淋巴组织切片染色不良时补救方法探讨

切片质量直接影响病理诊断的准确性,失系到准确及时的治疗。如何做好淋巴组织切片,有一些作者做了较详细的研究,总之,要做好一张淋巴组织切片,必须从固定、取材、脱水、切片直至染色都要遵循一套与常规标本不同的操作程序。若将淋巴组织,尤其是恶性淋巴瘤与常规标本一起处理,所做出的切片往往显得偏厚,有一层以上细胞,核染色深,核浆界限不太清楚,分辨不清细胞核内的微细结构而影响明确分型诊断,应如何采取补救办法?     

提高淋巴结石蜡切片质量和染色效果的探讨

 目的　提高淋巴结制片质量。方法　用正丁醇代替乙醇和二甲苯脱水兼透明。将切片分别置于60 ％、70 %和80 ％正丁醇及95 ％乙醇各1 h,无水乙醇30 min,正丁醇Ⅰ2～3 h,正丁醇Ⅱ过夜。结果　与常规方法脱水制出的切片相比,该方法切片薄,细胞无重叠,细胞核核染色质形态清晰。结论　对于淋巴结组织制片,此方法优于常规染色方法,可以确保切片质量,从而避免由于切片质量问题导致的误诊     

原HE切片中Feulgen染色的应用

常规 HE 染色的切片经酸性高锰酸钾液退色处理后,可重行 HE、VG、Foot 及AgNOR 染色。而对 HE 切片再行 Feulgen染色,我们在实验中发现 DNA 显色欠佳,得不到较满意的结果,由此对退色过程中各个步骤进行分组实验,以探讨此过程中影响Feulgen 染色的原因及应用方法。     

免疫组织化学染色在高温浸蜡切片中的应用

作者对７１例高温（７６℃）浸蜡的肿瘤组织切片，应用硫酸锌溶液进行抗原复活预处理，对３种单克隆抗体（ＥＭＡ，ＤｅｓｍｉｎａｎｄＣＥＡ）和３种多克隆抗体（Ｋｅｒａｔｉｎ，ＭｙｏｇｌｏｂｉｎａｎｄＳ－１００ｐｒｏｔｅｉｎ）进行免疫组织化学染色，结果均获得成功。提示硫酸锌溶液能恢复组织的抗原性。作者对其机理进行简要探讨。应用此技术，能对高温浸蜡切片进行免疫组织化学染色，在日常外检工作中具有重要的实用价值。     

细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学诊断中的应用

目的 探讨细胞块切片免疫组化染色在肿瘤细胞学诊断中的价值.方法 收集30例肿瘤标本,制备细胞块切片,用免疫组化二步法对肿瘤细胞的细胞膜、细胞浆内的抗原物质CK、AE1、AE3、LCA、CD20、CD45RO、Vim、HMB45等进行检测.结果 上述抗原物质显棕色,呈不同强度、不同形态、弥漫性、颗粒状分布于细胞膜、细胞浆.30例中,26例标本阳性表达(86%),4例标本无染色(14%).结论 细胞块切片免疫组化染色是判断肿瘤细胞良恶性及组织来源的有效方法.     

脱钙骨石蜡切片钙钴法碱性磷酸酶染色

碱性磷酸酶组化染色显示成骨细胞,可用于分析病变组织来源及发病机制,以往多用冰冻切片,而骨组织做冰冻切片几乎不可能。我们探讨用脱钙后石蜡切片钙钴法作碱性磷酸酶染色成功,介绍如下。一、方法及结果1.石蜡包埋的脱骨切成5μ厚组织片,用25％酒精滴裱片展平于载片上,待组织团着后放入37℃温箱24小时。2.常规脱蜡后令酒精自然挥发。3.入37℃孵育液(2％巴比妥钠10ml,3％B-甘油磷酸钠10ml,2％氯化钙20ml,5％硫酸镁1ml,蒸馏水5ml,调整PH为9.4)15～20分钟,对照片肝组织60分钟。4.流水洗3分钟。5.2％硝酸钴液5     

