海马注射miR-181c对CCI模型大鼠热痛的影响

目的:观察大鼠海马CA1区注射miR-181c激动剂/抑制剂对坐骨神经缩窄性损伤(CCI)大鼠热痛及海马炎症因子和转录因子表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠随机分为6组,分别是假手术组(Sham)、CCI模型组(CCI)、CCI+miR-181c激动剂阴性对照组、CCI+miR-181c抑制剂阴性对照组、CCI+miR-181c激动剂组和CCI+miR-181c抑制剂组。在术前1 d,术后第1、3、5、7 d测定热缩足潜伏期(TWL)。连续7 d给药后取海马,real time RT-PCR、ELISA及Western Blot检测TLR4、炎症因子(TNF-α和IL-1β)和转录因子(CTCF和Nrf2)表达。结果:与Sham组相比,CCI组大鼠TWL缩短(P <0.05),海马miR-181c表达下降(P <0.05),TLR4、TNF-α和IL-1βmRNA表达上调(P <0.05),IL-1β和TNF-α含量增多(P <0.05);与CCI组相比,注射miR-181c激动剂后CCI大鼠TWL延长(P <0.05),海马miR-181c表达上调(P ...     

米诺环素对CCI大鼠抑郁样行为的影响及机制研究

目的:观察海马CA1区注射米诺环素对坐骨神经慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的抑郁样行为、海马和前额叶皮层小胶质细胞激活的影响并分析其机制。方法:成年SD雄性大鼠随机分为:对照组、假手术组、CCI模型组、CCI+米诺环素组。糖水偏好及旷场实验检测大鼠抑郁样行为;免疫组化观察海马以及前额叶皮层Iba-1表达;取海马以及前额叶皮层组织,real-time PCR观察Iba-1、NLRP3和caspase1 mRNA表达,ELISA测定IL-1β和IL-18含量。结果:与假手术组相比,CCI大鼠7、10 d和14 d的糖水偏好明显降低(P 0. 05),旷场中央活动距离和中央活动时间明显减少(P 0. 05);与CCI组相比,CA1区注射米诺环素后CCI大鼠7 d和14 d的糖水偏好明显升高(P 0. 05),旷场中央活动距离和中央活动时间明显增加(P 0. 05)。与假手术组相比,CCI组大鼠海马CA1、CA3及DG区和前额叶皮层Iba-1阳性细胞数目显著增多(P 0. 05),Iba-1、NLRP3和caspase1 mRNA表达明显上调; IL-1β和IL-18含量也明显升高(P 0. 05)。与CCI组相比,注射米诺环素后,CCI大鼠海马CA1、CA3及DG区和前额叶皮层Iba-1阳性细胞数目减少(P 0. 05),Iba-1、NLRP3和caspase1 mRNA表达降低(P 0. 05),IL-1β和IL-18含量降低(P 0. 05)。结论:海马CA1区注射米诺环素明显抑制CCI大鼠的抑郁样行为;其机制可能是抑制海马和前额叶皮层小胶质细胞激活,下调NLRP3和caspase1表达,从而使IL-1β和IL-18产生减少。     

海马注射miR-181c对CCI模型大鼠机械痛和NF-L表达的影响

目的:在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)大鼠海马背侧CA1区给予miR-181c激动剂及抑制剂,观察大鼠机械痛阈以及海马神经微丝轻链多肽(NF-L)表达变化.方法:雄性SD大鼠分为假手术组(sham)、CCI组+生理盐水组、CCI+miR-181c激动剂组和CCI+miR-181c抑制剂组.在术前和术后第1、3、5、7、1...     

米诺环素对大鼠脑出血后VEGF、GLUT-1 表达的影响

目的 研究米诺环素对脑出血大鼠VEGF、GLUT-1表达的影响,探讨其的脑保护作用机制。方法 选用雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组、模型组及米诺环素组,每组20只。采用Ⅶ型胶原酶法制备Wistar大鼠右侧纹状体出血模型。模型制备成功后米诺环素组给予腹腔注射米诺环素,剂量为22.5 mg/kg,2次/d,假手术组和模型组给予腹腔注射等量的生理盐水。观察脑缺血后改良神经功能缺损评分（mNSS）、脑组织含水量,Western blots及免疫组化法分别检测VEGF及GLUT-1的表达。结果 与模型组相比,米诺环素组大鼠脑组织的mNSS评分、脑组织含水量、VEGF及GLUT-1的表达量降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 米诺环素可显著减轻脑出血后大鼠的神经功能损害及组织学损伤,并提高大鼠脑组织VEGF及GLUT-1的表达水平,对脑出血具有一定的神经保护作用,其机制可能与增强VEGF及GLUT-1的表达有关。     

