趋化因子受体CXCR7在牙周炎中的表达及其作用机制

目的:探讨CXCR7在牙周炎中的表达、分布及SDF-1/CXCR7生物学轴在牙周炎中的作用。方法:运用免疫组化的方法检测SDF-1、CXCR4、CXCR7在15例正常的牙龈组织和15例牙周炎组织中的表达,同时运用PCR方法检测15例正常的牙龈组织和15例牙周炎组织中的表达情况。结果:免疫组化和PCR的结果均显示SDF-1、CXCR4、CXCR7在牙周炎组织中表达增高,高于正常牙龈组织(P<0.05)。SDF-1与CXCR7呈正相关关系(γ=0.533,P=0.041)。CXCR4和CXCR7的表达呈正相关关系(γ=0.533,P=0.041)。结论:CXCR7在牙周炎微环境中的不同细胞群过表达,在牙周炎的病理过程中发挥作用,可能是治疗牙周炎的一个新的作用靶点。     

基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4在牙本质-牙髓复合体损伤修复过程中的表达

目的:通过构建牙本质-牙髓复合体损伤修复动物模型,研究基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4(SDF-1α/CXCR4)在其损伤修复过程中的表达。方法:制备大鼠牙本质-牙髓损伤模型,通过免疫组织化学染色、PCR技术分别对损伤后0、6h和1、3、7d及正常大鼠牙髓标本中SDF-1α/CXCR4进行检测。结果:正常大鼠组牙髓中没有发现SDF-1α、CXCR4阳性表达,实验大鼠组损伤6h后少量的成牙本质细胞和前期牙本质开始出现较弱阳性表达,损伤1d后成牙本质细胞阳性表达增强,损伤3d后牙髓成纤维细胞出现阳性表达,损伤7d后未分化间充质细胞出现阳性表达,大鼠牙髓损伤后SDF-1α、CXCR4随着时间的增加阳性表达程度明显增强。图像分析结果显示,SD大鼠牙本质-牙髓复合体损伤后牙髓中SDF-1α、CXCR4的表达(灰度值)除Oh外其余各组均高于对照组(P<0.05)。PCR结果显示,损伤后大鼠牙髓中SDF-1α、CXCR4均符合产物设计大小。其表达(灰度值)除Oh外其余各组均高于对照组(P<0.05)。结论:大鼠牙本质-牙髓复合体损伤后,前期牙本质、成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞和未分化间充质细胞对SDF-1α、CXCR4的表达呈时间依赖性,提示SDF-1α、CXCR4可能参与了修复性牙本质的形成。     

人类牙髓细胞中基质细胞衍生因子-1α/CXCR4轴的调控（英）

引言尽管有报道认为间质细胞性因子（SDF）-1α/CXCR4轴存在于牙髓组织中,但关于牙髓干细胞（DPSCs）中该轴的调控知之甚少。本研究目的就是要搞清炎症或组织缺氧状态对牙髓细胞中的SDF-1α/CXCR4轴是否有调控作用。方法：用不同浓度的脂多糖LSP刺激原代牙髓细胞     

CXCR4受体在口腔鳞癌细胞系中的表达及对细胞增殖和迁徙的影响

目的:观察口腔鳞癌细胞系(OSCC)中趋化因子受体CXCR4的表达,检测SDF-1/CXCR4反应轴对OSCC增殖的作用,SDF-1对CXCR4阳性肿瘤细胞的趋化作用,探讨CXCR4受体在OSCC中的功能及活性。方法:细胞涂片免疫荧光法检测CXCR4蛋白在OSCC细胞系的表达,流式细胞仪直接免疫荧光法检测OSCC细胞系中CXCR4蛋白的表达量,MTT法检测细胞的增殖能力,体外迁徙实验检测SDF-1/CXCR4反应轴对OSCC细胞的趋化作用。采用SPSS10.0软件包进行ANOVA方差分析和t检验。结果:CXCR4蛋白在OSCC细胞系呈阳性表达,表达率为68.62%。OSCC细胞在SDF-l作用下,其增殖反应显著增强,CXCR4抗体可显著抑制肿瘤细胞的增殖,SDF-1可显著诱导OSCC细胞的移动。结论:CXCR4受体与OSCC细胞增殖、迁徙功能有一定关系。     

