ABI ViiA 7 Taqman HBV-DNA检测系统性能验证

目的验证ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统性能,确定该系统是否稳定、准确、可靠。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件,从精密度、准确度、线性、可比性等方面对ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统进行性能评价;通过稀释标本直至低于检测下限进行定量检出限验证实验;并与质量目标要求和厂商声明的分析性能进行比较。结果ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA分析系统的批内精密度(CV批内)分别为1.485%、1.990%和0.932%;总精密度(CV总)分别为1.876%、3.361%和1.891%;准确度最大偏移为-6.8%;r2为0.998 3,回归方程为Y=0.974 8 X+0.050 7,线性范围为1.00E2~2.00E8;定量检出限为100IU/mL;ABIViiA7与ABI7500两台PCR仪的可比性:P=0.115,r2=0.994,线性比对直线回归方程为Y=0.987 2 X+0.051 7。结论 ABI ViiA 7Taqman HBV-DNA检测系统具有优良的精密度、准确度、灵敏度、线性,与ABI7500检测系统有良好的相关性,可用于临床标本检测。     

ABI7700、7500荧光定量PCR仪性能评价

目的 对美国ABI 7700、7500荧光定量PCR仪的主要性能指标进行评价.方法 按照美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准,对20份标本(HBV-DNA)定量检测,评价两种仪器的精密度、准确性、线性、可比性、灵敏度等指标.结果 精密度:ABI 7700批内变异系数(CV)为3.67%～5.58%,批问为4.46%～6.53%;7500批内CV为4.09%～5.61%,批间为4.73%～6.96%.准确性:与标准质控物比较,相对偏差7700为0.93%,7500为2.97%.线性:ABI 7700 r=0.999,7500 r=0.995.灵敏度:ABI 7700、7500能检测到的最低HBV-DNA浓度均为1000 U/ml.两种仪器的可比性:相关系数为0.994,直线回归方程为.y=1.0694x-0.1372.结论 两种荧光定量PCR仪各种指标性能均良好.     

SLAN-96P型荧光定量PCR仪性能评价及其应用

目的评价SLAN-96P型荧光定量PCR仪(SLAN-96P)的主要性能指标及其应用价值。方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件制定的评价标准,对40份临床血清标本、质控品和标准品进行乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)定量检测,评价该仪器的准确性、重复性、线性、灵敏度、A模块与B模块的可比性等指标。结果准确度的相对偏倚为0.2%~5.2%;重复性:批内变异系数(CV_(批内))为1.37%~2.75%,批间变异系数(CV_(批间))为1.52%~2.51%;灵敏度:SLAN-96P能检测的最低HBV-DNA浓度为10~2 IU/mL;线性:直线回归方程是Y=0.982 X+0.094 8,相关系数(r)=0.999;A模块与B模块的可比性:A模块与B模块的检测结果差异无统计学意义(P0.05),直线回归方程为Y=1.000 7 X+0.012 4,r=0.994。结论 SLAN-96P型荧光定量PCR仪各项性能指标良好,SLAN-96P在病原微生物核酸检测方面具有高效、灵敏、快捷、定量的特点,具有很好的临床应用价值。     

ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能评估

目的为参加医学实验室认可和评价仪器性能,对ABI 7300实时荧光定量PCR仪的性能进行评估。方法参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)文件对ABI 7300荧光定量PCR仪检测HBV-DNA定量结果的精密度、正确度、灵敏度及线性进行评价。结果精密度:批内变异系数(CV批内)为2.38%~4.61%,批间变异系数(CV批间)为3.87%~5.33%,达到《医学实验室质量和能力认可准则》中基因扩增检验项目分析性能标准(CV批内4.8%,CV批间6.4%)。正确度:参加2011年卫生部室间质评结果总体平均偏倚为2.14%,符合卫生部质评要求(偏倚不超过8%);功能灵敏度:100IU/mL检测限浓度的CV值最接近于20%,与试剂盒检出下限相符;线性:相关系数(r2)为1.0,线性关系符合要求。结论 ABI 7300实时荧光定量PCR仪各项性能指标精确,可以为临床提供快速、准确的报告。     

