极性有机溶性辅助阴、阳离子交换组合色谱法

目的：研究极性有机溶性辅助阴、阳离子交换色谱串接组合纯化蛋白质的可行性。方法：以溶栓素为纯化对象，采用极性有机溶性辅助阴、阳离子交换色谱串接组合与常规方法的纯化结果相比对比。结果：聚丙烯酰胺凝胶电泳考马斯亮蓝染色法结果显示，以含低浓度乙醇的缓冲液进行相同的离子交换色谱，具有较好的分离效果。结论：极性有机溶剂辅助阴、阳离子交换色谱有效串接组合是一种较好的组合纯化方式，但是这种方法使用的前提条件，是目标蛋白质在低浓度极性有机溶剂条件下仍能保持适当的活性和溶解性。     

阳离子交换树脂-高效液相色谱法测定羟喜树碱脂质体包封率

［摘要］目的建立阳离子交换树脂 高效液相色谱（HPLC）法测定羟喜树碱脂质体方法的包封率。方法阳离子交换树脂柱层析法分离脂质体和游离药物,HPLC法测定脂质体中药物的含量,计算包封率。 结果在所选色谱条件下,辅料不干扰测定,羟喜树碱浓度在0.56～11.20 μg&;#8226;mL 1范围内线性关系良好。阳离子交换柱层析法可将脂质体与游离药物有效分离,药物回收率99.4％,加样回收率98.1％。样品的包封率88.3%～91.5％。结论阳离子交换柱层析法便捷、准确,可用于测定羟喜树碱脂质体的包封率。     

重组人血管内皮抑素的阳离子交换色谱复性与纯化条件研究

对rhEndostatin包涵体蛋白的色谱复性条件进行研究,摸索出最佳的复性、纯化条件,解决其在大肠杆菌中表达提取时遇到的蛋白变性问题。按实验条件对表达的rhEndostatin包涵体蛋白进行提取、洗涤、变性;利用正交法设计重组蛋白的色谱复性、纯化实验;利用SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱对rhEndostatin包涵体蛋白进行了色谱复性、纯化。最佳复性条件为rhEndostatin上样浓度为2.5 mg/mL,洗脱体积流量为1/20床体积/min(3.5 mL/min),NaCl浓度0.1 mol/L,GSH/GSSG的浓度比为3/0.3 mmol/L。在此条件下纯度约97%,蛋白回收率为90%,重组蛋白的活性最高,IC50达到5μg/mL。     

离子色谱法测定口服电解质颗粒中阴、阳离子的含量

目的:建立离子色谱法(IC)测定口服电解质颗粒中6种阴、阳离子(氯离子、磷酸根、柠檬酸根离子、钠离子、钾离子、镁离子)含量的方法.方法:测定阴离子的色谱柱为Metrosep A Supp-5 column(250 mm×4 mm),流动相为12.8 mmol·L-1 Na2CO3,等度洗脱,柱温为30℃,流速为0.7 ...     

柱后衍生阳离子交换色谱法同时测定新疆产贝母中17种氨基酸的含量

目的:建立同时测定新疆产贝母中17种氨基酸含量的方法。方法:采用阳离子交换色谱柱分离17种氨基酸;采用柱后衍生阳离子交换色谱法测定药材中17种氨基酸的含量:色谱柱为LCAK 06/Na柱,流动相A为柠檬酸三钠11.9 g、柠檬酸6 g、苯酚1g,加水溶解,再加65 m L甲醇和6 m L浓盐酸,加水定容(调p H至3.4),流动相B为柠檬酸三钠11.9 g、氢氧化钠2.8 g、苯酚1 g、硼酸5.0 g,加水溶解并定容(调p H至10.8)(梯度洗脱),流速为0.45 m L/min(A泵)、0.25 m L/min(M泵),检测波长为440 nm(脯氨酸)、570 nm(其余氨基酸),进样量为50μL。结果:天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、赖氨酸、精氨酸和脯氨酸检测浓度线性范围均为20~400 nmol/m L(除胱氨酸10~200 nmol/m L)(r均大于0.989 0);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<2.0%;检测限除胱氨酸外(0.08 nmol/m L)其余氨基酸均为0.16 nmol/m L;加样回收率为98.5%~99.5%(RSD为0.06%~0.21%,n=6)。结论:该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可用于新疆产贝母中氨基酸含量的同时测定。     

