平均每耳分离出Ⅰ型前庭毛细胞42个,3 h后存活细胞约30个,6 h后存活细胞约23个, 3 h静息膜电位平均为-60±10 mV,胞内钙离子浓度平均为90±10 nmol/L,且胞内钙离子浓度更稳定.结论 与传统的胶原酶Ⅳ酶解加机械分离法相比,以胰蛋白酶酶解结合改良式液体外加机械分离技术分离方法简便易行,能提供足够量的存活时间较长的豚鼠单离Ⅰ型前庭毛细胞,适用于对细胞活性要求较高的实验如膜片钳电生理研究等.     

离体豚鼠前庭神经节细胞的分离及胞内钙离子活动的观察

目的进一步了解前庭神经节细胞的形态和电生理特性.方法用体重250～300g的豚鼠,断头后取出颞骨,剔除面神经和听神经,取出前庭神经节.经酶消化后用机械法分离成单细胞,用钙离子敏感的荧光染料Fura-2染色,于数字荧光显微镜下观察.结果分离出的单个前庭神经节细胞形状为园形、椭园形和不规则型,直径从20μm到30μm不等,分为有微绒毛的Ⅰ型细胞和无绒毛的Ⅱ型细胞.在体外室温22～24℃下可存活5～6h.用150 mmol/L KCl灌流1分钟,灌流开始20秒后,前庭神经节细胞胞内钙离子荧光强度比率从静止时的0.47±0.04,增至1.18±0.19,40秒后达峰值1.43±0.18,然后缓慢下降.300秒后降至峰值一半,约10分钟后基本恢复至正常,重复刺激可得到类似的结果.在无钙外环境中,150 mmol/L KCl不能诱发胞内钙离子浓度增加.1μM ionomycin可诱发不可逆的胞内钙离子浓度增加.结论本研究使用酶消化后机械分离法分离出活性良好的单个神经节细胞,前庭神经节细胞膜存在电压依赖性钙离子通道.     

正常豚鼠与内淋巴水肿豚鼠中耳加压前庭反应

将体重250g～350g的28只Duncan-Hartley白化病豚鼠分成3组,第1组15只去除其右侧内淋巴导管,造成内淋巴水肿,其中12只在2个月后行中耳加压;第2组8只作为对照组进行同样的中耳加压;第3组5只内淋巴水肿耳标本取自Massachusetts眼、耳科医院ENT电子显微镜实验室豚鼠颞骨库。将经内淋巴水肿造模2个月并对中耳加压的豚鼠标本与上述5只在同样存活期内经内淋巴水肿造模,但未对中耳加压的豚鼠标本作组织学比较。在豚鼠腹膜内戊巴比妥麻醉下将一塑料管插入豚鼠右侧听泡后上部2mm深处,用牙科粘合剂固定。此管通过Heise氏数字压力计与一压力室相连,使…     

豚鼠电刺激诱发前庭神经核场电位特征

目的 探讨电刺激前庭诱发电位的特征.方法 双银丝刺激电极放置于圆窗表面,在电刺激条件下采用玻璃微电极记录前庭神经核的场电位.结果 电刺激诱发的前庭场电位主要由一个负波(N1)构成,其振幅随微电极在前庭神经核的位置而变化.电流和电压刺激的阈强度分别为0.59±0.07 mA和0.90±0.50 V,1.5倍阈强度的电流刺激时N1波的潜伏期为1.20±0.13 ms,对间隔小于4 ms的双刺激中的第二次刺激无反应或者反应减低.结论 迷路刺激能有效地兴奋前庭神经诱发前庭神经核神经元的场电位,且电位相当稳定.     

促甲状腺释放激素对豚鼠前庭习服的影响

反复作旋转或冷热水试验可使动物眼震反应减弱,这称之为前庭习服。许多实验证明小脑蚓部尤其是前庭小脑区对前庭习服发生和维持起重要作用。作者研究了促甲状腺释放激素(TRH)对豚鼠前庭习服的影响。用健康成年豚鼠5只为实验组,另5只为对照组。用一直径40cm的转盘。其上有三只固定豚鼠的盒子,以0.5°/秒~2的匀加速度作逆时针旋转,当角速度到60°/秒时保持匀速旋转60秒,突然停止,2分钟后再重复上述实验,这样仅右水平半规管受刺激。本实验是在完全黑暗的环境中进行,每天作30次,连续15天,用眼震电图记录实验结果,以眼震持续时间和次数为参数。实