EagLes液稀释NDV-F接种鸡胚测定血凝滴度的初步探讨

本法主要采用EagLes液(Minima Essentia/Medium简称MEM)千倍稀释NDV-F病毒接种鸡胚,结果表明,用MEM液千倍稀释NDV-F接种鸡胚的血凝滴度比用NaCl液百倍稀释NDV-F的鸡胚的血凝滴度高,而其接种后的鸡胚成活率高,收集的NDV-F液量多。     

流感疫苗生产原料鸡胚消毒方法研究

目的：探索流感疫苗生产原料鸡胚消毒方法。方法：对接种前鸡胚用酒精消毒，比较其收菌效果、接种后存活率及接种后鸡胚尿囊液的血凝滴度。结果：用75％酒精消毒鸡胚表面120s，鸡胚表面已无菌、鸡胚存活率最高、不影响鸡胚接种后收获尿囊液的血凝滴度。结论：通过对鸡胚消毒方式的研究，证明用75％的酒精对鸡胚进行消毒的方法可行。     

香港流感在猪中的感染:实验和现场的观察

最初从台湾家养猪中所分离[A/猪/台湾/7251/70(H3 N2)]的鸡胚传两代A/香港流感毒株,大约1×10~4EID_(50)(鸡胚感染剂量),给5头3个月龄猪鼻内滴注。在感染前后3、5、7、9、11、13和15天,采取了鼻拭子。每个拭子被置于含有青、链霉素的2毫升肉汤中经薄膜滤器过滤后接种于10日龄鸡胚尿囊,在33.5℃孵化40—44小时。用鸡红血球血凝法,检查尿囊液存在的病毒。用相应标准抗血清的血凝抑制(HI)方法,鉴定分离的病毒。     

在健康成人中评估乙型流感山形/16/88重组减毒活病毒疫苗

作者将野型乙型流感病毒株B/山形/16/88中血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因与乙型流感病毒冷适应株B/安阿伯/1/66重组成重组疫苗病毒,在鸡胚中培养,收集尿囊液作为全病毒抗原;以无菌小牛肉浸汤作安慰剂,给血清抗体阴性的成年人注射。作者采用双盲法将25名血清血凝抑制(HI)效价≤1:4的接种者随意分组接受冷适应B/山     

人用H5N1禽流感病毒疫苗生产工艺的优化

目的 建立优化的人用H5N1禽流感病毒疫苗生产的工艺。方法 在不同的稀释倍数、收获时间及灭活剂添加量下,通过测量收获液的病毒滴度和血凝效价,来确定病毒的最佳生产条件,并对离心法和凝胶过滤层析法的纯化效果进行对比。结果 103~104半数鸡胚感染量(50% egg infective dose,EID50)病毒接种鸡胚,收获的鸡胚尿囊液的病毒滴度和血凝效价最高,分别为10-8.3EID50和1∶480;在56~72 h血凝效价最高。甲醛浓度1∶10 000灭活144 h为灭活最佳条件。两种纯化方法得到的样品纯度和卵清蛋白的去除率相近,但离心纯化法和凝胶过滤层析纯化法病毒回收率有较大的差异,分别为19%和70%。结论 成功建立了高产毒的鸡胚基质H5N1禽流感病毒培养、灭活及纯化工艺。     

猪血、猪脾白细胞的培养及干扰素的诱生

采用新鲜猪血、猪脾为原料,以D-Hank’s液及Hank’s液和RPMI-1640培养基培养白细胞,以新城疫鸡瘟病毒减毒株（NDV-F）为干扰素诱生剂,在 37℃、pH 7.2条件下培养18 h.制得猪脾干扰素,效价1620 u/ml,猪血干扰素,效价 1360 u/ml。     

Vero细胞制备的流感疫苗诱导的体液与细胞免疫

作者将候选的经连续传代的哺乳动物细胞系 ( Vero)生产的三价流感全病毒疫苗与模拟商售的鸡胚培养疫苗 ,在 Balb/c小鼠中比较它们诱导体液免疫和细胞免疫的能力。　　将小鼠分为 Vero细胞全病毒疫苗组、模拟商售鸡胚全病毒疫苗组、鸡胚裂解疫苗组和鸡胚亚单位疫苗组 ,对照组接种含 <0 .0 1μg/ml的 Vero细胞或卵蛋白的模拟制品。初免后 4周疫苗组和对照组均给予相同剂量的加强接种。结果表明 ,各疫苗组都有较高的血凝抑制抗体滴度和高水平流感病毒特异性 Ig G,Ig G应答主要是 Ig G1和 Ig G2 a/Ig G2 b同型。不管是经 Vero细胞还是鸡胚…     

