新疆维吾尔族妇女宫颈癌与HPV亚型感染的关系研究

目的：研究新疆维吾尔族妇女的HPV感染与宫颈癌发病的关系,为HPV疫苗引进提供理论依据。方法：选择新疆维吾尔族妇女CIN2/3和宫颈癌共100例,进行高危型HPV亚型检测。结果：新疆维吾尔族妇女CIN2以上病变中,主要为单一HPV16感染,其次为多重感染。在多重HPV亚型感染中,主要为HPV16、18感染、HPV16、58感染、HPV16、18、58感染（5.88%）。CIN2/3与宫颈癌中的多重HPV亚型感染率无差异（x2=0.638,P=0.424））结论：新疆维吾尔族妇女HPV16感染在宫颈癌的发生中起着重要作用,且主要以HPV16单一感染为主。多重HPV感染在宫颈癌的发生中不起主要作用。     

HPV感染与宫颈癌及癌前病变相关性临床分析

目的:探讨宫颈组织高危型HPV(16/18型)感染与宫颈癌及癌前病变发生的相关性临床分析。方法:运用现代宫颈癌及癌前病变的筛查方法检测宫颈组织HPV16/18型的表达水平及病变情况,判定HPV16/18型感染对宫颈癌及癌前病变的筛查价值。结果:HPV分型检测在诊断宫颈癌前病变中具有重要的指导作用。结论:积极防治HPV感染对于预防宫颈癌发生有重要意义。     

维吾尔族妇女对宫颈癌及HPV感染的认知程度调查

目的：对245例新疆维吾尔族宫颈癌妇女对宫颈癌及HPV认知程度的有关因素进行调查研究,为新疆宫颈癌健康教育干预奠定基础。方法：对245例维吾尔族宫颈癌患者进行有关宫颈癌的知识认知程度的问卷式调查后对其资料进行分析。结果：245例新疆维吾尔族宫颈癌患者的文化程度与宫颈涂片的认知程度有关（P〈0．01）,即随着文化程度升高,对宫颈涂片的认知程度提高;职业也与对宫颈涂片的认知程度有关,工人和干部对宫颈涂片的认知程度比其他职业高,差异有统计学意义（P〈0．01）;245例患者中无1例知道有关HPV的知识。结论：新疆维吾尔族宫颈癌患者对宫颈癌相关知识匮乏、对宫颈癌几乎无防护措施。因此,首先提高维吾尔族妇女的文化素质,使妇女认识有关宫颈癌及HPV的有关知识,通过健康教育干预降低新疆宫颈癌发病率迫在眉睫。     

宫颈组织中HPV感染与Survivin表达的关系研究

目的探讨宫颈癌组织中人乳头瘤病毒（HPV）感染与Survivin表达的关系。方法收集临床宫颈标本128分,提取总DNA,以HPV16和18的特异引物做PCR,检测HPV16和18;同时用免疫组织化学法检测Survivin的表达情况。结果HPV16和18的总感染率为35.16%（45/128）,随CIN分级增高,感染率也逐渐增高。HPV16和18阳性组织中Survivin表达量显著升高（P〈0.01）。结论Survivin表达增多可能在HPV16和18感染引起的宫颈癌变过程中发挥重要作用。     

HPV感染在高发区与低发区宫颈癌中的检测

收集宫颈癌高发区湖北省五峰县宫颈癌活检组织25例，宫颈炎22例，低发区的宫颈癌活检组织40例，宫颈炎15例由湖北医科大学附二医院妇瘤科提供。应用GP－PCR（generalprimers-PCR)技术检测多型HPV感染，发现宫颈癌高发区阳性率为88．0％（22／25），低发区为87．5％（35／40），宫颈炎高发区为36．4％（8／22），低发区为6．7％（1／15）。同时同一份样品进行HPV16型E7基因的检测，在宫颈癌高发区中检出率为60．0％（15／25），低发区为52．5％（21／40），宫颈炎中为22．7％（5／22），而在低发区宫颈炎中没有检测到HPV16E7基因，结果表明：HPV感染在高发区宫颈炎组织中明显高于低发区，两者差异具有显著性。     

