手性固定相在高效液相色谱中的应用研究进展

对映体的拆分曾被认为是相当困难及复杂的实验技术,随着世纪年代手性色谱的兴起和讯速发展,该难题得以逐步解决[1],尤其是近几年药物对映体的分析已成药学领域的研究热点.     

高效液相色谱中的蛋白质类手性固定相

在高效液相色谱中以蛋白质作手性固定相进行药物拆分已被广泛采用,因为这类手性固定相能提供多种作用和识别位点。本文综述了蛋白质类手性固定相的性质及其在药物拆分中的应用,重点讨论了各种影响药物拆分的因素,如固定相状况、流动相的pH值、有机改性剂、色谱柱温度等。     

色谱手性固定相在手性药物拆分中的应用

色谱手性固定相（chiral stationary phases，CSPs）在手性药物分析和制备拆分中具有很重要的作用。本研究对5种带有CSPs的手性色谱技术以及在高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）和超临界流体色谱（supereritical fluid chromatography，SFC）中CSPs的4种流动相模式和6种类型进行了综述，提出了CSPs色谱柱的筛选策略，并讨论了手性药物拆分从分析到制备的转变。     

键合纤维素手性固定相拆分奥美拉唑对映体

目的建立采用键合纤维素手性固定相拆分奥美拉唑对映体的高效液相色谱法。方法在正相条件下,采用Chiralpak IB色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)对奥美拉唑对映体进行拆分,考察了流动相组成、流速和柱温对对映体分离的影响。结果确立了最佳拆分条件:流动相为正己烷-乙醇(90∶10),流速0.8 mL/min,检测波长280 nm,柱温25℃。结论本法简便,准确,适用于奥美拉唑对映体的拆分。     

蛋白质及纤维素衍生物手性固定相分离盐酸西替利嗪对映体蛋白质及纤维素衍生物手性固定相分离盐酸西替利嗪对映体

目的研究盐酸西替利嗪对映体在蛋白质及纤维素衍生物固定相上的保留行为,优化分离条件。方法 聚α-葡糖苷酯、α₁-酸性糖蛋白及卵粘蛋白为固定相时,流动相分别为正己烷-异丙醇-乙醇-三氟乙酸(430∶45∶25∶1)、乙腈-10 mmol·L^-1磷酸盐缓冲液(NaOH调至pH 7.0)(4∶96)及乙腈-20 mmol·L^-1磷酸二氢钾(三乙胺调至pH 7.0)(12.7∶87.3)。蛋白柱柱温25 ℃,检测波长均为230 nm。结果本法准确、灵敏、专属性好。结论两类固定相均可较好地分离盐酸西替利嗪对映体。     

纤维素键合型手性固定相分离二氢吡啶类钙离子拮抗剂药物对映体

目的采用HPLC手性固定相法拆分6种二氢吡啶类钙离子拮抗剂药物对映体。方法采用Chiralpak IC[纤维素-三(3,5二氯苯基氨基甲酸酯)共价键合硅胶]手性色谱柱,考察了流动相中有机改性剂的种类和比例、碱性添加剂、柱温及流速对对映体分离的影响。结果最终确定分离尼莫地平的最优条件为正己烷-正丙醇(体积比90∶10);分离西尼地平的最优条件为正己烷-正丙醇(体积比85∶15);分离尼索地平、阿折地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比92∶8∶0. 01);分离阿雷地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比90∶10∶0. 01);分离贝尼地平的最优条件为正己烷-正丙醇-二乙胺(体积比95∶5∶0. 01);柱温为25℃,流速为1. 0 mL·min~(-1)。以上6种化合物均可在Chiralpak IC手性固定相上得到完全分离。且热力学研究结果表明尼莫地平、西尼地平、阿折地平、贝尼地平对映体的手性拆分过程均受焓驱动影响,低温有利于对映体分离。而阿雷地平、尼索地平既受焓驱动,同时也受熵驱动影响。结论该纤维素键合型手性固定相对以上6种二氢吡啶类化合物表现出良好的对映体选择性。     

正相高效液相色谱大粒径手性固定相拆分普萘洛尔对映体研究

目的:建立正相高效液相色谱拆分盐酸普萘洛尔对映异构体的方法。方法:采用自行合成的纤维素衍生物大粒径手性固定相,考察了拆分方法,以正己烷-异丙醇-三乙胺溶液(95∶5∶0.1%)为流动相,流速0.5mL·min-1,检测波长为276nm。结果:盐酸普萘洛尔两对映异构体的保留时间分别为8.67mim、14.36min,分离度良好;日内、日间精密度的RSD均小于3%。加样回收率在95.5%～101.4%之间,RSD为2.4%。结论:结果表明所建立的大粒径纤维素衍生物手性固定相高效液相色谱拆分盐酸普萘洛尔制剂中对映异构体的方法,简便、可靠、高效,可用于盐酸普萘洛尔制剂中对映异构体的测定。     

