何氏加味定喘汤对慢性支气管炎大鼠氧化相关指标的影响

目的 观察何氏加味定喘汤对慢性支气管炎大鼠氧化/抗氧化相关指标的影响.方法 SD大鼠50只,采用改良烟熏法复制慢性支气管炎模型,从造模第20天起,空白对照组及模型对照组用0.9％氯化钠注射液1 ml/100 g,给药组按1 ml/100 g体积灌胃,阳性对照组用止嗽合剂(5g·kg-1·d-1)灌胃,何氏加味定喘汤高剂量组(20g·kg-1· d-1)、何氏加味定喘汤中剂量组(10 g·kg-1·d-1)、何氏加味定喘汤低剂量组(5 g·kg-1·d-1)分别灌胃,各组灌胃均为每天1次.各组均用药20 d.观察治疗后大鼠血清、肺组织匀浆、肺泡灌流液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)含量.结果 慢性支气管炎模型组大鼠血清、肺组织匀浆及肺泡灌洗液中SOD[(188.11±9.37) U/ml、(276.11±30.28) U/ml、(8.80±1.49)U/rml]、CAT(9.40±2.04) U/ml、(26.57 ±4.26) U/ml、(1.58±0.26)U/ml)]等清除自由基的酶类活性,较空白对照组SOD、CAT显著降低(P＜0.01);血清、肺组织匀浆及肺泡灌洗液中的脂质过氧化物MDA[(5.64 ±0.52) μmol/L、(6.32±2.10)μmol/L、(28.08±2.43)μmol/L]]的含量较空白对照组增加(P＜0.05或P＜0.01),何氏加味定喘汤可有效地逆转这些改变(P＜0.05或P＜0.01),并呈明显的剂量依赖性,何氏加味定喘汤中、高剂量组大鼠血清中SOD[(253.05±7.81) U/ml、(256.92±5.37) U/ml]、CAT(14.86±2.49) U/ml、(18.22±2.65) U/ml)]活性比空白对照组还略高,何氏加味定喘汤中、高剂量组大鼠及肺组织匀浆中SOD[(470.91±11.46) U/mgprot、(482.91±14.32) U/mgprot]、CAT(46.87±3.75) U/mgprot、(55.49±3.33) U/mgprot)]活性亦比空白对照组还高.何氏加味定喘汤高剂量组大鼠血清及肺组织匀浆中MDA含量[(3.57±1.04)μmol/L]接近正常组水平.何氏加味定喘汤高剂量组大鼠肺泡灌流液中SOD(16.15±0.86) U/ml、CAT(2.88±0.25) U/ml活性和MDA(15.18±2.25)μmol/L含量均接近正常组水平.结论 何氏加味定喘汤对慢性支气管炎具有明显的减轻氧化应激作用.     

输液中硫酸庆大霉素配伍的研究

本文对输液中硫酸庆大霉素与40种注射剂的配伍变化进行了研究。实验方法1.试样:硫酸庆大霉素供试品:60mg/1.5ml/支;硫酸庆大霉素标准品:效价590μg/mg;配伍用注射剂:医院常用的先锋霉素等40种。     

维生素C对PM2.5致人肺癌A549细胞周期阻滞的影响

目的研究维生素C对PM2.5致人肺癌A549细胞周期阻滞的影响。方法用设定浓度的PM2.5(50、100和200μg/ml)单独或联合20μg/ml维生素C分别处理A549细胞24 h。用MTT比色法检测细胞活力,荧光探针检测细胞内活性氧,试剂盒检测MDA和SOD变化,用流式细胞仪检测细胞的周期时相,用Western blot检测细胞周期调控蛋白GADD45α的表达量。结果与空白对照组相比,PM2.5(50、100和200μg/ml)可降低细胞活力,提高ROS和MDA含量,降低SOD酶活,并在100和200μg/ml浓度组提高GADD45α蛋白表达量,使A549细胞阻滞在G2期。而20μg/ml维生素C可显著抑制上述损伤指标的升高,提高SOD酶活性,降低G2期细胞阻滞。结论本实验初步证明PM2.5可引起A549细胞氧化损伤并导致细胞发生G2期阻滞,维生素C抗氧化剂可有效抑制这一过程的发生,对细胞起到保护作用。     

