结核杆菌特异性单克隆抗体研究

目的 :制备结核菌特异性单克隆抗体 ;检测患者胸 (腹 )水、脑脊液中结核菌特异性抗原。方法 :制备特异性单克隆抗体 ,制备兔抗结核菌高效价多克隆抗体血清 ;DOT -ELISA法检测患者胸、腹水或脑脊液中结核菌特异性抗原。结果 :检测结核性胸 (腹 )水、结核性脑膜炎和脑结核球患者的脑脊液、恶性胸水、脑囊虫患者的脑脊液 ,结核菌抗原检查阳性率分别为 75 %、10 0 %、5 8%、0 %和 0 %。结论 :为结核性胸 (腹 )膜炎 ,结核性脑膜炎、脑结核球的诊断和鉴别诊断提供了快速、简便、准确的检查方法     

100例结核病聚合酶链反应与结核菌检测对比观察(摘要)

目前我国对结核病的诊断主要依靠K线胸片、痰涂片镜检和结核杆菌培养。痰涂片染色者抗酸杆菌阳性率不高,而结核菌培养则需要2～8周时间,用免疫学方法检测结核菌抗原或抗体,由于灵敏度和特异性不足,对临床诊断的参考价值亦有限。聚合酶链反应(以下简称PCR)检测结核菌是近年来结核病快速诊断的重要方法,是结核病早期诊断的主要手段之一,现已广泛用于临床。现将我们收集的100例各种类型活动期结核病采用PCR技术和结核杆菌检测法的检测结果对比分析如下。     

鸡尾酒抗原在结核病诊断中的价值

目的探讨多种结核特异性抗原联合应用在结核病诊断中的价值。方法分别以结核菌的脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)和38kDa、16kDa特异蛋白做抗原,比较两种胶体金方法在结核病诊断上的敏感性和特异性。结果以脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)为抗原的方法的敏感性为51.6%,特异性为65%;采用三种结核菌特异蛋白做抗原的方法的敏感性为88.3%,特异性为91.7%。结论鸡尾酒抗原(即联合采用多种结核特异性抗原)可提高结核病诊断的敏感性和特异性。     

检测结核抗体诊断结核病价值的研究

目的:研究结核抗体在活动性结核病诊断和监测病情变化的临床意义。方法:观察血清结核抗体在各类结核患者的敏感性和特异性,与脑脊液,胸腹水结核抗体的关系,与痰涂片及PPD皮试的一致性,以及与疾病转归的关系。结果:血清结核抗体诊断结核病的敏感性为82.6％,特异性为90.2％,脑脊液、胸腹水结核抗体阳性OD值>血清结核抗体阳性OD值对诊断结核性脑膜炎、结核性胸膜炎及腹膜炎具有定性定位价值,与痰涂片阳性和PPD皮试阳性的一致率分别为89.8％和75.2％,结核抗体水平与病情变化有一定相关性。结论:结核抗体可用来诊断活动性结核病及评估结核病的转归。     

不同检验方法对肺结核早期诊断的应用

目的 通过不同的检验方法对肺结核患者进行检查,以确定不同检验方法在诊断上的应用意义.方法 对患者进行痰、胸水、血清聚合酶健反应(Polyerase Chain Reaction PCR)和涂片结核菌检查及皮肤结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)试验,并用18例非结核病志者作为对照组.结果 患者痰、血清和胸水结核杆菌的检出阳性率明显高于涂片法和PPD皮试法,其中尤以胸水PCR检测阳性率最高为76.5%.与国内大多丧文献报道的56%-87%结果相仿.结论 PCR检测技术对临床上肺结核病的诊断和鉴别诊断有较高的应用价值.     

