分离胶处理标本不适合高效液相色谱法监测氯氮平、去甲氯氮平浓度

目的：探讨经分离胶处理的标本,是否适合高效液相色谱（HPLC）法测定血氯氮平（CZP）、去甲氯氮平（N-CZP）浓度。方法：选择临床服用CZP治疗达稳态的住院患者,使用真空采血系统分别采集普通管和含有分离胶的血液标本,在HP-1100高效液相色谱仪上测定CZP、N-CZP浓度,比较两者结果的差异。结果：（1）使用分离胶处理的标本较不使用分离胶处理的标本血清CZP、N-CZP浓度显著降低（P＜0．05～0．01）;两者结果呈线性正相关（r=0．750～0．814）。（2）不分离血凝块的分离胶管,室温和4℃放置24h后较放置前CZP、N．CZP浓度降低（P＜0．05～0．01）;两者结果呈线性正相关（r=0．972～0．976）。室温和4℃放置24h后的CZP、N-CZP浓度无统计学差异（P＞0．05）。（3）分离血清后,分离胶管4℃放置24h后较放置前CZP浓度降低（P＜0．05=0．013）,N-CZP浓度增加（P＜0．01=0．009）。结论：经分离胶处理的标本,不能用于HPLC法监测CZP、N-CZP浓度,也不适合标本的存储和运输。     

使用添加剂处理标本对离子选择电极法测定血锂浓度的影响

目的　探讨使用肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂处理的标本是否适合锂盐(Li+ )浓度的监测。方法　选择临床服用碳酸锂治疗达稳态的住院患者,使用真空采血系统分别采集普通管血液标本和分别含有肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂的标本,在IMS 972电解质分析仪上测定Li+浓度,比较结果的差异。结果　(1)不同方式处理的标本间Li+浓度差异有显著性(P<0. 001),其中普通血清、肝素钠抗凝血浆、促凝剂处理的血清之间Li+浓度差异均无显著性(P>0. 05),分离胶处理的标本与普通血清、促凝剂和肝素钠处理的标本之间Li+浓度差异均有显著性(P<0. 001); (2)肝素钠抗凝剂和促凝剂处理的标本与普通血清Li+浓度之间呈高度线性相关(r=0. 988~0. 993, P<0. 001),分离胶处理的标本与普通血清、肝素钠抗凝剂、促凝剂处理标本的Li+浓度线性相关均无显著性(r=0. 203~0. 288,P>0. 05); (3)肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂处理标本和普通血液标本,不分离血凝块室温放置8h,Li+浓度较放置前增高(P<0. 05~0. 001)。结论　促凝剂和肝素处理标本适合用于锂盐的快速测定,而分离胶处理的标本不适合用于离子选择电极法测定Li+浓度,也不适于储存和标本运输;使用肝素钠抗凝剂和促凝剂处理的标本,不能及时测定时应分离血浆或血     

使用添加剂处理标本对离子选择电极法测定血锂浓度的影响

目的 探讨使用肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂处理的标本是否适合锂盐(Li+)浓度的监测.方法 选择临床服用碳酸锂治疗达稳态的住院患者,使用真空采血系统分别采集普通管血液标本和分别含有肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂的标本,在IMS-972电解质分析仪上测定Li+浓度,比较结果 的差异.结果 (1)不同方式处理的标本间Li+浓度差异有显著性(P＜0.001),其中普通血清、肝素钠抗凝血浆、促凝剂处理的血清之间Li+浓度差异均无显著性(P＞0.05),分离胶处理的标本与普通血清、促凝剂和肝素钠处理的标本之间Li+浓度差异均有显著性(P＜0.001);(2)肝素钠抗凝剂和促凝剂处理的标本与普通血清Li+浓度之间呈高度线性相关(r=0.988～0.993,P＜0.001),分离胶处理的标本与普通血清、肝素钠抗凝剂、促凝剂处理标本的Li+浓度线性相关均无显著性(r=0.203～0.288,P＞0.05);(3)肝素钠抗凝剂、促凝剂、分离胶等添加剂处理标本和普通血液标本,不分离血凝块室温放置8 h,Li+浓度较放置前增高(P＜0.05～0.001).结论 促凝剂和肝素处理标本适合用于锂盐的快速测定,而分离胶处理的标本不适合用于离子选择电极法测定Li+浓度,也不适于储存和标本运输;使用肝素钠抗凝剂和促凝剂处理的标本,不能及时测定时应分离血浆或血清.     

