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相似文献
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1.
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植联合重组人生长激素(rhGH)皮下注射对大鼠心肌坏死模型坏死区血管新生的影响。方法:密度梯度离心和贴壁筛选法获得Wistar大鼠骨髓MSCs,液氮冷冻法制备大鼠左心室前壁心肌坏死模型,动物随机分为5组:假手术组(n=6),实验对照组(n=8),MSCs移植组(经BrdU标记的MSCs12.5×106个/50μl,分5点注射,n=8),rhGH注射组(rhGH 2 IU/kg·d,共14天,n=8)及MSCs+rhGH联合治疗组(n=8)。4周后处死动物,BrdU 免疫组化染色评价移植的MSCs向血管内皮细胞的生成、分化,苏木素伊红(HE)染色下评价坏死面积及血管密度。结果:各组间坏死面积未见统计学差异(P>0.05)。坏死区部分血管内皮细胞核呈BrdU阳性。MSCs移植组、rhGH 注射组以及MSCs+rhGH联合治疗组的血管密度明显高于实验对照组(P<0.001),而MSCs+rhGH联合治疗组坏死区的血管密度又高于MSCs移植组和rhGH注射组(P<0.05)。MSCs移植组与rhGH注射组之间坏死区的血管密度无统计学差异(P>0.05)。结论:心肌坏死急性期植入的MSCs能在坏死区存活、生长并可以向血管内皮细胞方向分化。MSCs移植可以增加坏死区血管密度,rhGH可以加强MSCs促血管生长的作用。  相似文献   

2.
目的探讨心肌内移植自体骨髓单个核细胞(BM-MNCs)治疗猪急性心肌梗死的有效性和安全性。方法11只小型猪分为两组:BM-MNCs组(n=6)和对照组(n=5)。心肌内移植BM-MNCs后4周观察移植细胞归巢情况、小血管密度、心功能及冠脉侧支血管形成情况及可能发生的不良反应。以超声心动图评价心室结构及功能变化。结果心肌内MNCs移植后4周心肌细胞间可见发蓝色荧光的移植细胞,心肌细胞间有较多新生毛细血管并可见新生的心肌样细胞。移植组小血管密度、左室射血分数(LVEF)及短轴缩短率(FS)明显高于对照组(P<0.01)而左室舒张末期内径(LVEDd)低于对照组(P<0.05)。移植组冠脉侧支循环形成较对照组明显。心肌内移植MNCs没有发现异常增生、钙化或肿瘤形成。结论心肌内移植BM-MNCs有较多的移植细胞归巢到宿主心肌,有助于促进缺血心肌血管新生,有改善左室收缩及舒张功能,减轻心室重构的作用。  相似文献   

3.
目的 证实骨髓干细胞心肌内移植治疗对心脏功能的改善和促血管新生作用。方法 小型猪冠状动脉结扎制备心肌梗死模型 ,然后经冠状动脉内注射骨髓单个核细胞 ,术后 3周用超声心动图以及左心室造影检测心功能的变化 ,核素心肌显像观察心肌灌注的情况 ,冠状动脉造影观察侧支循环的形成 ,免疫组化计数血管密度。结果 心肌梗死小型猪冠状动脉注射骨髓单个核细胞后 ,左心室造影显示左室 dP dtmax与对照组比较增高。核素心肌显像显示冠状动脉注射骨髓单个核细胞后心肌灌注显著改善。移植治疗后冠状动脉造影显示有侧支循环形成 ,血管密度计数比对照组增加了5 2 2 % (5 6 6± 11 7 mm2 vs 37 2± 8 4 mm2 ,P <0 0 5 )。结论 骨髓单个核细胞心肌内移植可能通过促进血管新生改善心脏收缩功能。  相似文献   

