基于“肝藏血”理论探究刺络泻血疗法对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡的影响

目的:基于中医"肝藏血"理论,观察刺络泻血疗法对肝纤维化大鼠肝组织中肝星状细胞(Hepatic stellate cells,HSC)凋亡的影响,进而探究刺络泻血疗法治疗肝纤维化的作用机制。方法:SD大鼠40只随机分为四组(正常组、模型组、秋水仙碱组、刺血组),每组10只,除正常组外其余3组应用40%CCL4(花生油稀释)诱导肝纤维化模型。6周后,秋水仙碱组给予秋水仙碱200μg/(kg·d),5次/周灌胃;刺血组选取下肢肝经血络刺血0.3~0.5 m L,3次/周。12周后腹主动脉取血测定各组大鼠肝功ALT、AST水平;选取肝左叶小块肝组织石蜡包埋、切片,行Masson染色观察肝脏病理形态学改变;TUNEL法检测HSC的凋亡。结果:ALT、AST:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST水平均升高,差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,秋水仙碱组和刺血组大鼠血清ALT、AST水平均降低,其中刺血组与模型组大鼠血清AST水平差异具有统计学意义(P0.01);秋水仙碱组与刺血组相比,刺血组大鼠血清ALT、AST低于秋水仙碱组,但差异无统计学意义(P0.05)。HSC凋亡情况:正常组HSC凋亡个数较少,其余各组HSC凋亡数目明显增多;与模型组比较,秋水仙碱组和刺血组HSC凋亡数目增多(P0.05,P0.01);与秋水仙碱组比较,刺血组HSC凋亡数目更多(P0.05)。结论:刺络泻血疗法可有效防治大鼠肝纤维化,其作用机制可能与促进HSC凋亡有关。     

软肝煎对高脂饮食肝纤维化大鼠HA、LN、PCⅢ、CⅣ及病理的影响

[目的]探讨软肝煎对高脂饮食肝纤维化大鼠透明质酸(HA)、层连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)及病理的影响。[方法]高脂饮食确定肝纤维化模型成立后,分别对中药低剂量组和中药高剂量组以每日生药12.8 g/kg体质量和每日生药25.6 g/kg体质量行中药灌胃,模型组、正常组以生理盐水灌胃。治疗12周后处死,观察肝脏组织学改变;取血测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);放射免疫法测血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ水平。[结果]两治疗组大鼠血清TC、ALT、AST明显低于模型组;模型组TG明显高于高剂量组。模型组大鼠血清HA、LN、PCⅢ、CⅣ明显高于正常组及两治疗组。肝脏脂肪变性、炎症活动度、肝组织纤维化计分(SSS)结果均显示模型组与中药低剂量组无统计学差异;中药高剂量组低于模型组。[结论]软肝煎降低肝纤维化大鼠血清ALT、AST、TC、TG、HA、LN、PCⅢ、CⅣ含量,保护肝细胞,改善肝功能,减轻肝脏炎症,抑制胶原合成,促进胶原降解,抑制了肝纤维化的发生、发展。     

二氢杨梅素对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化指标的影响

目的：观察二氢杨梅素对四氯化碳（CCL4）所致肝纤维化大鼠血清肝功能及肝纤维化指标的影响。方法：84只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、复方鳖甲阳性对照组和二氢杨梅素低、中、高剂量组。采用40%CCL4皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,造模的同时分别用3种不同浓度的二氢杨梅素进行干预,持续13周。测定各组大鼠血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）及透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）、Ⅳ型胶原（CⅣ）的含量。结果：与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST及HA、LN、PC-Ⅲ、CⅣ的含量均显著升高（P〈0.01）;与模型组比较,复方鳖甲组及二氢杨梅素低、中、高剂量组大鼠血清中ALT、AST及HA、LN、PC-Ⅲ、CⅣ的含量均显著降低（P〈0.05）。结论：二氢杨梅素对大鼠实验性肝损伤具有一定的预防作用和抗肝纤维化作用。     