分析前标本处理对高效液相色谱法测定血氯氮平浓度的影响

氯氮平（Clozapine，CZP）是第一代非典型抗精神病药物，是目前国内治疗精神分裂症的常用药物之一，它的发现曾被誉为精神病治疗史上的一大飞跃，是治疗难治性精神分裂症的一个金标准和最后的手段，但CZP诱发粒细胞缺乏症的危险性较高，而且发生机制目前还不清楚。与许多抗精神病药物一样，CZP的用药剂量和血药浓度以及疗效存在巨大个体差异，因此监测CZP血药浓度和研究其药物代谢率对精神分裂症的治疗有重要意义。近年来真空采血系统的普遍应用，特别是一些添加剂的处理提高了检测速度和检验质量，但是否适合HPLC法测定CZP，尚未见报道。我们对此作了一些初步探讨，报道如下。     

用高效液相色谱法测定血清醋氨酚浓度及临床意义

用高效液相色谱（HPLC）测定血清醋氨酚浓度的方法，以β－羟乙基茶碱为内标，用乙腈沉淀血清蛋白，采用国产不锈钢色谱柱（150mm×5mm），流动相组分为乙腈／醋酸缓冲液＝7／93（V／V），用254nm固定波长检测器进行检测。最低检出浓度为5μg／ml。血清醋氨酚浓度至少在25～400μg／ml范围内成线性相关，相对回收率平均为98.7％，批内及批间变异分别为1．06％和3．45％，该方法操作简单、快速、准确，可在一小时内报告结果，适于临床上醋氨酚中毒的急诊测定，可及时为临床医生的诊断提供可靠的实验室依据。     

高效液相色谱法测定血浆肝素含量

为探讨高效液相色谱（ＨＰＬＣ）法直接测定血浆游离肝素含量的可行性及其意义。用ＨＰＬＣ分离血浆普通肝素（ｕｎｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｄｈｅｐａｒｉｎ）钠、肝素钙以及低分子量肝素（ＬＭＷＨ），探讨ＨＰＬＣ法所选色谱方法为Ｃ－１８反相柱分离，流动相为甲醇与醋酸铵，外标法定量，紫外光吸收波长为２１５ｎｍ。回收率为９０．４％～９６．８％，血浆肝素含量在１００～６５００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限为３０Ｕ／Ｌ批内与批间变异系数分别小于３．０％和４．７％。同时用ＨＰＬＣ法和凝血酶法检测一批血样（ｎ＝２９），结果相似。此法适宜于肝素含量高的血样检测。     

高效液相色谱法测定人血浆中加替沙星浓度

目的:建立HPLC法测定人血浆中加替沙星浓度的方法。方法:采用噻克硝唑为内标,色谱柱为Polaris C18-A柱(150*4.6mm),流动相为乙腈:0.05M的枸缘酸溶液(22:78),流速1.0ml/min,检测波长为295nm。结果:加替沙星血清浓度在0.015～6.48μg·ml-1范内具有良好线性关系,最低定量限为0.015μg·ml-1,方法回收率为99.1%～101.0%,日内、日间RSD均<7%。结论:本法简便、准确、灵敏,适用于加替沙星血药浓度监测及人体药代动力学研究。     

高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物

目的建立高效液相色谱法快速测定肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5′-羟色胺(5′-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)及多巴柯(DOPAC)7种单胺类神经递质及其代谢产物.方法流动相选用柠檬酸-柠檬酸三钠-甲醇-离子对试剂-EDTA-Na2混合液(pH 4.2);色谱柱采用30 mm×3 mm C18柱,用电化学检测器检测.结果最低检测限为2～30 ng/ml,平均回收率为80.1%～107.3%.分别测定6例正常大鼠及6例帕金森病(PD)模型组大鼠的5种单胺类递质和12名正常人及2例嗜铬细胞瘤患者3种单胺类递质,结果皆有明显区别和升高.结论此法能满足大鼠PD模型的研究和嗜铬细胞瘤患者实验诊断的需要.     

