舒拉明对培养的人视网膜色素上皮细胞移行的影响

目的 观察舒拉明（suramin)对培养的人视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium,RPE)移行的影响。方法 在体外培养的RPE细胞的损伤模型中,加入不同浓度的舒拉明（1.5,15,150mg/L)观察12h,24h和48h3个时间点RPE细胞移行率。结果 无血清培养液中的RPE细胞有较弱的移行能力,含有100ml/L新生小牛血清的培养液可以显著刺激RPE细胞移行（P＜0．01）,3种浓度舒拉明可以显著抑制100ml/L血清条件下的RPE细胞的移行,12h移行率分别对照组的82％、74％和46％、24h为92％,83％和52％、48h为92％,84％和55％这种作用呈剂量依赖性。结论 血清中的某些成分可以刺激RPE细胞的移行,舒拉明可以抑制血清的这种作用,为临床预防和治疗增殖性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreoretinopathy,PVR)提供了新的用药思路。     

不同浓度EGF对体外培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响

目的 探索表皮生长因子(EGF)培养体外人视网膜色素上皮细胞(hRPE)的最佳浓度和最佳作用时间.方法 用CCK-8法观察EGF对体外hRPE增殖调控的剂量-效应关系、时间-效应关系.结果 在相同浓度EGF作用下,hRPE吸光度值(A值)随作用时间延长而增加;在相同培养时间条件下,hRPE A值随EGF浓度增加而增加,...     

血小板源性生长因子在妇科肿瘤中的作用

目的：总结血小板源性生长因子（PDGF）在妇科肿瘤中的病理生理作用。方法：检索国内外文献,对PDGF在妇科肿瘤中的病理生理作用进一步综合分析。结果：PDGF参与卵泡的发生;PDGF与子宫肌瘤、宫颈、卵巢癌等疾病相关联。结论：PDGF在妇科肿瘤的发生、发展中起着重要的作用。     

血小板源性生长因子受体基因重排的研究

血小板源性生长因子（PDGF）是血清中的一种强有丝分裂原分子，分子质量为28～31ku。PDGF可刺激成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞的增殖，其受体在人巨核细胞和巨核细胞系有表达。PDGF一方面通过与其受体相互作用刺激细胞的c-fos的表达，促进细胞有丝分裂，另一方面它可作用于骨髓微环境的间质细胞，使间质细胞产生更多的细胞因子，     

人视网膜色素上皮细胞原代培养及HGF/c-Met的表达

目的：探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)及其受体c-Met在原代培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞中的表达情况。方法：体外培养人RPE细胞，3—5代细胞用于实验；采用免疫细胞化学和RT-PCR方法检测细胞内HGF及其受体c-Met的表达。结果：人RPE细胞HGF及其受体c-Met免疫细胞化学染色的阳性信号分别位于细胞浆内和细胞膜上；RT-PCR方法可检测到HGF及其受体c-Met mRNA的表达。结论：人RPE细胞自身产生HGF并表达其受体c-Met，提示HGF可能通过自分泌和(或)旁分泌途径作用于RPE细胞，涉及眼内多种疾病过程。     

丹酚酸B对血小板源性生长因子-BB诱导的人主动脉平滑肌细胞增殖和迁移的作用研究

目的 探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对血小板源性生长因子BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cells, HAVSMCs)增殖和迁移的影响及可能机制。方法 本研究采用20 ng/ml PDGF-BB刺激血管平滑肌细胞建立细胞增殖模型,将传代培养的HAVSMCs随机分为4组：对照组、Sal B组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Sal B组(提前1 h加入Sal B),通过不同浓度的Sal B (12.5、25、50和100μmol/L)进行干预。采取细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞活性和增殖能力,筛选Sal B抑制血管平滑肌细胞增殖的最适浓度,通过划痕试验和Transwell迁移实验评估Sal B对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞迁移的影响。Western blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen...     