阳离子交换-高效液相色谱-电化学法测定人血浆中儿茶酚胺的浓度

目的:采用弱阳离子固相萃取小柱(WCX-SPE)优化人血浆儿茶酚胺检测实验条件,以减少血浆用量,提高实验稳定性,建立操作简单、可靠的人血浆儿茶酚胺浓度检测方法。方法:采用waters WCX固相萃取小柱提取血浆中儿茶酚胺,采用高效液相色谱-电化学检测法测定儿茶酚胺,并对其线性范围、方法回收率、提取回收率、日间日内精密度及稳定性进行考察。结果:去甲肾上腺素(NE)在50~2 000 pg·ml^-1(n=6,r=0.998 5),肾上腺素(E)在50~2 000 pg·ml^-1(n=6,r=0.999 3)浓度范围内线性关系良好,最低检测限分别为25,50 pg·ml^-1 (S/N≥3),NE、E样品的平均提取回收率分别为89.6%、91.5%,平均方法回收率分别为100.6%,99.4%,平均日间RSD分别为5.1%,4.3%,平均日内RSD分别为3.9%,3.6%。结论:采用WCX固相萃取小柱提取血浆中儿茶酚胺灵敏度高,操作简便,结果准确可靠,适合于临床诊疗需要。     

柱后衍生阳离子交换色谱法与柱前衍生高效液相色谱法测定人胎盘组织液中18种氨基酸含量比较

摘 要 目的：比较柱前衍生高效液相色谱法（HPLC法）和柱后衍生阳离子交换色谱法（AARO法）测定人胎盘组织液中18种氨基酸含量的差异。方法: HPLC法采用 C₁₈柱和2,4 二硝基氯苯（DNCB）进行柱前衍生化,加入0.1 mol·L^-1硼砂缓冲液（pH=9.1）,进行测定;AARO法采用强酸性阳离子交换色谱柱和柱后衍生化,直接测定。结果: 柱前衍生高效液相色谱法和柱后衍生阳离子交换色谱法的重复性考察,AARO法各组分RSD为0.91%～1.84%,HPLC法RSD为1.04%～1.87%。结论:柱后衍生阳离子交换色谱法与柱前衍生高效液相色谱法测定人胎盘组织液种 18种氨基酸,均可采用,两种方法对测定上述各氨基酸结果一致性较好, 但柱前衍生HPLC法可能易造成衍生不彻底和衍生物不稳定。     

阳离子交换固相萃取结合LCMS-IT-TOF的中风回语颗粒化学成分分析

目的:基于阳离子交换固相萃取(PCX-SPE)结合液相色谱-离子阱-飞行时间质谱(LCMS-IT-TOF)技术鉴定中风回语颗粒中的化学成分.方法:样品采用甲醇超声提取,经PCX-SPE小柱分离富集.选用Dimonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为20.02 mmol/L乙酸铵-0.5...     

强酸性阳离子交换纤维固相萃取-ICP-AES测定食品包装铝材中铜、镍、锌

摘 要 目的：建立用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP AES）测定食品包装铝材中Cu、Ni和Zn含量的分析方法。方法: 在试液中加入少量EDTA使其浓度为0.010 0 mol·L^-1,调节溶液pH=5.0,用强酸性阳离子交换纤维对Al³⁺ 进行超声辅助萃取,由于Al³⁺不能与EDTA迅速形成配阴离子,则被强酸性阳离子交换纤维吸附,而Cu²⁺、Ni²⁺和Zn²能与EDTA迅速形成不被强酸性阳离子交换纤维吸附的配阴离子,则留在溶液中待测定。结果: 试液经过分离后, Cu、Ni和Zn未见损失,而残留Al的质量浓度约是Cu、Ni、Zn的170倍,不干扰ICP AES的测定。样品标准加入的回收率均在95.3%~104%之间,RSD在0.2%~2.5%（n=5）之间;标准物质中Ni、Cu和Zn的测定值对认定值的相对误差均小于5.0%。结论:本方法可用于铝制饮料易拉罐、烘烤食品用铝箔和标准物质等样品中Ni、Cu和Zn的测定。     