正常及炎症状态人牙髓中八聚体结合转录因子4B的表达

目的 研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞( HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用.方法 采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应( RT-PCR)方法检测正常及炎症牙髓组织中Oct-4B的表达情况.RT-PCR检测1 mg/L脂多糖刺激HDPC 24、48、72 h后Oct-4B和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化.结果 正常牙髓组织中未检测到Oct-4B的表达,炎症牙髓组织病灶处牙髓成纤维细胞和炎症细胞胞质中Oct-4B表达强阳性.炎症牙髓组织中Oct-4B mRNA水平显著高于正常牙髓组织(P<0.05).脂多糖刺激48.72 h后,HDPC中Oct-4B和HSP70 mRNA水平同步上调(P<0.05).结论 Oct-4B在炎症牙髓组织中高表达,且脂多糖刺激可上调牙髓细胞内Oct-4B表达,Oct-4B可能参与牙髓炎症修复过程.     

用免疫组化法对正常和炎症牙髓中免疫细胞的研究

乳、恒牙正常和炎症牙髓的免疫组化研究表明:炎症牙髓中的Mψ和OKM-1阳性细胞比正常牙髓明显增多,乳、恒牙无显著差别。慢性牙髓炎急性发作组中的OKM-1阳性细胞群明显高于慢性牙髓炎。T细胞散在于正常牙髓中央区,CD_4/CD_8=0.55,以CD_8阳性细胞居多,无B细胞存在。炎症牙髓中T细胞明显增加,CD_4/CD_8=1.15,CD_4细胞占优势,T细胞:B细胞=2.31。慢性牙髓炎急性发作组的B细胞多于慢性牙髓炎组,恒牙炎症牙髓组中T细胞高于乳牙炎症牙髓组。     

CD14在牙髓和牙龈组织中的免疫组化定位

目的：检测CD14在牙髓和牙龈组织的分布，探讨CD14在牙髓和牙龈炎症过程中的可能作用。方法：组织切片技术制备人牙髓和牙龈组织标本，用免疫组织化学方法检测CD14在健康和炎症牙髓、牙龈组织的分布。结果：健康牙髓没有发现CD14免疫阳性细胞，炎性牙髓组织病灶处炎细胞呈阳性反应；健康牙龈上皮棘层细胞有微弱的阳性反应，炎性牙龈上皮棘细胞层强阳性。结论：CD14参与了牙髓和牙龈组织的炎症反应过程；特别是牙龈上皮棘细胞层CD14免疫阳性，说明棘细胞层可能参与了牙龈炎免疫病理过程。     

人正常及炎症牙髓中炎症信号受体TLR4表达的研究

目的:研究人正常及炎症牙髓组织中炎症信号受体TLR4的表达特点,探讨其在牙髓和根尖周组织炎症中的可能作用。方法:采用激光共聚焦扫描显微镜和免疫荧光技术,检测正常及炎症牙髓TLR4的表达情况。结果:正常牙髓组织中未发现TLR4免疫阳性细胞,炎症牙髓组织病灶处TLR4表达强阳性。正常组平均荧光强度为28.80±2.57,炎症组为258.12±24.51(P<0.001)。结论:与正常牙髓组织相比,炎症牙髓组织TLR4表达显著增强,提示其可能参与牙髓组织炎症过程。     

