Survivin在星形细胞瘤中的表达及其与肿瘤增殖活性的相关分析

目的:探讨Survivin、Ki67在星形细胞瘤中的表达规律和意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测10例正常脑组织和59例星形细胞瘤中Survivin蛋白及ki67的表达,并结合病理特点进行分析。结果:正常脑组织中未见Survivin表达,星形细胞瘤中Survivin表达阳性率为64.4%.组织学分级之间差异显著(P<0.05)。此外Survivin的表达还与Ki67呈明显相关(P<0.05)。结论:Survivin在星形细胞瘤中高表达,与星形细胞瘤的恶性程度、增殖活性密切相关,可望成为诊断治疗的新靶点。     

Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性

目的 探讨Survivin、PTEN蛋白在脑星形细胞瘤中的表达及其相关性.方法 应用免疫组化SP法,检测65例脑星形细胞瘤患者的肿瘤标本中Survivin、PTEN蛋白的表达.结果 不同级别间的脑星形细胞瘤Survivin 蛋白的表达阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著低于Ⅲ级与Ⅳ级(均P＜0.05);不同级别间PTEN蛋白表达的阳性率差异有统计学意义,Ⅱ级显著高于Ⅲ级与Ⅳ级(P＜0.05,P＜0.001);两者在脑星形细胞瘤中的表达呈负相关(r=-0.5367,P＝0.002).结论 Survivin、PTEN蛋白的表达与脑星形细胞瘤形成有关,抑癌基因PTEN的突变与Survivin基因的表达可能在星形细胞瘤的恶性进展中起协同作用.     

幕上星形细胞瘤微血管密度检测的临床意义

目的:研究血管生成在幕上星形细胞瘤中的意义。方法:采用免疫组化方法对71例幕上星形细胞瘤作von Willebrand因子染色,显示血管内皮细胞以检测肿瘤内微血管密度,分析微血管密度与肿瘤级别及患者预后的关系。结果:微血管密度与肿瘤级别密切相关(P>0.01),较高级别的肿瘤内微血管密度较高,Ⅳ级星形细胞瘤内微血管密度最高。预后分析显示微血管密度较高组的患者生存率较低(P<0.01)。结论:血管生成在肿瘤生长中发挥了重要作用,微血管密度是反映幕上星形细胞瘤患者预后的重要指标。     

P53在星形细胞瘤中的表达

目的研究P53在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级的关系,讨论P53在星形细胞瘤预后判断上的价值.方法SP免疫组化法对110例星形细胞中P53的表达进行研究.结果在星形细胞瘤中,P53阳性表达率及其阳性细胞百分率均与病理分级无关.结论P53基因突变是星形细胞瘤发生发展过程的不同阶段中的一种相对独立的基因改变,P53蛋白的积聚在该肿瘤预后判断上的价值尚难肯定.深圳市科委课题资助     

Delta-like ligand 4在脑星形细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨Delta-like ligand4(DLL4)在脑星形细胞瘤中的表达及与微血管密度(MVD)的关系。方法脑星形细胞瘤标本40例,分Ⅰ级,Ⅱ级,Ⅲ～Ⅳ级三组,分别使用DLL4单克隆抗体、抗人CD31多克隆抗体行免疫组织化学染色,Image-Pro Plus6.0软件分析DLL4光密度(optical density,OD)半定量分析DLL4表达,统计微血管数。结果各组DLL4蛋白OD值为Ⅰ级514.71±179.56,Ⅱ级961.97±88.53,Ⅲ～Ⅳ级1125.31±225.35,P<0.01;MVD值Ⅰ级24.75±10.33,Ⅱ级57.62±12.45,Ⅲ～Ⅳ级114.60±25.28,P<0.01。DLL4的OD值与MVD的相关系数为γ=0.68(P<0.01)。结论 DLL4表达随星型细胞瘤恶性程度的升高逐步增加,与微血管密度密切相关,对判断星型细胞瘤的恶性程度及血供有指导意义。     

