植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响与补充外源性17β-雌二醇的比较

背景天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景. 目的探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用进行比较分析. 设计观察对比实验. 单位首都医科大学病理生理学教研室和中国医学科学院中国协和医.科大学基础医学研究所病理生理学系. 材料实验于2003-07/09在首都医科大学实验动物科学部完成.选择36只12周龄健康雌性Wistar大鼠,体质量(250±10)g,清洁级,随机分为4组,假手术对照组、去卵巢组、去卵巢+17β-雌二醇组及去卵巢+α-玉米赤霉醇组各9只. 方法假手术对照组开腹而不摘除卵巢.去卵巢组在无菌条件下摘除双侧卵巢复制去卵巢动物模型.去卵巢+17β-雌二醇组和去卵巢+α-玉米赤霉醇组分别在去卵巢14 d后肌注17β-雌二醇(1 mg/kg)和α-玉米赤霉醇(1mg/kg),3 d注射1次,共35 d.实验结束后大鼠经颈总动脉采血,分离血浆备用.用凝固法测定血浆凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间.用全自动生化分析仪测定血浆纤维蛋白原水平.用酶联免疫吸附法测定血浆组织因子水平.组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活剂抑制物活性测定均采用发色底物法.同时分离子宫,计算子宫质量与体质量的比值. 主要观察指标①血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原水平、血浆组织因子水平、组织型纤溶酶原激活剂活性及纤溶酶原激活剂抑制物活性.②子宫质量/体质量的比值. 结果36只大鼠全部进入结果分析.①凝血酶原时间变化去卵巢组显著短于假手术对照组(P＜0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后长于去卵巢组(P＜0.05～0.01).②纤维蛋白原和组织因子水平变化去卵巢组显著高于假手术对照组(P＜0.05～0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后低于去卵巢组(P＜0.05～0.01).③组织型纤溶酶原激活剂活性变化去卵巢组显著低于假手术对照组[(0.33±0.33)μkat/L,(4.00±1.50)μkat/L,(q=9.43,P＜0.01)].补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后[(1.83±0.67)μkat/L,(1.17±0.83)μkat/L]显著高于去卵巢组(q=13.30,P＜0.01;q=5.00,P＜0.05).④纤溶酶原激活剂抑制物活性变化去卵巢组显著高于假手术对照组[2.33±0.67)μkat/L,(1.17±0.33)μkat/L,(q=10.5,P＜0.01)].⑤子宫质量/体质量比值去卵巢+α-玉米赤霉醇组明显低于去卵巢+17β-雌二醇组[0.66,1.96,(q=14.67,P＜0.01)]. 结论补充外源性17β-雌二醇或α-玉米赤霉醇后,均可使去卵巢大鼠重新建立起凝血-纤溶的动态平衡,表明α-玉米赤霉醇具有同17β-雌二醇相似的心血管保护作用,且其致子宫增生的副作用明显小于17β-雌二醇,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物.     

17β-雌二醇对去卵巢SD大鼠离体骨组织微损伤的影响

目的 :观察 17β 雌二醇对不同时期去卵巢SD大鼠离体骨组织微损伤的影响 ,评价抗骨质疏松药物的防治效果及评价指标。方法 :10月龄SD大鼠 90只 ,随机分为 3组各 30只 ,每组分成去卵巢组 (OVX组 )、17β 雌二醇替代组(EST组 )和对照组 (SHAM组 ) 3个小组 ,分别于去卵巢后 3、15和 2 1周时处死大鼠 ,右侧胫骨上端行常规骨形态计量学观察 ,对第 4离体椎骨进行疲劳损伤后观测微损伤。结果 :疲劳损伤后每块骨组织磨片均可见微损伤 ,以微破裂最常见 ,各组间及小组间比较差异均无显著性。骨小梁单位面积百分率微破裂长度和数目在 3周时出现OVX组明显低于EST组 ,与SHAM组比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;15周时 3组差异消失 ,2 1周时OVX组明显大于其它 2组 (P <0 0 5 ) ,EST组与SHAM组比较差异均无显著性 (P >0 0 5 )。结论 :10月龄SD大鼠去卵巢后早期尚不表现出骨结构性能的下降 ,17β 雌二醇早期应用可使骨结构性能提高 ,且应用至去卵巢后较晚时期显示出良好的抗骨结构性能下降效果。单位骨小梁面积百分率的微破裂长度和数目可反映药物对骨质疏松的影响 ,可作为骨结构性能的评价指标。观察时间以去卵巢后 2 1周较佳。     