米诺环素对帕金森病模型大鼠胶质细胞源性神经营养因子家族的影响

BACKGROUND:Researches have found that minocycline plays a neuroprotective effect by inhibiting the microglia cell proliferation and activation and suppressing glial cells to release cytokines and chemokines. OBJECTIVE:To investigate the influence of minocycline on glial cell line derived neurotrophic factor, NTN and gene expression in substantia nigra and corpus striatum in Parkinson’s disease model rats. METHODS:144 rats were randomly divided into four groups, with 36 rats in each group. In the normal control group, no intervention was given. In the model and experimental groups, 6-hydroxydopamine was injected in the right substantia nigra pars compacta and ventral tegmental area to establish Parkinson’s disease models. In the sham surgery group, vitamin C was injected in the two points. In the experimental group, after model establishment, rats were intragastrically given 4.5 g/L minocycline 45 mg/kg. From then on, additional 22.5 mg/kg minocycline was added every 12 hours. The last group was normal control group. Immediately, 12 hours, 1, 7, 14 and 21 days after model induction, SP immunohistochemistry was used to detect the expression of glial cell line derived neurotrophic factor and NTN expression in the substantia nigra and corpus striatum. RT-PCR was used to identify glial cell line derived neurotrophic factor and NTN mRNA expression in the substantia nigra and corpus striatum. RESULTS AND CONCLUSION:Both in the substantia nigra and corpus striatum, the positive cell number and relative gene expression of glial cell line derived neurotrophic factor and NTN were lower in the model group than in the normal control and sham surgery groups (P < 0.05). Glial cell line derived neurotrophic factor- and NTN-positive cell number and relative expression were higher in the experimental group than in the model group (P < 0.05). These findings suggest that minocycline can delay the process of Parkinson’s disease pathogenesis by promoting glial cell line derived neurotrophic factor protein and gene expression.     

米诺环素对糖尿病大鼠脊髓小胶质细胞极化的影响

目的:研究米诺环素对糖尿病大鼠脊髓小胶质细胞极化的影响。方法:27只成年雄性SD大鼠分为对照组(control)、糖尿病组(DM)、米诺环素处理组(minocyline),利用腹腔注射链脲菌素(STZ)方法制备糖尿病大鼠模型,检测大鼠的血糖及体重变化,免疫荧光染色检测大鼠脊髓Iba-1的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测大鼠脊髓肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子β(TGF-β)和白细胞介素10(IL-10)的水平变化,Western Blot检测大鼠脊髓CD68、精氨酸酶-1(Arg-1)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达变化。结果:STZ注射成功制备了糖尿病大鼠模型;免疫组化染色显示糖尿病模型大鼠脊髓Iba-1阳性细胞增多; ELISA检测结果显示糖尿病组大鼠脊髓组织中M1型小胶质细胞特异性细胞因子(TNF-α和IL-6)水平增加,米诺环素处理组大鼠脊髓组织中M2型小胶质细胞特异性细胞因子(TGF-β和IL-10)水平增加;Western Blot结果显示STZ组大鼠脊髓CD68表达上调,MAG和MBP表达降低,而米诺环素...     

高浓度酒精摄入对大鼠学习记忆及海马炎症因子表达的影响

目的:研究高浓度酒精摄入对大鼠学习记忆能力及海马内炎症因子表达的影响。方法:将20只雄性SD大鼠随机分为酒精组和对照组。酒精组大鼠给予酒精灌胃(50%,8 ml/kg,1次/d,28 d);对照组大鼠给予生理盐水灌胃。利用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,尼氏染色显示海马结构,免疫组化及免疫印迹检测海马内TNF-α和IL-6的表达。结果:酒精组大鼠学习记忆能力、海马尼氏染色强度均显著低于对照组;而海马TNF-α和IL-6的表达则强于对照组,且阳性细胞为多突起小细胞。结论:高浓度酒精可能通过增强海马内炎症因子表达而影响其功能、导致大鼠空间学习记忆能力下降。     