天津滨海新区3447例妇女宫颈HPV感染型别分析

目的:分析天津滨海新区人乳头瘤病毒(HPV)感染情况及基因分布。方法:采用实时荧光定量PCR对3 447例妇女进行HPV分型检测,对感染情况及亚型分布进行统计学分析。结果:3 447例病例中HPV阳性病例693例,以单一型别感染为主,共检出977株15种高危型基因型和2种混合低危型(6/11)HPV。不同年龄段组间HPV感染差异有统计学意义(P<0.01)。不同月份组间HPV感染差异有统计学意义(P<0.01)。结论:本地区女性HPV感染率为20.10%,主要以58型,52型,16型病毒为主,以>50岁组感染率最高。本地区的HPV感染流行情况有自己的特点,可为本地区HPV疫苗的选取及宫颈癌疾病的防治提供一定的理论基础。     

女性生殖道HPV感染与宫颈癌前病变的关系

目的探讨女性生殖道感染人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌前病变的关系。方法收集688例宫颈糜烂患宫颈外口、颈管的脱落细胞，采用AutoCyte PREP液基细胞学检查，诊断按TBS标准。HPV检测采用基因芯片技术。结果HPV阳性组(320例)液基细胞学检查呈正常细胞抹片160例(50％)，HSIL24例(7．5％)，LSIL88例(27．5％)，ASCUS48例(15％)；HPV阴性组(368例)液基细胞学检查呈正常细胞抹片316例(85．87％)，HSIL0例，LSIL16例(4．35％)，ASCUS36例(9．78％)。两组比较差异极显。结论女性生殖道HPV感染较易发生宫颈癌前病变，提示积极防治HPV感染对于预防宫颈癌发生有重要意义。     

中原地区妇女宫颈癌患者人乳头瘤病毒(HPV)感染各亚型分布特点

目的探讨中原地区妇女宫颈癌患者人乳头瘤状病毒(human papillomav irus,HPV)感染分布情况及主要型别。方法采用人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒,对80例中原地区妇女经病理确诊宫颈癌患者的宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测。结果 80例宫颈癌患者中有76例HPV阳性,阳性率为95.0%,其中HPV16感染率最高为53.9%,其他高危型的感染率从高到低依次为HPV16、52、58、33、18、31、56、68、59、39、45、35、51。低危型中HPV11型感染率最高为10.5%,其他低危型的感染率从高到低依次为HPV6、44、42、43。多重感染率为25.0%。正常对照组65例中有15例HPV阳性(23.1%),HPV16感染率最高为26.7%。宫颈癌HPV阳性率明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论中原地区妇女宫颈癌患者中以HPV16、52、58、33感染为主要型别,可能是中原地区妇女宫颈癌较易感染的型别。     