转移生长因子β2对培养的人类视网膜色素上皮细胞DNA合成增殖影响的研究

目的：为研究转移生长因子β2（TGF－β2）对培养的人类视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖的作用。方法：取自愿者贡献的眼球并游离其视网膜色素上皮细胞，用DMEM加10％血清及MEM氨基酸和庆大霉素，进行细胞传代培养。用溶血磷脂酸、转移生长因子β2（TGF－β2）及TGF－β2＋LPA进行视网色素上皮细胞增殖试验，用细胞染色法进行细胞计数，提取视网膜色素上皮细胞DNA，用Spectrophotometer进行DNA定量测定。结果：含有和／或缺乏1％小牛血清的两种LPA（10uM）均明显刺激视网膜色素上细胞增殖，但这种细胞的增殖被2nG/ml的转移生长因子－β2所阻滞。结论：增殖性玻璃体视网膜病变（PVR）是一种以细胞增殖为主的疾病，参与增殖的主要细胞为视网膜色素上皮细胞，转移生长因子－β2能阻滞体外培养的人类视网膜色素上皮细胞DNA合成与增殖，应用TGF－β2治疗由RPE细胞引起的PVR疾病，仍需进一步深入研究。     

姜黄素对人视网膜色素上皮细胞增殖和VEGF表达的影响

目的 探讨姜黄素对人视网膜色素上皮(hRPE)细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 (1)采用不同浓度(5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL)的姜黄素干预hRPE细胞1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d,同时设置空白对照组(不给予姜黄素干预)。采用CCK-8法检测各时间点不同浓度姜黄素对hRPE细胞增殖的影响,采用流式细胞仪检测各时间点各组细胞周期时相分布情况。(2)将hRPE细胞分为姜黄素组和对照组,姜黄素组加入10μg/mL的姜黄素,对照组加入等体积培养液,采用实时荧光半定量PCR检测各组hRPE细胞VEGF mRNA的表达水平。结果 (1)各浓度姜黄素对hRPE细胞均有抑制作用(均P<0.05),且随着药物浓度的增大、作用时间的延长,其抑制率呈升高趋势,整体呈现剂量和时间依赖性。(2)不同浓度姜黄素干预后,G₀/G₁期细胞比例均大于空白对照组,S期细胞比例和G₂/M期细胞比例均小于空白对照组(均P<0.05)。(3)姜黄素组hRPE细胞VEGF mRN...     

川芎嗪对糖基化终产物诱导人视网膜色素上皮细胞表达血管内皮生长因子的影响

目的研究川芎嗪对糖基化终产物(AGEs)诱导人视网膜色素上皮细胞(RPE)表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法应用免疫组化法及免疫印迹法(western blot)检测不同浓度AGEs作用下RPE中VEGF的表达、同一浓度AGEs作用于RPE不同时间VEGF的表达、不同浓度川芎嗪对AGEs作用下RPE中VEGF的表达的影响。结果随着AGEs浓度的增加,RPE中VEGF的表达逐渐增加,以100mg/L最为明显;AGEs作用8h时,RPE中VEGF的表达较高;随着川芎嗪浓度的增加,AGEs作用下的RPE中VEGF的表达逐渐降低。结论AGEs可诱导RPE中VEGF的表达,川芎嗪可对抗这一作用,且具有浓度依赖性。     

转化生长因子β1调节培养的人视网膜色素上皮细胞分泌基质金属蛋白酶-2

目的 研究转化生长因子β1（TGF-β1）对培养的人视网膜色素上皮（HRPE）细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的调节作用。方法3～4代培养的人视网膜色素上皮细胞，经不同浓度的TGF-β1（0．01、0．1、1、10ng／ml）处理，36h后收集条件培养基，或经TGF-β1作用不同时间（24、36、48h）后收集条件培养基，采用明胶酶谱分析方法定量检测HRPE细胞上清液中MMP-2的活性水平。结果培养的HRPE细胞上清液中可检测到MMP-2，经TGF-β1处理后，能显著上调培养基中MMP-2的分泌。TGF-β1的浓度从0．01～10ng／ml，MMP-2的分泌活性有明显的剂量依赖性，同时MMP-2的分泌活性随TGF-β1作用时间延长而增强。结论培养的HRPE细胞能分泌MMP-2，TGF-β1能上调HRPE细胞中MMP2的分泌。MMP-2分泌增加，可能在玻璃体视网膜的疾病中有利于HRPE细胞的迁移。     

Transwell小室共培养条件下缺氧时视网膜色素上皮细胞对内皮细胞增殖的影响

目的 研究在Transwell小室共培养系统中,缺氧时视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelium,RPE)对血管内皮细胞增殖的影响.方法 培养并鉴定RPE细胞和人脐静脉血管内皮细胞,利用200 μmol/LCoC12造成细胞缺氧、Transwell小室建立细胞共培养模型.实验分为4组:对照...     

