艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑皮层细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子、视网膜母细胞瘤抑制蛋白及c-fos的影响

目的:探讨艾炷灸治疗D-半乳糖衰老小鼠的可能机制。方法:雄性昆明小鼠60只随机分为生理盐水组、造模组、艾灸1组、艾灸2组、尼莫地平组,每组12只。皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型。艾灸1、2组分别选取小鼠"足三里""悬钟""关元""百会"行艾柱灸治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃。采用免疫组化法观察各组小鼠细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(P16)、视网膜母细胞瘤抑制蛋白(pRb)及c-fos的表达。结果:造模组小鼠大脑皮质P16蛋白表达的神经元密度较生理盐水组增高(P0.01),艾灸1、2组及尼莫地平组较造模组降低(P0.01)。造模组小鼠pRb、c-fos蛋白表达的神经元密度较生理盐水组、艾炷灸、尼莫地平组降低(P0.01,P0.05)。其余组各指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾炷灸"足三里""悬钟""关元""百会"可调控D-半乳糖衰老小鼠脑组织P16、pRb、c-fos蛋白的表达。     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力和大脑皮质、海马区c-fos蛋白表达的影响

目的观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力的影响与学习记忆相关脑区c-fos蛋白表达的关系。方法健康3月龄昆明雄性小鼠体质量(30±2)g,60只,水迷宫检测后按随机区组设计分为:生理盐水组,造模组,艾灸1、2组,尼莫地平组等5组,每组各12只。造模组,艾灸1,2组,尼莫地平组连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1、2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。采用水迷宫检测学习记忆、免疫组化方法观察各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达。结果模型组潜伏期较生理盐水组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组原象比、垮台次数较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05),模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fos蛋白表达的神经元密度较生理盐水组、艾炷灸组、尼莫地平灌胃治疗组降低(P<0.01)。结论艾炷灸足三里、悬钟,关元、百会穴位处方可能通过提高D-半乳糖衰老小鼠脑组织大脑皮层、海马CA3区c-fos蛋白的表达改善学习记忆能力。     

艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响

目的:观察艾灸及电针对D-半乳糖致衰老小鼠大脑组织形态的影响。方法:健康3月龄昆明种雄性小鼠72只,按随机区组设计分为6组:正常对照组、模型对照组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组,每组各12只。除正常对照组外,余组连续42天颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;正常对照组连续42天颈背部皮下注射等量生理盐水。第13天艾灸1组、艾灸2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次。另设自然衰老组(16月龄)昆明种雄性小鼠6只。采用光镜下观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构。结果:①正常对照组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常。模型对照组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失。艾灸1、2组,电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少。②造模后小鼠大脑皮质、海马CA3神经元细胞密度明显下降(P0.01),经艾灸、电针及尼莫地平干预治疗后神经元细胞密度均有显著提高(P0.01)。且艾灸及电针在提高大脑皮质神经元密度方面效果优于尼莫地平(P0.05或P0.01)。结论:艾灸及电针均可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护神经元细胞。     

艾炷灸对衰老小鼠学习记忆力及胰岛素水平的影响

目的:观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆及血清、脑组织胰岛素(INS)水平的影响。方法:将75只小鼠随机分为对照组、造模组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组,每组15只。艾灸1组艾炷灸足三里穴+悬钟穴,艾灸2组艾炷灸百会穴+关元穴,艾灸3组艾炷灸腕背关节上1mm与膝髌正中上沿上2mm。用Morris水迷宫测试学习记忆力,用酶联免疫法检测血清及脑组织INS水平。结果:治疗前各组小鼠水迷宫各项指标及学习记忆能力比较,差异无统计学意义(P0.05);治疗后,造模组与对照组、艾灸1组、艾灸2组比较,各项指标差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。造模组血清和脑组织INS水平较对照组、艾灸1组和艾灸2组升高或降低,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);对照组、艾灸1组、艾灸2组与艾灸3组比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:艾炷灸足三里穴+悬钟穴、关元穴+百会穴均能显著提高D-半乳糖衰老小鼠学习记忆能力,与降低外周循环胰岛素水平、提高脑组织的胰岛素浓度有关,具有延缓脑衰老作用。     