苷泰胶囊对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用

目的:研究苷泰胶囊对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化的治疗作用,并探讨其相应的作用机制。方法:SD大鼠将连续8周ip CCl4成功诱导的肝纤维化大鼠随机分为模型组,阳性药组秋水仙碱(2 mg·kg-1),苷泰胶囊低、高剂量组(230,460 mg·kg-1),每组12只,另设同批次正常大鼠12只为正常组。除正常组和模型组给予等体积生理盐水外,各组均按给定剂量ig给药,每日1次,连续4周。给药结束后处死大鼠,取血取肝。采用比色法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定透明质酸(HA),层粘蛋白(LN),Ⅳ型胶原(CⅣ)和Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ)的含量;采用碱水解法处理肝组织后测定其羟脯氨酸(Hy P)的含量;同时采用苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色法对肝组织染色,并于光学显微镜下观察比较肝脏病理学变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中ALT,AST,HA,LN,CⅣ和PCⅢ的水平明显升高,肝组织中Hy P的含量明显升高(P0.01),病理学结果显示模型组肝脏病理损伤程度较为明显,肝脏中胶原沉积较多;与CCl4模型组比较,苷泰胶囊能显著降低血清中ALT,AST,HA,LN,CⅣ和PCⅢ的水平(P0.05,P0.01),同时可使肝组织中Hy P的含量明显下降(P0.05,P0.01)。病理学结果显示苷泰胶囊能明显改善肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积。结论:苷泰胶囊能够有效地减轻CCl4诱导的大鼠肝纤维化程度。     

刺络泻血疗法对肝纤维化大鼠HA、LN影响的研究

目的研究刺络泻血疗法对肝纤维化大鼠透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)及肝组织病理学的影响,探讨其抗肝纤维化的疗效及作用机制。方法选用雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、刺络泻血组(刺血组)、药物组4组。除正常组外,其余3组分别颈后皮下注射40%CCL4(花生油稀释)诱导肝纤维化模型。第6周起,刺血组从大鼠后肢肝经浅表静脉处刺络泻血,每次0.5 m L,每周2次;药物组给予秋水仙碱灌胃,每日200μg/kg体重,每周灌胃5次,至12周。第12周末,以10%水合氯醛麻醉大鼠,腹主动脉取血5 m L,进行丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝纤维指标HA、LN检测,剖取肝叶行Masson染色观察肝脏病理形态学改变。结果与正常组比较,模型组大鼠ALT、AST、HA、LN含量均升高,差异有统计学意义(P0.05);与模型组比较,刺血组和药物组大鼠ALT、AST、HA、LN含量均降低,差异有统计学意义(P0.05);与药物组比较,刺血组ALT、AST、HA、LN水平均有降低,但差异无统计学意义(P0.05)。模型组Masson染色示肝脏纤维化明显,刺血组和药物组Masson染色肝纤维化程度较轻。结论刺络泻血疗法能减少肝纤维组织增生,阻止肝纤维化的发展,可能与下调大鼠血清细胞外基质HA、LN水平有关。     

徐氏化纤汤对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠影响的实验研究

目的:研究徐氏化纤汤对四氯化碳(CCl_4)诱导的肝纤维化大鼠的作用及其可能的作用机制。方法:将72只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、化纤汤高剂量组、化纤汤中剂量组、化纤汤低剂量组、秋水仙碱组,每组12只。除空白对照组外,其他各组均采用40% CCl_4+花生油腹腔注射制作大鼠肝纤维化模型。空白对照组和模型组每天灌服生理盐水;化纤汤高、中、低剂量组每天分别灌服21 g/(kg·d)、10.5 g/(kg·d)、5.25 g/(kg·d)化纤汤药液;秋水仙碱组按0.35 mg/(kg·d)灌服秋水仙碱药液。检测各组大鼠肝功能、肝纤四项,并作肝组织病理切片分析反映肝脏的损伤程度。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠肝重、肝脏指数明显升高,大鼠体质量明显减轻,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)显著升高,血清白蛋白(Alb)显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与模型组比较,秋水仙碱组、化纤汤各剂量组大鼠体质量明显升高,大鼠肝重、肝脏指数明显降低,大鼠血清ALT、AST、TBil、HA、CⅣ、PCⅢ显著降低,Alb显著升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:徐氏化纤汤有一定的保护肝功能及抗肝纤维化的作用。     