基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4在人牙髓细胞中的表达

目的 研究体外培养人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPC)上CXCR4的表达情况,检测大肠杆菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激后HDPC培养上清液中基质细胞衍生因子1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α)的表达水平,探讨人工重组SDF-1α(recombinant human SDF-1α,rhSDF-1α)对HDPC增殖及迁移的影响.方法 采用免疫细胞化学及间接免疫荧光技术检测HDPC上CXCR4的表达.用不同浓度LPS(0.1、1、10、100 mg/L)和TNF-α(1、10、100μg/L)刺激HDPC 48 h后,ELISA法检测HDPC培养上清液中SDF-1α含量的变化.同时甲基噻唑基四唑(MTT)法及体外趋化实验观察不同浓度rhSDF-1α对HDPC增殖及迁移的影响.结果 正常HDPC胞膜表达CXCR4且其培养上清液分泌SDF-1α,浓度约为(4513.55±962.92)ng/L.在用LPS和TNF-α刺激HDPC后,SDF-1α的表达水平均显著降低(P＜0.05).50、100和200μg/L的rhSDF-1α可促进HDPC的增殖(P＜0.05),50和100μg/L rhSDF-1α作用9 h可显著趋化HDPC的迁移(P＜0.01).结论 CXCR4在HDPC上表达且SDF-1α能促进HDPC的增殖及迁移;SDF-1-CXCR4轴可能在牙髓组织损伤修复中发挥重要作用.     

脂多糖信号受体CD14、TLR4在人牙髓组织和牙髓成纤维细胞中的表达

目的研究人牙髓组织和牙髓成纤维细胞中脂多糖（LPS）信号受体CD14、TLR4的表达特点,探讨牙髓炎症组织中LPS的信号转导途径.方法采用免疫组化染色法观察健康和炎症牙髓组织中CD14、TLR4的表达情况;应用直接免疫荧光标记法,采用流式细胞术检测体外培养人牙髓成纤维细胞在LPS刺激前后的CD14、TLR4阳性细胞率和细胞表面平均荧光强度.结果正常牙髓组织中未见CD14、TLR4阳性细胞;炎症牙髓组织中可见大量CD14、TLR4阳性细胞,CD14、TLR4阳性细胞率差异无统计学意义（P＞0.05）.牙髓成纤维细胞经LPS刺激后,TLR4平均荧光表达强度和TLR4阳性细胞率均显著增高（P＜0.05）,而CD14在LPS刺激前、后均无表达.结论炎症牙髓组织中CD14、TLR4的阳性表达,提示LPS可能通过CD14、TLR4信号受体在牙髓炎症组织中发挥作用,而牙髓成纤维细胞在LPS刺激后仅表达TLR4,表明LPS可能通过TLR4对牙髓成纤维细胞发挥作用.     

Expression and significance of stromal cell-derived factor-1alpha and its receptor CXCR4 in human dental pulp cells

OBJECTIVE: To investigate the expression of CXCR4 in cultured human dental pulp cells (HDPC) in vitro and the corresponding ligand SDF-1alpha level of HDPC supenatants stimulated by lipopolysaccharide (LPS) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and to explore the role of SDF-1alpha on the proliferation and the migration of HDPC. METHODS: The expression of CXCR4 in HDPC was detected by immunocytochemistry technique and indirect immunofluorescence technique. The culture supernatants of HDPC were collected after HDPC had been simulated by LPS and TNF-alpha of different concentrations for 48h and then the SDF-1alpha level was assayed by quantitative sandwich ELISA. Meanwhile, the effects of recombinant human SDF-1alpha (rhSDF-1alpha) on the proliferation and the migration of HDPC at different concentrations were observed by MTT and Boyden Chamber Assay. RESULTS: CXCR4 was expressed in cytomembrane of HDPC and SDF-1alpha was secreted into their normal cell supernatants with a concentration of (4513.55 +/- 962.92) ng/L. The secretion of SDF-1alpha was both significantly decreased by stimulation with LPS and TNF-alpha (P < 0.05). In addition, rhSDF-1alpha stimulated the HDPC proliferation at the concentrations of 50, 100, 200 microg/L (P < 0.01) and increased the chemotactic migration of HDPC significantly after 9h's incubation with the concentrations of 50, 100 microg/L (P < 0.05). CONCLUSIONS: SDF-1alpha accelerated the proliferation and the migration of HDPC which expressed CXCR4. SDF-1-CXCR4 axis may play a role in repair of pulp injury.     

