组合探针荧光原位杂交检测慢性淋巴细胞白血病分子遗传学异常

目的 探讨中国人慢性淋巴细胞白血病(CLL)的分子遗传学特性及其在CLL预后判断中的价值.方法 运用组合探针(LSI D13S319、LSI p53、LSI ATM、CEP 12、LSI MYB、LSI IGHC/IGHV)和间期荧光原位杂交(FISH)技术,前瞻性研究106例CLL患者的的分子遗传学特征.生存分析采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线和Log-rank检验.结果 106例患者中79例(74.5%)存在一种及以上细胞遗传学异常,35例(33.0%)同时检测出2种及以上的异常.其中del(13q14)异常最常见(45.3%),其他依次为+12(25.5%)、IgH基因重排(23.6%)、del(17p13,16.0%)、del(11q23,10.5%)和del(6q23,4.7%)异常.del(13q14)异常的发生率在年龄＜60岁的患者中明显高于≥60岁的患者,差异具有统计学意义(P=0.033);分子遗传学异常与患者性别、Binet分期无明显相关性(P＞0.05).生存分析显示,伴有del(17p13)或del(11q22)异常组患者的生存期最短,单纯具有del(13q14)异常组的生存期最长,差异具有统计学意义(P=0.003).结论 中国人CLL的分子遗传学特性与西方国家的相似,组合探针FISH技术提高了CLL异常染色体的检出率,del(13q14)异常是CLL最常见的染色体异常.     

慢性淋巴细胞白血病的遗传学异常及其临床意义

慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种B淋巴细胞肿瘤,免疫分型通常表达CD5、CD19、CD23,SmIg弱表达,CD22弱表达,不表达CD79b和FMCT。其临床表现和转归具有明显的异质性,一些患者生存期可长达30年,早期没有任何症状,数年之后才出现淋巴结、肝脾或其他器官的受累。而有些患者在短短几个月内即出现疾病进展,甚至转化为侵袭性淋巴瘤和白血病,     

荧光原位杂交技术在慢性淋巴细胞白血病中的应用及分子遗传学异常研究

目的探析对慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者应用荧光原位杂交(FISH)技术检测其分子遗传学异常的效果。方法将在我院接受治疗初诊为CLL患者30例,采用FISH技术检测,以观察其分子遗传学异常情况。结果经检测,30例CLL患者中有25例为基因异常(83%),其中有13例为D13S25缺失,3例为ATM缺失,7例为P53缺失,10例为RBI缺失,9例为12号染色体三体。此外,有2种基因异常患者共有9例,其中有3例均有P53缺失,有6例为RBI、D13S25同时缺失;有3种及以上基因异常者有2例。结论对CLL患者应用FISH技术检测,可有效地检出患者分子遗传学异常情况,及其基因异常特点,从而为临床诊断、治疗提供有价值的依据。     

慢性淋巴细胞白血病患者的临床和分子遗传学研究

目的：探讨荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）在检测慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia,CLL）中的应用及与患者临床指标和特征的相关性,并分析其判断患者预后的价值。方法：收集2013年6月—2020年10月初诊于南通大学附属医院CLL患者74例,男43例,女31例。收集患者相关的临床特征、实验室检查、骨髓涂片、免疫分型及FISH结果等资料。分析FISH检测的分子遗传学异常与患者的性别、年龄、临床Binet分期、Rai分期及相关实验室检查［如外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2?微球蛋白（β2?microglobulin,β2?MG）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平］的相关性。结果：①CLL患者FISH检测至少具有1种分子遗传学异常者为56例,发生率为75.68%。②各种遗传学异常情况与患者性别、年龄无相关性（P > 0.05）,与外周血淋巴细胞绝对值计数、血红蛋白、血小板、β2?MG、LDH的表达水平无明显相关性（P > 0.05）。③就Binet分期而言,12号染色体三体（+12）仅在B期和C期患者中检出,在Binet分期中的分布差异具有统计学意义（χ2=4.696,P=0.041）;C期的生存时间明显短于A和B期（χ2=14.242,P=0.001）。就改良的Rai分期而言,ATM基因缺失仅在高危组检出,且此种分布差异具有统计学意义（χ2=5.40,P < 0.001）;低中危组的生存时间明显优于高危组（χ2=12.393,P < 0.001）;单纯del（13q）核型异常的CLL患者生存时间明显长于伴有其他核型异常及复杂核型的患者（χ2=8.138,P=0.017）。结论：CLL为惰性疾病,但其疾病进展和临床预后具有高度异质性。FISH检测结果联合疾病临床分期可更好地预测患者预后。     