白首乌提取物对小鼠肝癌抗氧化能力的影响

目的:探讨白首乌提取物对肝癌小鼠抗氧化能力的影响.方法:建立H22细胞移植性肿瘤模型小鼠,随机分为白首乌低剂量(50μg/ml)组、中剂量(100μg/ml)组、高剂量(200μg/ml)组、空白对照组、模型组、阳性对照组(CTX,5-FU)共7组,每组小鼠10只,15天以后处死,取肝脏的匀浆液离心的上清液测定MDA、SOD、GSH-Px活力.结果:与模型组相比白首乌各剂量的SOD、GSH-Px的活力都有所提高,基本接近空白组,甚至高剂量的酶活力比空白组还高.与模型组相比白首乌组的MDA的活力有所降低,但还是高于空白组.结论:白首乌各组能提高小鼠肝癌的抗氧化能力.     

流动注射分析法测定氢化可的松片剂、注射剂的含量

根据氢化可的松在碱性溶液中，受热还原四氮唑蓝生成蓝色的双甲化合物，在525nm波长处测定其吸收度。采用单管路系统，流速为3．85ml／min，进样100μl，检测限可达1μg／ml，每小时可进行90次测定，精确度分别为0．6％（注射剂），0．4％（片剂）。     

胃液与胃粘膜中庆大霉素的测定及临床意义

本文采用荧光偏振免疫分析法(简称FPIA)测定55例胃疾病患者的胃液、血清、胃窦粘膜中庆大霉素的浓度,结果表明,口服庆大霉素后经较长时间在胃液和胃窦粘膜组织中,可保持较高的有效浓度,其中18例口服庆大霉素4万U 后12h 胃液浓度为50.33±12.64μg/ml;4例24h 胃液庆大霉素浓度为46±6.6μg/ml;25例患者口服庆大霉素4万U 后12h 胃窦粘膜浓度为3.17±1.24ug/g,而血清中庆大霉素未检出。这项工作为临床合理使用庆大霉素提供了科学依据。     

离子色谱法测定注射剂中的抗氧剂亚硫酸钠

目的:建立离子色谱抑制电导法测定注射剂中的抗氧剂含量的方法。方法:采用阴离子交换柱AG-11HC保护柱和AS11-HC分析柱(250 mm×4 mm,5μm)以氢氧化钾溶液作淋洗液,进行梯度洗脱,抑制器电流值设定为149 mA,流速为1.0mL·min-1,电导检测器测定注射剂中亚硫酸钠的总量。结果:亚硫酸钠在0.5074～507.444μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9998(n=5);定量限分别为0.16μg·mL-1(S/N≥10),检测限分别为0.05μg·mL-1(S/N≥3)。结论:本方法选择性高,灵敏度好,测定结果较为准确,可用于注射剂中抗氧剂的测定研究。     

蜂王浆对顺铂诱导HEK-293细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨蜂王浆对顺铂诱导人胚肾细胞损伤的保护作用及其可能的机制。方法将细胞分为损伤组(100μg/ml CDDP)、蜂王浆(RJ)不同剂量组(CDDP+25、50、100μg/ml RJ)和正常对照组(等量溶剂)。各组经处理后,通过CCK-8法检测细胞增殖活力,比色法测定培养基乳酸脱氢酶(LDH)活性反映细胞损伤情况;Hoechst33342/PI双染法分析细胞凋亡情况;测定细胞活性氧(ROS)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果与对照组比较,损伤组培养液中LDH活性增加,细胞损伤增加、增殖活力降低、凋亡增加,差异具有统计学意义(P0.05);细胞内SOD、CAT和GSH-Px活性降低,ROS含量增加,差异具有统计学意义(P0.05)。25～100μg/ml浓度范围内RJ能明显改善这些指标,差异有统计学意义(P0.05,P0.01),且改善作用和浓度呈正相关(P0.05)。结论 100μg/ml CDDP可通过氧化损伤诱导的HEK-293细胞凋亡,活力降低。25～100μg/ml浓度范围内RJ能增加胞内SOD、CAT和GSH-Px 3种抗氧化酶活性,降低ROS含量,减轻这种损伤。     