The inhibitory effects of five alkaloids on the substrate transport mediated through human organic anion and cation transporters

1.?Human solute carrier transporters (SLCs) are important membrane proteins mediate the cellular transport of many endogenous and exogenous substances. Organic anion/cation transporters (OATs/OCTs) and organic anion transporting polypeptides (OATPs) are essential SLCs involved in drug influx. Drug–drug/herb interactions through competing for specific SLCs often lead to unsatisfied therapeutic outcomes and/or unwanted side effects. In this study, we comprehensively investigated the inhibitory effects of five clinically relevant alkaloids (dendrobine, matrine, oxymatrine, tryptanthrin and chelerythrine) on the substrate transport through several OATs/OCTs and OATPs.

2.?We performed transport functional assay and kinetic analysis on the HEK-293 cells over-expressing each SLC gene.

3.?Our data showed tryptanthrin significantly inhibited the transport activity of OAT3 (IC₅₀?=?0.93?±?0.22?μM, K_i?=?0.43?μM); chelerythrine acted as a potent inhibitor to the substrate transport mediated through OATP1A2 (IC₅₀?=?0.63?±?0.43?μM, K_i?=?0.60?μM), OCT1 (IC₅₀?=?13.60?±?2.81?μM) and OCT2 (IC₅₀?=10.80?±?1.16?μM).

4.?Our study suggested tryptanthrin and chelerythrine could potently impact on the drug transport via specific OATs/OCTs. Therefore, the co-administration of these alkaloids with drugs could have clinical consequences due to drug–drug/herb interactions. Precautions should be warranted in the multi-drug therapies involving these alkaloids.     

气相色谱法测定盐酸比生群中溶剂残留量

目的：测定盐酸比生群原料中残留有机溶剂甲醇、1，4-二氧六环和甲苯的含量。方法：采用气相色谱法，氢火焰离子化检测器(FID)，以水为溶剂，异丙醇为内标，采用2m不锈钢填充柱，80／100目，Carbopack担体，上附0．2％Carbowax1500固定液；柱温120℃维持4分钟，以70℃／min的速率升温至150℃，维持7．5分钟；气化室温度：150℃；检测器温度：180℃(FID)；载气：氮气；柱前压：33Psi。实现了各组分的基线分离。结果：3批盐酸比生群原料中3种有机溶剂残留量均符合规定。结论：经方法学试验验证，该方法灵敏、准确、可信、适用于本品有机溶剂残留量的测定。     

Capillary electrophoresis and high-performance anion exchange chromatography for monitoring caseinoglycomacropeptide sialylation

Capillary zone electrophoresis was applied to separate caseinoglycomacropeptide glycoforms and characterize microheterogeneity of the glycopeptide. Particular attention was paid to the sialic acid content in caseinoglycomacropeptide obtained through different manufacturing processes. A chemometric approach was used to simultaneously study effects of acid concentration, hydrolysis time and temperature on sialic acid release from caseinoglycomacropeptide. Hydrolysis conditions that maximize sialic acid release were chosen. Sialic acid was determined using high performance anion exchange chromatography coupled with pulsed amperometric detection. Results were compared to those obtained by alternative techniques, such as colorimetric and enzymatic methods.     