TDP对大鼠痛阈的影响

TDP辐射器已在临床广为采用,认为能缓解某些痛症和促进损伤的康复。有人认为TDP辐射的作用仅是一种热辐射效应。有关TDP的镇痛作用尚未见有动物实验指导。为更客观反映TDP的镇痛作用,作了如下实验,每次取SD大鼠6只,随机分成2组,用TDP辐射器     

鞘内注射MRS2395及MRS2211对足烫伤大鼠机械痛及炎症因子表达的影响

目的:观察鞘内注射P2Y_(12)受体拮抗剂MRS2395和/或P2Y_(13)受体拮抗剂MRS2211对足烫伤大鼠机械痛以及脊髓背角炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:在烫伤前1 h、烫伤后第6、12、24和48 h测定给药后机械缩足反应阈值(MWT);烫伤后24 h,取脊髓背角,实时荧光定量PCR检测Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达,ELISA技术检测背角IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果:与假烫伤组相比,大鼠烫伤后6 h即出现MWT明显下降,持续24 h处于较低水平(P0.01),但48 h后MWT回升。与烫伤组相比,单独鞘内注射MRS2395或MRS2211组12 h后MWT升高(P0.05),联合给药组MWT升高更为明显(P0.01)。与假烫伤组相比,烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达明显上调(P0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α水平上调(P0.01)。单独鞘内注射MRS2395或MRS2211仅部分抑制烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA表达上调(P0.05)以及部分抑制烫伤大鼠脊髓背角IL-1β、IL-6和TNF-α水平上升(P0.05)。MRS2395和MRS2211联合鞘内注射几乎完全阻断烫伤大鼠脊髓背角Iba-1、IL-6和TNF-αm RNA表达上调(P0.01),仅部分阻断IL-1β表达上调(P0.05),以及几乎完全阻断烫伤引起的脊髓背角IL-6和TNF-α水平上升(P0.01),仅部分阻断IL-1β水平上升(P0.05)。结论:单独鞘内注射MRS2395或MRS2211能够缓解烫伤痛大鼠机械痛敏症状,但联合用药时,镇痛效果更佳,其机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞激活以及炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α表达上调有关。     

米诺环素抑制内毒素诱导的大鼠眼内炎症反应

目的： 观察米诺环素对内毒素（LPS）诱导的大鼠眼内炎症的抑制作用。方法: SD大鼠玻璃体腔内1次注入LPS（1 μg）建立LPS诱导的眼内炎动物模型。在LPS注射前12 h和术中及术后连续3 d每天腹腔内注射米诺环素（45 mg/kg）。在LPS注入后6、12、24、48和72 h,裂隙灯显微镜下进行眼部炎症评分,组织病理学切片进行眼内浸润白细胞计数,并测定玻璃体内肿瘤坏死因子-α水平和前房水蛋白质浓度。结果: 在LPS注射后所有时点,米诺环素治疗均可明显减轻LPS诱导的眼内炎症,明显抑制玻璃体腔内白细胞浸润［LPS注射后24 h,眼内炎组（EO）为(1 182.63±191.15)细胞/每眼,眼内炎+米诺环素治疗组（EMT）为(291.50±63.77)细胞/每眼, P<0.01］并下调玻璃体腔内TNF-α的分泌水平［LPS注射后24 h,EO组为(931.17±99.81)ng/L,EMT组为(353.02±71.67)ng/L, P<0.01］。与EO组比较,EMT组各时点前房水蛋白质浓度改变无显著差异（P>0.05）。结论: 米诺环素通过抑制白细胞的眼内浸润和减少TNF-α的分泌,可明显抑制LPS诱导的眼内炎症反应。这些结果进一步证实白细胞眼内浸润和TNF-α分泌在LPS诱导的眼内炎发病机制中的作用,提示米诺环素在细菌性眼内炎的潜在治疗应用前景。     

PARP调节癫痫大鼠海马核转录因子κB及相关炎症因子的表达

目的:探讨癫痫大鼠海马组织核转录因子κB(NF-κB)随时间的变化规律及聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-AB)对NF-κB及白细胞介素1β(IL-1β)、环氧化酶-2(COX-2)的调节作用。方法:应用Western blotting检测海藻氨酸致痫大鼠海马核蛋白中NF-κBp65在不同时点及3-AB干预癫痫大鼠后的表达;应用RT-PCR及Western blotting检测IL-1β、COX-2 mRNA和蛋白水平在3-AB干预前后的变化。结果:大鼠海马核蛋白内NF-κBp65在癫痫后2h开始增高(P0.05),持续12h(P0.05),24h后恢复至对照组水平;应用3-AB后,NF-κBp65在核蛋白中含量明显下降(P0.05);癫痫发作6h海马组织内IL-1β、COX-2 mRNA和蛋白水平表达增高(P0.05),3-AB干预显著降低IL-1β、COX-2 mRNA及蛋白的表达(P0.05)。结论:癫痫发作可诱发海马组织NF-κB的核转位及IL-1β、COX-2的表达,3-AB能明显抑制癫痫诱发的NF-κB核转位及IL-1β、COX-2的表达。     

