耐甲氧西林金黄色葡萄球菌femA调控基因的研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA是否存在调控基因,以进一步揭示其耐药机制。方法用最低抑菌浓度法（MIC）筛选对苯唑西林高耐株、低耐株、敏感株;用头孢色芬纸片法（Nitrocephin）筛选出不产β-内酰胺酶菌株;用PCR筛选出含mecA的菌株。将含mecA不产酶的高耐株、低耐株、敏感株纳入进一步研究中;PCR扩增femA及femA5？上游基因;提取细菌总蛋白;生物素标记DNA探针;滞留电泳检测调控基因。结果滞留电泳检测对苯唑西林高度耐药不产β-内酰胺酶含mecA基因菌株均出现滞留条带。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的辅助基因femA有调控基因存在。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药表型与femB基因表达水平关系研究

目的 了解金黄色葡萄球菌femB基因表达水平与其对苯唑西林不同耐药表型的关系.方法 从临床送检标本中分离71株非重复金黄色葡萄球菌,琼脂对倍稀释法测定苯唑西林的最低抑菌浓度,产色头孢菌素纸片法测定菌株产β-内酰胺酶情况;将28株非产β-内酰胺酶金黄色葡萄球菌株按对苯唑西林的最低抑菌浓度分为敏感组、低耐组、高耐组,采用实...     

金黄色葡萄球菌耐药机制的研究

目的探讨金黄色葡萄球菌的耐药性及耐药机制。方法按NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定分离鉴定的198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药性（MIC值）;用Nitroeephin纸片法测定各菌株产酶情况,统计对苯唑西林不同耐药水平的金黄色葡萄球菌产酶率并分析其耐药水平和产酶率的相关关系;PCR测定各菌株含mecA基因情况。结果198株金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药率为64．65％;128株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）中,高耐菌株为118株（92．19oA）,低耐株为10株（7．81%）。敏感株产酶率为58．57％（41株）,高耐株产酶率53．39％（63株）,低耐株产酶率40．00％（4株）,苯唑西林敏感株与高耐株之间产β-内酰胺酶的差别有统计学意义,前者高于后者;含mecA基因的高耐株占95．76％（113／118）、低耐株占60．00％（6／10）、敏感株占10．00％（7／70）,高耐株与敏感株含mecA基因的差别有统计学意义,前者高于后者。结论金黄色葡萄球菌耐药机制主要是产β-内酰胺酶和mecA基因的表达。     

用头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 探讨用头孢西丁纸片扩散法确证耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)在临床实验室的应用.方法 采用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的120株葡萄球菌,其中金黄色葡萄球菌(SA)、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)各60株.并与苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林-NaCl琼脂筛选法进行比较.结果 三种方法检测MRSA结果没有差异;在CNS中有1株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林-NaCl 琼脂筛选法检测耐药,苯唑西林纸片扩散法敏感;6株头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法耐药,苯唑西林-NaCl琼脂筛选法敏感.结论 头孢西丁纸片扩散试验可用于多种表型的MRS,尤其对低水平表达、异质性耐药的MRS,是临床实验室确证MRS的一种可靠方法.     

外源性甘氨酸对金黄色葡萄球菌耐药及femA表达水平的影响

目的探讨外源性甘氨酸对金黄色葡萄球菌苯唑西林耐药水平及femA表达的影响。方法用琼脂平皿对倍稀释法检测不同浓度甘氨酸下苯唑西林对30株金黄色葡萄球菌的MIC值,用实时荧光定量PCR方法检测不同浓度甘氨酸下金黄色葡萄球菌femA表达水平。结果30株金黄色葡萄球茵中MSSA4株,低耐MRSA2株,高耐MR-SA24株,在0．2M外源性甘氨酸存在时MIC下降4-256倍,在0．3M外源性甘氨酸存在时MIC均〈0．25μg／ml。在所有金黄色葡萄球菌中均检测到femA表达,在0．2M甘氨酸存在时femA表达下降50％-80％,0．3M甘氨酸存在时femA表达下降75％-90％。结论外源性甘氨酸能降低金黄色葡萄球菌对苯唑西林的耐药水平及femA表达水平。     

