8-硝基鸟嘌呤在砷暴露小鼠心肌细胞中表达

目的 通过检测活性氮族引起的核酸损伤标志物8-硝基鸟嘌呤(8-NO2-G)在砷暴露小鼠心肌组织中的表达情况,探讨砷对心肌细胞的毒性作用机制.方法 昆明种小鼠40只,随机分为4组:1,2,4 mg/L三氧化二砷染毒组和生理盐水组.连续染毒60 d,取小鼠心脏组织固定,用免疫组化方法观察心肌细胞的8-NO2-G表达.结果 对照组小鼠心肌细胞中无8-NO2-G表达,而砷暴露组小鼠心肌细胞的胞浆被染成棕褐色,呈现抗8-NO2-G阳性反应,4mg/L剂量染砷组小鼠心肌细胞中8-NO2-G表达明显.结论 慢性砷暴露可诱发小鼠心肌细胞8-NO2-G的高表达,提示8-NO2-G可能是砷致心肌细胞损伤的早期生物标志物.     

人尿8-羟基脱氧鸟嘌呤的HPLC电化学测定方法

目的：建立高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）测定人尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷（8-OHdG）的检测方法。方法：采用Bond Elute C18小柱固相萃取尿液，ODS C18分析柱，8％甲醇醋酸缓冲液为流动相，电化学检测器检测，电极电压750mV。结果：本方法线性范围25～400μg/L，r=0．9892，回收率为91．2％～108．8％，批内和批间精密度分别为3．9％～7．5％和4．3％～8．6％，检测限为2μg/L。结论：本方法操作简便、准确度较好，已应用于正己烷接触者现场尿样的测定。     

燃煤型砷中毒患者症状分级和尿砷水平与尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷水平的相关性研究

目的研究燃煤型砷中毒患者症状分级和尿砷水平与尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)水平的相关性。方法对贵州省某燃煤型慢性地方性砷中毒病区进行调查,确定砷中毒患者并依据诊断标准进行症状分级(n=21)同时选择非砷暴露对照人群(n=6),测定尿中总砷(tAs)和8-OHdG水平。结果砷中毒患者组尿中tAs及8-OHdG水平均显著高于对照组,且重度患者组尿中tAs及8-OHdG水平均显著高于轻度和中度患者组。尿中8-OHdG水平与tAs水平呈显著正相关(r=0.590,P0.01);与砷中毒症状的轻重程度呈显著正相关(r=0.456,P0.05)。结论高砷暴露可引起尿8-OHdG水平增高,且呈剂量-效应关系;高砷暴露所致的损伤可能与氧化损伤关系密切。     

阳江高本底地区居民8-羟基脱氧鸟苷及其修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶表达水平

目的 探讨小剂量长期连续天然放射性照射人群的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)及其修复基因8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(hOGGl)表达水平.方法 选择我国阳江天然放射性高本底辐射地区(HBRA) 50名50～59岁男性居民为研究对象,另选择在恩平市某镇(CA)出生并居住,年龄相仿的50名男性居民为对照人群.采集周围血10 ml,分离血浆和白细胞,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定血浆中DNA氧化损伤指标8-OHdG的水平,实时定量基因扩增荧光检测系统测定白细胞中DNA氧化损伤修复基因hOGGl mRNA相对表达水平.结果 与CA组比较,HBRA组人群周围血血浆中DNA氧化损伤指标8-OHdG水平较低,白细胞中hOGG1基因mRNA的相对表达水平较高,以上指标在2组间的差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 小剂量长期连续照射可能会提高机体DNA氧化损伤修复能力.     

