右归丸对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-性腺轴影响的实验研究

目的:探讨右归丸对氢化可的松所致肾阳虚动物模型下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法:氢化考的松法制造大鼠肾阳虚模型,观察模型组、用药组、空白组体重变化,睾丸重量及HE染色后睾丸精曲小管的变化。放射免疫法测取血清睾酮含量,比较各组差异。结果表明,右归丸能显著提高肾阳虚大鼠的睾酮含量,对大鼠肾阳虚证有改善作用。     

山茱萸水溶性总提取物对肾阳虚动物模型生命质量和肾上腺组织的影响

为了探讨山茱萸补肾阳作用,复制氢化考的松致肾阳虚动物模型,观察山株萸水溶性总提取物对肾阳虚大鼠的影响。结果山茱萸水溶性总提取物能够提高肾阳虚大鼠的存活率和生命质量。其中大剂量组的存活率为73．30％,明显高于中剂量组（46．67％）,小剂量组,模型阳性药组和模型空白对照组（均为26．67％,P均＜0．05）,投以大,中剂量的山茱萸水溶性总提取物,可以使肾阳虚模型动物肾上腺病理改变显著减轻（P＜0．01）,说明山茱萸水溶性总提取物具有补益肾阳,保护肾阳虚动物模型肾上腺组织,提高肾阳虚模型生命质量的作用。     

从"肾主生殖"角度评价腺嘌呤与氢化可的松诱导的肾阳虚模型

目的从“肾主生殖”角度，比较腺嘌呤诱导与氢化可的松诱导的SD大鼠肾阳虚模型的优劣，从而得到在形态学及性腺指标方面更符合中医“肾阳虚”证的动物模型，以供科研、教学使用。方法雄性SD大鼠100只，随机分成正常组、腺嘌呤组及氢化可的松低、中、高剂量组，每组20只。造模4周后通过HE染色，观察模型大鼠睾丸、精囊、前列腺、肾上腺、组织形态变化；放免法检测大鼠睾酮、雌二醇的改变情况。结果腺嘌呤制作的SD大鼠肾阳虚证动物模型在肾上腺、前列腺、精囊、睾丸组织形态改变及睾酮、雌二醇等性腺指标的变化较氢化可的松诱导组明显。结论腺嘌呤诱导的肾阳虚证SD大鼠模型在形态学与性腺指标方面更符合中医肾阳虚形态学表现。     

纳子法择时用药对肾阳虚SD大鼠治疗作用的实验研究

目的:探讨纳子法择时用药对肾阳虚SD大鼠的治疗是否具有优越性。方法:将雄性SD大鼠30只随机分为正常、模型、卯时用药、午时用药、酉时用药五组,臀部注射氢化可的松制作肾阳虚模型,卯时、午时、酉时用药组用金匮肾气丸水煎剂灌胃,正常、模型组灌以生理盐水。干预两周后,采用放免法测定大鼠血清睾酮水平,对大鼠、脾、睾丸进行称重。结果:酉时用药组血清睾酮水平和睾丸重量显著高于卯时用药组(P<0.01)和午时用药组(P<0.05),模型组血清睾酮水平和大鼠、脾、睾丸重量显著低于正常组(P<0.01),模型组血清睾酮水平、脾重量显著低于三个用药组(P<0.01)。结论:金匮肾气丸治疗肾阳虚SD大鼠应提倡酉时用药,纳子法择时用药对肾阳虚SD大鼠的治疗具有优越性。     