4.
目的探讨静脉内移植自体骨髓单个核细胞(BM-MNCs)治疗猪急性心肌梗死的有效性和安全性。方法静脉内移植BM-MNCs后4周观察移植细胞归巢情况、小血管密度、心功能及冠脉侧支血管形成情况及可能发生的不良反应。结果静脉内MNCs移植后4周心肌细胞间可见少量发蓝色荧光的移植细胞,散在分布,心肌细胞间有较多新生毛细血管并可见新生的心肌样细胞;移植组小血管密度(68.25±9.54)条/mm~2明显高于对照组(35.14±7.06)条/mm~2(P<0.01),左心室射血分数(LVEF,62.75%±5.08%)、短轴缩短率(FS,40.28%±4.73%)也明显高于对照组LVEF(46.34%±5.94%)、FS(29.34%±3.86%)(均为P<0.05);移植组冠脉侧支循环形成较对照组明显;静脉内移植MNCs没有发现异常增生、钙化或肿瘤形成。结论经静脉移植的BM-MNCs可归巢到宿主心肌,有助于促进缺血心肌血管新生,改善左心室收缩功能的作用。  相似文献   

5.
目的研究血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)基因转染骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)移植对缺血心肌的血管生成作用。方法于2004年5月至2005年8月取第四军医大学西京医院分离、培养Wistar大鼠的MSCs,用真核表达载体pcDNA3.1(-)/hVEGF165转染MSCs。45只近交系Wistar大鼠随机均分为转染组(MSCs/VEGF组)、对照组(MSCs组)、无血清培养基组(DMEM组),结扎前降支建立急性心肌梗死模型后在梗死区边缘区行5×106细胞移植,DMEM组行等量培养基注射。细胞移植前行CM-DiI标记。移植1个月后行心脏B超测量射血分数值,组织化学染色评价新生血管密度。结果培养的MSCs呈典型贴壁生长成纤维样外观,pcDNA3.1(-)/hVEGF165能有效转染大鼠MSCs,移植1个月后MSCs/VEGF组较其余各组左室射血分数(LVEF),再生血管密度明显增加,差异均有显著性(P<0.01)。结论VEGF基因转染MSCs移植能显著促进缺血心肌血管再生,进而改善心脏功能。  相似文献   

6.
金家贵 《心脏杂志》2017,29(6):647-651
目的 探讨无针注射移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗缺血性心脏病的可行性。方法 健康杂种犬32只建立急性心梗(MI)模型并随机分为4组为单纯建模组(MI组),无针注射生理盐水组(NS组),有针注射移植干细胞组(N+MSCs组),无针注射移植干细胞组(NF+MSCs组)。术后6周检测血流动力学,处死动物后分离心脏行大体及组织学观察,计算MI面积并行新生血管计数。结果 N+MSCs组及NF+MSCs组梗死区心肌被纤维结缔组织替代,其间可见新生小血管;分别与MI组,NS组及N+MSCs组比较,NF+MSCs组左室舒张末压(9.00±3.2)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)下降、左室内压最大上升(841.86±72.85)mmHg/s和下降速率(-787.29±45.08)mmHg/s升高、梗死面积(18.59±3.58)%缩小、新生小血管数量(9.57±2.23)增多(P<0.05)。结论 无针注射移植干细胞治疗缺血性心脏病是安全,有效的。  相似文献   

7.
目的:探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)预处理对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)移植效率及心肌修复的影响.方法:不同浓度的IGF-1(0、2.5、5、10 ns/m1)以不同时间(4、12、24、48 h)预处理MSCs,流式细胞术分析趋化因子受体4的表达.建立大鼠心肌梗死模型,尾静脉分别注射不含细胞的100μl 培养液(对照组),无预处理的MSCs(MSCs组)和含经IGF-1预处理的MSCs(IGF-1-MSCs组),每组8只大鼠.MSCs移植4周后分析血流动力学和心肌梗死面积,移植细胞的归巢情况,Ⅷ因子相关抗原的表达,心肌特异性蛋白肌钙蛋白T的表达.结果:流式细胞术显示10 ns/mi IGF-1预处理48 h后MSCs趋化因子受体4的表达较0、2.5、5 ng/ml IGF-1预处理48 h后显著增高(P0.05).结论:IGF-1通过提高MSCs的归巢情况来提高细胞移植治疗心肌梗死的效果.  相似文献   