TP、MVD在人脑星形胶质细胞瘤中的表达及意义

目的探讨脑星形胶质细胞瘤组织胸苷磷酸化酶（TP）和微血管密度（MVD）的表达及其与星形细胞瘤的病理分级关系。方法选取病例50例，记录病例年龄、性别、组织学类型、病理分级。正常脑组织病例5例，鼠抗人单克隆抗TP抗体选取乳腺炎石蜡标本1例（阳性对照）。鼠抗人单克隆抗CD34抗体选取扁桃体炎石蜡标本1例（阳性对照）。将上述符合条件病例蜡块每例切片3张，利用免疫组化技术SP法检测它们TP、CD34的表达。结果5例正常尸检脑组织TP表达均阴性（-）；高级别星形胶质细胞瘤TP阳性表达率及微血管密度（MVD）值明显高于低级别星形胶质细胞瘤（WHOⅠ-Ⅱ级）（P〈0．05）。且口表达与MVD明显正相关（r=0．692，P〈0．05）。结论TP及MVD可以作为星形胶质细胞瘤恶性程度病理分级及判定预后的参考指标。     

AQP-1和VEGF在星形细胞瘤中的表达及其意义

目的探讨水通道蛋白-1（AQP-1）、血管内皮生长因子（VEGF）在星形细胞瘤的表达以及对肿瘤侵袭性生长的影响。方法采用免疫组化SABC法，分析58例星形细胞瘤和7例正常脑组织标本中AQP-1和VEGF的表达，并用Ⅷ因子相关抗原（FV1—RA）标记血管内皮细胞以计算微血管密度（MVD）。结果VEGF在正常脑组织、低级别（Ⅰ-Ⅱ级）和高级别（Ⅲ-Ⅳ级）星形细胞瘤中的阳性率分别为0、28．13％和73．08％，三者相较相差显著（P〈0．01或P〈0．05）。MVD值及AQP-1的积分光密度值在正常脑组织中分别为2．34±1．97和0．01±0．05，在低级别星形细胞瘤中分别为8．89±2．45和2．89±0．94,在高级别星形细胞瘤中分别为17．49±3．58和7．38±0．56，三者相较差异显著（P〈0．05）。MVD与VEGF、AQP-1的表达均呈正相关（P〈0．01）。结论VEGF和AQP-1的高表达可能促进了肿瘤血管增生、破坏了正常血脑屏障结构，从而易化了肿瘤的侵袭性生长。     

EphA2基因在脑星形胶质细胞瘤的表达

目的 检测EphA2基因在脑星形胶质细胞瘤中的表达并探讨其与星形胶质瘤病理分级、增殖和凋亡的关系.方法 选取90例人脑星形胶质瘤标本,以逆转录聚合酶链反应检测EphA2mRNA表达,以免疫组化法检测EphA2和Ki67蛋白表达,以TUNEL法检测凋亡,分别计算EphA2免疫反应评分(IRS)、增殖指数(PI)和凋亡指数(AI)并进行统计学分析.结果 EphA2 mRNA和蛋白阳性表达率分别为47.8%和43.3%.EphA2 IRS、PI及AI分别为(2.90±3.89)%、(30.42±24.91)%和(1.42±0.99)%,三者均随肿瘤病理级别增高而升高.EphA2阳性组PI明显高于阴性组PI,PI与EphA2 IRS呈显著正相关;EphA2阳性组与阴性组之间AI差异无统计学意义,但AI与EphA2 IRS呈显著负相关.结论 EphA2在脑星形胶质瘤中高表达,其表达水平与肿瘤病理分级、增殖和凋亡密切相关,提示EphA2可能是参与脑星形胶质瘤恶性进展的重要分子.     