慢性淋巴细胞白血病中FISH的应用及与其他指标相关性的分析

目的：运用荧光原位杂交（FISH）技术检测慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞遗传学的异常与其他预后指标相关性的分析。方法回顾性分析47例已经确诊的患者进行间期荧光原位杂交技术检测。应用着丝粒探针CSP12（＋12）和序列特异性探针ATM（11q22．3）、RB1（13q14）、P53（17p13,1）进行间期荧光原位杂交检测。同时分析FISH检测出的遗传学异常与其他检测指标的相关性。结果47例患者中有8例（17．02％）患者通过常规染色体显带技术（CC）检测到细胞遗传学异常,10例未见中期分裂相,但应用FISH检测此类样本有6例发生染色体改变,余29例为正常核型。17p-有2例（4．25％）,13q-有19例（40．42％）,11q-有4例（8．5％）,12-三体有6例（12．77％）,复杂细胞学异常有5例（10．64％）,13q-合并11q-有2例,13q-合并12-三体有2例,17p-合并13q-有1例。将正常核型和13q-分到低危组,12-三体分到中危组,11q-、17p-和复杂细胞学异常分到高危组,CD38在高危组的分布较低危组高,IgVH在低危组的分布较高危组高,差异有统计学意义（P＝0．012vs．P＝0．013）。年龄、β2微球蛋白、ZAP-70、Rai分期在预后不同的染色体中分布无差异。结论（1）FISH技术在检测CLL染色体异常方面检出率较CC高;（2）FISH检测出的染色体异常与CD38、IgVH的分布具有一致性。     

荧光原位杂交对197例慢性淋巴细胞白血病的诊断

目的 探讨荧光原位杂交技术(FISH)在慢性淋巴细胞白血病(CLL)诊断与预后评估中的应用,指导CLL患者的精准个体化诊疗。 方法 对2014年1月至2021年1月收治的197例CLL患者采用 RB1(13q14.1)、D13S25(13q14.3)、p53(17p13.1)、ATM(11q22.3)及CSP12(+12)5组基因探针进行FISH检测,对其中62例进行染色体核型分析、75例进行免疫球蛋白重链可变区(IGHV)突变状态检测,分析FISH检测细胞遗传学改变在CLL中的临床意义。 结果 197例初诊CLL患者分子遗传学标志物异常总检出率为56.4%(111/197),其中D13S25(13q14.3)占63.1%(70/111)、RB1(13q14.1)占43.2%(48/111)、p53(17p13.1)占29.7%(33/111)、ATM(11q22.3)占22.5%(25/111)、CSP12(+12)占13.5%(15/111)。同时伴有2种染色体异常患者占34.2%(38/111),其中RB1与D13S25双阳性患者占25.2%(28/111)。同时伴有3种及3种以上染色体异常患者占16.2%(18/111)。相比于CLL患者的染色体核型分析结果,FISH 检测阳性率相对较高(P<0.001)。另外,FISH检测结果与CLL国际预后指数(CLL-IPI)有关。FISH检测阳性CLL患者中CLL-IPI评分为高危/极高危的比例高于FISH检测阴性患者(P=0.009)。FISH-p53阳性CLL患者的CLL-IPI评分均为高危/极高危(P<0.001)。FISH阳性患者中IGHV基因突变者占78%,未突变者占22%。 结论 FISH技术是一种敏感的CLL分子遗传学检测手段,对CLL患者的预后评估和治疗均有重要的指导意义。     

慢性髓细胞白血病的细胞遗传学和荧光原位杂交分析

目的 探讨慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）细胞遗传学、分子遗传学特点及其临床意义.方法 选择196例CML患者,采用直接法和（或）24 h短期培养法制备骨髓染色体标本,采用R显带技术（RHG）进行染色体核型分析;用BCR-ABL双色双融合探针或ES探针对骨髓间期细胞进行荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）检测.结果 将患者分为慢性期和加速/急变期2组.细胞遗传学分析：附加染色体异常、变异易位在2组中比例分别为9/166（5.4%）、7/166（4.2%）和19/30（63.3%）、3/30（10.0%）.196例患者中检出179例Ph阳性标本,占91.3%;其中典型易位169例（94.4%）,变异易位10例（5.6%）,附加染色体异常出现频率最多的为双Ph、＋ 8、I（17q）、-Y.分子遗传学分析：68例患者行FISH 检测,均为BCR-ABL融合基因阳性（含10例变异易位、11例Ph染色体阴性及6例染色体检测失败者）,其中10例（14.7%）为der（9）缺失（含1例染色体检测失败者）,在慢性期、加速/急变期中比例分别为8/55（14.5%）、2/13（15.4%）.68例患者中典型易位41例,变异易位10例,der（9）缺失在典型易位、变异易位中比例分别为5/41（12.2%）和4/10（40.0%）.结论 与慢性期相比,加速/急变期附加染色体、变异易位等异常明显增加,染色体核型分析有助于疾病诊断和进展的分析,并且在遗传学分析的基础上,选用分子遗传学FISH技术可以明显提高疾病的诊断率和染色体异常的检出率及准确率,并可有效检测der（9）缺失.     

