一测多评法同时测定雷公藤提取物中6种成分含量

目的建立一测多评法(QAMS)同时测定自制雷公藤提取物6种有效成分的含量。方法采用QAMS法,以雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷酚内酯、雷公藤次碱、雷公藤红素和雷公藤内酯甲6种成分为研究对象,对外标法和校正因子法的实测值及计算值的差异进行分析。结果 6种指标成分在一定范围内线性关系良好,以雷公藤甲素为内参物,雷公藤内酯酮、雷酚内酯、雷公藤次碱、雷公藤红素和雷公藤内酯甲的fk/s分别为0.654、1.221、0.347、1.238、0.079,且在不同条件下重复性良好;3批样品中各成分含量分别为雷公藤甲素0.037～0.038mg/g、雷公藤内酯酮0.245～0.253 mg/g、雷酚内酯6.165～6.325 mg/g、雷公藤次碱14.439～15.065 mg/g、雷公藤红素1.699～1.856 mg/g、雷公藤内酯甲20.946～21.825 mg/g,且计算所得量与实测量测得结果无显著差异。结论QAMS法适用于雷公藤提取物的含量测定,可为雷公藤的质量控制提供参考。     

不同浓度脱落酸对雷公藤悬浮细胞萜类次生代谢产物累积的影响

目的:研究不同浓度脱落酸(Abscisic acid,ABA)对雷公藤悬浮细胞中萜类次生代谢产物的诱导效应,探讨脱落酸的毒物效应(Hormesis)。方法:雷公藤悬浮细胞继代培养10 d后,分别加入不同浓度(10μM,20μM,50μM,100μM,150μM,200μM,500μM)的ABA诱导,并设置空白对照组,每组生物学重复4次。分别采用HPLC和UPLC检测诱导后0 h和240 h的样品,测定悬浮细胞中雷公藤甲素、雷酚内酯、雷公藤红素和雷公藤内酯甲4种萜类成分的含量。结果:当ABA浓度为10μM和20μM时,诱导组与对照组无差异;50μM时,与对照组比较,雷酚内酯含量明显升高,雷公藤红素含量升高至2.4倍,雷公藤内酯甲含量升高至4.7倍;当诱导浓度超过100μM时,与对照组比较,除雷公藤内酯甲外,雷公藤甲素、雷酚内酯、雷公藤红素含量均显著降低。结论:ABA在10~500μM范围内对不同的雷公藤萜类成分影响作用不同,从整体趋势看,呈现为β曲线,符合Hormesis效应特点;50μM时ABA对雷公藤红素含量的积累有显著促进作用,为后期研究ABA影响雷公藤红素合成机制奠定基础。     

雷公藤片中5种有效成分同时测定及其质量评价研究

[目的]建立雷公藤片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲、雷公藤定碱和雷酚内酯5种成分的液相色谱串联质谱法的同时定量测定的方法。[方法]采用液相色谱质谱联用技术(LC-MS/MS)测定含量,使用Zorbax XDB-C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm)色谱柱,流动相采用40 mmol/L甲酸铵水溶液和0.1%甲酸甲醇溶液梯度洗脱,采用正离子模式大气压化学电离源(APCI源)。检测成分的离子对质荷比分别为:雷公藤甲素(361.0/105.0)、雷公藤红素(451.2/201.0)、雷公藤内酯甲(455.3/409.7)、雷公藤定碱(884.4/856.5)、雷酚内酯(313.2/225.2)。[结果]雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲、雷公藤定碱和雷酚内酯的线性关系良好(r0.999),加样回收率分别为105.67%、94.07%、101.90%、99.28%、101.92%,RSD分别为2.65%、5.17%、2.68%、2.65%、3.27%。[结论]本研究所建立的LC-MS/MS分析方法稳定可靠、简便易行,可用于雷公藤片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯甲、雷公藤定碱和雷酚内酯5种成分的同时定量分析,为雷公藤片的质量评价和质量控制奠定了基础。     

昆明山海棠化学成分的研究

目的研究昆明山海棠的化学成分。方法采用硅胶柱、半制备柱、凝胶色谱以及重结晶等方法,从昆明山海棠根的氯仿乳化层中分离得到12个化合物。通过理化性质和波谱学分析,鉴定它们的化学结构。结果分离得到了12个化合物,分别鉴定为山海棠二萜内酯A(1)、齐墩果酸乙酸酯(2)、齐墩果酸(3)、雷公藤内酯乙(4)、雷公藤内酯甲(5)、山海棠素(6)、雷酚新内酯(7)、β-谷甾醇(8)、胡萝卜苷(9)、3-氧代齐墩果酸(10)、木栓酮(11)、原花青素B2(12)。结论系统分离并鉴定了昆明山海棠根氯仿乳化层的化学成分。化合物10～12均为首次从雷公藤属植物中分离得到。     

