维A酸对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的:探讨维A酸(ATRA)诱导HL-60细胞增殖过程中端粒酶活性的变化.方法:将不同浓度(10-6、10-7及10-8M)的ATRA处理体外培养的HL-60细胞,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其细胞增殖情况,培养72 h时用TRAP-ELISA法检测端粒酶活性的变化.结果:维A酸呈时间-剂量依赖方式抑制HL-60细胞增殖,与对照组比较,实验组端粒酶活性均下降,其中10-6M及10-7M两组差异显著(P＜0.05,P＜0.01),而10-8M组无显著差异(P＞0.05).结论:维A酸能够抑制HL-60细胞增殖,该过程可能与其下调细胞端粒酶的活性有关.     

大蒜素对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的 研究大蒜素对人早幼白血病HL-60细胞端粒酶活性的影响。方法 不同浓度的大蒜素作用HL-60细胞后,MTT法测细胞的生长和增殖情况,TRAP-PCR-ELISA法研究细胞端粒酶活性的变化。结果 大蒜素能明显地抑制HL-60细胞的生长,且呈时间、浓度依赖性。不同浓度的大蒜素能下调HL-60细胞的端粒酶活性,且同样呈时间、浓度依赖性。结论 大蒜素可抑制HL-60细胞的端粒酶活性,可能是其诱导HL-60细胞凋亡的重要机制之一。     

维A酸对HL-60细胞增殖与NF-κB、VEGF表达的影响

目的：观察维A酸对HL-60细胞增殖与NF—kB、VEGF表达的影响，以探讨维A酸治疗白血病的作用机制。方法：将不同浓度的维A酸作用于HL-60细胞72h后，采用MTT法观察细胞生长，用ELISA法检测上清液中VEGF的含量，并用流式细胞术检测NF-kB活性表达及细胞周期。结果：HL-60细胞经维A酸作用72h后生长显著受抑制，实验组HL-60细胞上清液中VEGF含量、NF-kB表达下降，10^-6M、10^-7M组与对照组相比差异显著（P〈0．05），而10^-8M组与对照组比较，无显著差异（P〉0．05），其中10^-6M组NF-kB表达与VEGF含量呈显著正相关（r=0．55，P〈0．01，n=6），各治疗组G，期细胞明显升高．10^-6M组、10^-7M组与对照组相比，差异显著（P〈0．01），而10^-8M组与对照组比较，无显著差异（P〉0．05）。结论：维A酸对HL-60细胞增殖有抑制作用，其作用机制可能与NF-kB活性及VEGF表达水平下调有关。     

金荞麦Fr4诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的研究金荞麦有效部位Fr4能否诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响。方法用MTT法检测Fr4对细胞增殖的影响;光学显微镜和透射电镜观察细胞形态改变;Annexin-V/PI双染法检测细胞膜介导的凋亡;琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片;TRAP-PCR-ELISA检测端粒酶活性。结果金荞麦Fr4 60~240 mg.L-1能诱导HL-60细胞凋亡,电镜观察到典型的凋亡细胞,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到早期凋亡细胞数随剂量的增加而升高。MTT法示金荞麦Fr4抑制HL-60细胞增殖,并且呈剂量依赖性趋势,药物作用24 h的IC50为115 mg.L-1,Fr4诱导HL-60细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降。结论金荞麦Fr4可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能与端粒酶活力下降有关。     

齐墩果酸对人白血病HL-60细胞端粒酶活性的影响

目前研究表明,正常人体细胞中无端粒酶活性,而大部分肿瘤细胞和胚系细胞（如睾丸、卵巢）中端粒酶活性呈阳性[1]。齐墩果酸具有消炎、增强免疫、抑制血小板降集、降糖、抗氧化和利尿作用等多方面的临床药理作用,还具有护肝、抗高血脂、抗动脉粥样硬化及抗肿瘤等生物活性[2]。本实验旨在探讨齐墩果酸对人白血病HL-60细胞端粒酶活性的影响,为开发新的抗肿瘤药物提供实验依据。1材料与方法1.1材料人白血病HL-60细胞购自中国科学院上海细胞库。齐墩果酸（O leano lic A c id）购自中国药品生物制品检验检定所,溶于DM SO中,配制成浓度为80mM的原液,再用含10%胎牛血清的1640培养基稀释100倍,配制成终浓度为800μM的使用液。凯基TRAP-PCR银染法端粒酶活性检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。     