8-羟基脱氧鸟嘌呤作为可溶性铬盐职业接触者生物标志物的研究

[目的]了解职业接触可溶性铬盐人群尿中8-羟基脱氧鸟嘌呤(8- OHdG)含量及其影响因素,探讨其作为职业接触人群生物标志物的可行性.[方法]2006年,选择济南市某铬盐生产企业114名重铬酸钾作业的健康劳动者作为接触组,以无毒物接触史的当地健康农民30名为对照组,测定2组人群尿液中8-OHdG水平与作业环境铬盐浓度,测定接触组外周血淋巴细胞DNA链断裂水平、红细胞与尿液中铬浓度.[结果]尿液中8-OHdG水平接触组为(1 240.494±1 603.918) μg/L,对照组为(468.871±908.460) μg/L(P<0.01);尿液中8-OHdG水平与空气中个体铬盐暴露水平、红细胞中铬浓度水平、外周血淋巴细胞DNA链断裂水平的相关系数(r)分别为0.333、0.230、0.396(P<0.01);多元线性回归分析显示,铬盐劳动者年龄、接触铬盐的年限、空气中铬盐浓度对尿液中8-OHdG水平影响显著.[结论]尿液中8-OHdG水平可以作为职业接触可溶性铬盐劳动者遗传损伤效应性生物标志物,可望用于职业接触可溶性铬盐劳动者生物监测及健康危险性的评价.     

亚急性与慢性砷暴露人群尿砷和8-羟基脱氧鸟苷含量的比较

目的比较亚急性与慢性砷暴露人群尿砷水平、砷形态分布和DNA氧化损伤的情况。方法选择2004年12月阜新市亚急性砷中毒事件发生时阜新市中心医院收治的65名男性患者(年龄为20～62岁,水砷含量达48.5 mg/L,连续暴露4～7 d)为亚急性砷暴露组,慢性高砷(男性72人,年龄为18～73岁,水砷浓度为0.24 mg/L,暴露6 a)、低砷暴露人群(男性40人,年龄为18～60岁,水砷浓度为0.02 mg/L,暴露10 a,无砷中毒相关临床症状)均选自内蒙古呼和浩特市周边砷暴露区。采集亚急性砷暴露人群确诊入院且未采取治疗措施时的尿样,采集慢性砷暴露人群即时尿样。采用超低温捕集-氢化物发生-原子吸收分光光度法测定尿中不同形态砷含量,用酶联免疫法分析尿8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平。结果3种不同砷暴露人群尿中总砷水平和不同形态砷水平均随着砷暴露剂量的升高呈升高趋势:亚急性砷暴露组>慢性高砷暴露组>慢性低砷暴露组,且差异均有统计学意义(P<0.05)。各组尿中无机砷、一甲基砷和二甲基砷含量占总砷含量的构成比(iAs%,MMA%和DMA%)间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。iAs%和MMA%在亚急性砷暴...     

牛黄酸和VC对染砷小鼠脑神经损伤保护作用

目的 观察牛黄酸和维生素C(VC)对砷暴露导致的脑组织核酸损伤的保护作用,为砷毒性脑损伤的预防和治疗提供科学依据。方法 昆明种小鼠40只,随机分为4组:4 mg/L三氧化二砷染毒组1、50 mg/kg牛黄酸和45mg/kg VC拮抗组以及生理盐水对照组。每周2次,连续染毒60d,取小鼠脑组织固定,用免疫组化方法观察脑组织神经细胞8-硝基鸟嘌呤(8-NO₂-G)的表达。结果 染砷组小鼠脑组织出现异常病理学改变,脑皮质神经细胞的胞浆中8-NO₂-G呈现明显的高表达。而牛黄酸和VC拮抗组小鼠脑组织出现轻度的病理学变化8-NO₂-G表达。结论 牛黄酸和VC对砷暴露小鼠脑组织RNA损伤具有保护作用。     

8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1基因多态性与食管癌关系

目的研究8-羟基鸟嘌呤糖苷酶1(hOGG1)基因Ser326Cys多态与淮安食管癌易感性的关系。方法采用配对病例-对照的流行病学方法,运用人工修饰双等位基因特异性引物扩增(diASA-AMP)技术分析了106对正常对照和食管癌患者hOGG1基因第326位Ser/Ser、Ser/Cys和Cys/Cys基因型分布,并比较不同基因型与食管癌发病风险的关系。结果对照人群的Ser/Ser、Ser/Cys和Cys/Cys基因型频率分别为19.8%,47.2%和33.0%,与现有的中国人群资料结果相近,等位基因型的测序结果与diASA-AMP结果相符。食管癌病例组、对照组的hOGG1 3种基因型分布的差异无统计学意义(χ2=1.439,P=0.696)。携带至少一个hOGG1 326Cys突变基因(Ser/Cys和Cys/Cys)与食管癌危险性无明显相关(OR=1.385;95%CI=0.678~2.823),亦未见hOGG1 Ser 326Cys基因多态与吸烟之间的交互作用。结论hOGG1 Ser326Cys基因多态与淮安地区食管癌易感性无相关性,在食管癌发病风险上该位点多态与吸烟无明显交互作用;diASA-AMP是特异性较高的单核苷酸多态(SNP)快速检测方法,在人群肿瘤易感基因快速筛检方面有较好的应用前景。     