植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉血管的舒张效应

目的：观察植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉的舒张作用及其途径。 方法：实验于2005—09／12在首都医科大学病理生理学教研室完成。选取健康成年雌性Wistar大鼠17只，采用体外血管灌流的方法，用10-6mol／L苯肾上腺素预收缩血管，将10^-6mol几乙酰胆碱对血管环是否有舒张反应作为判断血管内皮是否完整的标准。观察α-玉米赤霉醇对血管内皮完整和去内皮胸主动脉的舒张作用，以及内皮型一氧化氮合酶抑制剂左旋硝精氨酸甲酯、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝、钙激活钾通道阻断剂四乙胺、ATP敏感钾通道的阻断剂格列本脲、L-型钙通道激动剂（-）BayK8644（10^-6mol／L）及雌激素受体阻断剂ICI182，780对这一过程的影响。各种药物对血管环的作用强度用最大舒张率表示，即加药后收缩幅度与加药前收缩幅度的百分比。 结果：纳入大鼠17只，共取得胸主动脉环68个，共8个不合格予以剔除，其余60个胸主动脉环均用于实验。①α-玉米赤霉醇（10^10-10^-5mol／L）可引起内皮完整的胸主动脉剂量依赖性的舒张效应；去内皮血管的最大舒张率显著低于同浓度内皮完整血管（P〈0．05～0．01）。②左旋硝精氨酸甲酯和亚甲蓝均可抑制α-玉米赤霉醇对胸主动脉的舒张作用，使两组胸主动脉环的最大舒张率显著降低（P〈0．05-0．01）。⑧四乙胺、格列本脲、BayK8644可以减弱α-玉米赤霉醇的舒张血管作用（P〈0．05-0．01），雌激素受体特异性阻断剂ICI182，780对10^-6mol/Lα-玉米赤霉醇的舒张作用无显著影响（P〉0．05）。 结论：α-玉米赤霉醇可引起内皮依赖性的胸主动脉舒张，其作用与一氧化氮合酶／一氧化氮系统激活、钙激活钾通道和ATP敏感钾通道开放、钙通道抑制有关，但与雌激素受体无关。α-玉米赤霉醇的舒张血管效应可能是其心血管保护途径之一。     

植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉血管的舒张效应

目的:观察植物雌激素α-玉米赤霉醇对大鼠胸主动脉的舒张作用及其途径。方法:实验于2005-09/12在首都医科大学病理生理学教研室完成。选取健康成年雌性Wistar大鼠17只,采用体外血管灌流的方法,用10-6mol/L苯肾上腺素预收缩血管,将10-6mol/L乙酰胆碱对血管环是否有舒张反应作为判断血管内皮是否完整的标准。观察α-玉米赤霉醇对血管内皮完整和去内皮胸主动脉的舒张作用,以及内皮型一氧化氮合酶抑制剂左旋硝精氨酸甲酯、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝、钙激活钾通道阻断剂四乙胺、ATP敏感钾通道的阻断剂格列本脲、L-型钙通道激动剂(-)BayK8644(10-6mol/L)及雌激素受体阻断剂ICI182,780对这一过程的影响。各种药物对血管环的作用强度用最大舒张率表示,即加药后收缩幅度与加药前收缩幅度的百分比。结果:纳入大鼠17只,共取得胸主动脉环68个,共8个不合格予以剔除,其余60个胸主动脉环均用于实验。①α-玉米赤霉醇(10-10～10-5mol/L)可引起内皮完整的胸主动脉剂量依赖性的舒张效应;去内皮血管的最大舒张率显著低于同浓度内皮完整血管(P<0.05～0.01)。②左旋硝精氨酸甲酯和亚甲蓝均可抑制α-玉米赤霉醇对胸主动脉的舒张作用,使两组胸主动脉环的最大舒张率显著降低(P<0.05～0.01)。③四乙胺、格列本脲、BayK8644可以减弱α-玉米赤霉醇的舒张血管作用(P<0.05～0.01),雌激素受体特异性阻断剂ICI182,780对10-6mol/Lα-玉米赤霉醇的舒张作用无显著影响(P>0.05)。结论:α-玉米赤霉醇可引起内皮依赖性的胸主动脉舒张,其作用与一氧化氮合酶/一氧化氮系统激活、钙激活钾通道和ATP敏感钾通道开放、钙通道抑制有关,但与雌激素受体无关。α-玉米赤霉醇的舒张血管效应可能是其心血管保护途径之一。     

不同压力二氧化碳气腹对腹腔镜胆囊切除术患者凝血及纤溶功能的影响

目的观察不同压力二氧化碳(CO_2)气腹对腹腔镜胆囊切除术患者凝血及纤溶功能的影响。方法选择择期行腹腔镜胆囊切除术患者60例,根据气腹压力不同随机分为两组:低压力组(10mm Hg)和高压力组(14mm Hg),每组30例。于术前、术后1h、术后24h抽取静脉血,检测凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(DD)水平,以及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。结果在各时间点,两组PT、AST、ALT水平比较,差异均无统计学意义(P0.05)。两组术后24h的APTT较术前均明显缩短(P0.05);两组FIB、DD水平较术前均明显升高(P0.05),且高压力组的FIB、DD水平升高幅度显著大于低压力组(P0.05)。结论腹腔镜胆囊切除术低气腹压力和高气腹压力均可导致术后高凝状态,但低气腹压力对凝血和纤溶功能影响较小,有利于预防静脉血栓形成。     