艾灸对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆、大脑组织NOS/NO-cGMP信号系统及c-fosmRNA的影响

目的探讨艾灸疗法改善学习记忆的作用机制。方法将72只雄性小鼠随机分为生理组、模型组、艾灸1组、艾灸2组、电针组和尼莫地平组,每组12只。模型组及艾灸组连续42 d于小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖,生理组注射等量生理盐水。造模第13天开始干预治疗,艾灸1组灸足三里、悬钟穴,艾灸2组灸关元、百会穴,隔天治疗1次,共治疗15次。采用水迷宫检测学习记忆,检测脑组织匀浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,原位杂交检测各组小鼠大脑皮层、海马CA3区c-fosmRNA的表达。结果模型组"潜伏期"较生理组、艾灸1组、艾灸2组、尼莫地平组延长(P<0.01,P<0.05),模型组"原象比"和"垮台次数"较其他各组缩短、降低(P<0.01,P<0.05)。模型组脑组织NO含量、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力较其他5组均显著升高(均P<0.01),模型组脑组织cGMP含量较其他5组均显著降低(均P<0.01)。模型组小鼠大脑皮质、海马CA3区c-fosmRNA表达的神经元密度较其他5组均降低(P<0.01,P<0.05)。结论艾灸疗法可能通过提高cNOS的活力,生成生理活性的NO,增加第二信使cGMP的含量,即通过NO-cGMP信号转导系统,促进大脑皮质、海马CA3区神经元细胞c-fosmRNA表达,维持长时程增强(LTP),改善学习记忆能力。     

银杏外种皮内脂对抗D-半乳糖衰老小鼠的作用

目的:观察银杏外种皮内酯对抗D-半乳糖所致衰老过程的作用.探讨银杏内酯对D-半乳糖所致衰老小鼠的影响.方法:计连续42dSCD-半乳糖,造成小鼠衰老模型,用Y迷宫、Morris水迷宫实验及测定小鼠海马SOD和GSH-Px及脑组织MDA的方法来检验银杏内酯对D-半乳糖所致衰老小鼠的改善作用.结果:表明银杏内酯可显著改善D-半乳糖所致的学习与记忆能力的损害.高、低剂量银杏内酯组比模型对照组的Y迷宫、Morris水迷宫的学习、记忆能力有显著性改善(P＜0.05)、小鼠海马SOD含量增多(P＜0.05)、GSH-Px含量增多(P＜0.05)、脑组织MDA含量减少(P＜0.05).结论:银杏内酯能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习与记忆功能,减少脑组织损伤.     

中药PT液对衰老小鼠大脑皮质、海马BDNF的影响

目的:观察中药PT液对衰老小鼠大脑皮质、海马BDNF的影响.方法:D-半乳糖衰老模型小鼠灌胃给予中药PT液,用免疫组化和图象分析测定大脑皮质、海马中脑源性神经营养因子(BDNF) .结果:给予大、小剂量中药PT液小鼠在大脑皮质、海马BDNF的含量与D-半乳糖衰老模型组比较,有显著性差异.结论:中药PT液可使D-半乳糖衰老模型组BDNF的生成增加,提高了内源性神经营养因子在大脑皮质、海马的含量.     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织形态和超微结构的影响