多糖聚合物手性固定相高效液相色谱法拆分二苯甲醇类手性化合物

目的：对6个氯取代的二苯甲醇类手性化合物建立HPLC分析方法。对拆分反应进行监测,并用于拆分产物光学纯度的分析测定。方法：在正相高效液相模式下,采用Chiralcel OD—H和Chiralcel OB-H两种纤维素类手性柱以及Chiralpak AD—H直链淀粉类手性柱,以正己烷-异丙醇或正己烷-异丙醇-三氟乙酸溶剂系统为流动相,流速：0．5ml·min^-1,检测波长：210nm。结果：采用上述方法,基线拆分了合成手性中枢性镇咳药左旋盐酸氯哌啶[（-）cloperastine hydrochloride]的主要原料4-氯二苯甲醇等6个氯取代的二苯甲醇类手性化合物,建立了快速的手性高效液相色谱法。结论：本方法简便准确,可对手性合成反应进行监测和中间体质量控制;同时．对4-氯二苯甲醇和3-氟二苯甲醇的高效液相手性分析方法进行了对比研究。     

键合纤维素衍生物手性固定相拆分酮洛芬对映体

目的建立用键合纤维素衍生物手性固定相拆分酮洛芬对映体的高效液相色谱法。方法采用Chiralpak IB色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)在正相条件下拆分酮洛芬对映体,流动相为正己烷-异丙醇(95∶5),流速0.8 mL/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果酮洛芬对映体在键合纤维素衍生物手性固定相上能够基线分离,分离度为5.44。结论本法简便、快速、重复性好,适用于酮洛芬对映体的分离。     

一类新的手性柱:糖肽抗生素手性柱

介绍了糖肽抗生素手性柱的折分机制并对此类手性柱在手性分析应用中具有的多模式操作，互补拆分原则和通用性强等特点进行评述。     

纤维素键合手性固定相拆分盐酸奈福泮对映体

目的 建立一种用键合纤维素手性固定相的HPLC拆分盐酸奈福泮对映异构体。方法 盐酸奈福泮的分离使用Chiralpak IC色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为正己烷-异丙醇（90：10,0.1% DEA）,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长267 nm,柱温25℃。结果 盐酸奈福泮对映体在键合纤维素手性固定相上能够完全分离,分离度为6.53。结论 该方法可快速实现盐酸奈福泮对映体的分离。     

大粒径纤维素衍生物手性固定相合成及对普萘洛尔的手性拆分研究

目的:合成适合于手性药物制备分离的大粒径纤维素衍生物手性固定相并评价其性能。方法:以微晶纤维素和3,5-二甲基苯基异氰酸酯为原料,合成纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(CDMPC),并涂敷于大粒径(40～60μm)的氨丙基烷化硅胶上,制得了涂敷型CDMPC手性固定相;对CDMPC进行元素分析和红外光谱分析;采用高效液相色谱法,在正相条件下以普萘洛尔为对象评价了CDMPC的手性拆分性能。结果:元素分析和红外光谱分析结果表明CDMPC成功涂敷于手性固定相;普萘洛尔在此手性固定相上获得了手性分离,分离度达到1.67。结论:制备的大粒径纤维素衍生物手性固定相具有良好的手性拆分性能。     

正相手性高效液相色谱法拆分卤代苯丙氨酸衍生物

目的:建立手性固定相正相高效液相色谱法拆分首次报道合成的 D、L-苯丙氨酸衍生物的光学异构体。方法:采用 O,L′-二(3,5-二甲基苯甲酰)-N,N′-二烯丙基-L-酒石酸肼(KR100-CHI-I DMB)手性色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为正己烷-无水乙醇-三氟醋酸(100:10:0.4),流速:0.5 mL·min~(-1),检测波长:220 nm。结果:除2,5-二氯-苯丙氨酸外的3对 D、L-卤代苯丙氨酸光学异构体得到了分离,并用建立的分离方法对酶拆分得到的卤代苯丙氨酸进行了纯度检查。结论:方法简单、灵敏,可用于检查卤代苯丙氨酸的纯度。     

HPLC法测定恩替卡韦分散片的异构体

目的:建立以HPLC法检测恩替卡韦分散片中异构体的方法。方法:色谱柱为ChiralpakAD-H手性柱,柱温为30℃,流动相为正庚烷-乙醇-甲醇-三乙胺(55:42.5:2.5:0.1),检测波长为254nm,流速为0.6mL.min-1,进样量为20μL。结果:所用手性柱对恩替卡韦手性异构体有良好拆分能力,相邻2种成分之间的分离度分别为1.9、1.9、4.0,恩替卡韦及其异构体的分离度符合要求。结论:该方法操作简便,可用于恩替卡韦分散片中异构体的检测。     

高效液相色谱法拆分盐酸舍曲林对映体

目的:建立一种手性固定相拆分盐酸舍曲林对映异构体的方法。方法:使用 Chiralpak AD-H 柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为正已烷-乙醇-二乙胺(90:10:0.2),流速1.0mL·min~(-1),检测波长223nm,柱温25℃。结果:所建立的方法能够将4种对映体有效分离,主峰峰面积的 RSD 小于3.0%。结论:本法可方便地实现盐酸舍曲林对映体的分离。     

恩曲他滨对映体的HPLC法测定

建立了HPLC法测定恩曲他滨对映体.采用CHIROBIOTIC T手性柱,以甲醇-5 mmol/L枸橼酸钠缓冲液(pH 4.6)(20∶80)为流动相,检测波长280 nm.恩曲他滨与其对映体在0.01～0.5 mg/ml范围内线性关系良好,检测限为1和0.5 ng.