砷暴露小鼠肝组织核酸损伤免疫组织化学观察

目的为进一步研究砷对肝脏的毒性作用机制提供实验依据。方法昆明种小鼠40只,随机分为4组：1,2,4 mg/L三氧化二砷染毒组和生理盐水组,连续染毒60 d,取小鼠肝组织固定,用免疫组化方法观察肝脏组织细胞的8-Nitroguanine表达。结果染砷组小鼠肝细胞出现抗8-Nitroguanine免疫染色阳性反应,并随着砷暴露剂量的增加而呈现明显的剂量-反应关系。结论慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠肝细胞8-Nitroguanine的高表达,提示8-硝基鸟嘌呤核苷（8-Nitroguanine）可以作为砷对肝细胞毒性作用的早期敏感生物标志物。     

高效液相色谱-电化学检测法测定尿中8-羟基脱氧鸟苷含量

活性氧引起的DNA氧化损伤与衰老和一些疾病有关。DNA中碱基鸟嘌呤C8位易受羟自由基攻击，形成碱基修饰产物8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)。8-OHdG是DNA氧化损伤的特异产物，是公认的内源性及外源性因素对DNA氧化损伤的生物标志物。当机体修复机制正常时，8-OHdG可在酶的作用下从DNA链上切除并重新掺人正常的鸟嘌呤碱基，而切下的8-OHdG则经尿液排出体外。     

Urinary Arsenic Speciation and its Correlation with 8-OHdG in Chinese Residents Exposed to Arsenic Through Coal Burning

In contrast to arsenicosis caused by consumption of water contaminated by naturally occurring inorganic arsenic, human exposure to this metalloid through coal burning has been rarely reported. In this study, arsenic speciation and 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine (8-OHdG) levels in urine were determined in the Chinese residents exposed to arsenic through coal burning in Guizhou, China, an epidemic area of chronic arsenic poisoning caused by coal burning. The urinary concentrations of inorganic arsenic (iAs), monomethylarsonic acid (MMA), dimethylarsinic acid (DMA) and total arsenic (tAs) of high-arsenic exposed subjects were significantly higher than those of low-arsenic exposed residents. A biomarker of oxidative DNA damage, urinary 8-OHdG level was significantly higher in high-arsenic exposed subjects than that of low exposed. Significant positive correlations were found between 8-OHdG levels and concentrations of iAs, MMA, DMA and tAs, respectively. In addition, a significant negative correlation was observed between 8-OHdG levels and the secondary methylation ratio (DMA/(MMA + DMA)). The results suggest that chronic arsenic exposure through burning coal rich in arsenic is associated with oxidative DNA damages, and that secondary methylation capacity is potentially related to the susceptibility of individuals to oxidative DNA damage induced by arsenic exposure through coal burning in domestic living.     

慢性砷中毒对小鼠齿状回caspase-3表达的影响

目的 观察慢性砷中毒对成年小鼠齿状回神经元的形态学影响,探讨慢性砷中毒对成年小鼠脑部的神经毒性机制.方法 选取健康成年昆明小鼠80只,雌雄各半,分为对照组、高、中、低剂量砷染毒组,每组20只,高、中、低剂量砷染毒组分别以As03的1/5、1/10、1/40 LD50(9、4.5、1.1 mg/kg)灌胃染毒,对照组以蒸...     

