布地奈德上调支气管哮喘小鼠肺组织IDO、抑制气道炎症和气道高反应性的研究

目的 研究布地奈德对急性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠肺组织吲哚胺-2,3双加氧酶(IDO)表达、气道炎症和气道高反应性的干预作用.方法 18只SPF级BALB/c小鼠随机分为正常组、哮喘组、布地奈德组.卵白蛋白(OVA)致敏和激发建立哮喘模型.末次激发24 h后,测定气道对乙酰胆碱的反应性,HE染色观察气道炎症细胞浸润,ELISA法检测血清总IgE、OVA特异性IgE(OVA-sIgE)以及支气管肺泡灌洗液(BALF) Th2细胞因子(IL-4和IL-13).Western blot检测肺组织IDO蛋白表达.结果 正常组小鼠气道阻力随乙酰胆碱浓度增加仅轻度增加,哮喘组气道阻力较正常组显著增高,布地奈德组气道阻力较哮喘组显著下降(P＜0.05);哮喘组血清总IgE和OVA-sIgE、BALF炎症细胞总数和嗜酸粒细胞分类计数、Th2细胞因子水平较正常组显著增高,布地奈德组炎症指标较哮喘组显著降低(P＜0.05);哮喘组肺组织IDO)较正常组显著下降,布地奈德组肺组织IDO较哮喘组显著增高(P＜0.05).结论 布地奈德抑制急性哮喘模型气道炎症和气道高反应性,可能与上调肺组织IDO有关.     

吲哚胺-2,3双加氧酶在支气管哮喘和过敏症中的作用

变态反应(过敏症)是指机体对某些抗原初次应答后,再次接触相同抗原刺激时,产生以机体生理功能紊乱或组织损伤为主的一种特异性免疫应答.吲哚胺-2,3双加氧酶(indoleamine 2,3 dioxygenase,IDO)既是细胞内催化色氨酸分子沿犬尿酸途径进行分解代谢的限速酶,也是一种重要的免疫调节酶.越来越多的研究表明,免疫耐受机制缺陷在变应性疾病中扮演着重要的角色,而抗原递呈细胞(APC)如树突状细胞(DC)表达的IDO可通过多种机制诱导机体产生免疫耐受.因此,通过增加DC表达IDO而诱导免疫耐受,有望成为治疗支气管哮喘、变应性鼻炎和特应性皮炎的新靶点.     

支气管哮喘与气道炎症和支气管高反应性

现已普遍认为支气管哮喘是一种气道炎症(AI)疾病,支气管高反应性(BHR)是其重要特征。本文探讨了哮喘与AI和BHR的关系,进而阐述哮喘的可能发病机制。     

支气管哮喘与气道炎症和支气管高反应性

现已普遍认为支气管哮喘是一种气道炎症（ＡＩ）疾病，支气管高反应性（ＢＨＲ）是其重要特征。本探讨了哮喘与ＡＩ和ＢＨＲ的关系，进而阐述哮喘的可能发病机制。     

布地奈德对支气管哮喘患者Th17/Treg平衡的干预机制研究

目的探讨布地奈德对支气管哮喘(简称哮喘)患者Th17/TregT细胞平衡的干预机制。方法收集轻、中、重度哮喘患者各15例用布地奈德进行干预治疗,健康者15人作为对照组,观察治疗前后外周血Th17及其胞内细胞因子IL-17和IL-23,Treg及其胞内细胞因子IL-10和TGF-β1;同时对以上观察对象进行肺功能检测。结果①Th17/Treg:中及重度哮喘患者Th17及其IL-17、IL-23显著高于健康对照组,而Treg及其IL-10、TGF-β1显著低于健康对照组;经布地奈德干预后Th17及其细胞因子下降,而Treg及其细胞因子回升。②肺功能:治疗后轻及中度患者的FEV1显著回升,且FEV1下降及回升率以及PEF波动率下降,而重度组治疗后上述效果不明显。③相关性分析:Th17与Treg呈显著负相关性。Th17与FEV1呈负相关性;与FEV1下降及上升率、呼吸峰流速波动率呈正相关性。而Treg与FEV1呈正相关性;与FEV1下降及上升率、呼吸峰流速波动率呈负相关性(P<0.05)。结论布地奈德可有效抑制哮喘患者Th17的数量与功能,同时增强Treg平衡数量与功能,使平衡向Treg回落,并且上述改变与哮喘的病变程度及肺功能的恢复紧密联系。     