CD44v6与人乳头状瘤病毒L1衣壳蛋白在宫颈鳞癌及癌前病变中的诊断价值

目的 探讨CD44v6与人乳头状瘤病毒（HPV）L1衣壳蛋白在宫颈鳞癌及癌前病变中的诊断价值。方法 收集2017年1月—2022年1月江南大学附属医院102例手术切除的宫颈鳞癌及癌前病变组织石蜡标本,其中宫颈鳞癌组织石蜡标本41例,癌前病变组织石蜡标本61例［宫颈低级别上皮内病变（LSIL）标本30例,宫颈高级别上皮内病变（HSIL）组织31例］,另选取同期49例因子宫肌瘤行子宫切除的正常宫颈组织石蜡标本为对照。采用免疫组织化学法检测不同组织中CD44v6与HPV L1衣壳蛋白表达,绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析CD44v6、HPV L1衣壳蛋白在宫颈鳞癌及癌前病变中的诊断价值。结果 正常宫颈组织、LSIL组织、HSIL组织、宫颈鳞癌组织中CD44v6阳性表达率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,宫颈鳞癌组织高于正常宫颈组织、LSIL组织及HSIL组织（P <0.05）,HSIL组织高于正常宫颈组织和LSIL组织（P <0.05）。正常宫颈组织、LSIL组织、HSIL组织、宫颈鳞癌组织中HPV L1衣壳蛋白阳性表达率比较,差异有统计学意义（P <0.05）,宫颈鳞癌组织低于HSIL组织、LSIL组织、正常宫颈组织（P <0.05）,HSIL组织低于LSIL组织、正常宫颈组织（P <0.05）。ROC曲线分析结果显示,宫颈鳞癌组织中CD44v6、HPV L1衣壳蛋白及两者联合诊断宫颈鳞癌的敏感性分别为70.73%（95% CI：0.543,0.834）、75.61%（95% CI：0.594,0.871）、70.73%（95% CI：0.543,0.834）,特异性分别为77.05%（95% CI：0.642,0.865）、73.77%（95% CI：0.607,0.838）、90.16%（95% CI：0.792,0.959）,AUC分别为0.746（95% CI：0.648,0.844）、0.742（95% CI：0.638,0.846）、0.907（95% CI：0.848,0.966）。ROC曲线分析结果显示,癌前病变组织中CD44v6、HPV L1衣壳蛋白及两者联合诊断HSIL的敏感性分别为74.19%（95% CI：0.551,0.875）、70.96%（95% CI：0.518,0.851）、70.96%（95% CI：0.518,0.851）,特异性分别为76.67%（95% CI：0.573,0.894）、73.33%（95% CI：0.538,0.870）、90.00%（95% CI：0.723,0.974）,AUC分别为0.748（95% CI：0.649,0.847）、0.726（95% CI：0.627,0.825）、0.890（95% CI：0.820,0.959）。结论 CD44v6在宫颈病变组织中异常高表达,且随着宫颈病变程度的加重,CD44v6表达水平呈升高趋势,HPV L1衣壳蛋白的变化与CD44v6相反,两者联合诊断宫颈鳞癌及癌前病变价值较高。     

HR-HPV载量和HR-HPV E6/E7 mRNA在宫颈癌和癌前病变的表达和意义

目的 比较和分析高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）载量和HR-HPV E6/E7 mRNA在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变（CIN）的表达和差异,探讨二者的关联及其在宫颈癌变进程中的临床意义。方法 以339例HR-HPV持续感染者为研究对象,依病理组织学诊断分为宫颈癌和CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ共4组,分别采用PCR荧光法、支链DNA技术定量检测宫颈刷检物中的HPV-DNA和HPV E6/E7 mRNA,对数据资料进行统计学分析。结果 （1）随宫颈病变严重程度的增加,HR-HPV DNA和HR-HPV E6/E7 mRNA的表达水平和阳性表达率均明显上升;（2）不同等级的宫颈病变中,HR-HPV DNA和HR-HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率总体分布差异无统计学意义（P>0.05）,两两比较显示,除CINⅡ组两指标检测阳性率差异无统计学意义（P>0.05）,其余各组间差异有统计学意义（P<0.05）;（3）4组患者HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV DNA的总体表达水平差异均有统计学意义（P<0.05）,两两比较显示：HPV E6/E7 mRNA在CINⅢ和宫颈癌之间差异无统计学意义（Z=-1.013,P=0.311）,其余组别间差异有统计学意义（P<0.05）。HR-HPV DNA在CINⅠ和CINⅡ之间差异无统计学意义（Z=-1.376,P=0.169）,CINⅢ和宫颈癌之间差异无统计学意义（Z=-0.991,P=0.322）,其余组别间差异有统计学意义（P<0.05）;（4）HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV DNA间存在相关性（r=0.533,P<0.05）,不同级别病变表现为在CINⅠ、CINⅡ呈明显正相关（r=0.412,0.804,均P<0.05）,在CINⅢ和宫颈癌无相关性（P>0.05）;（5）随着病毒载量的提高,高级别CIN和宫颈癌在宫颈病变整体构成的占比上升。结论 HR-HPV E6/E7 mRNA在CINⅠ阶段即开始表达,随着表达量激增,加速宫颈癌的发生,HR-HPV载量和HR-HPV E6/E7 mRNA存在显著相关性,病毒与宿主基因整合,干扰了HPV载量与病变严重程度的一致性。     