电化学发光免疫分析仪检测TSH的性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析仪的系统性能。方法以促甲状腺激素(TSH)检测为例,参考美国临床实验室标准化协会(NCCLS)文件,制定了一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、干扰能力、参考范围等方面进行验证。结果批内不精密度(CV)1.44%～1.84%、批间CV2.01%～2.44%;正确度相对偏倚为4.60%～4.73%;分析灵敏度0.017μIU/mL;线性范围0.017～92.04μIU/mL;干扰:血红蛋白小于或等于24.00mg/mL、三酰甘油小于或等于4.2mg/mL、总胆红素小于或等于0.50mg/mL;参考范围0.27～4.21μIU/mL。结论 Roche Cobas e411精密度好、分析灵敏度高、线性范围宽、正确度高,其参考区间大致与厂家提供的一致;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过。     

一种乙型肝炎病毒核酸PCR定量检测试剂的性能验证

目的验证和评价一种乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)定量PCR检测试剂的性能。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP系列文件和ISO15189:2012的相关要求对试验试剂的精密度、正确度、可报告范围、定量检测限进行评价。结果精密度:高值(106 IU/mL)、低值(103 IU/mL)标本检测浓度对数值的批内变异系数(CV)分别为3.27%、4.00%,批间CV分别为4.84%、4.89%;正确度:试验试剂与比对试剂具有较好的相关性,直线回归方程为Y=1.006 2 X+0.226 4,r2=0.984 70.95;可报告范围:试验试剂在4.76×102~4.76×108 IU/mL范围内具有良好的线性(Y=0.995 9 X+0.183 9,r2=0.9990.95);定量检测限为500IU/mL。结论试验试剂的各项检测性能与厂家声明相符。     

基于Pre-NAT全自动核酸检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂方法学性能验证

目的对基于Pre-NAT全自动核酸检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂进行方法学性能验证。方法参考美国国家临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的相关文件,分别选用HBV国家标准品、室内质控品、临床高/低值及阴性样本,对基于PreNAT全自动检测系统的HBV-DNA超敏检测试剂进行准确性、灵敏度、线性范围、精密度及特异性的评估;并与基于手工提取的HBV-DNA普通定量检测试剂进行比对。结果 HBV-DNA超敏检测试剂的准确性能够通过国家标准品标准;室内质控品批间精密度CV为2.01%;临床高值、低值样本的批内精密度CV分别为3.21%、5.26%;检测下限为20 IU/m L,高于HBVDNA普通检测试剂(100 IU/m L);对丙型肝炎、戊型肝炎、巨细胞、风疹、单纯疱疹等病毒核酸无交叉反应性;HBV-DNA超敏检测试剂与HBV-DNA普通检测试剂检测结果呈高度相关性(r=0.987,P0.05),回归方程为Y=0.911X+0.215;配对t检验显示两者差异有统计学意义(t=3.765,P0.05)。结论 HBV-DNA超敏检测试剂有较好的准确性、精密性、特异性、灵敏度、线性范围,其基于全自动核酸检测系统可广泛应用于临床。     

F-DAOS色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价

目的根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件,评价N乙基N(2羟3磺丙)3,5二甲氧4氟苯胺(F DAOS)酶法肌酐(Cr)试剂盒。方法采用F DAOS酶法试剂盒测定血清Cr,并对精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果精密度批内变异系数(CV)为1.24%～2.15%,批间CV为2.33%～3.95%,总CV为2.52%～4.27%,线性达2870μmol/L,r=0.996。与Roche同类试剂对照,r=0.9894。上海市临床检验中心质控血清测定偏差值≤2.06%。胆红素<684μmol/L、血红蛋白<5.0g/L、维生素C<500mg/L时对本法无干扰。参考值:男性为55.8～136.2μmol/L,女性为36.8～111.2μmol/L。结论采用F DAOS色原的酶法测定血清Cr的方法特异性好,精密度高,结果准确,有一定推广价值。     

Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原的方法学评价

目的:对Roche Cobas E601电化学发光分析仪检测降钙素原(PCT)进行方法学评价.方法:通过Roche Cobas E601测定PCT的精密度、准确度、分析测量范围和携带污染率来评价其性能.结果:低、高值批内精密度的变异系数(CV)分别为1.16％、0.51％,批间精密度的CV为2.98％、1.96％;测定4份定值校准品的检测结果与靶值的偏倚为-5.26％ ～ 3.16％;线性为0.039 ng/mL ～ 86.325 ng/mL;携带污染率为0.019％.结论:该系统检测性能能够满足PCT的测定要求.     