慢性鼻窦炎耐甲氧西林葡萄球菌对抗生素的耐药分析

目的:了解慢性鼻窦炎耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus,MRS)的感染情况及耐药特点,为临床合理选用抗菌药物、有效控制MRS的感染提供依据。方法:采用苯唑青霉素纸片法和琼脂筛选法,对临床分离的葡萄球菌行MRS检测,并测定了它们对20种常用抗生素的耐药谱和β-内酰胺酶。结果:72株金黄色葡萄球菌中,耐甲氧西林株占37.6%,其中产β-内酰胺酶菌株占77.8%。凝固酶阴性的葡萄球菌(CoN葡菌)中,耐甲氧西林株占38.3%,其中产β-内酰胺酶菌株占72.7%。MRS菌株耐药程度明显高于甲氧西林敏感葡萄球菌(P<0.05)。金黄色葡萄球菌耐甲氧西林株和凝固酶阴性葡萄球菌耐甲氧西林株多重耐药数分别为6~17种和5~15种。结论:万古霉素、利福平、丁胺卡那对MRS显示了较强的抗菌活性。万古霉素是治疗感染的首选药物,MRS的多重耐药性应引起广泛关注,需加强抗生素使用的管理和MRS对抗生素耐药性的监测。     

MecA基因在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对β-内酰胺类抗生素耐药中的作用

目的:探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中MecA基因表达水平对β-内酰胺类抗生素耐药的机制与作用。方法:利用头孢西丁纸片法筛选MRSA,提取MRSA细菌RNA,反转录成cDNA,实时荧光PCR检测MecA基因的表达水平;琼脂稀释法检测MRSA对头孢西丁、苯唑西林、万古霉素、利奈唑胺的最低抑菌浓度。结果:40株MRSA分为低水平耐药组(12株)、中水平耐药组(15株)、高水平耐药组(13株)。MecA基因的表达水平在MRSA低水平耐药组、中水平耐药组、高水平耐药组分别为58.87±30.30,363.37±200.05,1257.72±446.63,MRSA对头孢西丁、苯唑西林的耐药率为100.0%,没有检测到对万古霉素、利奈唑胺耐药的MRSA,但40株MRSA万古霉素的90%的细菌被抑制的浓度(MIC90)为2.0μg/mL。结论:MecA基因的表达水平可能与MRSA对β-内酰胺类抗生素耐药程度相关。     

多重聚合酶链反应用于检测、鉴定耐甲氧西林葡萄球菌的研究

目的 建立一种快速的多重聚合酶链反应(PCR)方法，用于检测葡萄球菌对甲氧西林的耐药性，同时对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的种进行鉴定。方法 对临床分离的武汉地区金黄色葡萄球菌80株。表皮葡萄球菌70株，其余凝固酶阴性葡萄球菌60株，提取其基因组DNA，针对金黄色葡萄球菌独有的femA基因，表皮葡萄球菌的种特异性序列，决定葡萄球菌对甲氧西林耐药性的mecA基因，和细菌共有的16srRNA基因的保守序列设计四对引物。同时加入PCR体系中对相应片段进行扩增。结果 在210株葡萄球菌中，mecA基因检测结果与苯唑西林敏感试验结果的一致率为96．2％。mecA基因阳性但苯唑西林敏感的5个菌株，通过由低到高浓度的苯唑西林筛选培养后。均表现出耐药性。mecA基因阴性但苯唑西林耐药的3个菌株，经过对阿莫西林-克拉维酸敏感性试验后，被证明是β-内酰胺酶的高产株。结论 此多重PCR方法不仅可以对临床分离葡萄球菌菌株的甲氧西林耐药性作出判断。同时还可以对金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌做出种的鉴定，是一种高效、敏感、特异性高的检测技术。     

438株金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的 了解金黄色葡萄球菌感染的耐药情况，指导临床合理使用抗生素。方法 采用琼脂筛选法检测金黄色葡萄球菌对苯唑西林耐药情况，β-内酰胺酶采用产色头孢菌素法测定，药敏试验按K-B纸片扩散法进行。结果 438株金黄色葡萄球菌中，β-内酰胺酶阳性菌占401株，产酶率为91．55％，检出MRSA236株，占53．88％，β-内酰胺酶阳性金黄色葡萄球菌的耐药率高于阴性金黄色葡萄球菌耐药率，耐苯唑西林金黄色葡萄球菌的耐药率高于对苯唑西林敏感的金黄色葡萄球菌。未检出耐万古霉素的金黄色葡萄球菌。 结论 金黄色葡萄球菌是临床感染的主要病原菌之一；分析金黄色葡萄球菌耐药情况，可以指导临床合理选用抗生素。     