LC-MS/MS同时测定不同产地雷公藤饮片中4种萜类成分的含量

目的建立简便、快速、灵敏的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定雷公藤饮片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯酮和雷公藤内酯甲的含量,为雷公藤饮片的质量控制与临床应用提供依据。方法采用液相色谱质谱联用技术。色谱条件:Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL·min~(-1),柱温为35℃;采用电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测模式进行检测,检测成分的离子对质荷比分别为:雷公藤甲素(361.1/145.1)、雷公藤内酯酮(358.9/143)、雷公藤红素(451.2/201.1)、雷公藤内酯甲(455.3/409.2)。结果雷公藤甲素、雷公藤内酯酮、雷公藤红素和雷公藤内酯甲分别在100~3000 ng·mL~(-1)、100~3000 ng·mL~(-1)、20~600 ng·mL~(-1)和50~1000 ng·mL~(-1)的浓度范围内,线性关系良好(r0.999)。平均回收率为100.45%~102.74%,其RSD3.15(n=6)。结论本研究所建立的LC-MS/MS色谱法稳定可靠、简便易行,可同时检测雷公藤饮片中雷公藤甲素、雷公藤红素、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯甲4种萜类成分的含量,可为雷公藤饮片及雷公藤制剂的质量控制提供科学依据。不同地区的雷公藤饮片成分含量差异明显。     

雷公藤根醋酸乙酯提取物总二萜含量测定

已有大量报道的雷公藤有效成分雷公藤内酯醇Ｔｒｉｐｔｄｉｄｅ（甲素）、雷公藤内酯酮、雷公藤内酯二醇,均为二萜类成分,但是单独使用甲素则毒副反应发生率比雷公藤醋酸乙酯提取物增加４９．３３％,类风湿因子转阴率亦降低。从结构相似性看,其余二萜类成分如雷酚酮内...     

昆明山海棠根皮化学成分的研究

目的:研究卫矛科雷公藤属植物昆明山海棠根皮的化学成分.方法:应用硅胶、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20等各种色谱技术分离纯化化学成分,通过MS,1H-NMR,13C-NMR等波谱方法鉴定结构.结果:分离鉴定了12个化合物,分别为木栓酮(1),3-O-△9(11),12-齐墩果二烯(2),canophyllal(3),3-乙酰氧基齐墩果酸(4),雷酚内酯(山海棠素,5),雷酚萜甲醚(6),二十三酸(7),β-谷甾醇(8),硬脂酸(9),任卡漆-5-烯-3β,28-二醇(10),棕榈酸(11),胡萝卜苷(12).结论:化合物1,2,3,7,10均为首次从昆明山海棠中分离得到,其中化合物7为首次从雷公藤属植物分离得到.     

雷公藤属植物物种间的化学成分差异性研究

以主成分分析(PCA)和方差分析法(ANOVA)研究雷公藤属植物化学成分的含量与物种相关性,并比较3个物种间的差异。采用[BMIm]PF6离子液体-超声辅助萃取,HPLC法测定28批雷公藤属植物中雷公藤晋碱、雷公藤碱庚、雷酚内酯、雷公藤次碱、雷公藤醌A、雷公藤甲素、雷公藤红素、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素和没食子儿茶素11个成分的含量,并进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘法(PLS)和方差分析(ANOVA)。结果显示,雷公藤属植物3个物种中11个化学成分的含量测定结果在PCA和PLS分析结果中分别聚集在3个区域,其中雷公藤醌A是影响3个物种分别聚集的最大因素;而且11个化学成分的含量在3个物种间有显著性差异(P0.000 1),表明化学成分与物种的分类有一定的相关性,3个物种间化学成分含量差异明显。该实验含量测定方法快速准确,分析方法简单方便,为雷公藤属植物的物种分类、药效和毒性研究等提供参考。     

基于UPLC-Q-TOF-MS比较雷公藤与昆明山海棠叶片的代谢产物差异

为了区分雷公藤与昆明山海棠之间的代谢产物差异,采用UPLC-Q-TOF-MS对采自5个地区的雷公藤与昆明山海棠叶片代谢物进行分析,通过系统聚类、主成分分析研究雷公藤与昆明山海棠叶片代产物特征,利用OPLS-DA模型进一步分析,挑选出VIP> 5.0,r> 0.85的差异代谢物,再对差异代谢物进行mann-Whitney非参数检验,将满足P< 0.001,ROC曲线下面积AUC=1的化合物确定为区分雷公藤与昆明山海棠的潜在生物标记物.结果表明,雷公藤与昆明山海棠叶片代谢物差异显著,分析次生代谢物信息,雷公藤与昆明山海棠可分为二类,同时筛选获得区分二者的潜在生物标记物23个.     