脑胶质瘤的凋亡和相关基因Survivin的表达

目的明确Survivin在脑胶质瘤中的表达和细胞凋亡及微血管密度的相关性。方法检测Survivin在91例脑胶质瘤、20例颅内良性肿瘤的表达用免疫组化法,用流式细胞仪检测其表达和凋亡的关系。用CD34标记及图像定量分析微血管密度。结果Survivin在脑胶质瘤(WHO分级)中阳性率35?91(38.5%),随着脑胶质瘤的恶性程度增高,检出Survivin的阳性率就越高,其中I～II级为6?41(14.6%),III级为12?27(44.4%),IV级为17?23(73.9%)。III级以上恶性脑胶质瘤Survivin表达阳性显著高于II级以下脑胶质瘤(P<0.01)。20例颅内良性肿瘤仅1例表达(5%);Survivin表达强度和CD34标记及图像定量分析的微血管密度呈显著正相关(P<0.05);Survivin阳性比Survivin阴性患者术后生存期缩短(P<0.05)。结论Survivin对脑胶质瘤发生、恶化可能和抑制细胞凋亡、肿瘤血管的形成起重要的作用。     

星形细胞瘤中PTEN蛋白表达的意义及其与微血管密度的相关性研究

目的研究星形细胞瘤中PTEN蛋白表达的意义及其与微血管密度(MVD)之间的相关性.方法应用免疫组化SP法检测星形细胞瘤组(n=60)和对照组非肿瘤组织(n=20)中PTEN蛋白的表达并记数相应的MVD.结果 PTEN蛋白阳性染色定位于胞浆,在对照组中均呈阳性表达,在肿瘤组的阳性表达率明显低于对照组(P＜0.05),其中Ⅲ～Ⅳ级肿瘤的阳性表达率明显低于Ⅱ级肿瘤(P＜0.05).Ⅲ～Ⅳ级的MVD平均值明显高于Ⅱ级(P＜0.05).PTEN蛋白阳性表达组的MVD平均值显著低于PTEN蛋白阴性表达组(P＜0.05).结论 PTEN基因的缺失与突变在星形细胞瘤的发生发展中可能起重要作用.PTEN可能通过某些途径抑制星形细胞瘤的血管生成.     

脑胶质瘤中乙酰肝素酶mRNA的表达与微血管密度的相关性研究

目的通过对脑胶质瘤中乙酰肝素酶mRNA的检测，探讨乙酰肝素酶在脑胶质瘤中的表达及与微血管密度的相关性。方法实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（realtime RT-PCR）检测47例各级人脑胶质瘤和8例正常脑组织中HPA mRNA的表达，并用免疫组化S—P法检测其微血管密度（MVD）情况，分析HPA mRNA的表达与其恶性程度及与MVD的相关性。结果胶质瘤HPA表达值随肿瘤病理级别增高而增高。不同级别组胶质瘤HPA mRNA相对值有显著性差异（P〈0.01）；在脑胶质瘤中HPA mRNA表达与MVD呈正相关（r=0．979，P〈0.01）。结论脑胶质瘤HPA的表达与肿瘤的恶性程度、肿瘤血管生成密切相关。HPA的高表达反映了胶质瘤的恶性生物学行为，对判断预后有重要意义。     

基质金属蛋白酶表达和MVD计数与垂体腺瘤侵袭性的关系研究

目的研究基质金属蛋白酶表达和微血管密度(MVD)计数与垂体腺瘤侵袭性相关性。方法选取垂体腺瘤手术标本41例,分为侵袭组(18例)和非侵袭组(23例)。采用免疫组化法检测MMP-2在两组中的表达水平,并计数垂体腺瘤组织中MVD。结果MMP-2在侵袭组和非侵袭组表达阳性率分别为72.2%(13/18)、26.1%(6/23),两组比较有显著性差异(P<0.05);MVD计数在侵袭组和非侵袭组分别为50.51、13.41,两组比较有显著性差异(P<0.05);侵袭性垂体腺瘤中MMP-2的表达水平与MVD计数呈正相关(P=0.000)。结论MMP-2和MVD表达与垂体腺瘤侵袭性密切相关。     