制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究制山茱萸活性部位对D-半乳糖致小鼠肝损伤的保护作用。方法:采用D-半乳糖造成小鼠急性肝损伤模型,以血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及肝脏丙二醛(MDA)含量作为考察指标,观察制山茱萸活性部位(醇沉多糖部位、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位)对小鼠急性肝损伤的保护作用。另取肝组织进行常规HE染色病理组织学切片,结合透射电镜观察肝细胞的凋亡情况。结果:生化分析结果表明,与正常对照组比较,模型组小鼠肝匀浆SOD活性显著降低,MDA含量及ALT、AST活性活性均显著升高(P<0.05);与模型组比较,三种制山茱萸活性部位干预组小鼠肝脏ALT、AST活性及MDA含量均显著降低,肝脏SOD活性显著升高(P<0.05)。肝脏病理形态学显示,模型组肝脏出现明显坏死和炎症,而制山茱萸活性部位干预组变性坏死明显减少,炎症细胞数减少,肝组织的损伤修复程度较好。电镜结果显示,模型组肝细胞损伤较为明显,小鼠肝脏细胞出现明显凋亡特征,而制山茱萸活性部位用药组未见凋亡。结论:制山茱萸多糖、正丁醇萃取部位、石油醚萃取部位均表现出保肝作用,提示三者均存在保肝活性成分,是制山茱萸保肝的物质基础所在,其保肝机制可能与抑制氧化应激及抗炎症反应有关。     

颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸功能的影响

目的观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸功能的影响并探讨其机制。方法用腺嘌呤制备肾阳虚大鼠模型。实验分为正常对照组、肾阳虚模型组、阳性药物治疗组和颐和春治疗组。观察颐和春口服液对肾阳虚大鼠睾丸形态学、血清雄性激素及睾丸组织MDA和SOD的影响,并观察对腺垂体细胞凋亡及下丘脑区兴奋性及抑制性氨基酸比值的影响。HE染色观察睾丸形态学改变、放免法测定血清雄性激素、生化法测定睾丸组织MDA和SOD,末端标记法测定腺垂体细胞凋亡,HPLC测定脑组织氨基酸。结果颐和春明显改善肾阳虚引起的睾丸损伤,提高雄性激素水平,降低睾丸组织MDA,提高SOD,减少腺垂体细胞凋亡,调节下丘脑兴奋性和抑制性氨基酸比值。结论颐和春口服液对肾阳虚大鼠生殖能力有一定改善作用,可能与其对下丘脑-腺垂体-睾丸轴的调节作用有关。     

玉竹水提物对衰老模型小鼠线粒体DNA含量的影响

目的:从氧自由基和肝细胞线粒体DNA(mtDNA)的含量,研究玉竹抗衰老的可行性和可能的作用机制.方法:5%D-半乳糖皮下注射建立衰老小鼠模型,同时灌胃给予玉竹水提物,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水.检测肝细胞mtDNA的相对含量、血清SOD活性及MDA含量作比较.结果:玉竹水提物能够降低衰老状态下小鼠肝细胞mtDNA相对含量及血清MDA含量,提高血清SOD活性(P<0.01).结论:玉竹水提物具有减轻D-gal诱导亚急性衰老动物模型的氧化损伤,保护肝细胞mt DNA,从多方面延缓机体衰老的作用.     

艾条悬灸肾俞、关元对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴和垂体-甲状腺轴的影响

目的观察艾条悬灸对肾阳虚大鼠垂体-肾上腺轴和垂体-甲状腺轴的影响。方法以氢化可的松肌肉注射制作皮质酮肾阳虚动物模型,将大鼠随机分成模型对照组、艾灸治疗组,并设立空白对照组,艾灸治疗组采用艾条悬灸肾俞、关元,每次每穴20 min,每日1次,共治疗14次;治疗结束后采用ELISA方法检测各组大鼠血清CORT、ACTH、T3、T4、TSH的含量,采用RT-PCR方法检测垂体ACTH、TSH m RNA的表达。结果与模型对照组比较,艾灸治疗组血清CORT无显著性差异(P0.05),血清ACTH、T4、TSH和垂体ACTH、TSH m RNA均具有显著性差异(P0.05),血清T3具有极显著性差异(P0.01);与空白对照组比较,艾灸治疗组上述各指标均无显著性差异(P0.05)。结论艾条悬灸肾俞、关元通过降低血清TSH的含量,下调垂体TSH m RNA的表达和升高血清ACTH、T3、T4的含量,上调垂体ACTH m RNA的表达对肾阳虚大鼠起治疗作用。     