维A酸对HL-60细胞增殖与NF-κB、VEGF表达的影响

目的:观察维A酸对HL-60细胞增殖与NF-κB、VEGF表达的影响,以探讨维A酸治疗白血病的作用机制.方法:将不同浓度的维A酸作用于HL-60细胞72 h后,采用MTT法观察细胞生长,用ELISA法检测上清液中VEGF的含量,并用流式细胞术检测NF-κB活性表达及细胞周期.结果:HL-60细胞经维A酸作用72 h后生长显著受抑制,实验组HL-60细胞上清液中VEGF含量、NF-κB表达下降,10-6M、10-7M组与对照组相比差异显著(P＜0.05),而10-8M组与对照组比较,元显著差异(P＞0.05),其中10-6M组NF-κB表达与VEGF含量呈显著正相关(r=0.55,P＜0.01,n=6),各治疗组G1期细胞明显升高,10-6M组、10-7M组与对照组相比,差异显著(P＜0.01),而10-8M组与对照组比较,无显著差异(P＞0.05).结论:维A酸对HL-60细胞增殖有抑制作用,其作用机制可能与NF-κB活性及VEGF表达水平下调有关.     

维A酸多种方式联合阿糖胞苷或柔红霉素对体外HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨维A酸（ATRA）采用多种方式与阿糖胞苷（Ara-C）或柔红霉素（DNR）联用对体外白血病细胞株HL-60凋亡的影响。方法体外培养HL-60细胞株,细胞悬液以浓度2．0×10^5·mL^-1接种后分7组,其中A组不施加任何药物,作为空白对照;B组将Ara—C与ATRA同时联合作用48h;C组预先用ATRA作用24h,然后改用Ara-C继续作用24h;D组预先用Ara-C作用24h,然后用ATRA继续作用24h;E组将DNR与ATRA同时联合作用48h;F组预先用ATRA作用24h,然后用DNR继续作用24h;G组预先用DNR作用24h,然后用ATRA继续作用24h。Ara-C、DNR、ATRA给药浓度均为1．0×10^-7 mol.L^-1。应用流式细胞仪、DNA凝胶电泳及瑞氏-吉姆萨染色观察药物以不同方式联用导致细胞凋亡变化。结果D组的HL-60细胞凋亡比例轻度增加（50±14．7）％;细胞染色体完整,瑞氏染色为明显细胞凋亡。E组和G组均导致HL-60凋亡细胞明显增多,但细胞染色体丢失明显,瑞氏染色示细胞破裂。其中E组能最大限度减少HL-60存活数量,使HL-60细胞死亡数目增加,达（4．00±0．56）％。结论同时联合使用DNR与ATRA能显著减少HL-60细胞存活率。首先应用小剂量Ara—C,随后应用ATRA可较明显增多细胞凋亡数目,并能有效控制HL-60细胞死亡方式为凋亡而非坏死。     

全反式维甲酸和阿糖胞苷对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨全反式维甲酸（all trans-retinoic acid,ATRA)和阿糖胞苷（Ara-c)诱导人早幼粒细胞白血病细胞凋亡和分化的机制。方法 采用PCR－ELISA方法观察ATRA和Ara-c对HL－60细胞端粒酶活性的影响。结果 ATRA和Ara-c在诱导HL－60细胞凋亡和分化过程中均可使端粒酶 活性减低。结论 ATRA和Ara-c抑制HK－60细胞端粒酶的活性,可能是其诱导白血病细胞凋亡和分化的重要机制之一。     

