芫花根总黄酮对小鼠细胞免疫功能的调节作用

目的　探讨芫花根总黄酮对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法　以小鼠迟发性超敏反应、小鼠腹腔巨噬细胞IL 1的分泌、小鼠T淋巴细胞增殖和IL 2生成 ,以及小鼠Ts细胞亚群等指标评价芫花根总黄酮对小鼠细胞免疫功能的影响。结果剂量为 12 .5～ 5 0mg·kg-1·d-1的芫花根总黄酮 ,对环磷酰胺诱导的小鼠免疫功能的增强和减弱均有显著的下调和提升作用 ;浓度为 12 5～ 5 0 0 μg·ml-1的芫花根总黄酮 ,可促进腹腔巨噬细胞分泌IL 1;剂量为 3.12 5～ 2 5mg·kg-1·d-1的芫花根总黄酮 ,可显著促进ConA诱导的小鼠T淋巴细胞增殖、IL 2的分泌 ,并呈剂量依赖性的量效关系 ;单独使用 2 5～ 5 0mg·kg-1·d-1的芫花根总黄酮 ,可显著减弱超适量 2 ,4 -二硝基氯苯诱导的小鼠的免疫耐受 ,与环磷酰胺合用能增强超适量 2 ,4 -二硝基氯苯引起的小鼠免疫耐受。结论　芫花根总黄酮对小鼠的细胞免疫功能具有调节作用。     

芫花根醇提物弱极性组分化学成分及抗炎活性研究

目的 阐明芫花根醇提物弱极性组分化学成分及其对急性炎症的抑制活性。方法芫花根醇提物以硅胶柱层析,石油醚／丙酮梯度洗脱。以GC-MS分析弱极性组分的化学成分。以角叉菜胶致大鼠足肿胀和小鼠网状内皮系统对刚果红吞噬活性为模型,评价其对急性炎症的抑制活性。结果芫花根醇提物经硅胶柱层析得5个弱极性组分(F1～F5),GC-MS共检出98种化合物,其中脂肪族化合物48种,芳香族化合物24种,主要成分为苯甲酸酯衍生物。倍半萜1种,生物碱9种,三萜7种,其主要成分为齐墩果烷衍生物。甾族化合物9种。F1～F5对角又菜胶致大鼠足肿胀有显著的抑制作用,能显著提升小鼠网状内皮系统对刚果红的吞噬作用。结论芫花根醇提物弱极性组分中的苯甲酸酯衍生物、甾族化合物和齐墩果烷衍生物是其具有抗炎活性的物质基础。     

芫花根HPLC色谱指纹图谱研究

目的建立芫花根HPLE色谱指纹图谱,为芫花根有效成分筛选、药理毒理学、药物代谢动力学以及脱毒提取工艺研究提供可靠的检测方法。方法利用柱层析(硅胶,Sephadex LH-20)从芫花根乙醇提取物中分离代表性化合物;以HPLE方法,梯度洗脱,分别测定不同地区芫花根各样品10批。色谱条件：流动相A为甲醇;流动相B为水(乙酸调pH为3．0)。梯度洗脱A/B体积比：0～20min,35／65;21～40min,45／55;41～60min,50／50;61～85min,65／35,分析时间120mine,流速：1ml／min,柱温：35℃。结果10批芫花根乙醇提取物得到的色谱指纹图谱有23个共有峰,可分为6个区段。保留时间0～11min出现2小峰;保留时间11～23min出现2个峰;保留时间23～35min出现1峰;35～66min出现14个峰,主要特征峰6,7,11,12,13,18,19号峰在此区域,峰13为最强峰;66～72min出现1个峰,72～85min出现3个峰。不同产地的芫花根指纹图谱有一定差异。结论芫花根乙醇提取物HPLE指纹图谱具有很强的特征性及专属性,可作为检测方法用于芫花根黄酮、香豆素类化合物有效成分筛选、协同作用、药代动力学、毒理学以及芫花根脱毒提取工艺研究。     

γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响

目的观察γ射线照射对脐血淋巴细胞增殖和NK细胞活性的影响。方法取正常分娩的新生儿脐带血,体外肝素抗凝,应用常规密度梯度离心法分离脐血单个核细胞(MNC),计数并调整细胞浓度。Gamma Cell 1000数控细胞照射仪体外照射脐血MNC细胞,吸收剂量率3.72 Gy/min。①采用3H-TdR掺入法测量脐血淋巴细胞增殖:取已分离的单个核细胞,调至细胞浓度1×106个/ml,接受0.248、0.496、0.992、1.984、3.9685、.952、7.936和15.872 Gyγ射线照射。照射后继续培养56 h后加3H-TdR(3.7×107Bq/孔)再培养8 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数(计数/min)。②采用3H-TdR释放法检测脐血NK细胞活性:取传代培养24~48 h的K562细胞为靶细胞,调整浓度1×106个/ml,加入3H-TdR(3.7×108Bq/ml)孵育6 h,洗涤2次去除游离的3H-TdR,再制备成5×105个/ml备用。脐血单个核细胞调整细胞浓度为1×107个/ml作为效应细胞(效靶比20∶1),给以上述不同剂量γ射线照射。将效应细胞与制备好的靶细胞继续培养18 h后收集细胞,用Beckman液体闪烁计数器计数放射性核素每分钟闪烁数。结果在γ射线对脐血淋巴细胞增殖活性影响的研究中,0.248~15.872 Gyγ射线照射显著降低淋巴细胞增殖能力,增殖活性抑制程度与辐射剂量呈正相关(r=0.839,P<0.05);3.968 Gyγ射线照射组增殖活性仅为对照组的30.86%(P<0.01),SI=7.8,其中3.968~15.872 Gyγ射线照射未发现其明显的增殖活性。而γ射线对脐血NK细胞活性的影响的观察中发现0.248~1.984 Gyγ射线照射可引起脐血NK细胞活性显著增高(P<0.01);3.968 Gyγ射线照射保持NK细胞活性,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);5.952~15.872 Gyγ射线可引起脐血淋巴细胞NK细胞活性显著降低(P<0.01)。结论3.968 Gyγ射线照射完全抑制脐血淋巴细胞增殖的同时仍呈现脐血NK细胞抗肿瘤活性。因此,在进行供者淋巴细胞输注或混合脐血移植时,应用3.968 Gyγ射线照射淋巴细胞,再进行过继性细胞免疫治疗可能降低移植物抗宿主病效应,同时不影响移植物抗白血病效应;混合脐血移植时增强移植物抗白血病效应。     