罗氏全自动电化学发光免疫分析仪检测白细胞介素-6的方法学评价

目的 评价罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪模块定量检测白细胞介素-6(IL-6)的分析性能。方法 对罗氏全自动电化学发光免疫分析仪定量检测IL-6的准确度、精密度和线性进行验证,并进行交叉污染率评估实验。结果 经不同批次校准品检测,测定值与靶值的相对偏差为-3.01%～3.84%。批内变异系数(CV)为1.84%～2.80%,批间CV为0.67%～1.43%,检测的准确度和精密度均符合性能标准。IL-6检测回归分析呈一次线性,线性回归方程为y=1.008 1x-1.000 9(R²=0.999 96,P<0.05)。IL-6检测的交叉污染率为0.077%。结论 罗氏Cobas E602全自动电化学发光免疫分析仪对IL-6检测性能的验证结果与仪器生产厂家提供的说明基本一致,符合临床实验室检验的要求,可用于临床标本测定。     

实时荧光定量PCR检测病毒核酸方法学性能验证程序的探讨

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测病毒核酸的方法学性能验证程序。方法参考美国国家临床实验室标准化协会（CLSI）颁布的相关文件对实验室开展PCR检测病毒核酸进行方法学性能验证;通过稀释标本直至低于检测下限进行定量检出限验证实验。结果乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）检测的批内精密度（CV批内）分别为4.28%和2.08%;总精密度（CV总）为4.14%和2.69%;与比对方法回归方程为y=1.1082x-0.5225;线性相关系数为0.9976,回归方程为y=0.9771x-0.0062,线性范围为1.08E3~1.05E8;定量检出限为500IU/mL。丙型肝炎病毒核酸（HCV-RNA）检测的CV批内分别为4.11%和2.63%;CV总为5.15%和3.41%;与比对方法回归方程为y=1.0075x-0.0662;线性相关系数为0.9974,回归方程为y=1.0479x-0.2594,线性范围为1.50E3~2.53E7;定量检出限为1000IU/mL。结论实验室开展PCR检测项目前有必要进行方法学验证,根据实际情况选择实验方案和统计方法可减少人力和财力。     

飞测Ⅱ型免疫荧光检测仪检测C-反应蛋白性能验证

目的验证飞测Ⅱ型免疫荧光检测仪检测C-反应蛋白的性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会CLSI文件,并结合工作实际情况,以C-反应蛋白作为验证指标,对该仪器精密度、准确度、线性、可比性、稳定性、抗干扰能力进行验证。结果 C-反应蛋白3个浓度水平的批内精密度分别为高值CV4.46%,中值CV3.32%,低值CV6.47%;批间精密度分别为高值CV7.51%,中值CV5.89%,低值CV10.66%,结果均在仪器说明书范围内。准确度验证偏差分别为12.90%和13.95%,均在仪器允许偏差范围内。线性回归方程Y=0.958 X+2.897,相关系数r=0.998,与厂商承诺范围接近。与日本OlympusAU400散射比浊法对比实验检测结果相关性良好,回归方程Y=1.021 X-1.214,r=0.982,两法差异无显著性(P0.05)。稳定性实验表明全血标本在缓冲液中保存30min内结果稳定性良好,CV值2.35%。黄疸和血脂干扰物对测试结果影响较小,平均影响度均5%在可接受范围内。结论飞测Ⅱ型免疫荧光检测仪检测C-反应蛋白的性能符合厂商声明的性能指标。同时该仪器具有操作简单、检测速度快、精密度好、准确度较高、可比性好、抗干扰能力强,临床和患者易接受等优点,适合在临床实验室推广应用。     