维胺酯和维胺酸对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的分化诱导作用

本文研究了新维甲酸衙生物——维胺酯(RⅠ)和维胺酸(RⅡ)对人早幼粒白血病细胞(HL-60)的分化诱导作用,并与维甲酸(RA)和二甲基亚砜(DMSO)进行了比较。HL-60细胞经RⅠ和RⅡ处理后,细胞对NBT染料还原能力增强,细胞表面出现C₃补体受体等中性粒细胞的分化特征,但作用比RA弱。DMSO诱导上述分化性状出现时间不同,提示维甲酸类药物与DMSO诱导分化的机制可能不同。上述药物均可使HL-60细胞形态按粒系途径向较成熟的方向发展,但变化出现较晚。     

曲古菌素A抑制HL-60细胞端粒酶活性及hTERT的表达并诱导凋亡

目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A, TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制。方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用,流式细胞仪检测600 nmol·L-1TSA作用后的细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化,RT-PCR分析端粒酶三个亚单位的mRNA表达情况。结果 TSA对HL-60细胞的抑制作用具有时间和剂量依赖性,AnnexinV/PI双染色法检测凋亡显示,600 nmol·L-1TSA作用48 h后,细胞凋亡率为42·6%。600 nmol·L-1TSA作用12、24和48 h后,端粒酶活性分别下降到1·95 ±0·25、1·73 ±0·12和1·52 ±0·09。RT-PCR显示,端粒酶逆转录酶hTERT表达下降,而端粒酶RNA模板(hTR)和端粒酶相关蛋白(hTP1)表达无明显改变。结论 TSA抑制HL-60细胞中端粒酶活性,并诱导凋亡,其机制可能与曲古菌素A下调hTERT转录水平有关。     

8-氯腺苷对未分化HL-60细胞增殖的影响（图片更正）

Aim To study the effect of 8-chloroadenosine (8-CA)on undifferentiatied HL-60 cell line.Methods The IC50 of cancer cell proliferation was determined using a microculture plate reader at 570 nm (MTT) and 540 nm (SRB).Morphology of HL-60 cells was observed under a scanning electron microscope and a transmission electron microscope.The differentiation of HL-60 cells was examined by nitro blue tetrazolium reduction (NBT) and acid phosphatase assay.The cycle of HL-60 cells was analyzed by flow cytometry.Results 8-CA inhibited proliferation of eight human cancer cell lines.The IC50 ranked in the following order: KB (0.05 μmol·L-1) ＜ HL-60 (0.25 μmol·L-1) ＜ Bel-7402 (0.56 μmol·L-1) ＜ MCF-7 (0.65 μmol·L-1) ＜ HCT (0.79 μmol·L-1) ＜ HeLa (0.89 μmol·L-1) ＜ BGC-823 (1.149 μmol·L-1) ＜ PG (2.50 μmol·L-1).The scanning and transmission electron microscopy showed that the microvilli of HL-60 cell surface shortened, and the shape of HL-60 cells nuclei changed to kidney-shaped, horse shoe-shaped and bilob ated after treatment with 8-CA.Meanwhile, 8-CA promoted NBT reduction and increased activity of acid phosphatase in HL-60 cells in a time and concentration-dependent manner.Flow cytometry analysis indicated that 8-CA induced an appreciable increase of the cell population in G1 phase with a marked reduction in S phase.Conclusion 8-CA can induce differentiation of HL-60 cells and block the cells at G1 phase, thus inhibiting proliferation of HL-60 cells.     

全反式维甲酸对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响

摘要目的观察全反式维甲酸（ATRA）对急性前髓性白血病细胞HL60生长的影响,探讨其抑制肿瘤生长的作用方式。方法建立急性前髓性白血病细胞HL60的裸鼠皮下实体瘤模型,经尾静脉隔日给予ATRA,第14天测量肿瘤大小;体外实验中,用免疫荧光法检测分化相关抗原CD11b的表达,观察ATRA对HL60分化水平的影响,用碘化丙啶（PI）染色法观察ATRA对HL60的细胞周期的影响。结果ATRA治疗14 d后,ATRA组瘤体体积为（0.5±0.6） cm3,对照组为（1.9±1.7） cm3（P＜0.05）;体外实验中,ATRA处理HL60细胞72 h后,细胞分化相关抗原CD11b的表达为（27.3±3.2）%,对照组（5.1±3.2）%（P＜0.01）;ATRA处理HL60细胞24 h后,检测细胞周期分布比例,ATRA处理组静止期（G0/G1期）细胞比例为（57.6±1.5）%,对照组（43.0±2.0）%（P＜0.01）。结论ATRA能够有效抑制HL60实体瘤的生长;体外实验证实,ATRA抑制HL60生长的作用机制是诱导细胞G0/G1期阻滞,诱导细胞分化。     