目的 观察艾炷灸对脑组织形态和超微结构的影响.方法 将健康3月龄昆明雄性小鼠按随机区组设计分为:造模组、生理组、艾灸1组、艾灸2组、电针组、尼莫地平组6组,每组各12只.另设自然衰老组(16月龄)昆明雄性小鼠12只.造模组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组,连续42 d颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠衰老模型;生理盐水组连续42 d颈背部皮下注射等量生理盐水,12 d后艾灸1,2组,分别选取小鼠"足三里、悬钟","关元、百会"行艾柱灸治疗,电针组取"足三里、悬钟"治疗,尼莫地平组给予尼莫地平灌胃,均为隔日1次,共15次.采用光镜观察脑组织形态学变化和神经元密度,电镜下观察脑组织超微结构.结果 ①生理组大脑皮层、海马CA3区细胞结构正常.模型组、自然衰老组可见皮层、海马CA3区变薄,大部分神经元变性,胞核与胞浆界限模糊,核固缩,核仁消失.艾灸1,2组、电针组和尼莫地平组仍有不同程度的神经细胞变性,但变性神经细胞数量显著减少.②各组小鼠脑皮质及海马CA3区神经元密度差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组与生理组、艾灸1,2组、电针组、尼莫地平组神经元密度比较差异有显著性意义(P<0.01),模型组、自然衰老组神经元细胞密度下降.③大脑皮质超微结构,生理组神经细胞结构清晰,胞浆较宽,细胞器丰富,核仁清楚.模型组和自衰组神经元细胞变性,凋亡细胞器减少.其他各治疗组超微结构损伤较模型组和自衰组减轻.结论 艾炷灸"足三里、悬钟","关元、百会"可减轻D-半乳糖造成的氧化损伤,保护脑组织形态及其神经元细胞超微结构.     

益髓灸对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及氧化应激水平的影响

目的:观察益髓灸对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆和血清及脑、肾组织的8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHd G)、总抗氧化能力(T-AOC)的影响,比较2组穴位(足三里配悬钟、百会配关元)延缓脑衰老疗效,探讨其作用机制。方法:75只SPF级3月龄体质量为(30±2)g雄性昆明小鼠,水迷宫检测后随机分为5组,每组15只,即生理组、造模组、艾灸1组(足三里+悬钟穴)、艾灸2组(百会+关元穴),艾灸3组(非穴位)。造模组和各艾灸观察组予D-半乳糖按1 000 mg/(kg·d)颈背部皮下注射,同时生理组以同法注射等量的生理盐水,连续56 d。3组艾灸观察组于造模第13 d起开始艾灸,每次每穴3壮,灸单侧(或2穴),共6壮。生理组和造模组不做治疗性干预,但给予与各观察组同时间、程度的捉抓刺激。造模、治疗结束后,再次进行水迷宫测试,将小鼠眼球取血,断头取脑,开腹取肾,制备脑、肾组织匀浆,用酶联免疫法(ELISA)检测血清及脑、肾组织8-OHd G、T-AOC水平。结果:1)水迷宫结果显示:造模、治疗前各组小鼠水迷宫各项指标及学习能力比较,差异无统计学意义(P0.05);造模及治疗后,5组间比较差异有统计学意义(P0.05)。其中两两比较:a.造模及治疗后,造模组与生理组、艾灸1组、艾灸2组比较,"潜伏期、平台象比、停留时间、寻求次数、原平台象限百分比、跨越次数"6项指标比较,差异均有统计学意义(P0.05);b.生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05);艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。2)血清及脑、肾组织ELISA结果示:a.造模组血清和脑、肾组织8-OHd G含量显著升高,与生理组、艾灸1组和艾灸2组3组比较,差异有统计学意义(P0.05);生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05),艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。b.造模组血清和脑、肾组织T-AOC水平显著降低,与生理组、艾灸1组和艾灸2组3组比较,差异有统计学意义(P0.05);生理组与艾灸3组比较,差异有统计学意义(P0.05);艾灸3组与艾灸1、2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:益髓灸防治脑衰老的作用机制可能是通过降低D-半乳糖诱导的8-OHd G表达,抑制细胞的DNA损伤,提高机体总抗氧化能力T-AOC,发挥抗氧化应激损伤的作用。     