IMS-972电解质分析仪性能评价

目的对IMS-972电解质分析仪性能进行评价。方法通过分析钾离子(K~+)、钠离子(Na~+)、氯离子(Cl-)的检测精密度、准确度、线性范围及参考区间等对IMS-972电解质分析仪性能进行评价。结果 IMS-972电解质分析仪检测K~+正常水平与病理水平的批内精密度变异系数(CV)分别为0.38%和0.66%,批间精密度CV分别为0.39%和0.95%;Na~+正常水平与病理水平的批内精密度CV分别为0.14%和0.22%,批间精密度CV分别0.31%和0.45%;Cl-正常水平与病理水平的批内精密度CV分别为0.60%和0.93%,批间精密度CV分别为0.51%和1.54%,均满足美国《临床实验室改进法案修正案》(CLIA′88)标准。准确度检测结果在室间质评的允许范围。线性:K~+Y=0.989 7 X~+0.490 0,R~2=0.997 4;Na~+Y=0.996 7 X-1.584 8,R~2=0.999 2;Cl-Y=0.996 9 X~+0.294 3,R2=1.000 0。可报告范围:K~+1.97~20.44mmol/L,Na~+28.80~195.95mmol/L,Cl-13.20~164.54mmol/L。生物参考区间验证通过。结论验证方案可操作性和实用性强,IMS-972电解质分析仪检测电解质项目在精密度、准确度、线性范围等方面均达到了生物化学检验实验室的要求,可用于临床标本检测。     

F-DAOS色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价

目的根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件,评价N-乙基-N-(2-羟-3-磺丙)-3,5-二甲氧-4-氟苯胺(F-DAOS)酶法肌酐(Cr)试剂盒.方法采用F-DAOS酶法试剂盒测定血清Cr,并对精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析.结果精密度批内变异系数(CV)为1.24%～2.15%,批间CV为2.33%～3.95%,总CV为2.52%～4.27%,线性达2 870 μmol/L,r=0.996.与Roche同类试剂对照,r=0.989 4.上海市临床检验中心质控血清测定偏差值≤2.06%.胆红素＜684 μmol/L、血红蛋白＜5.0g/L、维生素C＜500 mg/L时对本法无干扰.参考值男性为55.8～136.2μmol/L,女性为36.8～111.2 μmol/L.结论采用F-DAOS色原的酶法测定血清Cr的方法特异性好,精密度高,结果准确,有一定推广价值.     

CLIA和ELISA检测血清HBsAg及HBsAb的结果比较

目的比较化学发光免疫分析(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清HBsAg及HBsAb的结果。方法采用CLIA法和ELISA法测定定值血清中的HBsAg和HBsAb,并对两种结果进行比较和分析。结果测定HBsAg时,ELISA法的批内CV:1IU/ml为9.6%,2IU/ml为7.3%,批间CV:1IU/ml为17.8%,2IU/ml为15.1%,灵敏度为0.25IU/ml,CLIA法的批内CV:1IU/ml为2.33%,2IU/ml为1.07%,批间CV:1IU/ml为6.57%,2IU/ml为3.78%,灵敏度为0.063IU/ml。HBsAb测定时,ELISA法的批内CV:10mIU/ml为11.8%,20mIU/ml为8.7%,批间CV:10mIU/ml为18.6%,20mIU/ml为15.9%,灵敏度为10mIU/ml,CLIA法的批内CV:10mIU/ml为4.79%,20mIU/ml为3.52%,批间CV:10mIU/ml为7.58%,20mIU/ml为6.13%,灵敏度为2.5mIU/ml。结论 ELISA法敏感度相对低,精密度差;CLIA法灵敏度高,精密度好,且自动化程度高,检测更快速,更适合于临床。     

荧光定量PCR仪检测乙型肝炎病毒核酸的性能验证及评价

目的荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的性能验证及评价。方法参考ISO15189《医学实验室质量和能力认可准则(2012年)》,以及美国临床和实验室标准化协会(CLSL)EP系列文件的相关要求对实验室HBV DNA荧光定量PCR检测系统的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力进行验证及评价。结果精密度:HBV DNA定量检测高浓度(106 IU/mL)和低浓度(103 IU/mL)标本的对数值批内变异系数分别为0.67%和3.65%,批间变异系数分别为1.72%和4.52%;正确度:标准物质标本检测结果的对数值与厂商给定靶值浓度的对数值差值在±0.4个Log值内;可报告范围:试验试剂在(2.22×10)～(2.22×108)IU/mL范围内具有良好的线性,线性回归方程为Y=1.027 X-0.408,R2=0.995,≥0.95;抗干扰能力:说明书浓度的干扰物质(血红蛋白、三酰甘油、胆红素)标本结果与不含干扰物质标本比较,其浓度的对数值偏倚CV7.5%,对数值差值在±0.4个Log值内。结论荧光定量PCR仪检测HBV DNA试剂的各项性能特征与厂家声明相符,满足预期用途,适用于临床常规检测。     