8.
目的 观察骨髓基质细胞在缺血心肌内诱导血管新生的作用及对心功能的影响。方法 复制兔心肌梗死动物模型 ,3d后将体外分离扩增的自体骨髓基质细胞用荧光标记物DAPI标记后移植到梗死周围缺血区心肌 (细胞移植组 ,n =8) ,对照组注射等量培养基 (n =6 )。 4W后 ,先进行心脏超声检查分别测定对照组和细胞移植组左室射血分数 (EF)和短轴缩短率 (FS) ,然后采集移植区心肌标本 ,用荧光示踪方法观察移植细胞在缺血坏死区心肌存活的情况 ,用CD31单克隆抗体免疫组化染色法测定毛细血管密度。结果 细胞移植组心肌组织和小血管内壁均可见蓝色荧光的DAPI标记的移植细胞 ;细胞移植组心肌毛细血管密度显著高于对照组 [(16 3 0 0± 2 5 85 )vs (96 0 0± 16 6 1) ,P <0 0 5 ];细胞移植组EF较对照组增高 [(0 5 0± 0 0 3)vs(0 4 6± 0 0 3) ,P <0 0 5 ],短轴缩短率FS也高于对照组[(2 7 0 2± 1 2 7)vs (2 3 85± 1 6 9) ,P <0 0 5 ]。结论 体外扩增的骨髓基质细胞可在缺心肌内存活 ,并能促进缺血组织血管新生、改善心功能。  相似文献   

9.
目的:比较经心外膜、静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗大鼠急性心肌梗死(AMI)的效果,为临床选择移植方法提供依据。方法:体外获取、培养大鼠骨髓MSCs。建立AMI模型,分别经心外膜、静脉移植5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记的MSCs。移植3周后超声测算左心室射血分数(LVEF)、短轴缩短率(FS);右颈总动脉插管检测血流动力学指标;免疫组化分析心肌内MSCs。结果:静脉移植组、心外膜移植组LVEF、FS较对照组均升高(P<0.05),心外膜移植组比静脉移植组升高更明显(P<0.05)。静脉移植组、心外膜移植组左心室收缩压、压力变化上升及下降速率最大值升高,左心室舒张末期压降低,心外膜移植组的变化比静脉移植组更明显(P<0.05)。心外膜移植组梗死心肌内BrdU阳性的MSCs数多于静脉移植组。结论:经心外膜移植MSCs治疗AMI的效果优于静脉移植途径。  相似文献   

10.
目的研究血管内皮生长因子(VEGF)基因转染同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)对猪急性心肌梗死(AMI)的治疗作用。方法体外分离、纯化、培养猪骨髓MSCs,以PCNA染色标记细胞;制备、抽提、纯化质粒pd-VEGF。用球囊堵闭及拉伤冠状动脉法建立AMI模型1周后,随机将其分为4组,每组4只,进行经冠状动脉途径移植MSCs和/或VEGF转染。Ⅰ组给予转染VEGF腺病毒的MSCs移植;Ⅱ组单纯MSCs移植;Ⅲ组VEGF基因质粒;Ⅳ组DMEM对照组。4周后行免疫组化和超声心动图检查。结果Ⅰ组及Ⅱ组在梗死区及缺血区均可见较大量的PCNA标记的移植细胞。Ⅷ因子染色阳性的新生血管密度:Ⅰ组〉Ⅲ组〉Ⅱ组〉Ⅳ组。4周后LVEF值:Ⅰ组〉Ⅱ组〉Ⅲ组〉Ⅳ组(P〈0.05或P〈0.01)。结论VEGF基因转染同种异体骨髓MSCs移植猪心肌梗死区及缺血区可以提高缺血心肌的心功能,这可能和骨髓MSCs促进血管和心肌细胞的再生有关。  相似文献   