炎症因子对原代培养海马神经元CLC-3表达的影响

目的:研究不同浓度TNF-α、IL-1β、TGF-β刺激对原代培养海马神经元CLC-3(voltage-gated chloride channel 3)mRNA及蛋白质水平的影响。方法:取原代培养8 d的大鼠海马神经元,随机分为对照组、TNF-α组、IL-1β组和TGF-β组。TNF-α、IL-1和TGF-β组分别加入加入含有浓度为10 ng/ml的相应炎症因子培养液,每组分别在孵育6、12、24 h后分别收集细胞提取总RNA和蛋白采用实时定量PCR、Western Blot技术检测CLC-3 mRNA及蛋白水平的表达。结果:TNF-α、IL-1β处理12 h后培养海马神经元CLC-3在mRNA及蛋白水平开始上调,高峰持续从12 h至24 h(P0.05)。TNF-α刺激作用强于IL-1β。TGF-β处理海马神经元CLC-3 mRNA在6 h后即开始升高(P0.05),但在孵育6 h到24 h时下降至正常对平(P0.05)。结论:TNF-α、IL-1β、TGF-β可能通过刺激海马神经元CLC-3表达增加增强神经元存活能力。     

米诺环素对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

研究米诺环素(MNC)对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并对其免疫调节作用进行初步探讨。以ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞,以不同终浓度的MNC与T细胞共培养,荧光抗体染色结合流式细胞术,检测T细胞早期活化抗原CD69的表达;用羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰(CFDA-SE)染色结合流式细胞术,并用ModFit软件分析T细胞增殖相关指数。结果:终浓度为10、25和50μmol/L的MNC显著抑制ConA诱导的T细胞CD69的表达,由ConA组的71.20%±1.08%,分别降低为64.43%±1.39%、53.34%±1.26%和33.65%±1.91%;CFDA-SE染色结果显示,培养48 h和72 h的ConA组T细胞的增殖指数(PI)分别为1.57±0.03和2.06±0.02,各浓度的MNC对ConA刺激的T细胞增殖具有明显的抑制作用,以50μmol/L的MNC抑制作用最明显,48 h和72 h的PI分别为1.01±0.02和1.03±0.01,与相应时间的对照组比较,均有统计学意义(P<0.01)。MNC能有效地抑制小鼠T细胞的体外活化和增殖。具有独立于其抗菌活性的抗炎作用。     

实验性大鼠胃溃疡对海马肠三叶因子表达的影响

目的:研究实验性大鼠胃溃疡期间海马区肠三叶因子(ITF)表达的变化。方法:选择SD大鼠42只,其中实验性胃溃疡36只,正常对照6只,用免疫组织化学染色和RT-PCR方法分别检测大鼠海马ITF蛋白表达量和mRNA转录变化。结果:大鼠海马锥体细胞和颗粒细胞质内,以及海马内部分神经细胞可见ITF免疫反应阳性物质。与正常大鼠比较,实验性大鼠溃疡1 d后海马ITF平均灰度值开始降低,随后逐渐降低,1周后达到最低水平(P0.01),维持2~4周后开始恢复(P0.05)。RT-PCR检测表明,大鼠实验性溃疡后1 d开始,海马ITF mRNA转录水平逐渐升高,1周达到最高值,其后开始下降(P0.05~0.01),4周后接近实验前水平。结论:实验性胃溃疡大鼠海马中ITF高表达可能是溃疡愈合过程神经内分泌调节的重要因素。     