中药降糖通脉方对2型糖尿病大鼠凝血和纤溶功能影响的实验研究

目的 观察2型糖尿病大鼠凝血和纤溶活性及降糖通脉方的干预作用.方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组、胰激肽原酶组及降糖通脉方组,每组10只.经尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)并以高糖高脂饲料喂养诱导制备2型糖尿病大鼠模型.采用发色底物法检测大鼠血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)水平;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定主动脉组织型纤溶酶原激活物(t-PA)及其抑制物纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的mRNA表达.结果糖尿病模型组血浆TAFI水平和主动脉PAI-1 mRNA表达均较正常对照组明显增高,主动脉t-PA mRNA表达较正常对照组明显降低(P<0.05或P<0.01).与糖尿病模型组比较,胰激肽原酶组和降糖通脉方组TAFI水平和PAI-1 mRNA表达均明显下降,t-PA mRNA表达明显增高,且降糖通脉方组作用明显(P<0.05或P<0.01).结论 2型糖尿病大鼠存在血栓前状态且纤溶功能受抑制;降糖通脉方能明显改善纤溶功能及血栓前状态,其疗效优于胰激肽原酶.     

缺氧/复氧损伤人脐静脉内皮细胞黏附分子表达与新型植物雌激素α-玉米赤霉醇的影响

目的:探讨新型植物雌激素α-玉米赤霉醇对缺氧/复氧损伤后人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的干预,并与内源性动物雌激素雌二醇的作用进行比较。方法:实验于2005-10/2006-01在首都医科大学完成。①健康产妇的婴儿脐带由首都医科大学附属宣武医院妇产科提供,产妇及其家属签署捐赠同意书。α-玉米赤霉醇(中国农业大学提纯,纯度99%以上,以乙醇作为溶剂),雌二醇(Sigma公司)。②脐静脉内皮细胞原代培养后,用质量浓度为1.25g/L的胰蛋白酶 0.1g/L的乙二胺四乙酸混合消化液进行传代,传至2～3代后用于实验。细胞以3×105/孔接种于24孔培养板,待生长至80%～90%融合后,设立10组:正常对照组、模型对照组、α-玉米赤霉醇1,10,100,1000nmol/L组、雌二醇1,10,100,1000nmol/L组,6孔/组。③除正常对照组外,其余各组细胞均复制缺氧/复氧损伤模型,置于体积分数为0.93的N2 0.05的CO2 0.02的O2缺氧环境中3h,然后恢复正常氧供应1h。α-玉米赤霉醇各组于造模前20min分别加入α-玉米赤霉醇,使细胞培养液中α-玉米赤霉醇终浓度分别达到1,10,100,1000nmol/L;雌二醇各组于造模前20min分别加入雌二醇,使细胞培养液中雌二醇终浓度分别达到1,10,100,1000nmol/L;正常对照组、模型对照组不予任何药物处理。④吸取各组上清液,按酶联免疫吸附试剂盒说明操作分别测定各孔可溶性E-选择素、细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1的含量。结果:①缺氧/复氧后各组细胞E-选择素含量的比较:与正常对照组比较,缺氧3h/复氧1h后模型对照组脐静脉内皮细胞上清液中的E-选择素含量明显升高[(1.77±0.36),(5.62±0.74)pg/L,P<0.01]。与模型对照组比较,α-玉米赤霉醇1,10,100,1000nmol/L组E-选择素含量均明显降低[(5.62±0.74),(3.53±1.21),(3.16±0.94),(2.79±1.78),(2.18±0.75)pg/L,P<0.05或0.01],雌二醇1,10,100,1000nmol/L组E-选择素含量亦均明显降低[(5.62±0.74),(3.72±0.42),(2.99±0.61),(2.45±0.99),(2.34±0.70)pg/L,P<0.01],且呈剂量依赖性。相同质量浓度的α-玉米赤霉醇与雌二醇作用差异无显著性意义(P>0.05)。②缺氧/复氧后各组细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1含量的比较:与E-选择素含量情况相似。结论:①人脐静脉内皮细胞给予α-玉米赤霉醇预处理后,可显著抑制由缺氧/复氧损伤所引起的黏附分子高表达,且呈剂量依赖性,保护内皮细胞免受炎症递质损伤。②与相同浓度的雌二醇抑制作用相似,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物。     