青蒿素及其衍生物体外抗肿瘤活性研究

目的研究青蒿素及其衍生物体外抗肿瘤活性。方法采用四甲基偶氮唑盐法测定青蒿素、双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯体外抑制人肺癌细胞、人胃癌细胞、人结肠癌细胞、人红白血病细胞和人肝癌细胞的活性。结果青蒿素、双氢青蒿素、蒿甲醚和青蒿琥酯对5株肿瘤细胞有选择性的抑制作用。结论青蒿素及其衍生物在体外对不同的肿瘤细胞有抑制活性。     

黄芪、昆明山海棠对系统性红斑狼疮自然杀伤活性的调节

系统性红斑狼疮(SLE)普遍存在自然杀伤(NK)细胞活性损害,其机理尚不完全明了,考虑与发病有关。本文报告SLE患者周围血单一核细胞(PBMC)的NK活性及其与疾病活动的关系,检测SLE患者PBMC的自然杀伤细胞毒因子(NKCF)活性,并着重研究黄芪和昆明山海棠在体外对正常人和SLE患者NK活性及其释放NKCF的调节作用。     

3，3’-(二硒双甲叉)双(5-羟基-6-甲基 4-吡啶甲醇)的合成及抗肿瘤活性

目的：合成新的具有抗肿瘤活性的含硒有机化合物。方法：以维生素B6为原料．经氯化、水解、再同二硒化钠反应,合成已知药物脑复新的硒代产物3,3’-(二硒双甲叉)双(5-羟基-6-甲基4-吡啶甲醇)。结果：产物结构经IR、^1HNMR、MS和元素分析确证。结论：对该化合物进行了抗肿瘤试验,发现具有一定的抗肿瘤活性。     

高强度聚焦超声对中晚期肝癌患者机体免疫细胞及其活性的影响

目的 观察高强度聚焦超声(HIFU)对中晚期肝癌患者的机体免疫细胞及其活性的影响.方法 HCC患者30例,经全身麻醉、超声肿瘤定位进行HIFU治疗,采用流式细胞仪及双抗体夹心法检测治疗前、后外周血T细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)、NK细胞的百分率及sIL-2R的变化.采用LDH释放法检测NK细胞的杀伤活性.结果 HIFU治疗后CD3+、NK细胞的百分率明显升高(P＜0.05),NK细胞杀伤活性也升高(P＜0.05),而CD8+细胞的百分率及sIL-2R的水平明显降低(P＜0.05).结论 HIFU具有激活机体免疫细胞活性作用,可使机体的免疫功能得到一定程度的改善.     

提高同种异体LAK细胞杀伤活性的实验研究

用欲攻击的瘤组织细胞与同种异体LAK细胞共育,并在治疗前给受试动物体内注射经超声粉碎的瘤细胞抗原与单独应用LAK细胞相比较,抑制瘤细胞生长率从33.3%提高至75.0%,抑制肺转移率从50.0%提高至83.3%,带瘤小鼠平均存活无数由35.3天延长至48.7夭,体外攻击试验也证实经处理过的LAK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤率明显提高.     

新月菱形藻胞外多糖抗病毒活性研究

目的阐明新月菱形藻胞外多糖(exopolysaccharidesofNitzschiaclosterium,EPN)及其硫酸酯(sulfatedexopolysaccharidesofNitzschiaclosteriumSEPN)的体内抗流感病毒活性。方法以流感病毒亚甲型小鼠肺炎适应株(FM1)对小鼠鼻吸入法造模,EPN和SEPN对染毒小鼠灌胃,以对小鼠肺指数抑制率作为体内抗病毒活性指标,同时观察小鼠的胸腺和脾脏指数;以MTT法检测EPN和SEPN对小鼠淋巴细胞增值和对NK细胞杀伤的促进作用。结果EPN和SEPN都显示出体内抗流感病毒作用,其中,中剂量组(100mg·kg-1)作用最为显著。与同等剂量的EPN相比,SEPN对FM1病毒表现出更为显著的体内抗病毒活性。EPN和SEPN均能不同程度地提高染毒小鼠的胸腺指数和脾脏指数,显著地促进小鼠淋巴细胞的增值反应,提升小鼠NK细胞的杀伤活性。结论新月菱形藻胞外多糖及其硫酸酯可能通过促进淋巴细胞增值,增强NK细胞的杀伤活力实现对FM1病毒的抑制作用。其中SEPN还通过自身携带的负电荷与病毒颗粒的正电荷相互作用阻止病毒进入宿主细胞从而抑制其复制来发挥抗病毒作用。