人参皂甙Rb2对培养人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的：研究人参皂甙Rb2(Ginsenoside-Rb2)对体外培养视网膜色素上皮细胞增生的直接抑制作用及可能机制。方法：通过活细胞计数法与MTT比色法分别检测不同浓度（250、200、120、100、50、10μg/ml）Rb2t Rb2 150μg/ml在不同作用时间（6－120h)对RPE细胞增生及代谢的影响。结果：Rb2组细胞增殖受到抑制并出现细胞脱落，Rb2 200μg/ml具有最强的抑制效应，其明显抑制效应在6h即出现，96h达高峰。Rb2组A值明显低于对照组，RPE细胞生存率下降。结论：Rb2可能通过阻滞钙通道降低细胞内钙浓度、干扰RPE细胞代谢对RPE细胞增殖具有剂量依赖和时间依赖方式的抑制作用。     

人参皂苷Rg3对培养人视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用

目的 研究人参皂苷Rg3(Ginsenoside-Rg3)对体外培养视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的直接抑制作用及可能机制。方法 通过活细胞计数法与MTT比色法分别检测不同浓度(10、20、50、80、100、150mg/L)Rg3和Rg3 80mg/L在不同作用时间(6-120h)对RPE细胞增生及代谢的影响。结果 Rg3组细胞增殖受到抑制并出现细胞脱落，Rg3 100mg/L具有最强的抑制效应，其明显抑制效应在6h即出现，96h达高峰。Rg3组A值明显低于对照组，RPE细胞生存率下降。结论 Rg3可能通过抑制钙内流促进钾外流改变细胞膜电位、干扰RPE细胞代谢，对RPE细胞增殖具有剂量依赖和时间依赖方式的抑制作用。     

Effects of PDTC on the Proliferation and PCNA Expression of Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is oneof the most common eye diseases that couldlead tosevere vision i mpairment and tend to cause blind-ness .It has beenfound that the abnormal prolifer-ation of retinal pigment epithelium(RPE) plays akey role in the onset and development of PVR.Under pathologic status ,such as rhegmatogenousdetachment of retina and severe ocular trauma ,RPE cells may migrate and proliferate because ofthe sti mulations of cytokines or chemokines ,thusmay lead to path…     

全反式维甲酸对人视网膜色素上皮细胞D407增殖及凋亡的影响

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对体外培养条件下的人视网膜色素上皮细胞株(retinal pigment epithelial cells,RPE)D407增殖及调亡的影响,探讨ATRA诱导D407细胞调亡影响的机制.方法 将常规传代培养的D407细胞计数后加入浓度为10μg/mL的ATRA完全培养基作为实验组,并与所设空白对照组相比较,继续培养72h后进行活细胞计数并观察药物对D407细胞的抑制作用.同时观察传代细胞培养24h后ATRA对传代细胞贴壁行为的影响.光镜、电镜下观察经ATRA药物作用后D407细胞形态学的改变,应用流式细胞仪检测实验组和对照组的细胞调亡率.结果 体外培养的D407细胞ATRA实验组细胞存活数显著少于空白对照组.ATRA能诱导D407细胞发生调亡现象,药物作用72h后发生调亡细胞多为早期调亡细胞.结论 ATRA能有效地抑制体外培养的D407细胞的增殖和黏壁,发生抑制作用的机制可能与诱导细胞调亡有关.     