雌激素对去卵巢大鼠不同脑区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达的影响

背景脑中雌激素可调节淀粉样β蛋白前体蛋白的代谢与β淀粉样蛋白的产生.了解雌激素与淀粉样β蛋白前体蛋白代谢以及关键酶淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶的关系,对研究轻度认知障碍、阿尔茨海默病的发病原因具有重要作用.目的利用大鼠卵巢切除模型观察内外源性雌激素缺乏及补充外源性雌激素对大鼠脑皮质区和海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达以及血清雌激素含量的影响.设计完全随机对照实验.单位青岛大学医学院附属医院脑血管病研究所,青岛市市立医院病理科.材料实验于2003-01/12在青岛大学医学院附属医院脑病防治重点实验室完成.选择健康雌性Wistar大鼠21只,随机分为3组,每组7只.①卵巢切除组制备大鼠双侧卵巢切除模型.②卵巢切除后补充外源性雌激素治疗组(雌激素组)卵巢切除后给予苯甲酸雌二醇(1 mg/kg),每7d皮下注射1次,共4次.③假手术对照组手术过程与卵巢切除组相同,但不切除卵巢,不补充雌激素.方法①第28天时,大鼠在麻醉状态下取脑组织备用,制备冠状切片,用于免疫荧光标记细胞化学染色观察.②激光共聚焦显微镜下观察皮质区、海马CA1区红色荧光标记细胞数量.③体内雌激素水平检测大鼠眼动脉取血1.5 mL,离心取上清备用,运用放射免疫法检测大鼠血清中雌激素含量.主要观察指标①免疫荧光标记细胞化学法观察大鼠脑皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶免疫荧光细胞数的变化.②放免法测量大鼠血清雌激素含量的变化.结果21只大鼠均进入结果分析.①卵巢切除组大鼠皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶阳性细胞数显著高于对照组和雌激素组[皮质区(20.00±5.16),(5.71±3.14),(4.00±4.61)个/视野;海马CA1区(17.14±4.45),(6.85±1.95),(5.14±5.52)个/视野,P均＜0.01].②卵巢切除组血液雌激素含量显著低于对照组和雌激素组[(5.31±0.85),(22.94±9.48),(21.30±7.62)ng/L,P均＜0.01].③雌激素组各观察部位淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达阳性细胞数和血液雌激素含量与对照组接近(P均＞0.05).结论采用双侧卵巢切除的方法,造成大鼠体内雌激素缺乏,引起大鼠脑内皮质区、海马CA1区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达增多.给予卵巢切除大鼠补充外源性雌激素,其海马CA1区、皮质区淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达显著减少,说明体内外雌激素含量的变化可影响大鼠皮质和海马区域淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶表达.     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学与血清雌二醇及肿瘤坏死因子α变化的干预

目的：观察益骨胶囊预防用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学及血清雌二醇、肿瘤坏死因子α的影响.方法：实验于2003-03/10在暨南大学完成.36只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组,其余24只在手术造模后随机分为模型组及预防组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;各组均在手术后3天开始灌胃,假手术组、模型组灌胃生理盐水3 mL、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3 mL,1次/d,共24周.股骨组织脱钙切片观察骨形态学;放射免疫方法测定血清雌二醇和肿瘤坏死因子α水平,评估雌二醇抑制肿瘤坏死因子α而抗骨质疏松的作用.结果：实验过程中无实验动物死亡,均进入结果分析.[1]光镜下骨形态学改变：假手术组苏木精-伊红染色见骨小梁粗壮、饱满,着色较深,形态结构完整,骨髓腔相对较小,腔内造血细胞数量较多,模型组骨小梁纤细,着色淡,数目减少且形态结构完整性差,有的部位有扭曲和断裂,骨小梁连接点减少,游离末端增多,骨小梁间隙增大,骨髓腔增宽,骨髓腔内造血细胞减少,脂肪细胞增多,预防组骨小梁数目较多,形态结构完整,骨小梁壁厚,骨小梁连接点多,游离末端少,骨髓腔小,骨髓腔内造血细胞较多,脂肪细胞少见.[2]假手术组和预防组24周时血清雌二醇水平接近,但两者均明显高于模型组[（88.703&;#177;15.210）,（83.02.&;#177;12.007）,（27.825&;#177;10.393）ng/L,P＜0.01],前两组相接近（P＞0.05）[3]假手术组和预防组24周时血清肿瘤坏死因子α水平接近,但两者明显高于模型组[（0.906&;#177;0.258）,（1.222&;#177;0.436）,（2.900&;#177;0.788）mg/L,P＜0.01],前两组相接近（P＞0.05）.结论：实验结果显示,模型大鼠血清雌二醇水平明显降低,这是由于大鼠卵巢分泌雌二醇功能丧失,导致体内雌二醇水平下降;大鼠血清中骨吸收刺激因子肿瘤坏死因子α含量明显升高,表明在正常情况下雌二醇对肿瘤坏死因子α有一定的抑制作用,当雌二醇水平下降时,解除或降低了这种抑制作用,从而使肿瘤坏死因子α增加.在使用具有补肾活血功效的益骨胶囊预防用药后,血清雌二醇水平保持较高水平,这说明益骨胶囊能刺激体内雌激素分泌,具有类雌激素样作用;血清肿瘤坏死因子α水平下降,说明益骨胶囊预防用药对肿瘤坏死因子α可能具有下调作用.     