病毒性关节炎的研究

作者根据广东省江门市某鸡场以破行鸡为主的鸡病流行情况,临床症状及病理变化等,作出鸡病毒性关节炎的假定性诊断。 从病鸡的关节滑液中分离到一种病毒,该病毒能在鸡胚卵黄囊内、尿囊腔内和绒毛尿囊膜上生长并致死鸡胚,使鸡胚皮肤呈暗红色。病毒也能在鸡胚肾细胞、鸡胚成纤维细胞上生长并引起细胞病变。病毒对鸡红细胞无凝集作用,用含病毒的鸡胚尿囊液接种敏感鸡后,可复制出与临床所见相类似的疾病。 在电镜下观察,病毒直径为63～74nm,在感染的鸡胚绒毛尿囊膜上可见到胞浆内的包涵体,经测定,病毒含有双股RNA,对氯仿、乙醚、60~0C1小时有抵抗力,对胰酶敏感。 实验结果表明:被分离到的病毒为传染性关节炎病毒,因此江门市某鸡场所发生的以跛行为主要特征的疾病可以确诊为鸡病毒性关节炎。     

莪术油对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管抑制作用研究

目的:探讨莪术油对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)新生血管形成的抑制作用.方法:制备鸡胚绒毛尿囊膜模型(CAM).水蒸馏法提取莪术油,稀释成不同浓度.平行设置NS对照(阴性)和沙利度胺片对照(阳性),每组分别8枚鸡胚.接种各药物后,37℃培养箱中继续孵育,每12小时观察一次,孵化5天.通过肉眼及体视显微镜观察,数码相机拍照留存,图像处理后进行血管面积值/面积比值测定,并作统计学处理.结果:莪术油鸡胚尿囊膜血管面积值/面积比值较生理盐水对照组显著增高,且有一定的量效关系趋势.结论:莪术油可剂量依赖性地抑制新生血管的作用,且效果明显.     

甲型流感冷适应重组减毒疫苗在儿童中的应用:冷适应重组株的反应原性和抗原性以及对接种者分离物的分析

实验用冷适应重组株按苏联常规方法制备,甲_1型疫苗株为47/25/1重组株,甲_3型疫苗株为47/7/2重组株。单价疫苗每ml 10~(7.5)EID_(50),使用前1:2稀释。双价疫苗由两种未稀释的单价疫苗于使用前混合而成。安慰剂系未曾感染的正常鸡胚尿囊液,使用前1:2稀释。人群接种为鼻腔喷雾,每侧鼻腔内接种0.25ml疫苗(10~(7.0)EID_(50)),21天后以同法实行再接种。选择健康儿童分成两组:1组接受疫苗;另1组接受安慰剂。第1次接种后观察5天,并测量体温,以评价局部和全身反应。于接种前、第1次接种后21天及第2次接种后21天采集双份如清,以Alexandrova改良法测定血凝素(HA)抗体滴度,以洗脱-抑制试     

鸡传染性支气管炎的研究——Ⅱ.利用鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚内对B_1系新城疫病毒的干扰作用诊断鸡传染性支气管炎

本试验利用鸡传染性支气管炎病毒(IBV)在鸡胚内对B_1株新城疫病毒(NDV—B_1)的干扰现象作为鸡传染性支气管炎(IB)的一种诊断方法。对其特异性、敏感性、操作方法以及对天然病例的诊断效果等几个方面的问题进行了探讨。 用IBV强毒人工发病的病鸡组织上清液接种鸡胚后10小时,再接入一定量的NDV—B_1,则50％以上鸡胚的尿囊液的HA滴度在1:20以下,而仅接NDV—B_1的对照组中,90％以上鸡胚的尿囊液的HA滴度在1:40或1:40以上,说明IBV在鸡胚内明显地干扰了NDV—B_1,在IBV被相应的抗血清中和之后,这种干扰作用也随之消失。 新城疫病毒(NDV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)、鸡痘病毒(FPV)、鸡败血霉形体(MG)等鸡呼吸道病的病原在鸡胚内对NDV—B_1则没有这种干扰现象。 利用这种干扰现象对6个鸡场的呼吸道病的病例进行诊断试验,结果4个鸡场为IB阳性,2个鸡场为IB阴性,这一结果与用病料在鸡胚内进行盲传继代及小鸡人工发病的结果是相符的。 试验证明,IBV在鸡胚内对NDV—B_1的干扰试验可以作为IB的一种诊断方法。     

忍冬感冒颗粒体外抗流感病毒实验研究

目的　对忍冬感冒颗粒抗流感病毒感染进行试验研究。方法　采用鸡胚接种和血球凝集试验测定病毒效价。结果　药物与病毒同时接种 ( A组 )和药物与病毒先后接种 ( B组 )的血凝滴度 ( GMT)分别为 40和 1 0 .2 8( P <0 .0 1 )。结论　忍冬感冒颗粒浸出滤液( 5 0 0～ 1 0 0 0 g· L-1) ,可抑制流感病毒 ( PR8株 )在鸡胚中的增殖     

哺乳动物细胞培养的新型流感疫苗的安全性和免疫原性[英]