艾炷灸神阙穴对衰老豚鼠肝组织SOD蛋白表达及基因表达的影响

目的:观察艾炷灸神阙穴对衰老豚鼠肝组织超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)蛋白表达及基因表达的影响。方法:将健康雄性实验豚鼠随机分为正常组、模型对照组和治疗组,采用D-半乳糖腹腔注射建立豚鼠亚急性衰老模型,对治疗组进行艾柱灸治疗,每天1次,每次灸3壮,连续28d。用实时荧光绝对定量聚合酶链反应(Realtime Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)法检测各组肝组织SOD相关基因表达,用免疫组化染色观察各组SOD蛋白表达。结果:造模后除正常组外,其余各组豚鼠血清SOD含量均较造模前明显降低(P0.05),提示造模成功。治疗后治疗组SOD基因表达量明显高于模型组(P0.05),与正常组差异无统计学意义(P0.05)。肝组织免疫组化染色示:治疗组切片阳性率明显高于模型组(P0.05),与正常组差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾炷灸神阙穴可提高衰老豚鼠肝组织SOD蛋白表达及相关基因表达。     

艾灸对衰老模型大鼠海马神经元凋亡蛋白Bcl-2及Bax的影响

目的研究艾灸对衰老模型大鼠海马区神经元中Bcl-2与Bax的影响,从细胞凋亡的角度探讨艾灸治疗衰老的部分作用机制。方法以D-半乳糖皮下注射造成的衰老模型大鼠为研究对象,艾灸神阙穴,每日1次,连续30d。以通道式水迷宫测试学习记忆能力的变化,评价艾灸对衰老的治疗效应;以免疫组化SP法检测海马神经元中Bcl-2和Bax表达。结果与模型组大鼠相比,艾灸组大鼠海马神经元中Bcl-2的阳性细胞数显著增加（P〈0.05）,而Bax的阳性细胞数显著降低（P〈0.05）。结论艾灸能有效改善衰老可能是通过促进衰老大鼠海马神经元Bcl-2的表达,降低Bax的表达,进而抑制细胞的凋亡,减少神经元的丢失来实现的。     

基于P38 MAPK信号通路探讨艾灸督脉对APP/PS1双转基因AD小鼠自噬水平的研究

摘要：目的：观察p38丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路来探讨艾灸督脉“百会”“大椎”“风池”穴对APPswe/PS1de9（APP/PS1）双转基因阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）小鼠脑内β-淀粉样蛋白（amyloid β-peptide,Aβ）清除功能的影响。方法：将48只APP/PS1双转基因AD小鼠随机分为模型组、艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组,每组小鼠12只且相同年龄相同条件的C57BL/6J雄性小鼠作为对照组。艾灸组小鼠实按灸“百会”、雀啄灸“大椎”和“风池”,每次灸20min,一天一次,治疗2周;西药Ⅰ组每只小鼠腹腔注射雷帕霉素,2mg?kg-1?d-1,治疗2周;西药Ⅱ组在艾灸组治疗基础上同时给予3-甲基腺嘌呤腹腔注射,1.5mg?kg-1?d-1,治疗2周;模型组和对照组动物不给予任何干预并常规饲养2周。各组小鼠于治疗结束后,用免疫组织法、透射电镜法、Western blot法依次分别检测小鼠皮质和海马脑区Aβ1-42 表达水平、海马区自噬体形成和海马组织p38MAPK、Bcl-2、Beclin-1相关蛋白表达。结果：免疫组织化学结果显示,与对照组相比,模型组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性增多（P﹤0.01）;与模型组相比,艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性减少（P﹤0.01）;与艾灸组相比,西药Ⅰ组大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达差异无统计学意义（P﹥0.05）,西药Ⅱ组小鼠大脑皮质和海马区Aβ1-42 蛋白表达阳性增多（P﹤0.01）。透射电镜结果显示,模型组海马区可见神经元变形、萎缩或不规则,细胞胞质内自噬泡减少;艾灸组海马区有部分神经元变形、萎缩、不规则,胞质内自噬泡增多;西药Ⅰ组胞质内自噬泡增多,神经元变形;西药Ⅱ组偶见少量自噬泡和较多变形神经元。Western blot结果显示,模型组p38 MAPK、Bcl-2蛋白表达较对照组显著升高（P﹤0.05）,而模型组Beclin-1蛋白表达较对照组显著下降（P﹤0.05）。与模型组相比,艾灸组、西药Ⅰ组、西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达均明显下降（P﹤0.05）,但Beclin-1蛋白表达上升（P﹤0.05）。与艾灸组相比,西药Ⅰ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达稍微升高（P﹤0.05）,而Beclin-1蛋白表达稍微下降（P﹤0.05）;西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达显著升高（P﹤0.05）,而Beclin-1蛋白表达显著下降（P﹤0.05）。与西药Ⅰ组相比,西药Ⅱ组小鼠p38MAPK、Bcl-2蛋白表达显著升高（P﹤0.05）,Beclin-1蛋白表达显著下降（P﹤0.05）。结论：通过加速自噬的作用,艾灸督脉可以清除APP/PS1双转基因AD小鼠脑区Aβ1-42 蛋白异常沉积,作用机制与艾灸督脉抑制P38 MAPK信号通路的异常激活可能有关。     