重庆地区1例宫颈癌组织人乳头瘤病毒16型E6,E7基因的结构和变异

目的：报告1例重庆地区宫颈癌组织人乳头瘤病毒16型E6，E7基因的结构及其变异，方法：应用聚合酶链式反应（PCR）从宫颈癌组织扩增出人乳头瘤病毒16型重庆株E6，E7基因，分子克隆技术进行基因的克隆，测序。结果：成功地扩增出重庆地区宫颈癌人乳头瘤病毒16型株E6，E7基因，并克隆于质粒载体pBKS( )，结论：该例宫颈癌组织人乳头瘤病毒16型E6，E7与标准株HPV16 E6，E7基因的长度相同，E6基因无变异，但E7基因有两处点突变。     

液基细胞学联合HPV基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的应用

目的:探讨液基细胞学检查(TCT)联合人乳头瘤病毒(HPV)基因分型检测在宫颈癌前病变筛查中的作用。方法:对我院2009年6月至2009年12月门诊TCT为非典型鳞状上皮细胞(ASCUS)及以上的患者行HPV基因分型检测。结果:(1)ASCUS及以上患者同时合并HPV阳性者共116例,其中ASCUS、LSIL、HSIL、SCC的例数(阳性率)依次为69(60%)、36(31%)、6(5%)、5(4%);116例患者中HPV高危型39例,AUSCS、LISL、HISL、SCC HPV高危型例数(阳性率)依次为16(23%)、14(39%)、4(67%)、5(100%),显示SCC与HPV高危型感染密切相关。(2)HPV高危型39例,平均年龄42.1岁;HPV低危型77例,平均年龄33.5岁;两者比较有显著性差异。结论:TCT与HPV基因分型检测是筛查宫颈病变的有效方法,对患者的随访具有重要意义。     

宫颈癌与癌前病变组织中HPV-16的整合感染状态

目的探讨宫颈癌及宫颈癌前病变中人类乳头瘤病毒16型（HPV-16）整合人宿主基因组的发生情况。方法选取252例宫
颈病变组织,其中宫颈癌48例,宫颈上皮内瘤样病变（CIN）204例,包括CINⅠ125例、CINⅡ46例、CINⅢ33例,另取因子宫肌
瘤行全子宫切除术的正常宫颈上皮20例为对照,采用重叠定量PCR检测HPV-16感染标本中病毒整合状态。结果宫颈癌中
HPV-16阳性感染31例,占宫颈癌患者总数的65.6%（31/ 48）,其中HPV-16整合感染18例,占HPV-16阳性宫颈癌患者的58.1%
（18/31）;在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ中,HPV-16阳性感染率分别为19.2%（24/125）、34.8%（16/46）、42.4%（14/33）,整合感染率分别
为16.7%（4/24）、18.8%（3/16）、35.7%（5/14）;与不同级别CIN病变相比,宫颈癌患者的HPV-16整合感染率明显增加,差异具有
统计学意义。结论HPV-16整合感染状态与宫颈病变严重程度呈正相关,在HPV DNA检测基础上联合应用高危HPV感染状
态的检测有利于提高宫颈癌筛查的靶向性并早期预测宫颈病变的转归。
     