石蜡切片进行免疫组化染色（PAP）法的几个问题

免疫组织化学染色是目前病理形态研究和临床诊断中一项较重要的手段。我科自1985年开展此项工作,现已应用到科研和临床病理诊断中。在几年工作中,常常遇到一些技术问题,影响染色结果的评定,经过摸索,找到一点解决的办法,能提高染色结果的准确性。以下仅就我们工作中的一些做法做一介绍,供同行参考。     

高温烤片对石蜡切片黏附、厚度与染色的影响

目的笔者实验室最近发现,高温烤片可有效解决甲基丙烯酸树脂包埋的组织切片的脱片问题,本文拟进一步研究确定高温烤片对石蜡包埋切片黏附、厚度及染色的影响。方法大鼠肾脏石蜡切片(切片机设定的切片厚度10μm)脱蜡后经90℃、140℃热板烤片30 min处理,然后用过碘酸-席夫试剂和苏木精染色,观察脱片情况、切片厚度及染色效果。大鼠脊髓石蜡切片(14μm厚)同样处理后分别进行小胶质细胞和突触素颗粒的免疫组化染色。结果与对照(未烤片)相比,90℃或140℃烤片都有效防止了肾脏石蜡切片从载玻片上脱落,但染色后的实际切片厚度减少了约50%(与设定切片厚度相比),染色变浅,结构清晰度欠佳(90℃烤片后),甚至有细胞消失(140℃烤片后);90℃烤片后免疫阳性小胶质细胞或突触素颗粒减少,非特异性染色加深,140℃烤片后几乎未见免疫阳性结构。结论高温烤片防脱片的方法可能不适用于石蜡切片。     

四种人肺癌细胞株的滴片与石蜡切片HE染色色度学定量分析

目的从色度学角度定量分析不同人肺癌细胞株A549、GLC-82、H358及H2009的相似性和差异性,比较滴片与细胞石蜡切片HE染色的色度学分析结果的异同。方法用计算机图像分析技术分别测试上述四种肺癌细胞滴片HE染色和A549、GLC-82和H358肺癌细胞石蜡切片HE染色的色度学参数,包括Rp、Gp、Bp、Rn、Gn、Bn、rp、rn、gp、gn、bp、bn。结果细胞滴片A549、GLC-82、H358和H2009细胞间色度学参数差异具有显著性(P<0.05),石蜡切片A549、GLC-82和H358细胞间色度学参数差异具有显著性(P<0.05);细胞滴片与石蜡切片HE染色的色度学参数差异具有显著性(P<0.05),滴片与石蜡切片上不同肺癌细胞同一色度学参数具有一致性(P=0.048),但一致性不明显(Kappa=0.313)。结论不同类型肺癌细胞株滴片与石蜡切片HE染色的色度学参数差异显著,可用于不同肺癌细胞株的甄别;滴片与石蜡切片色度学参数间差异有显著性,两者间的一致性不明显,应区别应用。     

大鼠脊髓厚石蜡切片的免疫组化染色及防脱片体会

运用光学体视框估计免疫组织化学染色阳性结构（粒子）的数量需要较厚的石蜡包埋切片;对于这样的切片,其染色深度和防脱片是制片、染色过程中需要特别注意的问题。本文介绍了我们运用大鼠脊髓厚石蜡切片的免疫组化染色与防脱片的经验体会。     

肿瘤相关标记染色在高温浸蜡切片研究中的应用

本文对６０例７６℃高温浸蜡的肿瘤切片，应用金属溶液水解。对角蛋白、上皮膜抗原、癌胚抗原、结蛋白、Ｓ－１００蛋白和肌红示记染色，结果均获得成功。提示金属溶液可恢复组织的抗原性。并对其机理进行初步探讨。应用此技术，弥补了低温浸蜡存在的不足承日常病检验中具有重要的实用价值。     