人胚胎视网膜色素上皮细胞的体外培养和吞噬作用

目的探讨人胚胎视网膜色素上皮（RPE）细胞分离培养的特性及其吞噬作用。方法取发育至13-15周的新鲜人胚胎眼球,显微解剖后采用机械胰酶消化法分离培养RPE细胞,应用免疫荧光法观察人胚胎RPE细胞吞噬视网膜光感受细胞外节膜盘。结果人胚胎发育至13-15周后,RPE细胞可应用标准的培养方法进行体外培养和传代。根据测定的人胚胎RPE细胞生长曲线,取2—6代细胞用于实验培养的人胚胎RPE细胞具备吞噬功能。结论改进了人胚胎RPE细胞的培养方法,证明人胚胎RPE细胞在体外具有吞噬能力。     

Genistein对高钾和化学缺氧所致人视网膜色素上皮细胞损伤的保护作用

目的:研究Genistein(gen)对高钾和化学缺氧所致人视网膜色素上皮(retinalpigmentepithelium,RPE)细胞损伤的保护作用。方法:采用体外培养人RPE细胞,MTT法测定细胞存活率以及在倒置相差显微镜下观察细胞形态改变。结果:200mmol/LKCl作用12h可降低细胞存活率至(43.97±3.43)%,gen50、100、200μmol/L可明显提高细胞存活率且呈浓度依赖性。相差显微镜观察细胞形态发现,200mmol/LKCl作用2h细胞膜开始皱缩,4h胞膜皱缩更加明显,胞核也开始浓缩,8h后仅见细胞核和断裂呈絮状的细胞膜,12h仅可见固缩的细胞核,而200μmol/Lgen可以减轻细胞损伤,4h后方见细胞膜开始皱缩;CoCl2损伤模型中,500μmol/LCoCl2作用12h可降低细胞存活率至(57.81±17.19)%,gen50、100、200μmol/L时也可浓度依赖性升高细胞存活率。结论:Gen对高钾和化学缺氧所致人RPE细胞损伤具有保护作用。     

微囊化牛视网膜色素上皮细胞体外BDNF及GDNF分泌特性的研究

目的检测体外培养的牛视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelium,RPE）脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）及胶质源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF）分泌特点,并观察微囊包裹对细胞存活率及BDNF和GDNF分泌的影响。方法原代培养牛RPE,用高压静电成囊装置制备海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化细胞,台盼兰染色法检测囊内细胞活性,ELISA法检测BDNF及GDNF分泌量。结果原代及传代后RPE上清液中在基础状态下就能够检测到BDNF和GDNF,传代后两者的分泌量较原代无显著差异。微囊化细胞BDNF和GDNF分泌量在1-5 d与未微囊化细胞相比显著降低（P〈0.01）,而6-8 d两组无显著差异。囊内活细胞数及BDNF和GDNF分泌量在体外培养的第14天至第21天趋于稳定。结论RPE基础状态下就能够分泌少量BDNF和GDNF,且不受传代及微囊包裹的影响。体外培养21 d后仍检测到囊内细胞的存活及BDNF和GDNF的分泌。牛RPE是一种具有一定前景的帕金森病细胞移植的供体。     

PKC信号传导通路对缺氧人视网膜色素上皮细胞表达VEGF的作用

目的 :探讨蛋白激酶C(PKC)信号传导通路对缺氧状态下培养的视网膜色素上皮 (retinalpigmentepithelium ,RPE)细胞表达VEGF的作用 .方法 :在缺氧状态下分别培养人RPE细胞 6 ,1 2和 2 4h ;将不同浓度的PKC激动剂佛波醇 1 2 豆蔻酰 1 3乙酸 (phorbol 1 2 myristate 1 3 acetate,PMA)及PKC抑制剂Chelerythrine分别加入人RPE细胞培养液 ,在缺氧状态下培养 2 4h .用免疫组化方法检测各组RPE细胞中VEGF的表达 ,经计算机图像处理 ,定量分析 .结果 :在缺氧状态下 ,RPE细胞对VEGF的表达较非缺氧组RPE细胞显著增加 (P <0 .0 1 ) ;较对照组 ,PMA可增强缺氧状态下RPE细胞VEGF的表达 (P <0 .0 1 ) ,Chelerythrine则减弱VEGF的表达 (P <0 .0 1 ) .结论 :缺氧诱导VEGF在RPE细胞中的表达 ,其信号传导途径部分是通过PKC通路实现的