11.
目的:探讨心肌机械钻孔结合复合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的缓释支架及骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对心肌血运重建的作用。方法:建立猪急性心梗模型后,于缺血区进行直径3.0mm的透壁性钻孔再生血管术(drilling transmyocardial revascularization,TMDR)并置入等直径的缓释支架,在孔道周围分五点进行细胞移植。心梗模型建立后0.5h及术后6周行心肌核素显像检测。取术后6周的心肌标本进行病理组织学检测。结果:术后6周,与对照组相比,治疗组的新生血管密度及心肌局部血流灌注均显著增加(P〈0.001),联合治疗组中上述指标明显高于支架或细胞单独治疗组(P〈0.05)。免疫荧光结果显示,联合治疗更有利于移植细胞存活,存活细胞分化成血管内皮细胞,参与新生血管网的形成。结论:复合bFGF的缓释支架及BMSCs移植可引发强烈的血管生成效应,减轻并改善缺血缺氧造成的心肌损伤,增强细胞移植的效果。  相似文献   

12.
BACKGROUND: Despite recent improvements in the treatments of coronary artery disease (CAD), there are a considerable number of patients who can not receive complete revascularization because of severe or total arterial occlusion. Intramyocardial injection of autologous bone marrow mononuclear cells (ABMMCs) has been shown to induce neovascularization of ischemic myocardium. METHODS AND RESULTS: The study will investigate the safety and feasibility of intramyocardial injections of ABMMCs and test the hypothesis that this treatment would promote neovascularization and improve left ventricular (LV) global and/or regional function in patients with severe CAD who have no other option. ABMMCs (approximately 10(6) cells) will be injected into the area of ischemic myocardium where the coronary artery is not graftable, in combination with bypass surgery to the other coronary branches. Myocardial perfusion and LV global and regional function will be evaluated, based on the micromanometer-tipped catheter method, single-photon emission tomography, and myocardial enhanced and color tissue Doppler echocardiography at baseline and during 12 month follow-up. CONCLUSIONS: This project will demonstrate that intramyocardial injection of ABMMCs with or without coronary artery bypass surgery could be a safe and effective method for therapeutic neovascularization, resulting in an improvement of cardiac function in patients with severe CAD.  相似文献   

13.
目的心肌梗死后经心外膜注射骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)后移植细胞在心外脏器(肝脾)的分布及对肝脾功能的影响。方法体外培养扩增雄性Lewis大鼠的MSCs,并用5-溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记,建立心肌梗死后3周的雌性大鼠模型,将MSCs(3×106,50μL)经心外膜注射到大鼠模型(n=22)的心肌梗死边缘区,对照组(n=21)注射同等量磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,PBS)。4周后,检查大鼠心功能改变情况,并分别取肝脾和外周血液,行免疫组化,HE染色,肝功能检测,血常规,IgM检测等。结果 MSCs移植后4周,MSCs移植组心功能较对照组改善,免疫双染示MSCs向肝样细胞分化,HE染色示肝脾淤血减轻,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、直接胆红素(DBIL)显著低于对照组,白蛋白(ALB)高于对照组,脾指数低于对照组。结论经心外膜注射MSCs可以改善心脏功能,移植后少量细胞滞留于肝脾,但对肝脾的功能均无明显影响。  相似文献   