PCR扩增产物凝胶电泳与微孔板反相杂交技术比较

九十年代初 ,随着聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术的临床应用 ,由于受诸多因素的影响 ,特别是结核分枝杆菌检测结果容易出现假阳性及假阴性 ,给临床诊断带来困难[1] 。我室引进微孔板反相杂交技术 ,采用特异性结核菌探针 ,对 (ＰＣＲ)扩增产物进行液相杂交分析 ,从而提高结核菌检测的特异性和灵敏度 ,以鉴别其假阳性 ,为临床提供准确可靠的依据。1　材料与方法1 1　材料临床疑诊结核病标本共 5 0份 ,其中胸水 15份、痰 30份、腹水 3份、尿液 2份。引进上海复星高科技 (集团 )有限公司 ,结核分枝杆菌微孔板反相杂交梳试剂盒。1 2　方法1 2 1　标…     

结核菌特异性抗体在肺结核诊断中的临床意义

既往,肺结核的诊断,临床医师一直依赖于胸片及痰菌的检查。随着临床检验技术不断进步和免疫酶标电泳技术的广范应用,国内外学者研究发现,检测机体内结核菌特异性IgG抗体,应用于临床结核病诊断,更具有其特异性和敏感性。本文应用免疫酶标电泳技术,对83例肺结核患者,进行了血清结核菌特异性抗体检测,现报道如下。     

结核病实验室诊断技术

结核病被列为我国重大传染病之一,早期发现和早期诊断结核病患者是减少传播机会、控制结核病疫情的关键环节。因此结核病实验室诊断技术,在控制和消灭结核病上起着决定性的作用。痰涂片镜检、痰结核菌培养法具有简便、快速、价廉等特点,是结核病早期诊断的金标准。但是对于涂阴、培阴、无痰及L型结核菌的肺结核病人则难以诊断。PPD试验、血清结核抗体检查对结核病的诊断有一定参考价值,但无法区分BCG接种、既往感染和正在感染,而且其灵敏性和特异性不理想。随着分子生物学技术的发展,基因诊断技术因具有较高的敏感性、特异性而日益显示其优越性。目前用于结核分枝杆菌诊断的方法有聚合酶链反应(PCR)、DNA探针技术、基因芯片技术。PCR技术具有快速、特异、灵敏和可无培养依赖性特征。DNA探针技术用于结核病的诊断,及进行菌种鉴定与分类。DNA序列测定不但为结核病的诊断和鉴别诊断提供准确病原学依据而且作为鉴定结核分枝杆菌耐药基因突变的重要手段。基因芯片法(GCT)具有高效率、微型化、自动化、成本低、防污染等特点。总之将这些诊断方法不断进行改进。在临床工作中将各种诊断技术有机的结合,综合分析,合理的为临床服务;从而做出正确的诊断,以使结核病能够得到及时发现、早期治疗,结核病疫情得以控制。     

T-Spot试验在结核病诊断中的价值

目的 评价T-Spot检测在结核病诊断中的作用。方法 回顾性分析2016年1月1日至2016年9月30日在同济大学附属肺科医院同批次进行T-Spot、痰液结核菌培养、痰结核菌荧光染色涂片、痰TB-SAT和结合抗体检测的患者479例,计算T-Spot试验在结核病诊断中的灵敏度、特异度、阴阳性预测值,评价T-Spot检测在在结核病诊断中的作用。 结果 T-Spot检测的灵敏度为96.47%(355/368),特异度为78.38%(87/111),阳性预测值93.67%(355/379),阴性预测值为87%(87/100)。T-Spot在肺结核和肺外结核中的敏感性分别为96.77%(270/279)和95.5%(85/89),特异性为78.38%(87/111),两者差异无统计学意义(P＞0.05)。T-Spot试验灵敏度高于痰液结核菌培养、痰结核菌荧光染色涂片、痰TB-SAT和结合抗体检测,差异有统计学意义(P＜0.05)。外周血T-Spot检测联合TB-Ab检测敏感性为98.10%(361/368),对比T-Spot单项检测差异有统计学意义(P＜0.05)。菌阴性结核患者T-Spot检测敏感性为95.48%(148/155),特异性为92.47%(86/93),肺结核与肺外结核患者差异无统计学意义。 结论 T-Spot检测可辅助临床诊断或排除结核,T-Spot检测联合血清结合抗体检测可提高结核患者检出率,T-Spot检测有助于菌阴性结核患者的诊断。     

结核病学

一、结核病的实验室研究结核病的快速、敏感和特异诊断技术为结核病研究的一个重要课题.聚合酶链反应(PCR)基因诊断技术是一个重大突破.近年来国内有较多有关PCR检测结核茵的报道,包括痰、胸水和脑脊液(CSF)等在内的各种结核标本中PCR阳性率在56.9%~96.2%,显著高于培养对照组,其特异性也高,非结核标本对照组大多为阴性.有报道PCR早期诊断结核性胸水的特异性高达100%,比生物亲和素系统ELISA法对照组特异性为高(86.7%);对CSF的检测其敏感性高于酶斑免     