益骨胶囊对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学与血清雌二醇及肿瘤坏死因子α变化的干预

目的:观察益骨胶囊预防用药对去卵巢骨质疏松大鼠骨形态学及血清雌二醇、肿瘤坏死因子α的影响。方法:实验于2003-03/10在暨南大学完成。36只10月龄SD雌性大鼠随机抽取12只为假手术组,其余24只在手术造模后随机分为模型组及预防组;以双侧卵巢切除法复制骨质疏松模型;各组均在手术后3天开始灌胃,假手术组、模型组灌胃生理盐水3mL、预防组灌胃益骨胶囊水溶液3mL,1次/d,共24周。股骨组织脱钙切片观察骨形态学;放射免疫方法测定血清雌二醇和肿瘤坏死因子α水平,评估雌二醇抑制肿瘤坏死因子α而抗骨质疏松的作用。结果:实验过程中无实验动物死亡,均进入结果分析。①光镜下骨形态学改变:假手术组苏木精-伊红染色见骨小梁粗壮、饱满,着色较深,形态结构完整,骨髓腔相对较小,腔内造血细胞数量较多,模型组骨小梁纤细,着色淡,数目减少且形态结构完整性差,有的部位有扭曲和断裂,骨小梁连接点减少,游离末端增多,骨小梁间隙增大,骨髓腔增宽,骨髓腔内造血细胞减少,脂肪细胞增多,预防组骨小梁数目较多,形态结构完整,骨小梁壁厚,骨小梁连接点多,游离末端少,骨髓腔小,骨髓腔内造血细胞较多,脂肪细胞少见。②假手术组和预防组24周时血清雌二醇水平接近,但两者均明显高于模型组犤(88.703±15.210),(83.02.±12.007),(27.825±10.393)ng/L,P<0.01犦,前两组相接近(P>0.05)③假手术组和预防组24周时血清肿瘤坏死因子α水平接近,但两者明显高于模型组犤(0.906±0.258),(1.222±0.436),(2.900±0.788)mg/L,P<0.01犦,前两组相接近(P>0.05)。结论:实验结果显示,模型大鼠血清雌二醇水平明显降低,这是由于大鼠卵巢分泌雌二醇功能丧失,导致体内雌二醇水平下降;大鼠血清中骨吸收刺激因子肿瘤坏死因子α含量明显升高,表明在正常情况下雌二醇对肿瘤坏死因子α有一定的抑制作用,当雌二醇水平下降时,解除或降低了这种抑制作用,从而使肿瘤坏死因子α增加。在使用具有补肾活血功效的益骨胶囊预防用药后,血清雌二醇水平保持较高水平,这说明益骨胶囊能刺激体内雌激素分泌,具有类雌激素样作用;血清肿瘤坏死因子α水平下降,说明益骨胶囊预防用药对肿瘤坏死因子α可能具有下调作用。     

不同负荷的游泳训练及雌激素对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响

目的:观察不同负荷的游泳训练和雌激素,对去卵巢大鼠血中生化指标和骨矿盐及其密度的影响,从而为因雌性激素减少而发生骨质疏松症的患者进行运动康复提供理论依据。方法:实验于2005-09/11在徐州医学院实验动物中心实验室完成。选取3月龄清洁级雌性SD大鼠75只,按体质量分层随机分为假手术组、骨质疏松模型组、中等负荷运动组、大负荷运动组、雌激素干预组,每组15只。骨质疏松模型组、中等负荷运动组和大负荷运动组、雌激素干预组行去卵巢术,假手术组行假手术。中等负荷运动组术后1周后进行游泳训练,45min/次,6次/周,休息1d。大负荷运动组游泳条件与中等负荷运动组相同,120min/次;雌激素干预组给予17β-雌二醇20μg/(kg·d),皮下注射,2次/周。假手术组和骨质疏松模型组正常饲养。6周后,测血清中钙、磷、总碱性磷酸酶和抗酒石酸酸性磷酸酶的变化,观测大鼠股骨远端骨松质骨矿盐含量、骨松质骨矿盐密度。结果:实验过程中各组大鼠均有死亡,死亡大鼠被剔除,共纳入结果分析66只。①6周后中等负荷的游泳运动训练和雌激素干预组大鼠与骨质疏松模型组大鼠相比,血清中钙、磷浓度及总碱性磷酸酶的活性均显著或非常显著升高(P<0.05～0.01),两组钙浓度和总碱性磷酸酶的活性分别上升8.4%,11.7%;20.1%,21.2%;骨股远端总的骨矿盐含量上升39%和33.4%,而大负荷的运动训练对钙和磷的效果不明显(P>0.05)。②4组的抗酒石酸酸性磷酸酶的活性均高于假手术组,其中骨质疏松模型组和大运动量组较假手术组显著升高(P<0.01);中等负荷的游泳运动训练和雌激素干预组血中的抗酒石酸酸性磷酸酶的活性相对于骨质疏松模型组下降31.8%和35.0%,差异有非常显著性意义(P<0.01)。③与骨质疏松模型组比较,中等负荷运动组和雌激素干预组大鼠骨松质骨矿盐含量升高明显(97.1%,88.6%,P<0.01);大负荷运动组的效果不明显。结论:中等负荷的游泳训练能像注射雌激素一样改善去卵巢大鼠的骨代谢状况,提高骨的形成,抑制骨的吸收,改善骨质疏松症状。     

