黄芪注射液抗心肌缺血再灌注损伤的临床研究

目的：探讨黄芪注射液防治体外循环心内直视手术中心肌缺血－再灌注损伤（ＭＩＲＩ）的作用机制。方法：将１２例风湿性心肌病瓣膜置换术和先天性心脑病室内隔缺损修补术患者随机分为对照组和治疗组,每组６例。治疗组通过锁骨下静脉注黄芪注射液４０ｇ;对照组不加中药。检测２组在不同时间的心肌酶、氧自由基含量,一氧化氮（ＮＯ）和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性。结果：主动脉阻断致心肌缺血及心脏恢复灌注后心肌酶均呈上升趋势,     

抑制细胞凋亡以防治缺血再灌注损伤的研究进展

细胞凋亡又称程序化死亡(Programmed Cell Death，PCD)，是主动的、信号依赖的细胞自杀死亡。Vogt早在1842年观察到两栖类动物发育过程中细胞凋亡的形态改变。1972年Kerr以细胞凋亡是一种基本生物现象为题介绍了凋亡在生物学中的广泛意义，并对细胞凋亡的形态改变与细胞坏死进行了区别、分析。细胞凋亡区别于坏死，在其细胞内容物外逸之前即很快被吞噬细胞吞噬，     

黄芪和川芎嗪注射液配伍防治心肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨黄芪注射液和川芎嗪注射液配伍防治心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制.方法在体兔结扎冠状动脉心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为对照组、黄芪注射液组(益气组)、川芎嗪注射液组(活血组)、黄芪和川芎嗪注射液配伍组(益气活血组).术中动态监测心电图并留取静脉血检测不同时期血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)活性.结果治疗各组与对照组比较,心电图损伤较轻,能减轻LDH、CK、MDA和SOD的变化,以益气活血组最为明显,与对照组比较多数有显著性差异(P<0.05或P<0.01).益气组和益气活血组NO和NOS活性升高,而活血组NOS活性降低.结论黄芪和川芎嗪注射液均有保护MIRI的作用,两药作用机制略有不同,但两药伍用具有协同互补作用.     

黄芪对脑缺血-再灌注后神经细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的:探讨黄芪对脑缺血-再灌注后神经细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Fas-L蛋白表达的影响.方法:采用Longa报道的线栓法制备大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型.将36只SD大鼠随机分为假手术组(生理盐水10 ml·kg-1·d-1灌胃)、模型组(生理盐水10 ml·kg-1·d-1灌胃)和黄芪干预组(黄芪煎剂6 g·kg-1·d-1灌胃),每组12只.采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术(TUNEL)检测各组大鼠脑组织神经细胞凋亡,免疫组化与医学图像分析结合的方法检测Bcl-2、Fas-L蛋白的表达.结果:与假手术组相比,模型组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Bcl-2、FasL阳性细胞表达增多(P均<0.01).与模型组相比,黄芪干预组大鼠缺血侧脑组织TUNEL阳性神经细胞及Fas-L阳性细胞表达减少,Bcl-2阳性细胞表达增多(P<0.01).结论:黄芪可增强Bcl-2蛋白表达,下调Fas-L蛋白表达,从而抑制脑缺血-再灌注后神经细胞凋亡,这可能是黄芪对脑缺血-再灌注损伤的神经保护作用机制之一.     

细胞凋亡与心肌缺血-再灌注损伤及中医药研究

心肌细胞凋亡在心肌缺血-再灌注损伤(MIRI)中所起作用越来越引起人们的重视.心肌缺血和再灌注时,细胞凋亡发生的确切机制还不清楚,可能与细胞在受到刺激后产生大量氧自由基、细胞内钙超载、线粒体损伤、炎性细胞浸润和基因调控有关[1,2].近年研究表明,不少中药单体、有效部位、复方、成药及针灸均有抗细胞凋亡的作用,综述如下.     

黄芪注射液对家兔心肌缺血再灌注损伤心功能的改善作用

目的　观察黄芪注射液对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法　结扎冠状动脉前降支 60分钟后再灌注 60分钟 ,造成心肌缺血再灌注损伤模型 ,动态观察黄芪注射液对ECG及心功能的影响。结果　与对照组比较 ,黄芪组家兔心肌缺血再灌注后 ,ECG胸前导联上抬ΣST明显降低 (P <0 .0 5、0 .0 1) ,左室内压力变化最大速率 (±dp/dtmax)、左室内压为 40mmHg时的压力微分 (dp/dt DP4 0 )和左室压力峰值 (LVSP)显著升高 ,左室舒张末期压 (LVEDP)和等容舒张期压力下降时间常数 (T)值明显降低 ,左室射血时间 (ET)明显缩短 (P <0 .0 5、<0 .0 1)。结论　黄芪注射液能显著缩小心肌缺血范围 ,改善左室舒张收缩功能 ,对心肌缺血再灌注损伤有良好的保护作用。     