Rapid liquid chromatography/tandem mass spectrometer (LCMS) method for clozapine and its metabolite N‐desmethyl Clozapine (Norclozapine) in human serum

Clozapine is indicated for the treatment of schizophrenia and related psychotic disorders. Several methods have been developed for monitoring Clozapine levels; however, they possess limited specificity and are often laborious. This study describes a simple liquid chromatography/tandem mass spectrometer (LCMS) method in human serum. The ion transitions monitored were m/z 327, 270, 296 for Clozapine, m/z 313, 192, 227 for Norclozapine and m/z 328, 271 for Loxapine. The assay is linear (25–1000 ng/ml) and showed a good correlation (r=0.98) within the analytical range of 79–1210 ng/ml in human serum. This assay is highly specific and sensitive for the simultaneous measurements of Clozapine and Norclozapine. The simplification of this assay makes it ideal for high throughput analyses of the patient samples in a routine clinical laboratory staffed with general medical technologists. J. Clin. Lab. Anal. 23:394–398, 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸

目的 建立测定血浆同型半胱氨酸的高效液相色谱（ＨＰＬＣ）方法。方法 血浆同型半胱氨酸经巯基乙醇还原后用碘乙酸封闭巯基,。再与邻苯二甲醛（ＯＰＡ）反应完成衍生化,以磺在同型半胱氨酸为内标,经Ｃ１８反相柱进行色谱分离,荧光检测器测定结果。结果测定线性范围达１５０μｍｏｌ／Ｌ,最低检测限为１．０μｍｏｌ／Ｌ日内不精密度３．７－４．２％,日间不精密度３．８－４．３％;方法回收率９３－１０２％。结论本方法     

高效液相色谱法快速测定氨基酸类神经递质

目的建立一种同时快速测定大鼠纹状体中谷氨酸(G lu)、天冬氨酸(Asp)、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸(G ly)、牛磺酸(Tau)5种氨基酸类神经递质的高效液相色谱法。方法采用Krom asil C18(4.6×250 mm,5μm)为色谱柱,丹酰氯为柱前衍生试剂,以曲唑酮为内标,以0.1 mol/L醋酸钠缓冲液∶甲醇=58∶42、14 mmol/L庚烷磺酸钠为流动相等度洗脱。结果在1~200 mg/L范围内,各组分线性关系良好(r=0.999)。各氨基酸的平均回收率为79.1%~92.9%。结论本方法简便、快速、准确,可用于临床大样本测定和研究神经及精神疾病氨基酸类神经递质的改变。     

高效液相色谱法快速检测单胺类神经递质及其代谢产物

目的　建立高效液相色谱法快速测定肾上腺素 (E)、去甲肾上腺素 (NE)、多巴胺 (DA)、5′ 羟色胺 (5′ HT)、5 羟吲哚乙酸 (5 HIAA)、高香草酸 (HVA)及多巴柯 (DOPAC) 7种单胺类神经递质及其代谢产物。方法　流动相选用柠檬酸 柠檬酸三钠 甲醇 离子对试剂 EDTA Na2 混合液 (pH 4 .2 ) ;色谱柱采用 30mm× 3mmC18柱 ,用电化学检测器检测。结果　最低检测限为 2～ 30ng/ml,平均回收率为 80 .1%～ 10 7.3%。分别测定 6例正常大鼠及 6例帕金森病 (PD)模型组大鼠的 5种单胺类递质和 12名正常人及 2例嗜铬细胞瘤患者 3种单胺类递质 ,结果皆有明显区别和升高。结论　此法能满足大鼠PD模型的研究和嗜铬细胞瘤患者实验诊断的需要。     

高效液相色谱技术在上海地区珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的: 探讨高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)在上海地区珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血,以下简称地贫）筛查中的实际应用价值。方法: 应用HPLC技术,对135例临床疑似地贫的患者进行血红蛋白分析,同时采用缺口聚合酶链反应( gap-polymerase chain reaction, gap-PCR)和反向斑点杂交(reverse dot blot,RDB)进行基因检测。结果: ①以基因分析为金标准,应用HPLC方法检测β地贫携带者,血红蛋白A₂(hemoglobin A₂,HbA₂) >3.7%为临界值,诊断β地贫携带者的灵敏度为100%,特异度为98.41%,阳性预测值98.0%,阴性预测值100%;②HbA₂<1.7%为临界值,诊断中间型α地贫（血红蛋白H病,hemoglobin H disease, HbH病）的灵敏度为100%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为100%;③应用HPLC法检出快速区带8例。结论: 应用HPLC法筛查β地贫灵敏度高,特异性强,与基因分析结果间有很高的符合率,且其操作简便、快速,适用于β地贫的诊断、分型及中间型α地贫（HbH病）的筛查,但对于静止型和标准型α地贫的筛查存在一定的漏诊率。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中无环鸟苷