双色ES探针检测慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因的应用研究

目的:探讨使用bcr/abl双色ES探针的荧光原位杂交(fluorescence in-situ hybridization,FISH)应用于慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因检测的意义.方法:使用荧光原位杂交方法对2005年1月至2006年2月本院收治的12例慢性粒细胞白血病患者之骨髓细胞进行检测分析.结果:12例CML均检出bcr/abl基因的存在,其中2例伴ASS基因缺失.结论:使用bcr/abl双色ES探针进行荧光原位杂交能为bcr/abl融合基因的检测提供准确直观的依据.     

PCR技术检测慢性淋巴细胞白血病患者基因甲基化异常

目的 探讨检测慢性淋巴细胞白血病患者孕激素受体B基因甲基化状态改变的临床价值.方法 选择2008年1月～2010年1月收治的慢性淋巴细胞白血病患者外周血DNA 27例作为观察组,采用甲基化特异性PCR技术对其进行检测;同时选取作为对照组的15例正常人对外周血DNA孕激素受体B基因甲基化状态.结果 慢性淋巴细胞白血病患者27例外周血中18例成功检测到孕激素受体B基因甲基化异常;对照组15例均没有发现甲基化异常.结论 PCR技术检测慢性淋巴细胞白血病患者基因甲基化异常对检测肿瘤的成长起着一定的作用.     

慢性淋巴细胞白血病的遗传基础

慢性淋巴细胞白血病(CLL)首次提出疾病中体细胞突变和甲基化改变。这个观点总结了本领域的最新发现和对肿瘤影响。从患者仅有的10%~15%基因突变到低频率相对大范围基因突变,基因组的研究揭示了疾病显著的分子异质性。NOTCH1和SF3B1突变启动了疾病进展。广泛的基因组研究显示CLL转变和增强子区大范围低甲基化有关。这种表观遗传学程序保留了原始和记忆B细胞起源假设。CLL表观遗传学和基因组研究为更多个体化诊断和潜在治疗靶点提供了新的前景。     

慢性淋巴细胞性白血病合并慢性髓细胞性白血病一例报告

1临床资料患者,男性,48岁,因“确诊慢性淋巴细胞性白血病(CLL)8年余,确诊慢性髓细胞性白血病(CML)2年余“入院.……     

35例慢性淋巴细胞白血病MIC研究

目的 探讨慢性淋巴细胞白血病(CLL)的免疫表型特征并分析免疫表型和细胞形态学及遗传学的关系.方法 应用一组系列相关的单克隆抗体射门的三色流式细胞术对35例CLL免疫表型进行检测.以常规R显带及荧光原位杂交(FISH)检测13q14.3(D13S272),11q22(ATM)位点缺失.结果 35例CLL中,B-CLL 29例,T-CLL 4例,CLL/PLL(慢淋-幼淋混合型)2例.35例CLL均表达CD5,其中B-CLL主要CD19 ,CD20 ,T-CLL主要CD2 ,CD3 ,CD7 ,CD8 ,2例CLL/PLL混合型CD5-.细胞形态学显示33例CLL骨髓及外周血中以成熟淋巴细胞增多为主,2例CLL/PLL型,11%＜幼淋巴细胞＜50%.35例CLL中,13例有细胞遗传学异常,6例为数目异常,涉及三体3、三体12、三体14、三体18;5例为结构异常,2例为复杂异常.对17例CLL的13q14.3(D13S272),11q22(ATM)位点进行FISH检测,结果7例有位点缺失.结论 慢性淋巴细胞白血病的诊断和免疫表型、形态学及遗传学分析密切相关.     