通肺平喘汤联合布地奈德对老年支气管哮喘患者外周血Th17/Treg表达的影响

目的探讨通肺平喘汤联合布地奈德对老年支气管哮喘患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)表达的影响。方法选取150例老年支气管哮喘患者为研究对象,随机分为2组。对照组75例,采用布地奈德治疗;研究组75例,采用通肺平喘汤联合布地奈德治疗。比较治疗前、后两组Th17、Treg表达、肺功能〔用力肺活量(FVC)、1 s用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)及不良反应,并评价两组临床疗效。结果与治疗前相比,治疗后两组Th17降低,Treg、FVC、FEV1、FEV1/FVC升高,且研究组上述观察指标均优于对照组(P<0.05);研究组总有效率为90.67%(68/75),明显高于对照组〔73.33%(55/75),P<0.05〕;两组不良反应发生率相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用通肺平喘汤联合布地奈德治疗老年支气管哮喘,可显著提高临床疗效,降低外周血Th17的表达,增强Treg表达,促进肺功能恢复。     

小鼠泡型包虫囊液对小鼠骨髓来源树突状细胞表达IDO的影响

目的 探讨小鼠泡型包虫囊液(MCF)诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs)表达IDO的能力。方法 通过体外诱导培养获得BMDCs,分别与MCF(MCF组)、rmIFN-γ(阳性对照组)和RPMI-1640培养基(阴性对照组)进行共培养,在不同时间点收集各组BMDCs,采用Real-time PCR方法检测BMDCs表面IDO mRNA转录水平,Western blotting方法检测BMDCs表面IDO蛋白水平,ELISA方法检测BMDCs上清液中IDO浓度变化。结果 MCF组BMDCs表面IDO mRNA相对表达量和BMDCs上清液中IDO浓度在24 h达到峰值,明显高于阴性对照组(F=303.305,5752.473,P<0.01);而MCF组BMDCs表面IDO蛋白相对表达水平在48 h达到最高值,明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(F=70.971,P<0.01)。结论 MCF具有上调BMDCs表面IDO表达的能力,为进一步揭示泡型包虫病的免疫耐受分子机制提供了理论依据。     

致耐受性树突状细胞和调节性T细胞在支气管哮喘中的作用

支气管哮喘是树突状细胞(dendritic cells,DC)介导的以辅助性T细胞2(T-helper type2,Th2)优势免疫为特征的气道炎症性疾病,DC在变应原触发哮喘的始动环节中发挥中心作用.调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是一种特殊的T细胞,能够通过多种机制影响DC和效应性T细胞,从而发挥免疫抑制作用.DC不仅对入侵病原体产生免疫应答,而且对无害物质维持免疫耐受.这些具有致耐受性的DC通过多种不同的路径诱导Treg,上调Treg数目和(或)功能,从而抑制免疫应答.应用致耐受性DC作为靶点,有望为哮喘免疫治疗开辟新的途径.     

调节性T细胞及其与支气管哮喘发病的关系

调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）是不同于Th1和Th2的具有调节功能的T细胞亚群,它们可分泌免疫抑制因子IL-10和TGF-β,或通过接触抑制等机制,对效应性T细胞产生强大的抑制作用,在多种免疫性疾病包括哮喘中起重要调节作用。本文就Treg的生物学特点、分化与调控及其与支气管哮喘的关系作一综述,以探讨支气管哮喘发病机制的新思路。     

γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对支气管哮喘（简称哮喘）模型小鼠气道炎症反应的影响,为哮喘治疗寻找新的药物提供理论基础。方法制作小鼠哮喘模型,在小鼠激发阶段尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂MW167,采用RT-PCR方法检测小鼠肺T细胞IL-4mRNA及IFN-γmRNA的表达,ELISA方法检测外周血清及BALF上清中IL-4及IFN-γ水平。结果 MW167注射组较哮喘组病理学改变减轻,而肝及肾无明显形态学改变,MW167阻断Notch信号后,MW167注射组小鼠肺T细胞IL-4mRNA的表达较哮喘组减弱,而IFN-γmRNA的表达增强（IL-4：0.119±0.045比0.414±0.214,P〈0.01;IFN-γ：0.459±0.205比0.170±0.050,P〈0.01）;MW167注射组外周血清及BALF中IL-4的表达较哮喘组减弱[血清：（19.601±0.870）ng/L比（26.046±2.211）ng/L,P〈0.05;BALF：（75.077±14.438）ng/L比（113.478±8.628）ng/L,P〈0.01）];外周血清中及BALF中IFN-γ的表达较对照组增强[血清：（10.644±3.338）ng/L比（5.119±2.230）ng/L,P〈0.01];BALF：（26.131±3.608）ng/L比（21.299±2.830）ng/L,P〈0.01]。结论静脉注射γ-促分泌酶抑制剂抑制了哮喘模型小鼠气道炎症,对哮喘有潜在的治疗价值。     

γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对支气管哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的 研究γ-促分泌酶抑制剂阻断Notch信号对支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠气道炎症反应的影响,为哮喘治疗寻找新的药物提供理论基础.方法 制作小鼠哮喘模型,在小鼠激发阶段尾静脉注射γ-促分泌酶抑制剂MW167,采用RT-PCR方法检测小鼠肺T细胞IL-4 mRNA及IFN-γmRNA的表达,ELISA方法检测外周血清及BALF上清中IL-4及IFN-γ水平.结果 MW167注射组较哮喘组病理学改变减轻,而肝及肾无明显形态学改变,MW167阻断Notch信号后,MW167注射组小鼠肺T细胞IL-4 mRNA的表达较哮喘组减弱,而IFN-γ mRNA的表达增强(IL-4:0.119±0.045比0.414±0.214,P＜0.01; IFN-γ:0.459±0.205比0.170±0.050,P＜0.01);MW167注射组外周血清及BALF中IL-4的表达较哮喘组减弱[血清:(19.601±0.870) ng/L比(26.046±2.211) ng/L,P＜0.05;BALF:(75.077±14.438) ng/L比(113.478±8.628) ng/L,P＜0.01)];外周血清中及BALF中IFN-γ的表达较对照组增强[血清:(10.644±3.338) ng/L比(5.119±2.230) ng/L,P＜0.01]; BALF:(26.131±3.608) ng/L比(21.299±2.830) ng/L,P＜0.01].结论 静脉注射γ-促分泌酶抑制剂抑制了哮喘模型小鼠气道炎症,对哮喘有潜在的治疗价值.     

调节性T细胞与支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病,尤以机体Th2型免疫反应为主要表现,而近年来的大量研究表明调节性T细胞具有抑制Th2型反应的功能。通过对哮喘患者体内的调节性T细胞进行干预,来达到对哮喘的治疗和预防作用,已成为目前哮喘领域研究的热点。     

调节性T细胞与支气管哮喘的研究进展

支气管哮喘(简称哮喘)是一种慢性气道炎症性疾病,尤以机体Th2型免疫反应为主要表现,而近年来的大量研究表明调节性T细胞具有抑制Th2型反应的功能.通过对哮喘患者体内的调节性T细胞进行干预,来达到对哮喘的治疗和预防作用,已成为且前哮喘领域研究的热点.     

干预支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌的研究

目的 探讨表皮生长因子受体（EGFR）阻滞剂吉非替尼抑制支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌的作用.方法 将BALB/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组和吉非替尼治疗组（干预组）.采用苏木精-伊红（HE）染色法、过碘酸-雪夫（PAS）特殊染色法、免疫组化法、原位末端转移酶标记法分别检测各组小鼠气道炎症及杯状细胞的数量和黏液分泌、p-EGFR蛋白表达、细胞凋亡等状况,western blot法检测各组小鼠肺组织中p-EGFR变化.结果 与正常组相比,哮喘组小鼠出现典型的哮喘激发症状,肺组织中出现明显的以淋巴细胞和嗜酸性粒细胞为主的炎症细胞浸润等病理改变;哮喘组小鼠小气道杯状细胞数显著增加,干预组数量明显减少,差异具有统计学意义（P均＜0.05）;与哮喘组相比,干预组小气道中p-EGFR阳性、Bcl-2阳性杯状细胞数量分别显著减少,细胞凋亡、Bax阳性杯状细胞数量分别显著增加,差异具有统计学意义（P均＜0.05）.结论 吉非替尼可抑制支气管哮喘小鼠气道黏液高分泌,其机制可能足阻滞EGFR通路,抑制黏液分泌的同时,诱导分泌黏液的杯状细胞凋亡.     