肿瘤相关标记染色在高温浸蜡切片研究中的应用

本文对６０例７６℃高温浸蜡的肿瘤切片，应用金属溶液水解，对角蛋白、上皮膜抗原、癌胚抗原、结蛋白、Ｓ—１００蛋白和肌红蛋白进行标记染色，结果均获得成功。提示金属溶液可恢复组织的抗原性。并对其机理进行初步探讨。应用此技术，弥补了低温浸蜡存在的不足，在日常病理检验中具有重要的实用价值。     

大切片P53免疫组化染色对判断直肠癌远端扩散长度的临床意义

背景与目的:目前直肠癌远端的安全分子切除长度尚无定论。本研究拟探索直肠癌远端肠壁内浸润的分子长度及其对临床的指导意义,阐明根治性直肠癌远端正常肠管应切除的安全长度。方法:收集1996年8月～1997年10月手术切除的P53阳性直肠癌标本61例,应用大切片P53免疫组化染色、对照常规HE染色,在显微镜下测量远端肠壁内浸润长度,并根据组织回缩比率,换算成活体远端浸润的实际长度;长期追踪随访,用寿命表法估计、比较各组浸润长度的生存曲线。结果:用免疫组化染色观察P53阳性直肠癌,82.0%(50/61)病例向远端浸润,肠壁内扩散的分子长度0.11～3.50cm,平均0.59cm,>3cm仅1例;而用常规HE染色观察,29例(47.5%)发生肠壁内扩散,长度为0.10～1.39cm,平均0.13cm,两组均数比较差异有显著性(P<0.0001);随访结果表明,浸润长度>1cm的病例,其生存率明显低于无远端浸润或浸润<0.5cm组(P<0.05)。结论:用免疫组化染色较常规HE染色测量直肠癌远端浸润长度更准确,对指导临床更有意义。P53阳性直肠癌远端浸润多数在1cm以内,根治术切除肿瘤远端正常肠管3cm对95%以上的病例已安全。浸润长度>1cm的病例生存率明显降低。     

影响冷冻切片的因素与预防探讨

冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法,是术中诊断的一种重要手段。笔者经多年的操作,摸索出一些实践经验,有较多的因素影响冷冻切片的质量。1 取材 组织块过大或内含较多脂肪或坏死组织时,较难制片。因为脂肪组织所需的冷冻温度较一般组织低,而当组织已完全冻结时,其还是软的,致使无法切片。而坏死组织正好相反,往往造成过冻。组织块过大,切片时阻力加大,容易产生     

基于人工智能的H-E染色全切片病理学图像分析在肺癌研究中的进展

病理学是疾病诊断的金标准。利用全切片扫描技术将病理切片转化为数字图像后,人工智能特别是深度学习模型在病理学图像分析领域展现出了巨大潜力。人工智能在肺癌全切片扫描中的应用涉及组织病理学分型、肿瘤微环境分析、疗效及生存预测等多个方面,有望辅助临床进行精准治疗决策。然而标注数据不足、切片质量差异等因素也限制了病理学图像分析的发展。本文总结了肺癌领域利用人工智能手段进行病理学图像分析的应用进展,并对未来发展方向进行展望。     

肿瘤组织石蜡切片的P53表达方法探讨

本文应用Ｐ５３单抗以ＤＯ—１在石蜡切片上对７１例各种肿瘤组织进行了免疫组化染色，其中２０例作了ＰＡｂ１８０１单抗、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）比较、染色，同时观察了五种固定液、三种免疫组化方法对Ｐ５３表达的影响。结果Ｐ５３ＤＯ—１阳性为３３例／７１例。ＰＡｂ１８０１１９／２０例阳性，ＰＡｂ１８０１阳性为高。Ｐ５３高水平的免疫反应与ＰＣＮＡ增高相呼应、在固定液中以常规福尔马林和中性福尔马林为最佳。免疫组化染色首选ＡＢＣ法，它较ＬＳＡＢ法内源色素酶着色少且背景清晰而染色后的切片较ＡＰＡＡＰ法保存长久。上述结果提示：石蜡切片中检测Ｐ５３蛋白时固定液、免疫组化方法、Ｐ５３抗体的不同均直接影响阳性率的检出。