14.
骨髓间质干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的 研究同种异体骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymak stem cells MSCs)移植至梗死心肌后对兔的一般情况、心功能、梗死面积和血管新生的影响.方法 开胸结扎冠状动脉左前降支建立急性心肌梗死动物模型,将5-溴脱氧尿核苷(bromodeoxyuridine,BrdU)标记的MSCs注入心肌梗死区.测定各组手术前后体重和心功能并取出心脏作相关检查.结果 与急性心肌梗死组比较,MSCs组术后一般情况好,6周时体重明显增加(P<0.05),术后3周、6周左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)均明显增加(P<0.05),梗死面积明显缩小(P<0.05),毛细血管数目显著增多(P<0.01).MSCs组心肌梗死区可见BrdU阳性细胞,电镜下可见不成熟的心肌样细胞.结论 同种异体MSCs移植治疗急性心肌梗死除提高心功能外,尚可改善兔子的一般情况,增加体重.  相似文献   

15.
目的探讨心肌梗死后自体骨髓间充质细胞(MSCs)心肌内移植减轻心功能不全的可能性,以及体外诱导及注射部位等因素对移植疗效的影响。方法34只新西兰白兔均经过骨穿抽取骨髓,开胸建立心梗模型,MSCs体外培养和二次开胸心肌内注射等操作,按照对其MSCs的处理方式和心肌内注射的成分不同随机分为三组:A组为MSCs未经体外诱导;B组为MSCs经5.氮杂胞苷(5-aza)体外诱导;C组为对照组,注射生理盐水。另外根据注射部位不同分为疤痕组和边缘组。结果与未诱导的MSCs相比,5-aza诱导的MSCs移植并未表现出更多的优越性。注射的部位是心功能改善关键的影响因素。如果注射到疤痕区,MSCs更倾向于分化为成纤维细胞。如果注射到边缘区,MSCs则倾向于分化为心肌细胞。结论在进行MSCs心肌内移植时不仅要强调将MSCs投送到梗死区,更要注意将MSCs投送到尚有存活心肌的边缘区。  相似文献   

16.
AIMS: Erythropoietin (EPO) improves cardiac function and induces neovascularization in chronic heart failure (CHF), although the exact mechanism has not been elucidated. We studied the effects of EPO on homing and incorporation of endothelial progenitor cells (EPC) into the myocardial microvasculature and myocardial expression of angiogenic factors. METHODS AND RESULTS: CHF was induced in rats by coronary artery ligation resulting in myocardial infarction (MI) after bone marrow had been replaced by human placental alkaline phosphatase (hPAP) transgenic cells. We studied the effects of darbepoetin alfa treatment (EPO, 40 microg/kg, every 3 weeks, starting 3 weeks after MI) on longitudinal changes in left ventricular (LV) function, circulating EPC, myocardial histology, and expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) determined 9 weeks after MI. EPO prevented LV-dilatation and improved cardiac function (all P < 0.05), which was associated with 42% increased capillary growth (P < 0.01). EPO-induced mobilization of EPC from the bone marrow (P < 0.01), which resulted in a three-fold increased homing of EPC into the cardiac microvasculature. The percentage of the endothelium that consisted of bone marrow derived cells was significantly increased (3.9 +/- 0.5 vs. 11.4 +/- 1%, P < 0.001) comprising 30% of the newly formed capillaries. In addition, EPO treatment resulted in a 4.5-fold increased myocardial expression of VEGF, which correlated strongly with neovascularization (r = 0.67; P < 0.001). VEGF was equally expressed by endothelial cells of myocardial and bone marrow origin. CONCLUSION: EPO-induced neovascularization in post-MI heart failure is mediated through a combination of EPC recruitment from the bone marrow and increased myocardial expression of VEGF.  相似文献   