凝血纤溶功能变化对急性自发性脑出血出血量和神经功能缺损评分及预后的影响

目的 探讨自发性脑出血患者凝血、纤溶功能的变化对出血量、脑损伤严重程度及预后的影响.方法 30例急性脑出血患者为脑出血组,另选30例为对照组,两组患者具有相同基础疾病,分别测定血浆纤维蛋白原(Fg)、抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)活性、血小板四项计数和D-二聚体(DD).入院时脑出血组予以神经功能缺损评分,病后3个月行改良 Rankin 量表评分.观察各指标对出血量、神经功能缺损评分及预后的影响.结果 ①脑出血组Fg、AT-Ⅲ、血小板四项计数和DD于发病后48 h显著变化,与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.01).②AT-Ⅲ与出血量、神经功能缺损评分及预后有负相关关系(P均<0.05).③Fg与出血量及预后有正相关关系(P均<0.05).④DD与出血量、神经功能缺损评分及预后有正相关关系(P均<0.05).⑤血小板四项计数与出血量、神经功能缺损评分及预后无明显线性相关关系 (P均>0.05).结论 早期检测凝血纤溶功能敏感指标对脑出血患者脑损伤判断具有重要的临床价值.     

自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者血管内皮功能及凝血-纤溶系统的影响

目的探讨自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者血管内皮功能及凝血-纤溶系统相关指标血清组织纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂1 (tPAI-1)含量、血清可溶性细胞间黏附分子1(s ICAM-1)水平的影响。方法根据随机数字表法将本院收治的75例稳定型心绞痛患者分为研究组和对照组。2组均给予相同的基础干预措施和常规西药治疗,研究组在此基础上服用自拟开痹通脉汤,2组均连续治疗2个月。治疗结束后分析2组的治疗效果。治疗前后分别检测2组患者tPAI-1含量、s ICAM-1含量、血浆一氧化氮(NO)含量和血清内皮素-1 (ET-1)含量。结果研究组中医证候积分显著低于对照组(P 0.05),疗效分级情况显著优于对照组(P 0.05);治疗后,研究组血清tPAI-1、s ICAM-1及ET-1含量显著低于对照组(P 0.05),血浆NO含量显著高于对照组(P 0.05)。结论自拟开痹通脉汤对稳定型心绞痛患者的疗效较好,可改善其血清tPAI-1、s ICAM-1水平,增强血管内皮功能。     

植物雌激素对去卵巢血管性痴呆大鼠认知功能和海马胆碱乙酰转移酶表达的影响

目的:观察植物雌激素对去卵巢血管性痴呆(VD)大鼠海马胆碱能神经元表达的影响,探讨植物雌激素对去卵巢VD大鼠的脑保护作用及可能机制。方法:60只雌性Wistar大鼠经水迷宫筛选随机分为4组。Ⅰ组(sham组):VD大鼠,未去除卵巢;Ⅱ组(OVX组):VD大鼠,去除卵巢;Ⅲ组(OVX+est组):VD大鼠,去除卵巢,给予化学雌激素喂养;Ⅳ组(OVX+phy组):去除卵巢,给予植物雌激素喂养。4组大鼠VD手术前后分别应用Morris水迷宫检测法进行大鼠空间认知功能的评价。采用胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫组织化学ABC法,观察去卵巢VD大鼠各组海马胆碱能神经元的数目。结果:与OVX组相比,OVX+est组及OVX+phy组的大鼠海马胆碱能神经元数目明显升高(P<0.05),且在水迷宫中找到水下平台的时间、距离明显缩短(P<0.05),而与sham对照组差别不明显,且OVX+est组和OVX+phy组相比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:植物雌激素具有雌激素样作用,能增强大鼠海马胆碱能神经元的ChAT表达,对血管性痴呆大鼠的记忆损害有一定程度的保护作用。     