NF-κB与Survivin基因在脑胶质瘤中的表达

目的探讨细胞核因子KB和Survivin基因在胶质瘤中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法分别采用原位杂交和免疫组织化学S—P法检测80例星形细胞瘤患者和10例正常脑组织Survivin mRNA和NF—KB的表达，用末端转移标记法（TUNEL）检测肿瘤组织的凋亡并计算其凋亡指数（AI）。结果星形细胞瘤组织中Survivin mRNA的阳性表达率明显高于对照组（P〈0．01），高度恶性组的阳性率明显高于低度恶性组（P〈0．01）；AI在星形细胞瘤中明显高于对照组（P〈0．01），而Survivin mRNA阳性组低于阴性组（P〈0．01）；NF—kB在星形细胞瘤中的表达明显高于对照组（P〈0．01），且Survivin mRNA阳性组明显高于阴性组（P〈0．05）。结论NF-kB与Survivin在星形细胞瘤中的表达密切相关，NF-kB的过表达可能通过上调Survivin mRNA的表达抑制星形细胞瘤细胞的凋亡．从而在肿瘤的发生、发展和治疗中发挥重要作用。     

OPN、MMP-9及MVD在垂体腺瘤中的表达与其侵袭性的关系

目的探讨骨桥蛋白（OPN）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及微血管密度（MVD）在垂体腺瘤中的表达及其与垂体腺瘤侵袭性的关系。方法应用免疫组化技术检测30例垂体腺瘤（其中侵袭性17例,非侵袭性13例）标本和3例正常脑组织中OPN、MMP-9及MVD的表达。结果垂体腺瘤侵袭组OPN、MMP-9及MVD的表达水平显著高于非侵袭组（P〈0．05）;OPN、MMP-9及MVD在侵袭性垂体腺瘤中的表达互为正相关（P〈0．01）。结论垂体腺瘤的侵袭性可能与其上调表达OPN、MMP-9及MVD有关。     

颅咽管瘤移植瘤中微血管密度及微染色体维持蛋白6的研究

目的建立颅咽管瘤（CP）动物模型，检测移植瘤的微循环结构和瘤细胞分裂、增殖能力。方法收集人脑颅咽管瘤组织，异种异位移植到BALB／C裸小鼠皮下，建立移植瘤。采用免疫组化法以cytokeratin（CK）鉴定肿瘤表型，CD34标记血管内皮细胞，微染色体维持蛋白6（MCM6）检测瘤细胞增殖活性。结果成功建立了10只动物模型。移植瘤组织自身形成微血管，瘤细胞保持了分裂、增殖活性。微血管密度（MVD）、MCM6二者呈正相关（r=0．410，P〈0．05）。釉质上皮型（AE）与鳞形乳头瘤型（SP）移植瘤MVD、MCM6比较差异无显著性意义（P〉0．05）。结论采用异种异位移植方法可在裸小鼠皮下初步建立人脑颅咽管瘤动物模型。移植瘤细胞可建立新的微循环结构，具备一定的分裂、增殖能力和血管形成活性。     

14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达及意义

目的探讨14-3-3蛋白在星形细胞瘤中的表达与肿瘤病理分级和预后间的关系。方法采用免疫组化ABC法检测10例正常脑组织和67例确诊并有随访的人脑星形细胞瘤石蜡标本中14-3-3蛋白的表达情况。分析14-3-3蛋白的表达与肿瘤恶性程度及预后间的关系。结果在正常脑组织标本中，14-3-3蛋白主要表达于神经元胞体和突起，而在少数的胶质细胞中仅见其弱表达。绝大部分星形胶质细胞瘤中可见14-3-3蛋白阳性表达，其阳性表达率为：Ⅱ级76．5％（13／17），Ⅲ级76．2％（16／21），Ⅳ级79．3％（23／29）。不同恶性级别的星形细胞肿瘤中，14-3-3蛋白的阳性表达率无显著差别（P〉0．05），但14-3-3蛋白表达的强度和范围有随肿瘤的恶性度增高而增加的趋势（P〈0．05）。52例14-3-3蛋白阳性表达患者的生存期明显短于15例14-3-3蛋白表达阴性的患者（P〈0．01）。结论14-3-3蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达上凋与肿瘤的恶性程度及预后相关。14-3-3蛋白有望成为星形细胞瘤基因治疗的新靶点。     