昆明山海棠中具有免疫抑制活性的二萜化合物

目的研究雷公藤属植物昆明山海棠的免疫抑制活性成分。方法运用各种硅胶柱色谱、凝胶渗透色谱以及制备高效液相色谱等手段对昆明山海棠氯仿提取物进行分离纯化,以各种有机波谱法鉴定化学单体结构,并通过体外淋巴细胞转化实验进行化学成分的免疫抑制活性研究。结果从中分离鉴定出6个二萜类化合物,分别为雷酚萜酸(triptobenzene H,Ⅰ)、雷藤二萜醌A(triptoquinone A,Ⅱ)、雷藤二萜醌B(triptoquinone B,Ⅲ)、雷藤二萜醌H(triptoquinone H,Ⅳ)、雷酚萜醇(triptonediol,Ⅴ)、雷酚萜(triptonoterpene,Ⅵ)。结论化合物Ⅰ~Ⅲ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅰ~Ⅵ均具有较强的免疫抑制活性。     

雷公藤和昆明山海棠植物根中卫茅醇的提取方法及鉴别研究

目的 从雷公藤和昆明山海棠植物根中提取卫茅醇并鉴别比较,寻找雷公藤和昆明山海棠植物在临床疗效上具有相似性的原因.方法 采用95%乙醇为溶剂,对雷公藤和昆明山海棠植物根中进行热提取.其提取液经浓缩后的相对应部位进行薄层层析检查对照、化学成分的预测、熔点的测定及红外吸收光谱的测定来判别两种植物的差异.结果 两种植物均含有相同的卫茅醇.结论 雷公藤和昆明山海棠在临床疗效上具有相似性,主要原因是这两种植物具有相同的化学成分.     

Studies on tannins from Tripterygium hypoglaucum (lévl.) hutch.]

OBJECTIVE: To study the tannins from Tripterygium hypoglaucum. METHOD: Compounds were isolated by column chromatography and elucidated on the basis of spectroscopic analysis and comparison of references. RESULT: The compounds obtained were determined as (+)catechin, (-)epigallocatechin, procyanidin B-3, procyanidin B-4 and gallocatechin-(4 alpha-->8) epicatechin. CONCLUSION: All the compounds were obtained from this plant for the first time.     

复方苔藓片调节口腔扁平苔藓患者红细胞免疫功能的研究

目的：探讨活血化瘀中成药复方苔藓片对口腔扁平苔藓（ＯＬＰ）患者红细胞免疫功能（ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲ，ＲＢＣ－ＩＣ）的调节作用，为临床用药提供依据。方法：６０例ＯＬＰ患者随机分为３组，分别给予复方苔藓片，昆明山海棠片及多抗甲素片进行治疗，采用酵母多糖法检测了治疗前后ＲＢＣ－Ｃ３ｂＲ及ＲＢＣ－ＩＣ的变化。结果：治疗２个月后复方苔藓片对ＯＬＰ患者红细胞免疫功能的调节明显优于昆明山海棠和多抗甲素。结论：复方苔     

Antitumor effect of Tripterygium wilfordii]

A new component of antitumor action TG has been isolated from the ethyl acetate extract of Tripterygium wilfordii (besides Triptolide, Tripdiolide and Triptonide). TG was shown in this study to have obvious antitumor effects. The average life span of H22, S180, EAC and breast carcinoma-bearing mice treated with TG ip x 2 days were 100% more than those of the control mice (P less than 0.01) TG was able to inhibit tumor growth of S37-bearing mice at the dose of 150 mg/kg per day, ig x 3, its inhibitory rate was 42% (P less than 0.01). TG could also inhibit squamous epithelial lung carcinoma induced by 3-methylcholanthrene. The inhibitory rate was 65.13% (P less than 0.05). TG had remarkable killing effect on human HL60 and Daudi cells and two direction effects on function M phi of mouse abdominal cavity in vitro.     