Genistein对去卵巢后大鼠基底前脑神经元一氧化氮合酶表达及认知功能的影响

目的：观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化。 方法：实验于2004—07／2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成：3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组，每组12只。卵巢切除前，各组大鼠行避暗回避实验行为学检测。各组大鼠的处理：①去势组：切除双侧卵巢。②Genistein替代组：切除双侧卵巢后进行Genistein替代，剂量100μg（溶于200μL DMSO）。③雌激素替代组：切除双侧卵巢后进行雌激素替代，皮下注射苯甲酸雌二醇，剂量10μg（溶于100μL无菌芝麻油）。④假手术组：只切开双侧腰肌不触及卵巢，随即缝合伤151，相同条件下存活4周。药物注射隔日1次，时间固定，持续4周，分别于最后1次注射24h后进行灌注固定。各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验。脑切片用NADPH—d组织化学方法染色，观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布，并进行计数和统计分析。结果：实验过程中无动物死亡，全部进入结果分析。①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性（P均〉0．05）；去势后行替代治疗1，2周后，各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性（P均〉0．05）；替代治疗4周后，Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少，滞留时间比去势组明显延长（P〈0．05）。②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色，胞体边界清晰，突起明显，为双极或多极细胞。内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧，呈倒“V”字形排列，体积较小，胞体多呈梭形，各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显。在斜角带核垂直支则呈”人”字形排列，胞体较内侧隔核大，多呈锥形或椭圆形，多为多极神经元。各组大鼠神经元的数目呈动态变化，Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元数目上升，而去势组减少，替代治疗后1，2周内，Genistein或雌激素替代组与去势组之间差异无显著性（P〉0．05）；第4周时Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元的数目接近于假手术组水平，与去势组间差异有显著性（P〈0．01）。 结论：去卵巢后行替代治疗能增加大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达，改善大鼠认知功能，可能对中枢神经系统退行性病变起保护作用。     

α-玉米赤霉醇对实验性高脂血症兔的血脂代谢及血液流变学的影响

目的本研究是探讨α-玉米赤霉醇（α-ZAL）在抗动脉粥样硬化（AS）作用中，对血脂代谢及血液流变学的影响。方法44只成熟未孕新西兰大耳白雌兔，分为5组，A组为正常对照组，B组为假手术组，C组为切除卵巢组，D组为切除卵巢并给予17β雌二醇（17βE2）阳性对照药组，E组为切除卵巢并给予α-ZAL组。喂胆固醇（CHO）前与12周后，分别测定血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）含量。还分别测定了全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数（AIRC）及纤维蛋白原及血小板聚集率。结果B、D、E组TC、TG、LDL-C明显低于C组（P〈0．05）；全血黏度、血浆黏度、AIRC和血小板聚集率也明显低于C组（P〈0．05）。结论α-ZAL可能通过干预血脂代谢，调节全血黏度、血浆黏度和AIRC及血小板聚集率，改善血管功能。     

Genistein对去卵巢后大鼠基底前脑神经元一氧化氮合酶表达及认知功能的影响

目的:观察去卵巢大鼠植物雌激素替代治疗后基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达和其认知功能在去卵巢后的时程变化。方法:实验于2004-07/2005-07在南通大学基础医学院人体解剖学教研室完成。3月龄雌性大鼠48只随机抽签法分为假手术组、去势组、Genistein替代组和雌激素替代组,每组12只。卵巢切除前,各组大鼠行避暗回避实验行为学检测。各组大鼠的处理:①去势组:切除双侧卵巢。②Genistein替代组:切除双侧卵巢后进行Genistein替代,剂量100μg(溶于200μLDMSO)。③雌激素替代组:切除双侧卵巢后进行雌激素替代,皮下注射苯甲酸雌二醇,剂量10μg(溶于100μL无菌芝麻油)。④假手术组:只切开双侧腰肌不触及卵巢,随即缝合伤口,相同条件下存活4周。药物注射隔日1次,时间固定,持续4周,分别于最后1次注射24h后进行灌注固定。各组大鼠在灌注前1周进行避暗回避实验。脑切片用NADPH-d组织化学方法染色,观察基底前脑内侧隔核、斜角带核垂直支脑区一氧化氮合酶阳性神经元的分布,并进行计数和统计分析。结果:实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①去势前各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);去势后行替代治疗1,2周后,各组大鼠避暗回避实验的探索次数和滞留时间差异无显著性(P均>0.05);替代治疗4周后,Genistein替代组和雌激素替代组大鼠的探索次数比去势组明显减少,滞留时间比去势组明显延长(P<0.05)。②大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元染色为深蓝色,胞体边界清晰,突起明显,为双极或多极细胞。内侧隔核的一氧化氮合酶阳性细胞主要分布于中线两侧,呈倒“V”字形排列,体积较小,胞体多呈梭形,各组大鼠的神经元数目在术后各时间点的差异不明显。在斜角带核垂直支则呈“人”字形排列,胞体较内侧隔核大,多呈锥形或椭圆形,多为多极神经元。各组大鼠神经元的数目呈动态变化,Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元数目上升,而去势组减少,替代治疗后1,2周内,Genistein或雌激素替代组与去势组之间差异无显著性(P>0.05);第4周时Genistein或雌激素替代组一氧化氮合酶阳性神经元的数目接近于假手术组水平,与去势组间差异有显著性(P<0.01)。结论:去卵巢后行替代治疗能增加大鼠基底前脑一氧化氮合酶阳性神经元的表达,改善大鼠认知功能,可能对中枢神经系统退行性病变起保护作用。     