结核菌RNA与抗酸杆菌涂片及结核菌DNA检测的临床对比分析

目的通过结核菌RNA检测技术可以快速诊断活动性结核病。方法取3998例疑似结核病及结核病病人的同一标本本,同时做结核菌RNA与抗酸分枝杆菌涂片及结核菌DNA检测,对3组检测结果进行对比分析。结果对3组实验检测结果进行对比分析,结核菌检出率,结核菌RNA DNA抗酸分枝杆菌涂片的阳性率分别为48.47%;47.40%;12%。结论 SAT技术2 h即可报告结果,其灵敏度和特异性非常高,能确定是活菌,同时能区分结核分枝杆菌(MTB)和非结核分枝杆菌(NTM)。是目前最新的结核菌检测技术,真正实现结核病早诊断早治疗,达到有效控制和消灭结核病的目标。     

结核菌快速培养法与γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的应用价值

目的 探讨结核菌快速培养法与γ-干扰素释放试验在结核病诊断中的应用价值.方法 选择2013年11月至2014年7月在我院进行检查的与结核病密切接触者180例,均进行结核菌快速培养法与γ-干扰素释放试验检测结核杆菌,以结核分枝杆菌培养结果为对照,分析两种检测方法结核杆菌阳性检出率的敏感性及特异性,并分析导致结核菌快速培养法误诊的危险因素.结果 结核菌快速培养法和γ-干扰素释放试验结核菌检出阳性率分别是13.3％ 和16.1％,两者比较差异无统计学意义(P＞0.05).以结核分枝杆菌培养结果为金标准,结核菌快速培养法和γ-干扰素释放试验的诊断敏感性分别为70.0％和96.7％,特异性分别为98.0％和100.0％.γ-干扰素释放试验的诊断敏感性明显高于结核菌快速培养法,差异有统计学意义(P＜0.05 ).logistic多元回归分析表明年龄和既往结核史是导致结核菌快速培养法误诊的主要因素 (P＜0.05 ).结论 相对于结核菌快速培养法,γ-干扰素释放试验结核病诊断的敏感性更高.     

酶联免疫斑点试验在骨关节结核中的辅助诊断价值

目的探讨评价酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在骨关节结核病中的辅助诊断价值。方法对骨关节结核病组30例和对照组21例患者,应用ELISPOT试验检测结核菌特异性6kD早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和10kD培养滤过蛋白(CFP-10)刺激后外周血中释放γ-干扰素的特异性T细胞。同时对关节穿刺液或手术标本进行涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)检测结核菌特异DNA以及病理检查诊断。结果骨关节结核病患者中ELISPOT检测敏感性为96.7%(29/30),特异性为76.2%(16/21),阳性预测值、阴性预测值和阳性似然比分别为85.3%、94.2%和2.86。抗酸杆菌涂片、结核菌培养、PCR和病理诊断的敏感性分别为23.3%(7/30),30.0%(9/30),46.7%(14/30)和93.3%(28/30)。结论 ELISPOT检测方法在骨关节结核病中具有一定的辅助诊断价值,其敏感性明显高于临床常规检测方法。     

痰结核菌培养前停药与不停药阳性率观察

痰结核菌培养为其细菌学诊断重要方法之一,有利于对结核病的确诊,关于结核病培养前停药与不停药,目前国内外尚无统一规定。兹将我院于1980年1月至4月对住院结核病患者100例,以停药与不停药进行痰结核菌培养作为比较,介绍如下。     

血清抗结核抗体检测对肺结核诊断的价值

（1）目的 比较血清抗结核分支杆菌抗体、结核菌素（PPD）皮试及痰结核菌涂片对活动性结核病诊断的意义。（2）方法 检测血清抗结核分支杆菌抗体在各类结核病人中的灵敏度和特异度以及与痰涂片查结核菌、PPD皮试的一致性。（3）结果 血清抗结核分支杆菌抗体诊断结核病的灵敏度为70．4％，特异度为94．0％，与痰涂片阳性和PPD皮试阳性的一致率分别为67．4％和64．8％。（4）结论 血清抗结核分支杆菌抗体与PPD皮试及痰结核菌涂片一样，可作为诊断结核病的一种辅助检查方法。     