养颜青蛾丸对D-半乳糖诱导的小鼠衰老皮肤氧化应激及MMP-1、MMP-3表达的影响

目的观察养颜青蛾丸对D-半乳糖诱导的小鼠衰老皮肤氧化应激及MMP-1、MMP-3表达的影响。方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖制备小鼠皮肤衰老模型。造模过程中,实验组同时每天给予养颜青娥丸低、中、高剂量组等体积药物灌胃。连续给药42 d后,测定小鼠血清SOD、MDA和小鼠皮肤组织上清液中SOD、MDA含量、皮肤含水量、皮肤胶原蛋白含量,Western blot检测皮肤组织中MMP-1、MMP-3蛋白表达。结果养颜青娥丸中、高剂量组小鼠皮肤含水量、皮肤胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量、血清和皮肤组织SOD含量均显著高于模型组(P0.05)。养颜青娥丸中、高剂量组小鼠血清和皮肤组织MDA含量、MMP-1、MMP-3蛋白表达水平均显著低于模型组(P0.05)。养颜青娥丸中、高剂量组小鼠皮肤含水量,皮肤胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量,血清和皮肤组织SOD含量,血清和皮肤组织MDA含量,MMP-1、MMP-3蛋白表达水平,两组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论养颜青娥丸通过调节氧化应激损伤,下调皮肤基质金属蛋白酶MMP-1、MMP-3的表达,继而提高皮肤含水量,增加皮肤胶原蛋白Ⅰ和Ⅲ含量,从而延缓D-半乳糖诱导的小鼠皮肤衰老。     

艾灸早期干预对SAMP8小鼠学习记忆行为及APP、BACE1表达影响研究

目的观察艾灸早期干预对衰老小鼠认知功能的影响,并观察艾灸对APP代谢途径相关蛋白及基因表达的影响,探讨艾灸的作用机制。方法以快速衰老的SAMP8小鼠作为研究模型,24只SAMP8随机分为两组(每组12只):艾灸组、模型组。12只雄性SAMR1系小鼠作为空白对照。艾灸组进行8周艾灸干预,每次10 min,每周5次,共8周,模型组及空白组进行假灸对照。采用Morris水迷宫法检测各组小鼠学习记忆能力,Western Blot、RT-PCR检测APP、BACE1表达。结果 Morris水迷宫检测显示,第1～4天,被动逃避实验结果显示:在第1天和第2天,模型组小鼠逃避潜伏时明显高于正常组(P=0.01,0.003),艾灸组显著低于模型组(P=0.03,0.05),第3天和第4天,各组间差异没有统计学意义(P0.05)。第5天空间探索实验结果显示,模型组小鼠穿越平台次数显著低于正常组(P=0.01),艾灸组显著高于模型组(P=0.04),平台象限游泳路程方面,模型组均明显低于正常组(P=0.02),艾灸组略高于模型组,差异没有统计学意义(P0.05)。Western Blot结果显示:与正常组小鼠相比,模型组小鼠海马APP、BACE1表达显著升高(P=0.002,P0.001),艾灸组小鼠海马APP、BACE1表达显著低于模型组(P=0.003,P=0.02)。RT-PCR结果表明:模型组APP、BACE1表达显著高于正常组(P=0.003,P=0.004),艾灸组APP、BACE1低于模型组,差异没有统计学意义(P=0.41,P=0.36)。结论艾灸早期干预对衰老小鼠认知功能的影响,此效应与调节APP代谢途径相关基因、蛋白的影响相关。     

艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织抗氧化和学习记忆的影响

目的:观察艾炷灸对D-半乳糖衰老小鼠大脑组织抗氧化与学习记忆的影响。方法:3月龄昆明雄性小鼠72只,随机区组分为6组:生理组、模型组、艾炷灸"足三里、悬钟"(简称艾灸1组)、艾炷灸"关元、百会"(简称艾灸2组)、电针组、尼莫地平组,每组12只。模型组及干预治疗组,连续42d颈背部皮下注射D-半乳糖;生理组连续42d颈背部皮下注射等量生理盐水,造模第13d开始干预治疗,1次/隔日,共15次。水迷宫行为测试、脑组织匀浆一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)、总超氧化物歧化酶(TSOD)及铜锌-超氧化物歧化酶(CuZnSOD)的活力检测。结果:①模型组"潜伏期"较生理组、艾灸1、2组、尼莫地平组延长(P<0.01或P<0.05),模型组"原象比"、"跨台次数"较其他各组缩短、降低(P<0.01或P<0.05);②模型组脑组织NO含量、总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力较其他5组显著升高(P<0.01),其他5组脑组织NO含量、TNOS、iNOS活力比较无明显差异。模型组脑组织TSOD、CuZnSOD活力较其他5组显著降低,其他5组脑组织TSOD活力无明显差异;电针组、尼莫地平组脑组织CuZnSOD活力低于艾灸2组、艾灸1组,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),其余各组间比较无差异。结论:艾炷灸可以通过提高脑组织总SOD、CuZnSOD的活力,保护脑细胞免受NO自由基损害,提高学习记忆,延缓脑组织老化。     

不同壮数艾炷灸神阙穴对衰老豚鼠SOD蛋白表达及基因表达的影响

目的观察不同壮数艾炷灸神阙穴对衰老豚鼠超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)蛋白表达及相关基因表达的影响。方法采用D-半乳糖腹腔注射建立豚鼠亚急性衰老模型,用酶联免疫吸附试验(Elisa)和免疫组化染色观察各组SOD蛋白表达,用实时荧光绝对定量聚合酶链反应(Realtime Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)法检测豚鼠肾组织相关基因表达。结果造模后除正常组外,其余各组豚鼠血清SOD含量均较造模前明显降低(P0.05),提示造模成功。各治疗组血清SOD含量、基因表达量明显高于模型组(P0.05),与正常组相比无差异(P0.05);各治疗组组间比较,疗效无差异(P0.05)。免疫组化染色示:各治疗组切片阳性率与正常组无差异(P0.05),明显高于模型组(P0.05);各治疗组阳性率组间比较无差异(P0.05)。结论艾炷灸神阙穴可提高衰老豚鼠血清SOD含量及其相关基因表达,但不同剂量的艾炷灸对其影响在本实验中未见明显差异。通过免疫组化染色发现艾炷灸神阙穴可提高SOD在衰老豚鼠肾组织中的蛋白表达。     

艾灸对亚急性衰老小鼠脑细胞端粒长度影响的实验研究

目的观察艾灸足三里穴对亚急性衰老小鼠脑细胞染色体端粒长度的影响,探究艾灸抗衰老在基因水平的作用机制。方法将36只健康雄性ICR小鼠按随机数字表法分为空白组、衰老模型组(对照组)、衰老模型加艾灸治疗组(治疗组)3组。通过背部皮下注射D-半乳糖30天制造亚急性衰老模型;艾灸治疗组隔日艾灸足三里穴,双侧轮换灸,共15次。30天后对各组小鼠进行跳台实验以比较其智能,测量各组小鼠脾重指数、脑细胞染色体端粒长度及脑重指数。结果治疗组小鼠与其他2组比较,跳台实验成绩优于其他2组(P>0.05);脾重指数较高,端粒长度较长,差异亦均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);治疗组小鼠脑重指数虽优于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论艾灸足三里穴能明显延缓脑细胞染色体端粒的缩短,这可能是艾灸抗衰老基因水平作用机制之一。     