慢性脑低灌注大鼠海马组织中IDO的变化

目的观察慢性脑低灌注大鼠海马组织中干扰素(IFN-γ)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达,探讨IDO在慢性脑低灌注导致认知功能损害中的作用。方法用双侧颈总动脉永久性结扎(2VO)制作慢性脑低灌注大鼠模型,Morris水迷宫检测2VO大鼠空间学习与记忆能力变化,免疫组化检测大鼠海马CA1区IFN-γ的表达,ELISA法检测IDO的表达。结果慢性脑低灌注大鼠的空间记忆能力较假手术组显著下降,海马IFN-γ、IDO表达较假手术组增加(P<0.05)。结论 IFN-γ刺激IDO合成增加,可能参与了慢性脑低灌注导致的认知功能损害。     

哮喘大鼠支气管高反应性与气道重塑的相关性

目的 探讨哮喘大鼠支气管对组胺的高反应性与气道重塑的相关性.方法 将20只清洁级幼龄大鼠随机分为对照组和哮喘组,哮喘组大鼠进行哮喘模型制备.两组大鼠行支气管激发试验(组胺和乙酰胆碱)记录PC20-Hist和PC20-Ach,并行肺功能检查和支气管组织切片苏木素-伊红(HE)染色测量气道平滑肌(ASM)的厚度和网状基底膜...     

儿童支气管哮喘、咳嗽变异性哮喘和支气管炎气道反应性特点

目的探讨儿童支气管哮喘、咳嗽变异性哮喘和急性支气管炎气道反应性特点及其临床价值,为临床诊断提供基础依据。方法回顾性分析2012年12月~2013年12月我院收治的以组胺为气道激发剂,采用气道反应性测定仪测定的40例支气管哮喘(A组)、40例咳嗽变异性哮喘(B组)及40例急性支气管炎(C组)儿童气道反应性变化及肺功能水平。结果 A组、B组和C组患儿肺功能指标FVC%、FEV1%、FEV1/FVC%、PEF%及MMEF%,两两比较差异无统计学意义(均P0.05);A组和B组患儿气道激发试验均为阳性,C组患儿气道激发试验阳性率为15.00%;3组患儿基础呼吸阻力(Rrscont)和基础呼吸传导率(Grscont)两两比较差异无统计学意义(均P0.05);3组患儿反应阈值(Dmin)和反应阈浓度(Cmin)两两比较差异有统计学意义(均P0.05)。结论气道反应性测定对不同呼吸系统疾病具有鉴别和指导治疗的作用,值得临床进一步推广使用。     