清香散对湿热证大鼠的抗氧化和肝细胞凋亡作用

目的：观察湿热证大鼠模型的氧化损伤和肝细胞凋亡情况,以及清香散对湿热证大鼠的抗氧化和肝细胞凋亡的作用。方法：Wistar大鼠随机分为湿热证模型组、清香散治疗组和正常对照组,采用流式细胞术分析和电镜检测肝细胞凋亡改变,同时测定血清超氧化歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和肝组织脂质过氧化物(120)水平。结果：湿热证模型大鼠肝细胞出现明显凋亡形态改变,凋亡率明显增加,血清SOD活性下降,MDA含量上升,肝脏IPO含量明显上升。清香散治疗组大鼠肝细胞凋亡率明显下降,血清SOD活性上升,MDA含量下降,肝脏120含量明显下降。结论：清香散具有抑制湿热证大鼠模型氧化过程和抗细胞凋亡的功能。     

山茱萸水溶物对老年小鼠淋巴细胞功能的影响

目的:研究山茱萸水溶物对老年小鼠的免疫调节作用,探讨其延缓衰老的机理。方法:采用氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷(~3H-TdR)掺入法测定淋巴细胞的增殖;以 K562细胞为靶细胞测定自然杀伤细胞(NK)细胞活性;~3H-缬氨酸掺入法测定总蛋白合成;以依赖株细胞增殖反应测定法检测白细胞介素-2(IL-2)活性;用32P-IL-2 cDNA 探针,通过胞浆印迹杂交法测定 IL-2 mRNA 含量。结果:老年小鼠中,山茱萸水溶物给药组与对照组比较,淋巴细胞的增殖指数增加18.2%(P<0.01);NK 活性提高30.6%(P<0.01);总蛋白合成率增加13.9%(P<0.01);IL-2活性提高14.9≤(P<0.05);并可影响 IL-2 mRNA 的表达。结论:山茱萸水溶物显著提高老年小鼠淋巴细胞增殖能力、NK 活性、总蛋白合成、IL-2活性以及 IL-2 mRNA 表达水平。山茱萸水溶物能够部分恢复老年小鼠的免疫功能。     

霍山石斛不同提取物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及物质基础研究

目的:研究霍山石斛水提物、醇提物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及其物质基础。方法:180只健康昆明雄性小鼠适应性喂养7d后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阳虚模型组、西洋参组、人参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚各给药组,分别每日灌服甲状腺素溶液和氢化可的松溶液制备肾阴虚证、肾阳虚证动物模型,给药14d,检测各组小鼠的力竭游泳时间、肝糖原、肌糖原、血乳酸(BLA)、游离脂肪酸(FFA)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的变化。结果:与肾阴虚模型组比较,霍山石斛水提物各剂量组、醇提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低血清FFA、BUN和TG,提高LDH值,降低肝脏CK、Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01)。与肾阳虚模型组比较,霍山石斛水提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低BLA水平,升高血清FFA、BUN、TG、CK及肝脏LDH、Na⁺-K⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01),霍山石斛醇提物高剂量能升高模型小鼠的力竭游泳时间和肌糖原含量(P<0.05)。结论:霍山石斛水提物能提高肾阴虚证、肾阳虚证小鼠的抗疲劳作用,具有双向调节作用,可能是霍山石斛补虚作用的主要物质基础,霍山石斛醇提物仅能提高肾阴虚证小鼠的抗疲劳作用,可能是霍山石斛滋阴清热功效的主要物质基础。     

何首乌不同提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响

目的观察何首乌四种提取物对雌二醇致肾阳虚模型小鼠的影响,探讨其"甘温,入肝、肾经"药性的现代科学内涵。方法取ICR雄性小鼠84只,随机分为正常对照组,模型对照组,桂附地黄丸组,何首乌水提取物组、正丁醇提取物组、乙酸乙酯提取物组和石油醚提取物组,共7组,每组12只。采用腹腔注射苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型,对小鼠体征、肛温、抓力、游泳时间、自主活动次数、血清肌酐(Cr)及尿素(UR)、血液学指标、睾丸和精囊腺指数进行测定。结果何首乌四种提取物均能改善小鼠体征、抓力、自主活动次数、RBC、Hb、PLT、WBC、LY、NE;何首乌水提取物能提高肾阳虚小鼠游泳时间、MO,降低Cr水平;乙酸乙酯提取物能提高游泳时间、睾丸指数、MCV,降低Cr水平;正丁醇提取物能提高MCV、MO,降低UR水平;石油醚提取物能提高游泳时间、MCV,降低UR水平。结论何首乌的药效可作为改善肾阳虚证腰膝酸软、精神萎靡、阳虚水泛,以及肾精亏虚、肝气虚弱所致血液亏虚的基础,并作为其甘温、入肝、肾经药性现代科学内涵的组成部分。何首乌四种提取物药效相近,其中水提取物与乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物与石油醚提取物的药效更为接近。     