17.
目的:探讨心肌内、冠脉内及静脉内3种途径移植自体骨髓单个核细胞(BM-MNCs)治疗猪急性心肌梗死的时机及安全性。方法:分别于心肌梗死(MI)后即刻进行心肌内及静脉内移植,于MI后1周进行冠脉内移植。移植BM-MNCs后4周,观察小血管密度、心功能变化及冠脉侧支循环形成的情况,探讨移植的时机及安全性。结果:①3种途径BM-MNCs移植后4周,小血管的密度均明显高于各自的对照(P0.01);心肌内移植与冠脉内移植相比,小血管的密度无统计学差异,但明显高于静脉内移植(P0.01)。②3种途径移植BM-MNCs后4周,左室射血分数(LVEF)和缩短分数(FS)组相比较无统计学差异。心肌内移植和冠脉内移植的左室舒张末压(LVDEP)和左室舒张末期内径(LVEDD)均明显低于对照;而静脉内移植的LVDEP和LVEDD虽低于对照但无统计学差异。③3种途径移植BM-MNCs后1周,血清碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及血管内皮生长因子(VEGF)的浓度明显高于各自对照及术前水平(P0.01)。④3种途径移植BM-MNCs后,均没有发现异常增生、钙化或肿瘤形成。结论:①心肌内及静脉内移植的时机应选在MI后即刻,冠脉内移植的时机应选在MI后1周。3种途径移植BM-MNCs后,均有助于促进缺血心肌中的血管新生,改善左室收缩功能。心肌内与冠脉内移植BM-MNCs均有改善左室舒张功能、减轻心室重构的作用,但在静脉内移植后该作用不明显。②3种途径移植BM-MNCs后,均没有发现明显的副作用。  相似文献   

18.
目的:评价心肌样细胞和内皮祖细胞联合移植对心肌梗死心室重构疗效是否优于单一细胞移植。方法:体外骨髓穿刺提取、分离、培养骨髓间充质干细胞(mensenchymal stem cell,MSC),向心肌样细胞和内皮祖细胞定向诱导分化。心肌梗死模型制作成功2周后,随机分为对照组、心肌样细胞组、内皮祖细胞组、联合移植组,沿梗死周边区域注射100μl培养基或心肌样细胞、内皮祖细胞、二者混合悬液各3×1012/L。移植前、后4周心脏超声检查,TTC染色评价梗死面积、氯胺T氧化法测定血浆、心肌组织羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量及基质金属蛋白酶含量。结果:①诱导后MSC呈现心肌样细胞超微结构特征,PCR检查表达β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy main,β-MHC)、受磷蛋白(phospholamban,PLB)、心房钠尿肽(atrial natriuretic polypeptide,ANP);内皮祖细胞呈"铺路石"外观,高表达CD133并随时间推移表达逐步下降。②与对照组相比,细胞移植能改善心功能(P0.05),降低梗死面积(P0.05),血浆羟脯氨酸含量(P0.05),心肌组织羟脯氨酸(P0.05)基质金属蛋白酶(MMP-9)含量(P0.05),联合细胞移植组效果更好。结论:MSC可定向分化心肌样细胞和内皮祖细胞,两者联合移植能够更好降低梗死面积、改善心室重构,效果优于单一细胞移植。  相似文献   

19.
目的探讨心内膜注射导管应用于干细胞移植治疗心肌梗死的可行性。方法将移植组和对照组分别经自制的心内膜注射导管梗死心肌内移植体外扩增的自体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和无血清培养,移植前后、6周及3个月超声评价左心功能,3个月时取梗死周围心肌组织冷冻切片,免疫荧光法鉴定结蛋白(desmin)和心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)的表达。结果自制的可调节注射导管,制作方法简单,安全有效;MSCs移植数量平均为(3.81±0.09)×107个;左室射血分数正常为(69.3±2.5)%,心肌梗死后降为(34.9±0.9)%,移植后3个月升至(56.7±0.8)%,超声提示室壁运动增强;与对照组相比,移植组左室收缩末压、左室舒张末压及左室压力最大上升/下降速率改善更明显(均为P<0.01),荧光显微镜下可见DAPI标记胞核为蓝色荧光的移植细胞,免疫组化提示结蛋白及cTnI表达阳性。结论实验用注射导管可以完成细胞的心内膜移植,移植的MSCs体内定位明确,移植后心功能改善,并有心肌相关蛋白的表达。  相似文献   

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