目的对流动相的配方进行改良,建立反相HPLC法测定人血浆中阿昔洛韦浓度。方法采用SphericorbC18色谱柱,以2．5％的乙腈水溶液（内含10mmol/L高氯酸,5mmol/L乙酸钠,3．5mmol/L庚烷磺酸钠）为流动相,紫外检测波长254nm。血浆以高氯酸沉淀后高速离心取上清液分析。结果阿昔洛韦峰和其它杂峰得到很好的分离,最低检测限为30ng/ml（进样50μl,信噪比为3：1）。结论本法快速、简便、灵敏度高,且可检测到阿普洛韦代谢物。     

离子交换高效液相层析法与酶化学法测定糖化血红蛋白的比对分析

目的对离子交换高效液相层析（IE-HPLC）法与酶化学法测定糖化血红蛋白（HbA1c）进行方法学比较。方法依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）有关文件对IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c进行相关性比较、精密度评价。结果 IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c相关性良好（Y=0.962 2X＋0.045,r=0.994 0,P〉0.05）,预期相对偏差在低值（4.0%）时为2.66%;在中值（6.5%）时为3.09%;在高值（16.0%）时为3.50%。IE-HPLC法批内变异系数（CV）为1.23%~2.17%,批间CV为1.87%~2.99%;酶化学法批内CV为0.93%~1.72%,批间CV为1.65%~2.71%。结论 IE-HPLC法与酶化学法测定HbA1c的相关性、精密度均很好,具有可比性。酶化学法测定HbA1c可用于自动生化分析仪,适合检验科使用。     

高效液相色谱法测定人血清中褪黑素的浓度

目的用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量。方法采用荧光检测器检测20例自愿者血清中的褪黑素。结果血清中褪黑素最低检测浓度为0.5pg·ml-1,检测限0.2pg,褪黑素在1.0～500pg·ml-1之间呈线性关系,回归方程Y=65744.7x-220.6(r=0.9989,P<0.05),回收率>94.7%,日间、日内变异系数均在10%以下。结论用反相高效液相色谱法测定血清中褪黑素的含量灵敏、快速、准确,为褪黑素在体内代谢等研究提供方法,对临床合理补充外源性褪黑素具有指导性。     

高效液相色谱法测定血清葡萄糖

摘要：目的:建立一种测定血清葡萄糖（glucose,Glu）的高效液相色谱法（HPLC）,探讨其能否作为血清Glu测定的参考方法。 方法:以D-半乳糖（D-galactose）为内标物,用无水乙醇沉淀、去除血清中的蛋白质,在pH 9.1条件下与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）反应,用HPLC测定血清Glu衍生产物、D-半乳糖衍生产物,用标准曲线法定量;对建立的方法进行方法学评价。 结果:本法测定血清Glu的批内变异系数（CV）为0.33%～0.67%,平均0.51%;批间CV为0.02%～0.85%,平均0.38%;总CV为0.47%～1.03%,平均0.68%。回收率为98.22%～101.96%。分析Glu的参考物质SRM 965a,测定结果与认定值的偏差为-0.928%～0.347%,平均偏差为-0.072%。 结论:初步建立了测定血清Glu的HPLC法;该法准确、精密,有望作为血清Glu测定的候选参考方法。     

高效液相色谱法检测精浆辅酶Q10水平及氧化应激研究

目的建立人精浆中辅酶Q10高效液相色谱测定方法,探讨正常生育男性及不育症患者精浆中辅酶Q10含量水平差异及其与男性不育氧化应激反应的关系.方法精浆样品经甲醇沉淀蛋白后,用正己烷提取辅酶Q10组分,45℃下氮气流吹干后溶解,以Lichrospher C18化学键合硅胶为固定相,异丙醇～甲醇～四氢呋喃(55∶ 39∶ 6)为流动相进行色谱等度分离,在275 nm波长下以辅酶Q9为内标定量检测,并对195例不育症患者和23名正常生育对照男性进行分析.结果在所建立的分析条件下,辅酶Q10及内标辅酶Q9色谱保留时间分别约为5.83 min及4.97 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确.辅酶Q10浓度在0.01 ～10.00 mg/L范围线性良好.批间(n=5)及平均批内(n=6)测定的相对标准偏差分别为0.80%和1.81%.样品测定回收率为94.1%～99.0%.对23例正常生育男性及195例不育症患者精浆中辅酶Q10含量测定结果分别为(37.1±12.2) μg/L和(48.5±20.4) μg/L,统计学分析表明两组之间的差异有统计学意义(P<0.01),随着精液中精子数量越少,这种差异性越显著.结论精浆CoQ10水平可作为男性不育研究时一项有用的生化参考指标,其升高或降低能反映生殖系统氧化应激反应状况,为临床治疗和有关男性生殖功能机制研究提供参考指导.