帕立骨化醇亚微乳注射剂的溶血性和血管刺激性实验

目的:评价帕立骨化醇亚微乳注射剂的溶血性和血管刺激性。方法:以家兔红细胞为受试物,设帕立骨化醇亚微乳注射剂(样品)组和市售帕立骨化醇注射液(市售品)组各5个剂量,加药量(5μg/ml)分别为每管0.5、0.4、0.3、0.2、0.1 ml,观察3 h内的溶血和红细胞凝聚情况,同时设阴性对照(0.9%氯化钠注射液)组和阳性对照(纯化水)组进行比较。取家兔随机分为5μg/ml样品和市售品的单次给药组和多次给药组,采用同体左右侧自身对比法,耳缘静脉左侧注射供试品0.5 ml,右侧注射0.9%氯化钠注射液0.5 ml,多次给药试验隔天给药1次,共给药5次,观察注射部位血管刺激性症状,并进行病理组织学检查。结果:阴性对照组细胞未见出现溶血和红细胞凝聚;阳性对照组细胞发生全溶血,未见红细胞凝聚;各剂量样品组和市售品组细胞3 h内均未出现溶血或红细胞凝聚。样品的单次给药组和多次给药组家兔耳缘静脉均未见血管刺激性;市售品的单次给药组和多次给药组家兔耳缘静脉均有血栓形成,对血管有轻度刺激性。结论:5μg/ml的帕立骨化醇亚微乳注射剂对家兔未见溶血性和血管刺激性。     

复方乳酸钠葡萄糖注射液中抗氧剂的迁移量测定

目的：注射剂作为高风险的制剂类型，与包装材料的相容性直接影响其安全性及质量。本研究以复方乳酸钠葡萄糖注射液为例对其抗氧剂的迁移量进行考查。方法：采用《欧洲药典》项下色谱条件，通过固相萃取试验，对复方乳酸钠葡萄糖注射液中的抗氧剂迁移量进行测定，并对测定方法进行方法学验证。结果：抗氧剂1010、330、1076及168分别在0.195 1～198.98μg/ml、0.194 6～199.56μg/ml、0.194 7～197.68μg/ml及0.194 8～198.80μg/ml浓度范围内呈良好的线性关系；平均回收率分别为97.47%、96.54%、95.31%和95.04%,RSD值分别为0.21%、0.59%、1.55%和1.87%;3批复方乳酸钠葡萄糖注射液中均未检测出迁移的抗氧剂，建立的抗氧剂迁移量测定方法满足试验要求。结论：本文建立的复方乳酸钠葡萄糖注射液中抗氧剂的迁移量测定方法简便、准确，可用于该类注射液抗氧剂迁移量的测定和质量控制。     

高效液相色谱法对乙胺吡嗪利福异烟片中利福平、异烟肼、吡嗪酰胺三项的测定

目的:用高效液相色谱法同时测定乙胺吡嗪利福异烟片中利福平、异烟肼、吡嗪酰胺的含量。方法:色谱柱以氰基键合硅胶为填充剂(250mm×4.6mm,5μm);流动相为0.01mol/L,庚烷磺酸钠溶液(稀磷酸调pH至2.2)-乙腈(44∶56);流速为1.0ml/min;检测波长为254nm。结果:利福平在24.72μg/ml～86.52μg/ml的范围内,异烟肼在19.84μg/ml～69.44μg/ml的范围内,吡嗪酰胺在59.92μg/ml～209.72μg/ml的范围内呈良好的线性关系,回收率分别为99.8%、99.8%、100.1%,重现性精密度符合要求。结论:本法可用于乙胺吡嗪利福异烟片中利福平、异烟肼、吡嗪酰胺的含量测定。     