针刺对利血平化大鼠痛阈以及脑和脊髓内脑啡肽含量的影响

本实验对利血平影响针刺镇痛作用及其可能的机制进行了探索。 将大鼠分为四组,对照组(不给利血平和针刺);针刺组,电针双侧“环跳”和双侧“手三里”30分钟,频率15赫兹,负载电压5伏;利血平组,腹腔注射利血平2mg/kg,每日一次,连续两天;利血平+针刺组,从第二次给药后24小时再给予针刺。在针刺前后、给药前和药后24小时,用50℃热水烫尾,进行测痛。实验毕,断头处死取材。用放射免疫分析法分别测定其中的亮-脑啡肽和甲硫-脑啡肽。     

Aβ海马注射的AD大鼠模型海马MAPK表达变化

目的探讨丝裂酶原激活蛋白激酶(m itogen activated prote in k inase,MAPK)在阿尔茨海默病(A lzhe im er’s d iease,AD)发病中的变化及其可能机制。方法将β-淀粉样肽(beta-amyloid peptide,Aβ)1~401μl(10μg/μl)在立体定位仪下注入大鼠海马建立大鼠AD模型,2周后测长时程增强(long term potentiation,LTP)、免疫组化SABC法检测MAPK的蛋白表达。结果AD模型组Aβ注射2周后,模型组刺激前后fEPSP斜率变化及高频刺激增加的幅值与对照组相比显著下降(P<0.01);模型组海马CA1区、CA2区磷酸化的MAPK蛋白的表达显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01)。结论Aβ可能通过抑制MAPK信号通路,导致大鼠海马LTP降低,参与AD学习记忆障碍和痴呆形成。     

脑室内注射BDNF抗体对大鼠海马NOS表达的影响

探讨脑室内注射脑源性神经营养因子 (BDNF)抗体阻断内源性BDNF对大鼠海马一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元的影响。脑室内注射BDNF抗体一周后 ,采用Morris水迷宫进行行为检测 ;并用NADPH 黄递酶组化染色方法观察海马NOS阳性神经元数目的变化。与对照组相比 ,实验组大鼠空间学习和记忆能力明显下降 (P <0 0 1) ;实验组大鼠海马CA1区NOS阳性神经元数目 (38 37± 5 2 3)明显少于对照组 (4 9 5 3± 5 74 ) (P <0 0 1) ;实验组DG区NOS阳性神经元数目 (4 8 77± 5 5 1)明显少于对照组 (6 0 4 0± 7 39) (P <0 0 1)。脑室内注射BDNF抗体可导致大鼠空间学习记忆能力下降 ,海马NOS阳性神经元数目减少 ,提示BDNF对学习和记忆的影响可能与海马NOS阳性神经元数目的变化有关     

雷公藤甲素对LPS诱导的海马炎症过程中COX-2和iNOS表达的影响

选用健康成年雄性SD大鼠,用不同剂量(10μg·kg-1·d-1,25μg·kg-1·d-1,50μg·kg-1·d-1)的雷公藤甲素预处理5d后,立体定位海马注射脂多糖(LPS),采用免疫组织化学染色方法观察海马CA3区环氧化酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达变化。结果发现:与注射生理盐水对照组比较,注射LPS可引起海马CA3区的COX-2和iNOS显著表达,而雷公藤甲素(50μg·kg-1·d-1)可明显下调LPS诱导的COX-2和iNOS的表达,其抑制程度与药物剂量呈正相关。本实验结果提示雷公藤甲素对中枢神经系统中LPS诱导的COX-2和iNOS的表达有明显的抑制作用。     

四君子汤对阿尔茨海默病大鼠中枢海马炎症因子及NLRP3小体的影响

目的 探讨四君子汤（SiJunZi Decoction, SJZD）治疗大鼠阿尔茨海默病的作用机制。方法 将60只雄性SPF级大鼠随机分为正常组,模型组,双氢麦角碱（dihydroergoline, DHE）组,SJZD低、中、高治疗组。采用Morris水迷宫实验检测大鼠记忆功能的变化;ELISA法检测IL-1β、IL-6及IL-10含量;免疫组化法检测caspase11蛋白表达变化;Western blot法检测海马组织NLRP3、caspase-1、caspase-4、caspase-5蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组大鼠潜伏逃避期时间增加（P<0.01）、穿越次数减少（P<0.01）,IL-1β、IL-6含量升高（P<0.01）,IL-10含量降低（P<0.01）,NLRP3、caspase-1、caspase-4、caspase-5、caspase-11(P<0.01)表达上调;DHE与模型组比较,潜伏逃避期减少（P<0.01）,穿越次数增加（P<0.01）,IL-1β减少（P<0.01）,NLRP3、caspase-1表达下...