HPV16E6对不同p53基因型宫颈癌细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的：探讨HPV16E6对不同p53基因型的宫颈癌细胞化疗药物敏感性的影响。方法：应用AO/EB染色结合荧光显微镜技术及Annexine V-FITC/PI双标法流式细胞仪检测不同浓度DDP干预前后宫颈癌细胞凋亡情况;Western印迹检测DDP干预后对HPV16E6和p53mt蛋白表达的影响;通过差异RT-PCR检测不同浓度DDP干预C33A,C33A-E6,C33A-P和CaSki4组细胞24和48h后HPV16E6基因mRNA表达的变化。结果：AO/EB染色和流式细胞术检测的C33A,C33A-E6,C33A-P,CaSki细胞随着DDP干预剂量的增大,凋亡率亦明显增加（P〈0.05）。Western印迹结果示C33A-E6和CaSki细胞中HPV16E6蛋白的表达随着DDP干预剂量的增大及作用时间的延长而逐渐降低甚至难以检测到表达（P〈0.01）,而未干预的对照组C33A-E6和CaSki细胞中HPV16E6的表达量稍有增加。C33A-E6,C33A和C33A-P3组细胞中均检测到p53mt的表达,但随着DDP干预剂量的增大及作用时间的延长,3组细胞总蛋白中p53mt的表达量均无明显改变（P〉0.05）。差异RT-PCR结果表明,在未予DDP干预的情况下,C33A-E6与CaSki细胞在24h时HPV16E6 mRNA的表达量无差异,而在48h时则C33A-E6细胞的HPV16E6 mRNA表达量显著高于CaSki细胞（P〈0.05）,且两组细胞48h的HPV16E6 mRNA表达均较24h显著增高（P〈0.05）;在24和48h两时间段内,随着DDP干预浓度的增加,两组细胞的HPV16E6 mRNA表达量均逐渐减少（P〈0.01）;但在同样浓度的DDP干预时,C33A-E6与CaSki的HPV16E6mRNA表达量无统计学差异（P〉0.05）。结论：HPV16E6基因对宫颈癌细胞株化疗敏感性的影响与p53的基因型（p53mt/p53wt）无明显关系,其可能通过其他作用机制对C33A细胞的凋亡和化疗敏感性产生作用。     

宫颈脱落细胞HPVL1蛋白及HPV DNA载量对宫颈病变的预测价值

目的 探讨宫颈脱落细胞HPVL1蛋白、人乳头瘤病毒(HPV) DNA载量对宫颈病变的预测作用.方法 选取宫颈病变患者362例,宫颈刷采集宫颈脱落细胞,采用免疫化学方法检测HPVL1蛋白,HC2技术检测HPV DNA载量,根据宫颈组织病理学结果将患者分为慢性宫颈炎(190例)、宫颈上皮内瘤变Ⅰ期(CIN Ⅰ,45例)、宫颈上皮内瘤变Ⅱ期(CINⅡ,43例)、宫颈上皮内瘤变Ⅲ期(CINⅢ,46例)和宫颈癌(38例);根据宫颈细胞学检查结果将脱落细胞分为未见异常细胞(NILM,122例),未明确性非典型鳞状上皮细胞(ASCUS,75例),可疑非典型鳞状上皮病变细胞(ASCH,52例),低度鳞状上皮内病变(LSIL,61例)和高度鳞状上皮内病变(HSIL,52例),比较不同宫颈病变HPVL1蛋白、HPV DNA载量的差异.结果 130例宫颈脱落细胞HPVL1蛋白阳性,阳性率为35.91％(130/362),其中HPVL1蛋白阳性率由大至小分别为:慢性宫颈炎＞CIN Ⅰ期＞CINⅡ期＞CINⅢ期＞宫颈癌,NILM＞ ASCUS＞ ASCH＞ LSIL＞ HSIL,不同宫颈病变组织病理学或细胞学类型比较差异具有统计学意义(P＜0.05),272例HPV DNA阳性,阳性率为75.14％,低度HPV DNA载量以慢性宫颈炎或NILM最多,高度HPV DNA载量以宫颈癌或HSIL最多,明显高于其他宫颈组织病理学或细胞学类型(P＜0.05).结论 HPVL1蛋白在宫颈脱落细胞的表达随着宫颈病变程度加重而下调,HPV DNA载量随宫颈病变程度加重而上调,二者检测在宫颈病变程度的预测中具有重要的价值.     