八探针荧光原位杂交技术在急性髓系白血病诊断中的应用

摘要：目的探讨八探针间期荧光原位杂交技术（FISH）在检测急性髓系白血病（AML）常见细胞遗传学异常中的价值。方
法采用八探针FISH系统,即以针对AML1/ETO融合基因、PML-RARα融合基因、CBFβ/MYH11 融合基因、MLL基因、
P53基因、Del（5q）、-7/Del(7q)、Del(20q)八种DNA探针对40例AML患者细胞遗传学异常进行检测,并与常规G显带核型
分析技术相比较。结果40 例AML中,共22 例多探针FISH检出了细胞遗传学改变,总阳性率为57.50%,包括：AML1/
ETO融合基因、PML-RARα融合基因、MLL基因断裂重排、Del(5q)、-7/Del(7q)、P53基因缺失、8号染色体三体7种细胞遗
传学异常。而常规G显带核型分析技术(CCG)对于相对应的遗传学异常仅检出8例,另检出3例八探针FISH不能检出的
异常,总阳性率为27.50%。结论FISH八探针诊断技术较常规G显带核型分析技术具有省时、准确、高效等优点,可作为
急性髓系白血病临床诊断的一个重要手段。     

慢性淋巴细胞白血病临床化疗

目的：探讨慢性淋巴细胞白血病（ CLL）的临床化疗。方法：对临床2012年1月～2014年6月收治的慢性淋巴细胞白血病患者40例内科治疗方法资料进行分析。结果：经治疗,完全缓解18例,部分缓解20例,未缓解2例,总有效率95％。结论：大多数患者临床进展缓慢,常维持多年而不需要积极治疗。 CLL临床进展大多缓慢,对无症状患者可仅观察,不予治疗。周围血淋巴细胞增多不是CLL的治疗指征。     

ES探针荧光原位杂交法检测bcr/abl融合基因

目的探讨应用ES型bcr/abl探针(双色单融合)荧光原位杂交技术(FISH)在检测bcr/abl融合基因中的价值。方法慢性髓细胞性白血病(CML)初诊或复诊患者30例(骨髓标本43份),行普通染色体核型分析和ES型bcr/abl探针荧光原位杂交分析。结果 43份骨髓标本,6份未做骨髓培养,6份培养失败,在其余31份培养成功的标本中,找到Ph1染色体9份,另有1份标本多次检查都发现存在21p+染色体异常;43份骨髓都经FISH检测,13份标本发现bcr/abl融合基因。结论 ES型bcr/abl探针对CML初诊病例的bcr/abl融合基因有较高的检出率;对复发病例,不仅能辅助诊断CML,而且在监测白血病微小残留病灶、判断疾病的进展上均有较高的灵敏度。     

慢性粒细胞白血病细胞遗传学特征分析

慢性粒细胞白血病 (chronicmyeloidleukemia,CML)是一种可由慢性期演进至加速期及急变期的造血干细胞恶性克隆性疾病。它的临床过程具有明显异质性。CML的主要特点是在 90 %以上患者出现较为恒定的ph′染色体 ,它是该病的一个重要细胞遗传学标志[1] 。对CML骨髓细胞遗传学的分析 ,不仅是白血病诊断MIC(morphology ,immunol ogy,andcytogenetics)分型的一个重要内容 ,而且也对骨髓增殖性疾病的鉴别诊断起关键性作用。我科从 1997年 9月至 2 0 0 2年 11月对 78例CML患者进行了染色体分析 ,现总结报告如下。1　对象与方     

细胞遗传学及分子生物学检测在慢性粒细胞白血病中的临床意义

1　细胞遗传学特性及分子生物学ＣＭＬ主要的细胞遗传学特性是存在特异性的Ｐｈ染色体———ｔ ( 9;2 2 ) ( ｑ34;ｑ11) ,这一易位使正常位于 9ｑ34上的ｃ -ａｂｌ基因与 2 2ｑ11上的ｂｃｒ基因发生融合 ,形成ｂｃｒ/ａｂｌ嵌合基因和表达具有高酪氨酸蛋白激酶 (ＰＴＫ)活性的ｂｃｒ/ａｂｌ融合蛋白。1 1　ｃ-ａｂｌ蛋白 　正常情况下主要位于细胞核 ,是一种非受体型酪氨酸蛋白激酶 ,但通常没有激酶活性 ,其主要结构包括 :①在ｃ -ａｂｌ氨基端存在一个ＳＨ3结构域和一个ＳＨ2 结构域 ,其间的蛋白质是一些信号分子 ,参与细胞内的信号传导 ;…