芪红水煎液对免疫肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化标志物的影响

目的观察芪红水煎液对猪血清诱导的免疫肝纤维化模型大鼠的肝功能及血清肝纤维化标志物的影响。方法模型制备采用腹腔注射无菌猪血清,每周2次,连续12周。成模后,用芪红水煎液干预治疗,秋水仙碱对照。实验结束血液生化检测肝功能,放射免疫法检测大鼠血清肝纤维化指标。结果与正常组大鼠比较,模型组大鼠血清ALT、AST、ALP水平均显著升高(均P0.01),说明造模成功。秋水仙碱组ALT、AST、ALP水平与模型组大鼠相比较差别均不大(均P0.05);而芪红水煎液组大鼠血清ALT、AST、ALP水平与模型组比较均改善(均P0.01)。与正常组大鼠比较,模型组大鼠HA、LN、PCⅢ、IV-C明显升高(均P0.01),说明造模成功。秋水仙碱组血清HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ与模型组比较,均有不同程度降低(P0.01或P0.05),Ⅳ-C则差别不大(P0.05)。芪红水煎液组血清HA、LN、Ⅳ-C、PCⅢ也有不同程度降低(P0.01或P0.05)。结论提示芪红水煎液可以减轻肝细胞损伤,改善肝功能,保护肝组织,并降低肝纤维化程度,对肝纤维化有一定的防治作用。     

复方991抗纤方对大鼠实验性肝纤维化的影响

目的观察复方991抗纤方对大鼠肝纤维化模型的生化酶学改变.方法对高脂饮食CCl4造模大鼠进行干预,分为模型组、预防组、秋水仙碱组、991治疗组,检测ALT、AST、ALB、GLB、TP、PCⅢ、HA,观察各组对肝纤维化的影响.结果复方991抗纤方可明显降低血清ALT、AST水平,升高白蛋白,降低球蛋白,预防组PCⅢ和HA水平低于其他组,991治疗组明显低于秋水仙碱组.结论复方991抗纤汤有预防和治疗肝纤维化的作用.     

平肝汤抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的观察平肝汤对CCl4诱导的大鼠肝纤维化的防治作用.方法64只雄性大鼠随机分为空白组、模型组、秋水仙碱组及平肝汤组,每组16只.除空白组外,所有大鼠皮下注射40?l4花生油溶液,每隔3 d 1次,共1 2周.空白组予以等量的花生油皮下注射.从造模第4周起,各组给予相应的药物或生理盐水灌胃.实验结束后采集血清、肝脏组织标本,检测血清ALT(丙氨酸氨基转移酶)、AST(天门冬氨酸氨基转移酶)、A1b(白蛋白)、Glo(球蛋白)、PCⅢ(Ⅲ型前胶原)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-Co)、LN(层粘连蛋白)、HA(透明质酸),观察肝组织学改变.结果平肝汤组、秋水仙碱组大鼠肝组织纤维化病变较模型组轻(P＜0.05),血清ALT、AST、Glo、PCⅢ、Ⅳ-Co、LN、HA亦较模型组低(P＜0.01),而Alb水平高于模型组,平肝汤组疗效显著优于秋水仙碱组(P＜0.05).结论平肝汤对CCl4所致大鼠肝纤维化有良好的防治作用,具有保护肝细胞、减轻肝细胞变性坏死、抑制肝脏纤维组织增生、减轻肝组织学病变的作用.     

佛甲草对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响

目的:观察佛甲草提取液(SLT)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化形成的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、秋水仙碱(Col,0.1mg/kg)、SLT低剂量组(SLT,4g/kg)、SLT高剂量组(8g/kg)。采用50%的CCl4花生油溶液灌服制备大鼠肝纤维化模型,期间灌服SLT(4,8g/kg)、Col(0.1mg/kg)进行干预,正常组和模型组灌服等体积生理盐水,连续9周。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)活性,透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、一氧化氮(NO)含量以及抗超氧阴离子自由基(O2.-)活力;取固定部位肝组织做病理组织学检查,光镜下观察肝细胞结构和肝纤维化程度。结果:SLT预防给药能明显降低CCl4诱导肝纤维化大鼠血清ALT、AST活性和HA、LN、PCⅢ、CⅣ含量,升高NO含量及增强抗O2.-活力;病理组织学检查结果显示SLT组肝细胞结构明显改善,肝纤维化程度减轻。结论:SLT预防给药可抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成。