三仙汤治疗去卵巢骨质疏松模型大鼠的实验研究——证据显示此项目对雌激素及相关指标无影响对骨生物力学性能作用较强

目的 通过研究三仙汤对去卵巢大鼠骨密度(BMD)、骨生物力学和血清雌二醇(E2)、孕酮(P)水平等的影响，探讨三仙汤治疗骨质疏松的机制。方法 68只3月龄雌性SD大鼠随机分为7组：空白组、假手术组(Sham)、模型组(OVX)、尼尔雌醇组、以及三仙汤小、中、大3个剂量组。给药3个月后测定BMD、最大载荷(E)、破坏挠度(R)、E2、P、体质量和子宫湿重。结果 骨密度：OVX组0．270g／cm^2，显著低于Sham组0．291g／cm^2(P&;lt;0．05)，三仙中剂量较OVX有上升趋势。最大载荷：三仙中剂量117kg、大剂量组114kg与OVX组104kg相比有一定的上升趋势。破坏挠度：OVX组较Sham组下降趋势明显；三仙小、中、大3个剂量组均较OVX组显著升高(P&;lt;0．05)；三仙中剂量组0．881mm较尼尔雌醇组0．737mm也显著升高(P&;lt;0．05)。E2、孕酮及子宫湿重：OVX组显著低于Sham组(P&;lt;0．001)，尼尔雌醇组显示一定的升高趋势，三仙各组与OVX相比差异无显著性意义。体质量：OVX组400g较Sham组347g显著上升(P均＜0．05)；尼尔雌醇组较OVX组及三仙各组显著减轻(P&;lt;0．001)；二仙各组与OVX相比无明显变化。结论 尼尔雌醇对去卵巢大鼠骨密度和骨结构的改善无明显作用；三仙汤能够改善去卵巢大鼠骨生物力学性能，对OVX大鼠雌激素水平无明显影响。     

穹窿海马伞切断和卵巢切除对大鼠不同脑区雌激素受体α与淀粉样β蛋白前体蛋白β位点裂解酶共存表达的影响

目的：探讨穹窿-海马伞切断和卵巢切除大鼠大脑雌激素受体α（ERα）与β淀粉样蛋白前体蛋白β位点裂解酶（BACE）共存表达的变化。方法：成年健康雌性Wistar大鼠28只，随机分为穹窿-海马伞切断组（FF组）、卵巢切除组（OVX组）、穹窿-海马伞切断加卵巢切除组（OF组）和对照组。每组7只。免疫荧光双标细胞化学法染色，激光共聚焦显微镜下观察大鼠大脑皮质区、海马CA1区ERα、BACE阳性细胞表达的变化。结果：FF组、OVX组和OF组大鼠皮质区和海马CA1区ERα阳性细胞与对照组比较显著减少（皮质区：4．71±1．11，5．29±2．01，4．42±3．99vs9．71±4．53;海马区：6．91±2．63，7．58±4．16，5．14±3．80vs12.57±3．59，均P〈0．05）；FF组、OVX组和OF组大鼠皮质区和海马CA1区BACE阳性细胞与对照组比较显著增多（皮质区：15．78±6．01，17．63±4．42，20．00±5．16vs5．71±3．14；海马区：15．91±5．12，12．34±5．07，17．14±4．45vs6.85±1．95，均P〈0.05）。但三组之间两两比较无显著性差异（P〉0．05）。OF组大鼠皮质区ERα和BACE双标阳性细胞数与对照组比较显著增多（P〈0．05），但海马CA1区无显著性变化（P〉0.05）。结论：穹窿-海马伞切断或卵巢切除可以导致大鼠大脑皮质区、海马CA1区ERα表达减少、BACE表达增多，两种方法同时作用导致皮质区共存细胞表达增多。