烧伤创面耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的监测

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)对常用抗生素耐药的可能原因. 方法1993 ～ 2000年从479例病人创面中获得金黄色葡萄球菌试验菌株560株,以对苯唑西林的耐药判断为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA). 结果各年度MRSA 的检出率高达76.5% ～90.8%,MRSA对头孢唑啉、头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均较高,对伊米配能的耐药率呈上升趋势,对阿米卡星高度耐药,而对耐替米星的耐药率下降,没有发现万古霉素耐药菌株,发现3株万古霉素中度敏感(VISA)的MRSA. 结论MRSA对临床常用的β-内酰胺类抗生素及β-内酰胺类-酶抑制剂复方抗生素耐药率很高,对阿米卡星高度耐药,而对耐替米星敏感,VISA的出现提示在万古霉素的选择性压力下,MRSA对万古霉素的敏感性下降.     

金黄色葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药性及耐药表型

目的 了解金黄色葡萄球菌对大环内酯类抗生素的耐药性和耐药表型，探讨其耐药规律，为临床合理用药提供依据。方法 采用K-B纸片扩散法测定96株金葡菌对红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药性，并分析其对大环内酯类抗生素的耐药表型。结果 42株甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对红霉素、阿奇霉素的耐药率同为45、2％（19／42），克林霉素为23．8％（10／42），对大环内酯类的耐药表型主要为诱导型（iMLS）（10／19）和内在型（CMLS）（9／19）；54株耐甲氧西林金葡菌（MRSA）对红霉素、阿奇霉素的耐药率同为96.3％（52／54），克林霉素为94.4％（5l／54），对大环内酯类的耐药表型主要为内在型（51／52），其次为诱导型（1／52）。结论 MSSA和MRSA对红霉素、阿奇霉素、克林霉素的耐药率差异有显著性，而在MSSA或MRSA中，红霉素和阿奇霉素的耐药率一致；对大环内酯类的耐药表型，MSSA以诱导型和内在型为主，MRSA以内在型为主。     

实时荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌femA表达水平

目的探讨实时荧光定量PCR检测金黄色葡萄球菌乒,以表达的方法。方法以BB270femA基因表达为标准,建立实时荧光定量PCR方法,对实验菌株femA表达进行相对定量。结果建立的实时荧光定量PCR方法所得结果标准曲线线性关系好,熔解峰单一。随MIC变化,金黄色葡萄球菌femA表达水平也随之变化。结论用实时荧光定量PCR方法研究金黄色葡萄球菌femA表达量结果可靠、敏感、重复性好。     

压电基因传感器阵列检测MRSA的实验研究

目的：探讨以压电传感阵列技术检测耐甲氧西林葡萄球菌的可行性。方法：收集临床64株葡萄球菌标本，对其耐药标志基因mecA基因和金黄色葡萄球菌特有基因femA增后应用压电传感器阵列进行检测，并以PCR电泳检测作参照，与目前采用的常规药物敏感试验进行对比分析。结果：传感器分析与PCR电泳分析结果完全一致，而此两种方法与常规培养加药敏法比较。结果略有差异。所有64株葡萄球菌中，2株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的mecA为阴性，2株甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA)的mecA为阳性，1株耐甲氧西林凝固酶性葡萄球菌（MRCNS）的mecA为阴性；2株甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（MSCNS）的mecA为阳性。结论：以压电传感阵列技术同时检测femA基因和mecA基因，既可鉴定出是否为金黄色葡萄球菌，又可判断其耐药类型，能为危重病人感染MRSA时的诊断和治疗提供依据。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析

目的了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药情况,为临床合理用药提供参考。方法收集2005年1月至2007年12月临床分离的460株金黄色葡萄球菌,经培养鉴定,采用纸片扩散法(K-B法)测定10种非β-内酰胺类抗菌药物的耐药情况。结果460株金黄色葡萄球菌中,检出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)242株,占52.61%,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)218株,占47.39%;2005~2007年MRSA对复方磺胺的耐药率相对稳定在71.4%~77.5%之间,对红霉素、克林霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素和利福平的耐药率基本处于上升状态。MRSA对红霉素、克林霉素、庆大霉素、左旋氧氟沙星、四环素和利福平的耐药率明显高于MSSA相应的耐药率(P<0.001)。MRSA对呋喃妥因耐药率明显高于MSSA(P<0.001),对复方磺胺敏感率耐药率二者差异无统计学意义(P>0.05)。药敏结果显示,MRSA和MSSA菌株均对万古霉素和替考拉宁敏感。结论MRSA具有多重耐药特征,万古霉素和替考拉宁可作为治疗MRSA感染的首选药物,呋喃妥因和复方磺胺可作为次选药物。     

Methicillin resistant Staphylococcus aureus.