基质细胞趋化因子-1对人牙周膜干细胞趋化因子受体——CXC亚家族受体4表达的影响研究

目的:证实人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)表达趋化因子受体——CXC亚家族受体4(cysteine X cysteine receptor 4,CXCR4)及探究趋化因子基质细胞趋化因子-1(stromalcell-derived factor1,SDF-1)和阻断剂AMD3100(商品名:普乐沙福)对CXCR4表达的影响,从而为探究牙周膜干细胞生物学效应的影响提供理论基础。方法:采用消化组织块法联合有限稀释法分离纯化得到hPDLSCs,取第3代hPDLSCs随机分为3组:阴性对照组、SDF-1组(200μg/L SDF-1),SDF-1+AMD3100组(200μg/L SDF-1+10 mg/L AMD3100)。利用Western blot检测CXCR4在hPDLSCs上的表达及在SDF-1、AMD3100作用下CXCR4表达的变化。结果:1.筛选后的hPDLSCs可被诱导分化为成骨细胞和成脂细胞,证实其具有多向分化潜能;利用流式细胞仪检测其细胞表型鉴定其符合牙周膜干细胞的免疫表型。2.Western blot检测结果显示hPDLSCs上表达CXCR4,且应用SDF-1后上调CXCR4的表达,SDF-1+AMD3100组无明显变化。结论:1.hPDLSCs可从新鲜离体牙的牙周膜中培养获得,经有限稀释法纯化后鉴定为间充质来源。2.hPDLSCs上表达CXCR4,SDF-1通过上调hPDLSCs上CXCR4的表达,AMD3100可阻断SDF-1与其受体CXCR4结合。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4在成体干细胞迁移中的作用

基质细胞衍生因子-1是一种重要的造血与非造血系干细胞形态发生因子和趋化因子。基质细胞衍生因子-1与其受体CXCR4结合,所介导的成体干细胞迁移归巢在多种组织器官损伤后的再生修复中发挥重要作用。基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4组成的功能轴在成体干细胞尤其是骨髓源干细胞迁移方面的研究进展,为研究牙髓干细胞迁移提供了新的方向。     

β-catenin在人恒牙牙髓及牙乳头中的表达

目的:比较人恒牙牙髓、牙乳头组织中β连环蛋白(β-catenin)的mRNA和蛋白的表达情况,探讨β-catenin与牙髓牙本质复合体发育之间的关系。方法:收集48颗因正畸而拔除的健康前磨牙,拔除后立即取出牙髓和牙乳头组织。实验分为3组,第1组为年轻恒牙的牙乳头组织,第2组为年轻恒牙的牙髓组织,第3组为成熟恒牙的牙髓组织。用RT-PCR及Western印迹检测β-catenin的表达,图像分析软件(Meta Morph)对阳性条带进行灰度值的测定。采用SPSS11.0软件包对数据进行两样本t检验。结果:β-catenin在年轻恒牙的牙乳头、牙髓及成熟恒牙的牙髓组织中均有mRNA和蛋白表达,在年轻恒牙牙髓组织中的表达强于在牙乳头组织以及成熟恒牙牙髓组织中的表达(P<0.05)。结论:β-catenin在年轻恒牙和成熟恒牙的牙乳头、牙髓组织中均有不同程度的表达,提示β-catenin在牙髓牙本质复合体发育及牙髓损伤后的修复过程中可能发挥重要作用。     

Treatment of endodontic urgent care cases

This article describes treatment for urgent care cases involving the dental pulp and periradicular tissues: acute pain of pulpal or periradicular origin, acute pain from endodontic procedures, and management of traumatically injured teeth.