细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的研究进展

急性心肌梗死发病率和死亡率居高不下。随着现代医疗技术不断进步,溶栓、经皮冠状动脉介入（PCI）等治疗使得急性心肌梗死病死率明显下降,但随之出现的再灌注损伤则会再次加重心肌损伤。再灌注损伤发生的机制复杂多样,其主要包括氧化应激、炎症、细胞凋亡,其中细胞凋亡起着关键作用,通过抑制细胞凋亡可有效减轻心肌缺血再灌注损伤（MIRI）。本文重点介绍细胞凋亡在MIRI中的作用机制,旨在为提高MIRI临床治疗效果及改善预后提供新的策略。     

缺血再灌注损伤诱导大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的：探讨大鼠心肌缺血再灌注后不同时相心肌细胞凋亡情况及其与缺血再灌注的关系，并进一步探讨心肌细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤中的可能作用。方法：64只SD大鼠随机分为5组：对照组（假手术45min、105min、165min、225min，各时间点n=8），心肌缺血45min组（I15min,n=8），心肌缺血45min后再灌注1h、2h、3h组（I／R1h、I／R2h、I／R3h，各时间点n=8），分别在各时点处死大鼠取材。应用DNA琼脂糖凝胶电泳分析与透射电镜的检测心肌细胞凋亡的改变。结果：DNA琼脂糖电泳分析显示，I／R2h组、I／R3h组出现凋亡特征性“梯状电泳带”而对照组、L45min组及I／R1h组均未见凋亡带谱。透射电镜检测显示，对照组、L45min组、I／R1h组均未见到凋亡的心肌细胞，I／R2h组、I／R3h组心肌细胞染色质凝聚、边集、核膜完整，显示出典型的凋亡特征。结论：心肌缺血再灌注可导致心肌细胞凋亡，心肌细胞凋亡因缺血再灌注不同时相而变化；心肌细胞凋亡在大鼠心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程中起重要作用；大鼠心肌缺血后再灌注可促发或加速心肌细胞凋亡。     

高氧液对家兔心肌缺血／再灌注细胞凋亡的影响

目的 观察高氧液对心肌缺血／再灌注心肌梗死面积、心肌结构和细胞凋亡参数的影响，探讨高氧液抗心肌缺血／再灌注损伤的保护作用机制。方法 家兔心脏左冠状动脉前降支缺血／再灌注动物模型，缺血30min，再灌注2h，60只家兔随机数字表法分成3组：对照组(Ⅰ组，n=20)只暴露左冠状动脉前降支，不结扎；缺血／再灌注组(Ⅱ组，I／R组，n=20)，在缺血再灌注前10min静脉注射生理盐水(20ml／kg)；高氧液治疗组(Ⅲ组，n=20)，在缺血前10min静脉注射高氧液(20ml／kg)。分别按TCC法染色，用图像分析系统计算梗死面积；原位末端TUNEL法检测细胞凋亡指数；免疫组化ABE法检测Fas、Bel-2的含量，同时电镜观察心肌细胞的超徽结构。结果 Ⅲ组心肌梗死细胞面积为(2．29&;#177;0．02)cm，与Ⅱ组的(3．38&;#177;0．07)cm比较，梗死面积明显缩小。Ⅱ组的AI(20．8&;#177;0．36)，明显高于Ⅰ组(4．1&;#177;0．25)，P&;lt;0．01，t=170．4，Ⅲ组的AI(13．3&;#177;0．35)显著低于Ⅱ组，P&;lt;0．01，t=66．8，但仍高于Ⅰ组，P&;lt;0．01，t=92．8。Ⅰ组Fas的OD值为2．80&;#177;0．07，Ⅱ组3．70&;#177;0．05，Ⅲ组3．10&;#177;0．04。Ⅰ组Bcl—2的OD值为2．7&;#177;0．02，Ⅱ组0．60&;#177;0．03，Ⅲ组2．90&;#177;0．02。结论 高氧液具有抗心肌缺血／再灌注损伤的作用，其作用机制可能是通过调节Fas和Bcl—2介导的心肌缺血/再灌注细胞凋亡而实现。     