艾灸足三里对衰老模型豚鼠血清SOD及肝肾组织基因表达的影响

目的观察艾灸足三里对衰老模型豚鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量及肝肾组织SOD基因表达的影响。方法将40只健康豚鼠随机分为空白组、模型组、足三里预防组、足三里治疗组,每组10只。除空白组外,其余三组均予腹腔注射D-半乳糖复制豚鼠衰老模型,每天1次,共30天。足三里预防组在造模的同时施行足三里艾炷灸,每日治疗1次;足三里治疗组在造模结束第二天开始施行足三里艾炷灸治疗。以血清SOD及肝肾组织SOD基因表达为客观指标,从预防及治疗两方面观察艾灸足三里对衰老模型豚鼠自由基代谢的影响。结果造模结束后,空白组未出现衰老症状,足三里预防组出现些许衰老症状,模型组、足三里治疗组出现明显衰老症状;模型组血清SOD与空白组相比,差异有统计学意义(P0.01);足三里预防组血清SOD与模型组相比,差异有统计学意义(P0.01),与空白组相比,差异无统计学意义(P0.05);足三里治疗组血清SOD与模型组相比,差异无统计学意义(P0.05),与空白组相比,差异有统计学意义(P0.01)。治疗结束后,足三里治疗组的衰老症状积分降低,与模型组比较有统计学意义(P0.01);足三里治疗组血清SOD与治疗前(造模结束后)差异有统计学意义(P0.01),与空白组、足三里预防组相比无差异(P0.05);在肝肾组织SOD基因表达量方面,空白组、足三里预防组、足三里治疗组和模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01),而足三里预防组、足三里治疗组与空白组相比,无统计学差异(P0.05)。结论艾灸足三里延缓衰老的机制可能与通过艾炷灸调节自由基代谢水平,提高自由基清除能力有关。     

健身宝对D-半乳糖拟衰小鼠SOD、MDA及其IL-2、IL-6的影响

目的:研究健身宝对D-半乳糖拟衰小鼠自由基代谢及免疫方面的影响.方法:将60只小鼠随机分为6组,除正常对照组外均每日注射D-半乳糖造成衰老模型,同时给予不同剂量的健身宝和金匮肾气丸.6周后检测小鼠血清中SOD活性、MDA含量及IL-2、IL-6的活性.结果:衰老模型组与正常对照组比较,小鼠血清中SOD、IL-2活性显著降低,MDA、IL-6含量显著升高(P＜0.01);而健身宝大、中剂量组与正常对照组相比较,小鼠血清中SOD、IL-2活性显著升高,MDA、IL-6含量显著降低,与衰老模型组相比较有显著性差异(P＜0.05).结论:健身宝可从调节自由基代谢和增强免疫两方面发挥延缓衰老的作用.健身宝对SOD和MDA的影响:衰老模型组与正常对照组比较,小鼠血清中SOD活性显著降低,MDA含量显著升高(P＜0.01);而健身宝大、中剂量组与正常对照组比较,小鼠血清中SOD活性显著升高,MDA含量显著降低,与衰老模型组相比有显著性差异(P＜0.05).     

漏芦提取物抗衰老作用的研究

目的研究漏芦乙醇提取物对D-半乳糖致衰老小鼠影响。方法D-半乳糖制作小鼠衰老模型,比色分析法测定小鼠大脑皮质超氧化物歧化酶(superoxide d ismutase,SOD)、单胺氧化酶(monoam ine oxidase,MAO)的活性及丙二醛(m alond-ialdehyde,MDA)的含量,同步观察电子显微镜下的组织学变化。结果漏芦提取物可提高D-半乳糖所致大鼠脑组织SOD活性、降低MDA含量,抑制MAO活性;电子显微镜观察到漏芦提取物可以减轻D-半乳糖导致的线粒体等超微结构的改变。结论漏芦提取物对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗衰老作用。