试验用疫苗为双价流感A/B裂解病毒颗粒疫苗,由在MDCK细胞克隆的细胞系传代的病毒制备而成,含A/得克萨斯/36/91(类HINI)和B/哈尔滨/7/94病毒株。对照疫苗为在鸡胚传代的裂解病毒颗粒,其病毒株与试验疫苗相同。接种对象为18～50岁健康成人志愿者。按随机、双育法进行试验。将接种对象分为两组,分别接种细胞培养和鸡胚传代的流感疫苗,在三角肌肌注流感疫苗0.5ml。在接种前后分别检测血凝抑制抗体。在接种后观察不良反应。     

流行性感冒病毒裂解疫苗灭活试验探讨

目的进行流行性感冒病毒裂解疫苗的病毒灭活检测,研究病毒灭活状况.方法将单价病毒液接种鸡胚尿囊腔,第二代鸡胚尿囊液检查不应出现血凝反应.结果半成品配制前,200批单价病毒液灭活试验全部通过,单价病毒液中较高的血凝素含量会影响灭活试验的判断.结论试验表明疫苗中无活病毒存在,生产过程中血凝素含量应适当控制.     

新近发展的纯化鸡胚细胞狂犬病疫苗在人体中的反应原性和免疫原性

作者将狂犬病病毒Flury LEP C-25株在原代鸡胚成纤维细胞中培养增殖后,用滤膜去除细胞碎片,β丙内酯灭活病毒后经区带超离心纯化。所用疫苗效价为8.7IU/ml。将88名21～38岁的志愿者分成6组,按下列不同的免疫程序接种疫苗。反应原性:31.2%的人出现全身症状,其中中强度反应者占15.1%。56.5%的人出现局部反应,其中中强度反应者占16.4%。第1、2针接种后不良反应发生率最高。放射免疫分析结果表明,在多次接种纯化鸡胚细胞狂犬病疫苗者中没能检出鸡类蛋白IgE抗体。     

用鸡胚绒毛尿囊膜制备的麻疹活疫苗的临床评价

这种麻疹疫苗由Lederle实验室用76代鸡绒毛尿囊膜毒种在鸡胚细胞培养中制备,称为CAM疫苗,以Attenuvax疫苗为对照,用双盲法作临床观察。接种对象为14个月以上的未接种过麻疹疫苗的易感儿,接种后30天内由家长在家里观察症状,第6～18天每天下午测肛温,儿童有发热时随时测体温,有明显发热(≥38.3℃)或不适时,要求家长与医务人员联系。试验前和接种后4～6周采     

免疫复合物用于免疫防御病毒性疾病

本文首次报告了新城疫病毒(NDV)抗原亚单位与特异性多克隆同种抗体组成的免疫复合物(IC)对鸡的保护作用。 在NDV感染的鸡胚尿囊液中加入最终浓度为0.2％的Triton X-100,37℃作用24小时后作超声处理,并离心澄清,即制成     

金莲花醇提物体外抗甲型流感病毒作用研究

目的研究金莲花醇提物的抗呼吸道甲型流感病毒作用。方法采用鸡胚培养流感病毒,并用鸡红血球凝集试验检测药物对病毒在鸡胚尿囊液中增殖的抑制作用。结果在药物和病毒先在体外直接作用后的共同接种试验中,金莲花醇提物对甲型流感病毒具有体外直接灭活作用;在甲型流感病毒先感染鸡胚后再接种药物试验中,金莲花醇提物可抑制病毒在鸡胚内的增殖。结论金莲花醇提物在体外对甲型流感病毒具有直接杀灭作用,对甲型流感病毒在鸡胚中的增殖具有抑制作用。     

1980年铜仁城区流感病毒分离及正常人群抗体水平测定

一、材料与方法: 1、标准毒株:甲_3/粤防77-38、甲_3/京科79-2、甲_1/津防77-78、乙/湘防72-4由省防疫站供给。 2、标本采取:咽拭标本采取临床症状典型和类似流感患者的咽拭子。双份血清系上述患者急性期(发病2～3天)、恢复期(2～3周后)耳垂血。正常人群血清系数收集医院肝功能正常血清。 3、方法:病毒分离按常规接种9～11日令鸡胚尿囊和羊膜腔。以血凝抑制试验鉴定病毒;交互血凝抑制试验作抗原分析;半加敏微     

抗病毒口服液在鸡胚内的抗病毒作用研究

目的观察抗病毒口服液在鸡胚内的抗病毒作用.方法采用鸡胚法(体内及体外)研究了抗病毒口服液对三种病毒(甲3型流行性感冒病毒IFV株、亚甲型流行性感冒病毒鼠适应的FM1株及新城疫鸡瘟病毒NDVⅡ系病毒株)的作用.结果抗病毒口服液对三种病毒株在鸡胚体外有明显的抑制作用或杀灭作用,在鸡胚内对鸡胚尿囊液HA效价有明显抑制趋势,但统计学处理无明显差异.结论抗病毒口服液在体外对甲3型流感病毒株、亚甲型FM1株和NDVⅡ系病毒株有明显的抑制作用,抗甲3型流感病毒和亚甲型FM1株的作用比抗NDVⅡ系病毒株的作用略强,但该药在鸡胚内抗病毒作用仅有抑制趋势.