Taqman荧光探针技术检测结核分枝杆菌

目的：比较Taqman荧光探针技术与常规PCR电泳技术检测结核分枝杆菌的灵敏度及特异性，评价Taqman荧光探针技术（Taqman技术）检测临床标本中结菌的应用价值。方法：应用细菌培养法，常规PCR电泳技术与Taqman技术检测300份临床结核病患者痰标本及50份非结核呼吸系统疾病患者痰标本。结果：细菌培养法检测结核阳性率为112/300；常规PCR电泳技术检测结核菌阳性率为169/300，特异性96%；Taqman荧光探针技术检测结核菌阳性率为141/300，特异性100％。结论：Taqman荧光探针技术是一种全新的PCR分子杂交模式，集PCR扩增、荧光探针杂交、荧光检测一体化，在单一管内完成，简便、快速、防污染、敏感性高、特异性强，是结核病辅助诊断的有效方法。     

痰Xpert MTB/RIF检查对涂阴肺结核的诊断价值

目的:探讨痰Xpert MTB/RIF检查对涂阴肺结核快速诊断中的应用价值。方法:研究组选取在我院确诊的涂阴肺结核90例,对照组选取我院同一时期住院期间诊断为肺部其他疾病患者40例,对两组患者均行痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养(BACTEC960)及血结核抗体检查,比较不同方法在涂阴肺结核患者中的阳性率及痰Xpert MTB/RIF在涂阴肺结核与对照组的敏感性。结果:涂阴肺结核组痰Xpert MTB/RIF、痰结核菌快速培养、血结核抗体的敏感性分别为80%,45.6%,25.6%;痰Xpert MTB/RIF与其他二者相比有明显差异(P<0.01);特异性分别为45%、97.5%、95%。结论:痰Xpert MTB/RIF检查在涂阴肺结核诊断中具有快速、敏感性及特异性高的优点。     

结核菌快速培养法与γ-干扰素释放试验在诊断结核病中的临床意义

目的 探究结核菌快速培养法、γ-干扰素释放试验在诊断结核病中的临床意义.方法 选取2018年2月至2020年3月本院收治的疑似结核病患者66例作为研究对象,均进行结核菌快速培养法、γ-干扰素释放试验,并以结核分枝杆菌培养试验结果作为金标准,比较两种检测方法的诊断符合率、特异性、敏感度.结果 66例疑似结核病患者经结核分枝杆菌培养试验,共确诊结核病患者29例,非结核病患者37例;γ-干扰素释放试验诊断符合率(89.39％)、敏感度(82.76％)、特异性(94.59％)均高于结核菌快速培养法(69.70％、58.62％、78.38％),差异有统计学意义(P<0.05).结论 γ-干扰素释放试验诊断结核病的敏感度及特异性均高于结核菌快速培养法,有助于指导临床医生制定合理、科学的治疗方案,控制病情进展,改善临床结局,值得临床推广运用.     

噬菌体裂解法在结核菌检测中的研究进展

噬菌体生物扩增法(PhaB)是一项接近于细菌培养的微生物学实验室技术,它能快速准确地检出结核分枝杆菌以及检测结核菌的药物敏感性,近年来在结核病诊断研究中备受关注。PhaB是一种敏感度和特异性均较高的方法。本文就分枝杆菌噬菌体的特性、在快速检测结核菌及药敏试验中应用研究进展予以综述。     

结核感染T细胞斑点检测在综合医院应用评价

<正>结核病是一呼吸道传染病,在综合医院结核病的鉴别诊断是一直困扰临床医师的难题,目前尚无一个理想的诊断技术针对结核病的早期诊断及鉴别诊断,结核菌涂片、培养、酶标法、聚合酶链反应(PCR)、快速培养、结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)、蛋白芯片等,都有各自的不足。结核感染T细胞斑点检测技术(T-SPOT.TB)是细胞免疫介导的结核菌γ干扰素释放(IGRA)试验,其应用为临床结核病的诊断及鉴别诊断提