微量酶联免疫吸附测定法测定人的霍乱抗毒素免疫球蛋白G:本方法与家兔皮肤血管渗透因子技术的相互关系

微量酶联免疫吸附测定法(ELISA)是一种经过改进的测定人霍乱抗毒素免疫球蛋白G(IgG)的微量方法。它特异、敏感、可重复,仅需血清0.5μl。其试验步骤如下:在聚苯乙烯板的U形孔内加100μl的纯霍乱毒素(10μg/ml磷酸盐缓冲盐水),4℃过夜,     

HPLC法测定复方茶碱麻黄碱片中四种组分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定复方茶碱麻黄碱片中四种组分含量的方法。方法:采用Dismonsil(Dikma)C18(20cm*4.6mm,5μl)色谱柱,0.05mol/L磷酸二氢钾-甲醇-三乙胺(77:23:0.02)为流动相,流速为1.0ml/min,检测波长为215nm,柱温:40℃。结果:所选流动相适用范围较广,耐用性好,样品中四种组分均能达到良好的分离度。可可碱、盐酸麻黄碱、茶碱、咖啡因的浓度分别在5.392μg/ml～53.92μg/ml(r=1.0000)、4.894μg/ml～21.24μg/ml(r=1.0000)、2.124μg/ml～48.94μg/ml(r=1.0000)、2.98μg/ml～29.8μg/ml(r=1.0000)范围内线性关系良好。可可碱的平均回收率为100.1%(RSD=0.5%),盐酸麻黄碱的平均回收率为100.5%(RSD=1.0%),茶碱的平均回收率为100.2%(RSD=0.6%),咖啡因的平均回收率为100.1%(RSD=0.7%)。结论:本测定方法简便、准确、精密度高,可有效控制复方茶碱麻黄碱片中四种组分的含量。     

炔诺酮存在时炔雌醇的微量测定法

本文介绍含有炔诺酮的炔雌醇片,采用萤光分光法测定炔雌醇的含量,最低检出量为10μg/ml,最佳测定范围为17.5～280μg/ml,一般片剂的赋形药以及炔诺酮含量即使高达2000μg/ml对本测定也无干扰,可应用于片剂释放度试验中释放量的测定。测定方法标准曲线:取标准溶液(炔雌醇氯仿溶液3.5μg/ml)0、0.125、0.25、0.5、1.0和2.0ml,分别置于具螺帽的试管中,用氮驱去氯仿,残留物中加入4%氢氧化钠-乙醇溶液(氢氧化钠4g溶于10%乙醇100ml中)0.5ml,然后加入80%硫酸2ml,混和,放置30分     

氧化钕颗粒对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383氧化损伤作用的研究

目的探讨氧化钕颗粒物对大鼠肺泡巨噬细胞NR8383细胞毒性作用及氧化损伤作用。方法将处于对数生长期的NR8383细胞,暴露于终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液6、12和24 h后,采用MTT法检测NR8383细胞抑制率;终浓度为0、3.125、6.25、12.5、25和50μg/ml氧化钕混悬液暴露24 h后,测定细胞培养液上清中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的浓度。结果与对照组比较,各浓度氧化钕暴露不同时间后NR8383细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,稀土氧化钕暴露NR8383细胞24 h后,12.5、25和50μg/ml染毒组随着染毒剂量增加,LDH水平逐渐升高;50μg/ml染毒组的T-AOC水平和12.5、25和50μg/ml染毒组的SOD水平低于对照组,25和50μg/ml染毒组MDA水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论氧化钕颗粒物暴露可致细胞毒性作用和氧化损伤作用。     

血清CA199异常增高1例

<正>患者,男,79岁。查体发现CA199轻度升高8年,异常增高19个月。2009年4月常规查体:CA19945.23 U/ml(0～39 U/ml),CEA5.15μg/L(0～5μg/L)。AFP、TPSA、CY21-1、CA242、CA724、NSE(以下称其他)均正常。定期复查肿瘤标记物,1次/3～6个月。2015年12月前,CA199、CEA相对稳定:CA199     