温州地方株HPV16型L1基因多态性及蛋白特性分析

目的：了解温州地方株HPV16 L1基因结构特点,分析其结构蛋白L1基因多态性及蛋白特性变化,为基于L1基因工程疫苗的设计和应用提供理论依据。方法：设计HPV16型L1基因特异性引物,从宫颈癌组织标本提取DNA,进行PCR扩增鉴定,PCR产物直接测序;进一步用Vector NTI 8.0和DNAStar软件分析HPV16型L1基因多态性及蛋白特性变化情况。结果：测定的序列与标准基因序列（NC 001526）比较,温州地区宫颈癌感染的HPV16型L1基因同源性为99.1%～99.8%,分别形成8种突变模式,其中3处由于核苷酸的改变,翻译的氨基酸也相应发生变化,但其编码蛋白在亲水性、表面可及性及抗原性上与标准株相比较无明显变化。结论：温州地方株HPV16 L1核酸有一定程度的变异。     

HPV16E6对不同p53基因型宫颈癌细胞 凋亡及化疗敏感性的影响

目的：探讨HPV16E6对不同p53基因型的宫颈癌细胞化疗药物敏感性的影响。方法：应用AO/EB染色结合荧光显微镜技术及Annexine V-FITC/PI双标法流式细胞仪检测不同浓度DDP干预前后宫颈癌细胞凋亡情况;Western印迹检测DDP干预后对HPV16E6和p53mt蛋白表达的影响;通过差异RT-PCR检测不同浓度DDP干预C33A,C33A-E6,C33A-P和CaSki 4组细胞24和48 h后HPV16E6基因mRNA表达的变化。结果：AO/EB染色和流式细胞术检测的C33A,C33A-E6,C33A-P,CaSki细胞随着DDP干预剂量的增大,凋亡率亦明显增加(P＜0.05)。Western印迹结果示C33A-E6和CaSki细胞中HPV16E6蛋白的表达随着DDP干预剂量的增大及作用时间的延长而逐渐降低甚至难以检测到表达(P＜0.01),而未干预的对照组C33A-E6和CaSki细胞中HPV16E6的表达量稍有增加。C33A-E6,C33A和C33A-P 3组细胞中均检测到p53mt的表达,但随着DDP干预剂量的增大及作用时间的延长,3组细胞总蛋白中p53mt的表达量均无明显改变(P＞0.05)。差异RT-PCR结果表明,在未予DDP干预的情况下,C33A-E6与CaSki细胞在24 h时HPV16E6 mRNA的表达量无差异,而在48 h时则C33A-E6细胞的HPV16E6 mRNA表达量显著高于CaSki细胞(P＜0.05),且两组细胞48 h的HPV16E6 mRNA表达均较24 h显著增高(P＜0.05);在24和48 h两时间段内,随着DDP干预浓度的增加,两组细胞的HPV16E6 mRNA表达量均逐渐减少(P＜0.01);但在同样浓度的DDP干预时,C33A-E6与CaSki的HPV16E6 mRNA表达量无统计学差异(P＞0.05)。结论：HPV16E6基因对宫颈癌细胞株化疗敏感性的影响与p53的基因型(p53mt/p53wt )无明显关系,其可能通过其他作用机制对C33A细胞的凋亡和化疗敏感性产生作用。     

实时荧光定量RT-PCR检测鼻咽癌骨转移相关基因表达的研究

目的研究CXCR4、CTGF、MMP-1、IL-11、MST1R、ETV-1 6种基因在鼻咽癌细胞5-8F与骨共培养前后的表达情况,分析这些基因在鼻咽癌骨转移中的作用。方法采用基于SYBR GREENⅠ法的实时荧光定量RT-PCR检测5-8F细胞与骨共培养前后骨转移相关基因的表达情况。结果5-8F细胞与骨共培养后CXCR4、CTGF、MST1R、ETV-1的表达水平较共培养前差异有显著性(P<0.05),均表达上调;MMP-1、IL-11则差异无显著性。结论实时荧光定量RT-PCR能够敏感、特异地检测出鼻咽癌细胞在与骨组织共培养前后的mRNA的表达变化,方法准确可靠,操作方便;CXCR4、CTGF、MST1R、ETV-1有可能成为判断鼻咽癌骨转移的潜在标志物。