电针内关穴对心肌缺血-再灌注损伤预防保护作用的实验研究(Ⅱ)——对超微结构及细胞凋亡的影响

目的：探讨针刺对心肌组织超微结构和细胞凋亡的影响，从形态学分子生物学的角度揭示针刺内关 穴对心肌细胞保护的作用机制。方法：电针家兔左、右侧内关穴20分钟，24小时后，结扎左冠状动脉前降支，行心电图监测，40分钟后恢复灌流，再灌注1小时，摘取心脏，进行心肌超微结构和细胞凋亡的检查。结果；针刺内关穴预防保护组和模型组相比较，心肌组织受损程序轻微，原位末端标记（TUNEL）法检测未见凋亡细胞。结论：电针内关穴可降低缺血－再灌注损伤的程度，明显抑制 缺血－再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡，对心肌有良好的预防保护作用。     

应用黄芪治疗重型颅脑损伤的临床研究

目的：探讨黄芪对重型颅脑损伤的治疗作用。方法：随机选取伤后24小时内入院的重型颅脑损伤患者,设立黄芪治疗组和常规治疗对照组,分别在伤后第14日采集血清及血涂片标本。采用放射免疫等方法检测白介素－2（IL－2）、可溶性白介素－2受体（SIL－2R）及T淋巴细胞亚群。结果;颅脑损伤患者伤后IL－2、CD4和CD4／CD8减低,而SIL－2R和CD8升高,与空白对照组比较,P均＜0.01;黄芪治疗组在伤后第14天血中IL－2、T淋巴细胞CD4亚群、CD4／CD8降低及SIL－2R、CD8升高程度均低于常规治疗组,P＜0.05。结论：重型颅脑损伤患者伤后细胞免疫功能明显抑制,应用中药黄芪可以提高免疫功能,改善预后。     

磷脂酶A2阻断剂对缺血再灌注损伤诱导细胞凋亡和坏死的影响

目的：探讨磷脂酶Ａ２ 活性对缺血 再灌注损伤过程中主要免疫细胞凋亡和坏死的影响。方法：采用ＤＮＡ 凝胶电泳、电镜、光镜以及流式细胞分析（ＦＡＣＳ）等方法测定了大鼠肠缺血 再灌注损伤后外周血中性粒细胞、脾脏细胞和胸腺细胞细胞凋亡和坏死情况及外源性磷脂酶Ａ２ 阻断剂对其的影响。结果：大鼠经小肠前动脉夹闭６０分钟、再灌注２７０ 分钟后,上述细胞出现程度不同的凋亡或坏死,ＤＮＡ电泳出现“梯形”或弥散状“拖尾”。缺血后再灌注前使用磷脂酶Ａ２ 阻断剂４ 溴苯甲酰乙烷（ｐ ＢＰＢ）、氯喹、血小板活化因子（ＰＡＦ）受体阻断剂ＳＲ２７４１７（５ ｍ ｇ／ｋｇ）后,对中性粒细胞的ＤＮＡ降解、坏死有显著的抑制作用,而对胸腺和脾细胞ＤＮＡ 降解、细胞凋亡没有明显的影响。结论：肠缺血 再灌注损伤可诱导外周血中性粒细胞、脾脏细胞和胸腺细胞细胞凋亡和坏死,在整体实验中阻断磷脂酶Ａ２ 活性可显著减少中性粒细胞坏死的发生     

封闭枯否细胞对肠缺血-再灌注小鼠肝细胞凋亡的影响

目的：观察封闭枯否细胞前后小鼠肠缺血－再灌注时肝细胞凋亡的变化,探讨枯否细胞在创伤后全身炎症反应综合征（ＳＩＲＳ）或多器官功能失常综合征（ＭＯＤＳ）中的可能作用。方法：用三氯化钆（ＧｄＣｌ３）特异性地封闭枯否细胞吞噬功能后,复制小鼠肠缺血－再灌注模型,动物分对照组和实验组。用原位末端标记（ＴＵＮＥＬ）法和流式细胞仪检测缺血前、缺血后６０分钟、再灌注３０分钟和再灌注６０分钟肝细胞凋亡。结果：肝细胞凋亡随肠缺血－再灌注时间延长而增多;封闭枯否细胞后,肝细胞凋亡显著增加。结论：枯否细胞功能状态对肠缺血－再灌注早期肝细胞凋亡有影响,枯否细胞功能不全可能与创伤后ＳＩＲＳ或ＭＯＤＳ发生有关。     

应用外源性bFGF对缺血再灌注后脏器组织损伤及修复的实验研究

目的：观察应用外源性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对大鼠肠缺血－再灌注后肝功能与肠组织Ｐ物质（ＳＰ）含量的影响及其与组织损伤修复的关系。方法：５４只Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为３组：假手术组、生理盐水对照组及ｂＦＧＦ治疗组（每只大鼠４μｇｂＦＧＦ）。生理盐水对照组及ｂＦＧＦ治疗组动物于再灌注后２、６、２４和４８小时活杀,检测小肠组织ＳＰ含量及血浆Ｄ－乳酸、二胺氧化酶（ＤＡＯ）和丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）水     