A New Natural Compound with Cytotoxic Activity from Tripterygium hypoglaucum

Objective To find antitumor constituents from Tripterygium hypoglaucum.Methods The chloroform extract of T.hypoglaucum was separated by silica gel column chromatography and preparative HPLC.The structures of compounds isolated were identified by spectral analysis and chemical evidence.Results Seven compounds were isolated and identified as rhein ethyl ester(1),chrysophenol(2),physcion(3),emodin(4),wilfordine(5),wilforgine(6),and wilforine(7).The cytotoxic activities of the compounds against cancer cell lines were assayed.Conclusion Compound 1 is a new natural compound with strong activities against human cancer cell lines(A2780 and OVCAR-3) .Compounds 2-4 are isolated from this genus plants for the first time.The possible structure-activity relationship among compounds 1-4 shows that the methoxy group or oxyethyl moiety might be responsible for the cytotoxity.     

基于文献计量学的昆明山海棠研究态势分析

本文旨在深入揭示昆明山海棠研究的最新进展,为昆明山海棠相关领域的研究者提供参考。本研究以中国知网（CNKI）资源总库收录的文献作为检索来源,检索1915~2013 年昆明山海棠研究文献,并利用数据库自带的分析工具、网络分析和引文网络分析等工具,对文献年度变化趋势、研究机构、期刊分布、研究人员、研究内容等方面进行了计量学统计分析。结果表明昆明山海棠整体的研究处于发展阶段,资源学、物质基础及制剂等方面的研究具有很大的发展空间。     

雷公藤多甙对哮喘患者Th1、Th2细胞因子产生的影响

目的：了解雷公藤多甙对哮喘患者Th1,TH2细胞因子的影响，进一步探讨雷公藤多甙治疗哮喘的,机制。方法：选12例中，重度哮喘患者，口服雷公藤多甙每日40mg 或60mg治疗4周，治疗前后取外公藤甲素处理24h，收集培养上清，用酶联免疫吸附试验（ELISA）对患者血清及PBMC培养上清IL－2，IL－4，IL－5，γ干扰素（IFN－γ）水平进行检测。结果：（1）雷公藤多甙治疗后哮喘患者血清中IL－2，IL－4，IL－5水平较治疗前降低（P＜0．01），而IFN-γ治疗前后均在检测灵敏度（25pg/ml)以下。（2）雷公藤甲素处理后哮喘患者PBMC分泌IL－2，IL－4，IL－5减少（P＜0．01，P＜0．05），而IFN－γ也在检测灵敏度以下。结论：雷公藤多甙对哮喘患者Th2细胞因子的产生具有明显的抑制作用，是治疗哮喘的重要机制，但雷公藤多甙对Th1细胞因子的产生也有抑制作用，说明雷公藤抑制Th2,Th1 细胞因子产生的作用无特异性。     

胆木叶和胆木的相似性研究

建立HPLC定量指纹图谱检测方法,对3批胆木叶和胆木进行测定,比较其异长春花苷内酰胺的含量和指纹图谱的差异,并采用LC-MS对指纹图谱色谱峰进行指认,获得胆木叶和胆木化学成分差异信息。胆木中的异长春花苷内酰胺的含量高于胆木叶;胆木叶和胆木指纹图谱色谱峰有差别,胆木叶的化学成分较胆木丰富;LC-MS检测结果表明胆木叶和胆木中主要化学成分为生物碱,胆木叶和胆木有7种相同的化学成分。胆木叶和胆木的相似性研究为开发胆木叶潜在药用价值和胆木资源的可持续利用提供一定的科学依据。     

昆明山海棠根皮化学成分研究

目的:对昆明山海棠根皮进行化学成分研究。方法:利用各种色谱方法进行化学成分分离,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为:4'-O-(-)甲基-表没食子儿茶素(1)、3,4-二甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷(2)、3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷(3)、(2R,3R)-3,5,7,3',5'-五羟基黄烷(4)、2-O-deacetyleuonine(5)、tripfordine C(6)、peritassine A(7)、hypoglaunine C(8)、雷公藤春碱(9)、雷公藤晋碱(10)、雷公藤碱(11)。结论:化合物1～6为首次从该植物中分离得到。     

昆明山海棠片对小鼠淋巴细胞体外增殖活化影响的研究

目的：研究昆明山海棠片对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化标志CD69和CD25及细胞因子IL-4及IFN-γ的影响。方法：无菌分离小鼠脾淋巴细胞,加入不同浓度的昆明山海棠溶液,MTT法检测刀豆蛋白A刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测活化标志CD69及CD25;酶联免疫法检测细胞因子IL-4及IFN-γ。结果：昆明山海棠片对脾淋巴细胞增殖活化及分泌均有抑制作用。