The total flavones from Semen cuscutae reverse the reduction of testosterone level and the expression of androgen receptor gene in kidney-yang deficient mice

OBJECTIVE: To discover the effect of the total flavones from Semen cuscutae (TFSC) on the kidney-yang deficiency male mouse, especially on hormone levels and the androgen receptor (AR) mRNA and protein level in the kidney and testicle. METHODS: ICR male mouse were separated into six groups, and, except for the normal group, hydrocortisone was injected intraperitoneally to make the kidney-yang deficiency. The groups were then treated with TFSC, methyltestosterone and Jinkui Shenqi Wan, except for the normal group and control group. 14 days after administering, testosterone levels in the total serum were analysed by radioimmunoassay, AR mRNA levels measured by real time RT-PCR and protein levels by immunohistochemistry. RESULTS: The control group had the lowest testosterone level, AR mRNA level and protein level, and the TFSC can reverse the reduction of testosterone level, AR mRNA level and protein level induced by the hydrocortisone. CONCLUSIONS: This is the first study to demonstrate that TFSC treatment may reverse kidney-yang deficiency symptoms by restoring the levels of testosterone and AR mRNA and protein expression in the kidney and testicle.     

海马不同提取物对雌二醇致肾阳虚小鼠的影响

目的 观察海马4个提取物(水、正丁醇、醋酸乙酯、石油醚提取物)对雌二醇致肾阳虚模型小鼠的影响,认识其"甘,温,人肝、肾经"药性的现代科学内涵.方法 采用ip苯甲酸雌二醇造成小鼠肾阳虚模型,对小鼠体征、肛温、抓力、游泳时间、自主活动、血清肌酐(Cr)及尿素(UR)、血液学指标、睾丸和精囊腺指数进行测定.结果 海马4个提取物均能改善肾阳虚小鼠体征,升高精囊腺指数和血液RBC、Hb、PLT,降低血清UR水平;海马水提取物、石油醚提取物均能提高肾阳虚小鼠肛温、抓力、游泳时间、自主活动次数、睾丸指数、WBC、淋巴细胞(LY)、单核细胞(MO)、嗜中性粒细胞(NE);正丁醇提取物能提高小鼠自主活动次数、NE;醋酸乙酯提取物能提高小鼠抓力、游泳时间.结论 海马的药效可作为改善肾阳虚证之腰膝酸软、性欲减退、畏寒肢冷、精神萎靡、阳虚水泛,以及肾精亏虚、肝气虚弱所致血液亏虚的基础,并作为其甘温、人肝、肾经药性现代科学内涵的组成部分.海马水提取物和石油醚提取物的作用较为接近且较强,为认识海马甘、温、归肝肾经共同药效物质群提供了启示.     

强肌健力饮对肾阳虚证大鼠环核苷酸水平的调节作用

目的:观察强肌健力饮对肾阳虚证大鼠血浆环核苷酸水平的影响,探讨该方防治肾阳虚证的作用机理。方法:选用SD雄性大鼠,随机分为正常对照组,肾阳虚模型组,强肌健力饮低、中、高剂量组、右归丸组;采用氢化可的松致肾阳虚证大鼠模型,观察各组动物胸腺和肾上腺重量指数,以及血浆环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量和cAMP/cGMP比值的变化。结果:肾阳虚模型组大鼠血浆cAMP含量及cAMP/cGMP比值与正常对照组相比均降低(P<0.01),cGMP含量则显著升高(P<0.01)。而强肌健力饮各剂量均能使cAMP含量和cAMP/cGMP比值升高及降低cGMP含量(P<0.01),又可使胸腺指数增大等作用。结论:强肌健力饮能够改善肾阳虚证大鼠的肾虚症状,其作用机理与调节cAMP、cGMP水平有关。     

毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2-IFN-NKC免疫调节网影响的研究

[目的]观察毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2(白介素-2)-IFN(干扰素)-NKC(自然杀伤细胞)免疫调节网的影响,探讨其治疗子宫发育不良的机制。[方法]通过对幼龄SD雌鼠40只随机分为4组:正常对照组(A组)、模型组(B组)、右归丸组(C组)、毓宫胶囊组(D组),肌注地塞米松复合双侧卵巢切除建立肾阳虚型子宫发育不良模型,对模型动物用毓宫胶囊治疗,右归丸做对照,治疗18d后处死,取胸腺、脾脏、子宫称质量,并测定脾组织IL2、IFN、NKC活性。[结果]肾阳虚子宫发育不良大鼠胸腺、脾脏、子宫质量以及IL2、IFN、NKC活性均较正常组明显下降(P<0.01),毓宫胶囊能提高胸腺、脾脏、子宫质量及IL2、IFN、NKC活性(P<0.01)。[结论]肾阳虚型子宫发育不良大鼠的非特异性免疫力下降;毓宫胶囊在促进肾阳虚型子宫发育不良大鼠子宫发育的同时,提高IL2、IFN、NKC活性,正向调节其免疫功能。即毓宫胶囊有调节神经内分泌免疫网的作用。     

维生素AD对肾阳虚证模型大鼠肾上腺、睾丸、血清睾酮水平的影响

目的:探索维生素AD对肾阳虚证模型大鼠肾上腺、睾丸、血清睾酮水平的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、维生素AD高剂量组、维生素AD治疗剂量组、维生素AD低剂量组、模型组,以氢化可的松建立肾阳虚模型,维生素AD高剂量组、维生素AD治疗剂量组、维生素AD低剂量组用维生素AD浓缩滴剂灌胃;正常组、模型组灌以生理盐水。2周后,用Elecsys-2010全自动电化学发光免疫分析仪测血清睾酮,用分析天平称取肾上腺、睾丸的质量。结果:模型组血清睾酮含量显著低于正常组(P<0.05),肾上腺质量也显著低于正常组(P<0.05);维生素AD低剂量组肾上腺质量显著高于模型组(P<0.05);维生素AD治疗剂量组血清睾酮含量显著高于模型组(P<0.05)。结论:维生素AD可提高肾阳虚证模型大鼠的肾上腺质量,并能提高其血清睾酮含量。补充维生素AD可作为肾阳虚证预防和治疗的辅助疗法。     

温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究

 目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1.2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。     

毓宫胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2-IFN-NKC免疫调节网影响的研究

【目的】观察毓官胶囊对肾阳虚型子宫发育不良大鼠IL2（自介素-2）-IFN（干扰素）-NKC（自然杀伤细胞）免疫调节网的影响，探讨其治疗子宫发育不良的机制。【方法】通过对幼龄SD雌鼠40只随机分为4组：正常对照组（A组）、模型组（B组）、右归丸组（C组）、毓宫胶囊组（D组），肌注地塞米松复合双侧卵巢切除建立肾阳虚型子宫发育不良模型，对模型动物用毓宫胶囊治疗，右归丸做对照，治疗18d后处死，取胸腺、脾脏、子宫称质量，并测定脾组织IL2、IFN、NKC活性。【结果】肾阳虚子宫发育不良大鼠胸腺、脾脏、子宫质量以及IL2、IFN、NKC活性均较正常组明显下降（P〈0．01），毓宫胶囊能提高胸腺、脾脏、子宫质量及IL2、IFN、NKC活性（P〈0．01）。【结论】肾阳虚型子宫发育不良大鼠的非特异性免疫力下降；毓宫胶囊在促进肾阳虚型子宫发育不良大鼠子宫发育的同时，提高IL2、IFN、NKC活性，正向调节其免疫功能。即毓宫胶囊有调节神经内分泌免疫网的作用。