毛细管色谱法测定盐酸米多君中的有机溶剂残留量

目的建立毛细管气相色谱法测定盐酸米多君中的有机溶剂残留量。方法用HP-FFAP毛细管气相色谱柱,FID检测器,以正丙醇为内标进行测定。结果乙醇、乙腈、乙酸的线性范围分别为20～800μg.L-1(r=0.999 9)、1.64～65.6μg.L-1(r=0.999 7)、20～800μg.L-1(r=0.999 5),平均回收率分别为100.2%、99.7%、99.6%,RSD分别为0.74%、1.17%、1.37%(n=9)。结论本方法简单、准确、灵敏度高、重现性好,适用于盐酸米多君中有机溶剂残留量的测定。     

顶空进样毛细管气相色谱法测定生物素中有机溶剂残留量

目的建立测定生物素中有机溶剂残留量的方法.方法采用顶空进样毛细管气相色谱法测定,色谱柱为HP-INNO-Wax毛细管柱;程序升温,初始温度为50℃,维持6min后,以20℃·min-1升温至180℃保持5min.结果在确定的色谱条件下各组分能基线分离,线性关系良好;加样回收率为96.7%～102.4%.最低检测限为0.03～0.16ppm.结论该方法灵敏度和准确度均达到有机溶剂残留量检测的要求,可用于生物素中有机溶剂残留量的测定.     

气相色谱法测定非布索坦中有机溶剂残留量

目的 建立非布索坦中4种残留有机溶剂的分离测定方法.方法 采用毛细管气相色谱法,FID检测器,应用DB-624毛细管柱(30m×0.53mm×3.0μm),气化室温度200℃,柱温40℃,保持7min,以10℃·min-1升至100℃,再以50℃·min-1升至220℃保持2nin.测定非布索坦尼原料中乙醇、乙酸乙酯、...     

顶空气相色谱法测定齐多夫定中有机溶剂残留量

目的测定齐多夫定中有机溶剂残留量。方法采用顶空进样法测定,检测器为FID,色谱柱为DB-624毛细管柱,溶剂为N-甲基吡咯烷酮。结果甲醇、乙酸乙酯、二氧六环、甲苯、二甲亚砜相关系数均在0.999 5～1.000 0内;平均回收率在95.83%～107.95%范围内,RSD在1.33%～2.71%范围内(n=9)。结论该方法简单、准确、快捷、适用于测定齐多夫定中有机溶剂残留量。     

毛细管气相色谱法测定丁酸丙酸氢化可的松中有机溶剂残留量

目的 建立丁酸丙酸氢化可的松中4种残留有机溶剂的分离测定方法.方法 采用毛细管气相色谱法,FID检测器,DB-Ⅰ石英毛细管柱(30m×0.3 mm×1.8μm),载气为氮气,柱温40℃保持9 min,以2℃/rnin升至68℃,再以70℃/min升至230℃,保持13 min;测定丁酸丙酸氢化可的松原料中甲醇、丙酮、吡啶和N,N-二甲基甲酰胺的残留量.结果 各有机溶剂均能得到有效分离,在所考察的浓度范围内线性关系良好,r为0.998 3～0.999 7,平均回收率为98.1％～100.0％.结论 本方法灵敏、简便快速、结果准确,可用于丁酸丙酸氢化可的松中残留有机溶剂的检测.     

顶空毛细管气相色谱法测定硝酸异康唑中5种有机溶剂残留

目的:建立测定硝酸异康唑原料药中甲基叔丁基醚、甲醇、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃5种有机溶剂残留量的分析方法。方法:采用毛细管气相色谱法,检测器:FID;检测器温度:250℃;进样器温度:200℃;载气:氮气;顶空进样。结果:在上述色谱条件下,甲基叔丁基醚、四氢呋喃、甲醇、二氯甲烷和三氯甲烷分别在10.28~92.52μg·mL^-1 (γ=0.9994),14.49~130.43μg·mL^-1 (γ=0.9994),62.86~565.74μg·mL^-1 (γ=0.9993),13.52~121.68μg·mL^-1 (γ=0.9995),2.76~24.84μg·mL^-1 (γ=0.9991)质量浓度范围内线性关系良好。平均回收率分别为97.19% (RSD为1.21%),99.90% (RSD为0.28%),99.29% (RSD为1.21%),99.15% (RSD为0.65%),100.14% (RSD为2.58%)。结论:该检测方法灵敏、准确、可靠,可用于硝酸异康唑原料药的质量控制。