8-氯腺苷对未分化HL-60细胞增殖的影响

目的　 8 氯腺苷对HL 6 0细胞增殖抑制作用及其机制的探讨。方法　采用MTT和SRB方法检测了 8 氯腺苷对不同种类人肿瘤细胞增殖的作用 ;通过扫描电镜和透射电镜观察了HL 6 0细胞表面和核的变化 ;利用NBT还原和酸性磷酸酶分析诱导HL 6 0细胞分化 ;用流式细胞仪分析了 8 氯腺苷对HL 6 0细胞周期的影响。结果　 8 氯腺苷对七种人肿瘤细胞的增殖有抑制作用 ,其IC50 值为KB ( 0 0 5 μmol·L- 1 ) 相似文献   

一种抗全反式维甲酸分化的HL－60亚系的特性

克隆了一株抗全反式维甲酸（ＲＡ）分化诱导作用的人早幼粒白血病细胞ＨＬ－６０的亚系ＨＬ－６０／ＲＡ：其抗分化特性不同于肿瘤细胞对一般细胞毒抗癌药的抗药性。可不依赖ＲＡ而传代培养。抗性稳定至少１８月之久。ＨＬ－６０／ＲＡ的抗分化具有定向特异性：对粒系分化诱导剂具有交叉抗性。而对单核－巨噬细胞系分化诱导剂仍然敏感。说明ＨＬ－６０粒系分化与单核－巨噬细胞系分化具有不同的调控机制。ＨＬ－６０／ＲＡ的克隆为深入研究肿瘤细胞的抗分化作用以及研究分化诱导剂和细胞分化的调控机理提供了工具。     

槲皮素对HL-60细胞周期的影响

本文报道了槲皮素对人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞的增殖和细胞周期的影响. 结果表明槲皮素能抑制HL-60细胞的增殖， 呈剂量依赖关系， 当槲皮素作用24， 48， 72 h后， 其IC₅₀分别为 46.6, 28.7, 14.9 μmol·L^-1流式细胞仪分析表明，槲皮素能明显增加HL-60的G₂-M期细胞，而相对减少G₀/G₁细胞之百分比，且呈剂量依赖关系，当去除槲皮素时，该作用是可逆的. 结果表明槲皮素对肿瘤细胞的生长抑制作用可能与其对细胞周期的影响有关.     

维生素A酸诱导分化的人早幼粒白血病细胞系HL-60的呼吸爆发功能

借助于自旋捕集剂DMPO,用电子自旋共振波谱仪直接定量检测了经维生素A酸(RA)诱导的人早幼粒白血病细胞HL—60受12—O—十四烷酰—佛波醇13—醋酸酯(TPA)刺激引起氧消耗爆发性增加(呼吸爆发)时主要产生的活性氧—羟基自由基(·OH).诱导分化的细胞产生·OH的量随刺激剂TPA在反应体系中量的增加(50～400 ng)而增高,并和RA诱导时间相关,在诱导d3达峰值,和硝基蓝四氮唑(NBT)还原反应及细胞生长曲线的时间过程一致.同时用自旋探针CTPO和TEMPOL及加宽剂Crox现察到RA诱导分化的HL—60细胞呼吸爆发过程中消耗细胞外介质中的氧.同样实验条件下,未经诱导的HL—60细胞不具有呼吸爆发功能,而人多形核白细胞(PMN)呼吸爆发时也消耗细胞外介质中的氧,检测到的活性氧自由基主要为超氧化物阴离子(O_2)。