半乳糖凝集素-1抑制过敏性哮喘小鼠Th2型炎症反应的研究

目的探讨半乳糖凝集素-1(galectin-1)抑制过敏性哮喘小鼠模型Th2型炎症反应的作用机制。方法54只BALB/c雌性小鼠随机均分为健康对照组、卵清蛋白(OVA)组和治疗组。在第0、3、7天,OVA组和治疗组小鼠分别皮下注射致敏液[含100μg OVA混合相同体积10%Al(OH)3佐剂],健康对照组注射等量生理盐水。最后1次注射后7 d,OVA组和治疗组小鼠分别进行滴鼻激发(50μg OVA),健康对照组使用50μl生理盐水,每天激发1次。治疗组在激发2 h后,给予galectin-1(1μg/ml)进行滴鼻治疗,健康对照组和OVA组使用生理盐水(10μl),连续7 d。第22天,检测3组小鼠气道高反应;收集肺泡灌洗液(BALF),吉氏染色后,对炎症细胞进行分类并计数;肺组织切片用HE染色后,镜下观察肺组织炎症病理变化;取眼球血,ELISA检测血清中过敏原特异性IgE和Th2型炎症细胞因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13,以及γ干扰素(IFN-γ)、IL-10、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平。取脾淋巴细胞,流式细胞术检测调节性T细胞(Treg)的比例。结果气道高反应性结果显示,治疗组小鼠的气道高反应性(Penh值为2.08±0.17)较OVA组(Penh值为5.77±0.64)降低(P<0.05)。治疗组小鼠BALF中的嗜酸粒细胞、巨噬细胞和中性粒细胞数量分别为(1.33±0.52)×10^4/ml、(1.16±0.41)×10^4/ml、(1.33±0.52)×10^4/ml,与OVA组的[(7.00±1.41)×10^4/ml、(5.00±0.63)×10^4/ml、(5.50±0.84)×10^4/ml]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。肺组织HE染色切片镜检显示,OVA组小鼠支气管周围出现炎症细胞浸润和气道壁增厚;治疗组小鼠的肺部炎症较OVA组改善,且与健康对照组相似。血清ELISA检测结果显示,治疗组血清中过敏原特异性IgE为0.24±0.06,IL-4、IL-5、IL-13的表达水平分别为(104.49±20.76)pg/ml、(82.82±7.71)pg/ml和(31.59±9.78)pg/ml,均较OVA组的[0.87±0.10,(442.72±14.97)、(445.18±35.60)和(434.67±9.78)pg/ml]降低(P<0.05)。治疗组血清中的IFN-γ、IL-10、TGF-β的表达水平分别为(120.80±9.71)、(63.05±6.05)、(67.89±6.64)pg/ml,均较OVA组的[(47.28±5.01)、(23.89±2.98)、(15.49±3.75)pg/ml]提高(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,治疗组的Treg比例为(9.64±0.41)%,较OVA组的(1.81±0.48)%增加(P<0.05)。结论Galectin-1通过促进机体调节性T细胞和调节性细胞因子IFN-γ、IL-10、TGF-β的生成抑制小鼠过敏性哮喘Th2型炎症反应。     

支气管哮喘小鼠肺局部淋巴细胞的炎症记忆

目的探索支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道中是否存在长期炎症记忆,肺局部淋巴细胞能否传递炎症记忆。方法97只小鼠按随机数字表法分为哮喘组(A组,50只)、长期组(B组,20只)、长期对照组(C组,6只)、过继转移组(D组,12只,根据转移细胞数再分为D1、D2与D3亚组)、过继转移对照组(E组,6只)和naive小鼠组(F组,3只)。B组与D组中分别有亚组用牛血清白蛋白(BSA)代替卵蛋白(OVA)进行第二轮激发,称为BBSA亚组与DBSA亚组。各组评价病理学,检测肺泡嗜酸粒细胞性炎症强度、支气管肺泡灌洗液(BALF)中的细胞总数、细胞分类计数与白细胞介素5(IL5)水平,并比较B组与A组、D组与A组的炎症反应。A组小鼠末次激发后34d,经支气管肺泡灌洗(BAL)得到的混合细胞(BAL细胞)与去除红细胞的脾细胞,分别进行体外培养、变应原刺激,检测细胞增殖与培养液中的IL5浓度。结果(1)A组小鼠主要表现血管炎、肺泡炎与细支气管炎,BALF中的细胞总数、嗜酸粒细胞数和IL5浓度分别在末次激发后8h、24h、240h达峰值[分别为(22±5)×104/ml、(143±009)×104/ml、(751±529)pg/ml]。B组小鼠在第二轮激发前肺中仍有零星的血管炎与肺泡炎;经第二轮激发后血管炎更严重,肺泡炎约为激发前的3倍(激发前、后的肺泡嗜酸粒细胞性炎症指数之比为2123/714),BALF中的细胞     

超表达Serrate1树突细胞对支气管哮喘小鼠CD4+CD25+T细胞分化的作用

2组小鼠肺组织的病理学改变.结果 与对照组相比,Serrate1组可使哮喘小鼠脾脏CD4+CD25+T细胞数量明显增多,占CD4+T细胞的百分数亦明显增高;Serrate1组CDZT细胞IL-10、CTLA-4、TGFβ1 mRNA表达明显增强,且气道炎症明显减轻.结论 超表达Serrate1 DC能抑制哮喘小鼠CD4+T细胞分化和促进CD4+T细胞分泌抑制性细胞因子,有效改善哮喘小鼠气道炎症,表明DC可通过Notchl/Serrate 1信号通路影响调节性T细胞分化、逆转哮喘免疫耐受缺陷.