小鼠氧化乐果急性中毒后心肌组织ATP酶及自由基代谢的变化

目的观察小鼠氧化乐果急性中毒后心肌组织ATP酶活性水平和自由基的代谢,探讨氧化乐果急性中毒后心肌损害的发生机制。方法20只健康小鼠随机分为对照组和氧化乐果染毒组,每组10只。染毒组按25mg／kg腹腔注射氧化乐果,对照组注射生理盐水。30min后处死,分别测定两组小鼠心肌组织Na^＋-K^＋-ATP酶、Mg^2＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性．丙二醛（MDA）、超氧化物峙化酶（SOD）、裕胱甘肽讨氢化物酶（GSH—Px）含量并进行比较。结果染毒组小鼠心肌组织Na^＋-K^＋-ATP酶、Mg^2＋-ATP酶和Ca^2＋-ATP酶活性均明显低于对照组（6．48±2．64vs17．96±2．07、9．48±2．93vs21．18±3．10、10．06±2．43vs18．29±2．13）（均P〈0．05）,染毒组小鼠心肌组织SOD、GSH—Px含量明显低于对照组（5．21±1．59vs6．85±1．43、8．12±3．73vs11．96±3．98）（均P〈0．05）,而MDA含量高于对照组（4．98±1．76vs2．74±1．82）（P〈0．05）,上述差异均具有统计学意义。结论氧化乐果可影响心肌组织能量代谢和抗自由基水平,损害心肌;其机制可能与自由基引起的肌细胞脂质过氧化有关。     

外源性谷胱甘肽对饮水砷暴露雌性小鼠脑砷形态及一氧化氮代谢的影响

目的 探讨外源性谷胱甘肽(glutathione,GSH)对饮水砷暴露小鼠脑中砷形态分布及一氧化氮(nitric oxide,NO)代谢的影响.方法 将40只雌性昆明小鼠随机分为对照组、单独染砷(NaAsO_2)组及低剂量(200mg/kg)、中剂量(400mg/kg)或高剂量(800mg/kg)GSH干预组,每组8只.染毒组小鼠饮水染砷4周,在最后一周,在染砷同时腹腔注射不同剂量GSH.末次注射后24h处死小鼠,取血和脑组织,分别检测无机砷(iAs)、一甲基胂酸(MMA)和二甲基胂酸(DMA)含量及脑中一氧化氮合酶(NOS)活力和NO含量.结果 GSH干预组小鼠血中iAs、MMA和总砷(TAs)含量及脑中DMA和TAs含量与单独染砷组比较显著下降.与对照组相比,单独染砷组小鼠脑中NOS活力及NO含量显著降低.与单独染砷组比较,中、高剂量GSH干预组小鼠脑中NOS活力显著升高.结论 给予外源性GSH可减少血液和脑组织中的砷负荷,进而改善砷对脑内NO代谢的影响.     

正常成人尿中8-羟基脱氧鸟苷水平的观察

目的检测正常成人尿中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平,了解其在正常人群中的分布范围.方法用8-OHdG的酶联免疫试剂盒检测尿中8-OHdG水平,用苦味酸法测定尿中的肌酐,计算8-OHdG的肌酐校正值.结果正常人群尿中8-OHdG水平为14.15±9.00ng/mgCr.在不同性别间存在显着性差异,男性为11.85±5.72ng/mgCr,女性为16.24±10.83ng/mgCr.按10岁一个年龄段分层,在男性、女性和全体人群中各年龄组间均无显着性差异.女性在21～60岁年龄段8-OHdG水平有随年龄增加而增高的趋势.结论正常人群8-OHdG水平的95%参考值范围在男女性分别为0～25.77ng/mgCr和0～44.89ng/mgCr.     

太阳光及紫外线照射诱发M13mp2噬菌体DNA产生8-OHdG的作用

[目的 ]分析太阳光及长波紫外线 (UVA)、中波紫外线 (UVB)诱发Ml3mp2噬菌体DNA产生 8 羟基脱氧鸟苷(8 OHdG)的作用。 [方法 ]用太阳光、UVA和UVB照射处理M13mp2噬菌体样品 ,以HPLC EC检测DNA样品中的 8 OHdG。 [结果 ] 1、3、5h太阳光照射和 2 8、10 8、2 5 0、5 0 0kJ/m2 剂量UVA照射后的样品均可检测到 8 OHdG含量增加 ,并存在与照射剂量的依存关系。较高剂量 (2 6kJ/m2 )UVB照射也可引起 8 OHdG的产生。 [结论 ]太阳光照射致M13mp2噬菌体突变作用中 ,存在DNA的氧化损伤 ,主要是UVA的作用。