改良溴甲酚绿法测定血清清蛋白的建立

目的建立一种改良溴甲酚绿(BCG)法(以下简称改良法)测定血清清蛋白(ALB),能够应用于所有/多数自动生化分析仪,也可手工操作。方法测试吸收峰、最佳读数时间,以试剂:样品为100:1筛选系列浓度的BCG试剂,将线性良好的试剂作为试验试剂,测试其灵敏度、准确度、精密度、干扰试验及试剂有效期。结果吸收峰为627～628nm,最佳读数时间为30s,BCG浓度为0.35mmol/L的试剂的灵敏度为0.1g/L,线性范围为0.1～80.0g/L(Y=0.0232X+0.0055,r=0.9998),回收率为95.6%～105.2%(x=100.4%,s=2.4),不准确度为0.71%,方法学对照试验:回归方程为Y=0.9594X+1.5078,r=0.9948,日内CV=1.42%,日间CV=2.65%,干扰试验:标本中血红蛋白(Hb)≤4.0g/L、三酰甘油(TG)≤5.83mmol/L、胆红素(BIL)≤702μmol/L、维生素C(VC)≤17613μmol/L时对实验无干扰。结论方法学评价试验结果表明,改良法的灵敏度、线性、准确度、精密度均优良,有较强的抗干扰能力,试剂有效期为半年,由于试剂样品比例合适,固能够应用于所有/多数自动生化分析仪,也可手工操作。     

4种丙型肝炎病毒荧光定量试剂诊断HIV感染的调查

目的 了解不同厂家HCV-RNA定量检测试剂盒测定结果的可比性.方法 采用RT-PCR技术对4种HCV-RNA试剂精密度(批内、批间)、线性、阳性检出率、试剂间可比性进行评价.结果 本方法评价表明各厂家试剂盒批内变异系数(CV)均小于10%、批间变异系数(CV)均小于12%、线性r>0.97、阳性检出率均大于81%、试...     

血清肌酐测定方法的研究

目的 建立血清中肌酐浓度的测定方法 .方法 采用肌酐酶水解样品中的肌酐生成肌酸,肌酸在肌酸酶的催化下生成肌氨酸,然后在肌氨酸氧化酶的作用下氧化生成的产物过氧化氢.通过Trinder反应可计算出样本中肌酐的含量.结果 本法的线性为0～8800μmmol/L,精密度:批内变异系数(CV)＜2.0%,回收率为98%～101%.本法(Y)和日本东洋坊试剂(X)比较(r=0.998).结论 研究建立的酶法测定血清中肌酐具有准确度及精密度高,线性范围宽,抗干扰能力强,值得推广应用.     

血清镁测定方法的比较

目的　了解临床常用的血清镁测定方法的性能。方法　对 4种常用的测定法做了精密度、线性、抗脂血能力等实验并进行了比较。结果　二甲苯胺兰法和偶氮氯磷Ⅰ法的精密度分别为CV批内 =2 .17%、CV批间 =3.4 0 %和CV批内 =2 .18%、CV批间 =3.4 %、线性达 3.0mmol/L、试剂稳定性优于甲基麝香草酚兰法和Calmagite染料法。甲基麝香草酚兰法和Calmagite染料法精密度分别为CV批内 =2 .38%、CV批间 =3.6 5 %和CV批内 =2 .38%、CV批间 =3.6 1%、线性达 2 .5mmol/L。扣除样本空白的甲基麝香草酚兰法和Calmagite染料法抗三酰甘油的能力优于二甲苯胺兰法和偶氮氯磷Ⅰ法。 4种镁测定方法的准确度较好 (偏倚 <5 % ) ,平均回收率都在95 %～ 10 5 %。 4种镁测定方法的结果相关性好 (r均 >0 .995 ) ,而灵敏度以偶氮氯磷Ⅰ法最高。结论　偶氮氯磷Ⅰ法测血清镁较适于临床使用。