苯妥英钠/丙戊酸钠引起中毒性肝炎、共济失调1例

患女,9岁,8年癫痫史.1998年2月起服丙戊酸钠0.5g,tid,仍时有发作.1998年10月起加服苯妥英钠0.2g,bid.2月后以食纳差、精神差、步态不稳就诊.患儿有明显共济失调.查体:肝肋下2cm,剑下2cm,疑是苯妥英钠中毒.查肝功:ALT 150U/L、AST 145U/L.血药浓度:苯妥英钠＞40μg/ml,丙戊酸钠57.4μg/ml.确认苯妥英钠中毒,遂减量:苯妥英钠0.1g,bid,丙戊酸钠早0.5g,晚0.25g.2月后复诊,共济失调消失.查体:肝肋下1cm,剑下1.5cm.     

气相色谱法检测二氯甲烷中微量挥发性杂质

目的建立二氯甲烷中三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷三种有机挥发性残留杂质的分析方法。方法采用程序升温气相色谱法进行,运用DB-5色谱柱、电子捕获检测器(ECD),检测器温度为250℃。结果三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷和二氯甲烷间能够完全分离(分离度>3.0),线性范围:三氯甲烷0.5～5.0μg/ml,r=0.997;1,2-二氯乙烷2.7～27.0μg/ ml,r=0.999;四氯化碳0.025～0.5μg/ml,r=0.999。平均回收率为:三氯甲烷98.6%;1,2-二氯乙烷103.5%;四氯化碳94.4%。检测限:三氯甲烷0.02μg/ml;1,2-二氯乙烷0.10μg/ml;四氯化碳0.001μg/ml。结论经方法学验证,该方法灵敏度、准确度均能满足ICH对药品中Ⅰ类、类Ⅱ残留溶剂检测的要求,可用于同时检测二氯甲烷中微量的三氯甲烷、1,2-二氯乙烷和四氯化碳残留。     

虎杖不同溶剂提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用与酶动力学研究

目的:研究虎杖不同溶剂提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用与酶动力学。方法:质量浓度分别为200、100、50μg/ml的虎杖总提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物与120μl黄嘌呤氧化酶(0.02 U/ml)作用于240μl黄嘌呤溶液(300μmol/L),采用高效液相色谱(HPLC)法测定黄嘌呤氧化酶-黄嘌呤反应体系尿酸生成量,计算抑制率。以40、20、10、5μg/ml虎杖乙酸乙酯提取物与100、80、60、40μg/ml虎杖正丁醇提取物作用于240μl黄嘌呤溶液,采用HPLC法测定尿酸生成量。酶动力学研究采用双倒数作图法确定有效溶剂提取物的抑制类型,采用二次作图法求药物对游离酶的抑制常数(K)i、药物对酶底物络合物的抑制常数(Kis)。结果:质量浓度为200、100、50μg/ml时,虎杖乙酸乙酯、正丁醇提取物对黄嘌呤氧化酶的抑制率均大于50%;虎杖乙酸乙酯提取物的Ki和Kis分别为14.46、61.82μg/ml,虎杖正丁醇提取物的Ki和Kis分别为82.97、148.93μg/ml。结论:虎杖乙酸乙酯、正丁醇提取物对黄嘌呤氧化酶具有抑制作用,二者均为混合型抑制,对游离酶的抑制作用均强于对酶-底物复合物的抑制作用。该结论为虎杖治疗痛风的新药开发和抑制黄嘌呤氧化酶作用有效成分研究提供了依据。     

蚓激酶基因在山羊乳腺中的瞬时表达

构建了包括山羊β-酪蛋白基因启动子和蚓激酶基因cDNA的乳腺表达载体pβLK。通过直接注射将重组载体DNA导入山羊的乳腺组织,以纤维蛋白平板法测定乳汁中蚓激酶基因表达产物的活性。实验证实蚓激酶基因可以在山羊乳腺中瞬时表达。在进行山羊乳腺的瞬时表达时,适宜的注射剂量为500μg/ml。注射后6~9 h的表达量最高,达到2.0×105U/L,并持续表达至60 h。