亚低温对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑皮质神经元凋亡及存活素、脑源性神经营养因子表达的影响

目的观察亚低温干预对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑皮质神经元凋亡及存活累(Survivin)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨Survivin、BDNF在亚低温脑保护机制中的作用。方法采用线栓法制备成年雄性SD大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶性脑缺血再灌注改良模型,将90只大鼠随机分为假手术组、常温缺血组和亚低温缺血组,缺血组分别于缺血3h再灌注3h、6h、12h、24h、48h、72h、7d处死,亚低温缺血组于缺血后10min实施全身亚低温持续3h。进行TUNEL染色及免疫组化染色,检测梗死灶周围皮质神经元凋亡数量和Sur-vivin、BDNF的表达水平。结果 (1)亚低温缺血组和常温缺血组于再灌注6h皮质区均出现TUNEL染色阳性细胞,72h达高峰,随后逐渐减少,两组内相邻时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05);在相同时间点亚低温缺血组凋亡细胞数明显少于常温缺血组,两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)亚低温缺血组于再灌注3hSurvivin、BDNF表达有所增加,BDNF于24h达高峰,Survivin于48h达高峰,随后表达逐渐降低,但7d时仍高于假手术组,常温缺血组表达趋势与之相似,两组各时间点Survivin、BDNF表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);除再灌注3h Survivin表达在亚低温缺血组与常温缺血组间无明显差异外,其余各时间点亚低温缺血组Sur-vivin、BDNF表达均高于常温缺血组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论亚低温干预可抑制梗死灶周围脑皮质神经细胞凋亡,促进存活素及脑源性神经营养因子的表达,发挥脑保护作用。     

丰富环境对脑梗死大鼠学习记忆和海马区微血管密度的影响

目的 研究丰富环境对局灶性脑梗死大鼠学习记忆及海马区微血管密度的影响.方法 采用开颅电凝法制作SD大鼠右侧大脑中动脉缺血(MCAO)模型,术后24h随机分为丰富环境组(EE组)和标准环境组(SE组),另设假手术组(Sham组),不电凝大脑中动脉,其余步骤与手术组相同.分别于术后7d、28d进行Mornis水迷宫测试大鼠学习记忆能力;以免疫组织化学法测定海马区微血管密度.结果 在学习记忆能力上,EE组成绩明显优于SE组(P<0.01),与Sham组相比无显著性差异(P>0.05);缺血侧海马区微血管密度显示EE组在术后14d、28d明显高于SE组大鼠(P<0.05),与Sham组相比无显著性差异(P>0.05).结论 丰富环境可促进脑梗死大鼠学习记忆能力的恢复与海马区微血管新生,改善大鼠的预后.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of enriched environment on learning and memory and microvessel density in hippocampus of rats after unilateral local cerebral infarction. Methods The right middle cerebral artery occlusion (MCAO) was performed with electric coagulation in SD rats, then the rats were randomly divided into enriched environment stimulation group (EE group) and standard environment stimulation group (SE group). The sham-operation rats were as control group. On 7d and 28d, Morris water maze was used to evaluate the learning and memory ability;microvessel density in hippocampus of rats was measured in the boundary zone to brain infarction on 1d,3d,7d,14d and 28d. Result The learning and memory ability in EE group was significantly better than that in SE group ( P < 0.01 ) and there was no significant difference between EE group and Sham group (P > 0.05 ) ;Compared with SE group, the microvessel density (MVD) of EE group in hippocampus of rats significantly increased on 14d and 28d after MCAO( P <0.05). There was no significant difference in MVD between EE group and sham group (P > 0.05 ). Conclusion The enriched environment can enhance the ability of learning and memory and promote the blood vessel proliferation of rats with unilateral local cerebral infarction.The study suggests enriched environment is good for recovery from brain damage in rats with MCAO.