Out of 308 isolates of Staphylococcus aureus isolated from specimens processed at the Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Colombo 66 (21.5%) were resistant to methicillin. A significantly higher proportion of methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) were isolated from special care units, namely the Premature Baby Unit (PBU) and the Plastic Surgery Unit (PSU) when compared with other general medical and surgical units. Most of these strains were also resistant to many other antibiotics. The patients with MRSA infections had a longer mean hospital stay when compared to patients with methicillin sensitive Staphylococcus aureus (MSSA) infections. MRSA strains are as virulent as MSSA strains and these infections are mainly nosocomial.     

145株金黄色葡萄球菌的耐药性分析

目的了解临床金黄色葡萄球菌（SA）的感染情况及其对常用抗生素的耐药情况,以便指导临床合理用药。方法对我院2008年7月。2010年6月间从临床分离的SA进行MRSA鉴定,并分析其是否产生β-内酰胺酶及其对一些常用抗生素的敏感性。结果共分离到145株SA,其中MRSA101株,占sA的69．6％;145株SA中有80株产生β-内酰胺酶,占55．17％,MRSA产生β-内酰胺酶的百分率明显高于MSSA（P〈0．05）;101株MRSA对青霉素G、氨苄青霉素、头孢塞吩、头孢唑啉的耐药率均为100％;MRSA对红霉素、庆大霉素、阿奇霉素、氯霉素、四环素和利福平的耐药率明显高于MSSA（P〈0．05）。环丙沙星和万古霉素对MRSA和MSSA都有较好的抗菌活性。结论MRSA已成为医院感染的重要病原菌,且MRSA对多种抗生素具有较高的耐药性,环丙沙星和万古霉素是临床治疗MRSA和MSSA感染的首选药物。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌抗生素耐药和耐药基因的检测

目的探讨北京地区社区感染和院内感染中金黄色葡萄球耐药情况变化。方法用琼脂稀释法检测了471株从北京地区收集的金黄色葡萄球菌对11种抗生素的敏感水平(其中422株菌株从1993年至2000年门诊脓疱疮患儿分离获得,49株从2000年烧伤病房住院患者分离获得)。用聚合酶链反应方法对上述菌株进行了mecA耐药基因的检测。结果引起社区感染的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的比率由1993年的12.2%上升至2000年的29.8%,对甲氧西林均表现为低度耐药。引起院内感染的金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药率为63.3%,表现为高度耐药。所有的金黄色葡萄球菌对青霉素100%耐药,对红霉素、四环素、克林霉素和氯霉素的耐药率分别约80%、70%、60%和50%。引起社区感染的金黄色葡萄球菌中未发现庆大霉素和利福平耐药菌株,对环丙沙星的耐药率由1993年的2.4%上升至2000年的21.3%;引起院内感染的金黄色葡萄球菌中对庆大霉素、环丙沙星和利福平的耐药率分别为63.3%、63.3%和57.1%。所有的金黄色葡萄球菌均对夫西地酸和万古霉素敏感。2000年分离的多重耐药菌株比例较1993年有所增加。PCR对mecA耐药基因的测定结果显示,所有对甲氧西林高度耐药的金黄色葡萄球菌mecA耐药基因均呈阳性;对甲氧西林低度耐药的金黄色葡萄球菌mecA耐药基因均呈阴性。结论在本实验所及范围内,北京地区金黄色葡萄球菌的耐药率逐渐上升,mecA耐药基因测定是筛选耐药MRSA菌株的快速、简易手段。     

169株金黄色葡萄球菌药敏结果分析

目的探讨金黄色葡萄球菌耐药特征,指导临床合理用药。方法使用美国BD公司PHOENIX100全自动细菌鉴定/药敏仪进行鉴定、K-B法药敏试验、B-内酰胺酶测试,并以“WHONET5”软件对数据进行分析处理。结果产B-内酰胺酶90株占53. 3%,MRSA占SA感染标本总数的60. 9%,MRSA耐药率介于8. 3%—95. 3%,本室未检出耐万古霉素、替考拉宁、呋喃妥因的菌株,耐药率低的抗生素有利福平、阿米卡星、氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟。耐药率高的有青霉素、苯唑青霉素、红霉素、SMZ、喹洛酮类等。结论金黄色葡萄球菌呈高度耐药性,万古霉素是治疗MRSA感染的首选抗生素,MRSA的耐药性应引起广泛关注。