缺血-再灌注诱导bcl2基因表达及其对肠道细胞凋亡的影响

目的：观察缺血再灌注肠道组织原癌基因ｂｃｌ２表达的特征、规律以及与肠道细胞凋亡发生的关系。方法：将１６只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成正常对照、肠系膜上动脉夹闭缺血４５分钟、肠系膜上动脉夹闭４５分钟与再灌注６小时和再灌注２４小时４组。用免疫组化法和末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ技术）分别观察以上各组肠道组织细胞ｂｃｌ２基因表达与凋亡发生的关系。结果：肠系膜上动脉夹闭可以导致肠粘膜细胞凋亡发生增加与激活ｂｃｌ２基因表达。在正常肠道ｂｃｌ２表达为阴性,缺血可诱导ｂｃｌ２表达,并且在ｂｃｌ２表达增加的同时凋亡细胞逐渐减少。与再灌注６小时组相比,再灌注２４小时肠道组织ｂｃｌ２表达不仅强度明显增加,而且还有分布广泛与涉及多种组织的特点。结论：缺血再灌注激活ｂｃｌ２基因表达是体内最重要的抗凋亡机制之一。成纤维细胞生长因子减轻肠道凋亡现象可能与其激活和上调ｂｃｌ２基因表达有关     

颅痛定对心肌缺血-再灌注性室性心律失常及血浆内皮素-1浓度的影响

目的：观察颅痛定对心肌缺血再灌注性室性心律失常及血浆内皮素１浓度的影响。方法：利用１４只硫喷妥钠静脉麻醉开胸犬结扎左前降支冠状动脉（ＬＡＤ）４０分钟，继以再灌注４０分钟进行研究。随机分成颅痛定组（７只）和对照组（７只）。持续心电监护并记录室性心律失常发生情况。２组均在缺血前、缺血１０、２０和４０分钟及再灌注１０、２０和４０分钟时，采集右心房血并测定血浆内皮素１浓度。结果：颅痛定能显著降低缺血再灌注性室性心律失常的发生率和血浆内皮素１浓度。与对照组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）。结论：颅痛定具有良好的抗心肌缺血再灌注性室性心律失常的作用，其机制可能与降低血浆内皮素１浓度有关。     

缺血-再灌注致肠道细胞凋亡的特征及碱性成纤维细胞生长因子对其转归的影响

目的：观察缺血再灌注导致肠道组织细胞凋亡发生的特征与规律，并探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对细胞凋亡发生的影响和作用机制。方法：将７２只Ｗｉｓｔａｒ大鼠分成ｂＦＧＦ治疗组，生理盐水对照治疗组及假手术组３组。利用大鼠肠系膜上动脉夹闭４５分钟与再灌注４８小时模型，病理学与末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术（ＴＵＮＥＬ）方法，定量评价缺血再灌注导致大鼠肠道组织细胞凋亡与坏死的特征和ｂＦＧＦ的治疗作用。结果：肠系膜上动脉夹闭可导致肠道组织明显的缺血性损伤和细胞凋亡发生，凋亡细胞出现在肠粘膜上皮与粘膜下交界处，表现为肠粘膜上皮细胞核固缩或边缘化，部分可见凋亡小体。经ｂＦＧＦ治疗后，细胞凋亡现象可明显减轻。结论：缺血再灌注导致的肠道损伤主要来源于组织坏死与激活凋亡机制两方面，而这两方面作用均与细胞内钙离子超载密切相关；ｂＦＧＦ减轻肠道缺血性损伤可能与它能调控凋亡机制有关     

亚砷酸钠预处理对鼠肝缺血再灌注损伤保护作用的研究

目的：观察亚砷酸钠（ＳＡ）预处理对大鼠常温下肝脏缺血－再灌注损伤的保护作用。方法：Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析ＳＡ预处理诱导大鼠肝脏合成热休克蛋白（ＨＳＰ）,复制大鼠肝脏缺血－再灌注模型,ＳＡ组缺血前１８小时以６ｍｇ／ｋｇ静注ＳＡ,动态观察血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）、乳本脱氢酶（ＬＤＨ）、肝组织ＡＴＰ及能荷（ＥＣ）、血浆内皮素（ＥＴ）和肝组织学变化及生存率。结果：ＳＡ预处理可诱导大鼠肝脏合成ＨＳＰ