注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血再灌注的影响

背景一些研究提示肿瘤坏死因子-α预注射对小鼠局灶性脑缺血可产生保护作用,脑缺血耐受与血浆肿瘤坏死因子-α水平增高有关.另一方面,肿瘤坏死因子-α是与脑卒中有关的一个有害细胞因子,抗肿瘤坏死因子-α循环抗体对再灌注损伤起保护作用.目的探讨脑缺血再灌注前、后不同时期注射肿瘤坏死因子-α对大鼠脑缺血灶的影响,是保护作用还是毒性作用.设计随机对照实验.单位哈尔滨医科大学附属第二医院神经科.材料实验于2002-01/2002-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成;选择健康雄性Wistar大鼠120只,随机将大鼠分为8组预注射肿瘤坏死因子-α 0.05,0.5,1.0μg及磷酸盐缓冲液对照组,后注射肿瘤坏死因子-α 0.05,0.5,1.0μg及磷酸盐缓冲液对照组,每组15只.方法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型.缺血前48 h或缺血2 h再灌注后,在大鼠小脑延髓池内分别注射不同剂量肿瘤坏死因子-α(0.05 μg,0.5 μg,1.0μg)或磷酸盐缓冲液.①各组取8只大鼠,于脑缺血2 h再灌注22 h,麻醉下处死取脑,制备TTC切片,用计算机图像分析系统测定每个脑片面积及梗死面积,然后计算梗死体积百分比.②各组取7只大鼠,于缺血2 h再灌注22 h后,麻醉下处死取脑,行HE、GFAP和ICAM-1免疫组化染色,用显微镜和计算机图像分析系统分析组织病理和免疫组化切片,计算胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数目及每侧半球细胞内黏附分子-1阳性血管数.主要观察指标①各组大鼠脑梗死体积百分比.②各组大鼠脑组织病理学观察.③各组大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达情况.结果120只大鼠全部进入结果分析.①脑梗死体积百分比肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组及1.0μg预注射组脑梗死体积减小,0.5μg预注射组脑梗死体积百分比减小70.9%,1.0 μg预注射组减小66.5%;肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射及1.0 μg后注射组脑梗死体积增加,0.5 μg后注射组脑梗死体积百分比增加22.3%,1.0 μg后注射组增加46.7%.肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组与1.0 μg预注射组间比较无显著差异(P＞0.05),肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射组与1.0 μg后注射组间比较有显著差异(P＜0.05).②病理变化肿瘤坏死因子-α0.5 μg预注射组及1.0 μg预注射组脑组织变性坏死程度减轻;肿瘤坏死因子-α0.5 μg后注射及1.0 μg后注射组脑组织变性坏死程度加重.③胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白的表达肿瘤坏死因子-α0.5 μg预注射组及1.0 μg预注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达减少(P均＜0.05);肿瘤坏死因子-α 0.5μg后注射及1.0 μg后注射组胶质纤维酸性蛋白和细胞间黏附分子-1蛋白表达增加(P均＜0.05);肿瘤坏死因子-α 0.5 μg预注射组与1.0 μg预注射组间比较无显著差异(P均＞0.05),肿瘤坏死因子-α 0.5 μg后注射组与1.0 μg后注射组间比较有显著差异(P均＜0.05).结论①肿瘤坏死因子-α预注射对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,该作用与星形胶质细胞的修复作用无关,而与细胞间黏附分子-1表达减少有关.②在脑缺血再灌注后给肿瘤坏死因子-α则加重脑缺血,该作用与细胞间黏附分子-1表达增加有关.③脑缺血前或脑缺血后给予肿瘤坏死因子-α决定了它的作用效果,这两种作用都有剂量依赖性.     

大鼠脑缺血再灌注损伤中肿瘤坏死因子仅预处理的作用α

背景：目前，有很多关于预处理诱导脑缺血耐受及其可能机制的报道，如脑缺血预处理、吸氧、针灸、异氟醚预处理等，国外一些研究也已证实肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)能诱导脑缺血，但机制尚未阐明。迄今，大鼠脑缺血再灌注损伤中TNF-α预处理的影响作用及其机制尚不十分清楚。目的：探讨TNF-α预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及可能机制。设计：完全随机设计，对照实验研究。地点和材料：实验地点为哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心。材料：健康雄性Wistar大鼠60只，体质量200—300g，完全随机分为TNF-α0．05μg组、0．5μg组、1．0μg组及对照组，每组15只大鼠。实验动物由哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心提供，显微器械、25μL微量进样器及微动脉夹均购自上海仪欣医疗器械公司，日本产钓鱼线(直径0．17mm)，恒温箱，数码相机，北航图像分析系统，PBS液，重组大鼠肿瘤坏死因子-α(购自美国Sigma公司)，CD54，GFAP试剂盒、相应二抗及DAB染色试剂盒皆购自武汉博士德生物工程有限公司，10g／L四氮唑红(TTC)及实验室常规使用材料等。干预：采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型(阻断大鼠大脑中动脉血流)，并予以改良。在脑缺血前48h，给大鼠小脑延髓池内注射不同剂量的TNF—α(0．05μg，0．5μg，1．0μg)或PBS液(对照组)，缺血2h后再灌注22h，处死大鼠。主要观察指标：脑梗死体积百分比，病理学观察，免疫组化法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein，GFAP)和细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecute-1，ICAM-1)蛋白表达情况。结果：与对照组相比，0．05μg组各指标差异无显著性意义(均P&;gt;0．05，脑梗死体积百分比t=1．52，患侧GFAP t=0．93，ICAM-1 t=0．82)，0．5μg组及1．0μg组脑梗死体积显著减小(均P&;lt;0．001，0．5μg组t=18．76，1．0μg组t=13．44)，脑组织变性坏死程度减轻，患侧GFAP阳性的星形胶质细胞减少(均P&;lt;0．001，0．5μg组t=5．82，1．0μg组t=6．84)，ICAM-1阳性的血管内皮细胞减少(均P&;lt;0．001，0．5μg组t=6．80，1．0μg组t=7．08)。结论：TNF-α可诱导脑缺血耐受，与星形胶质细胞的修复作用无关，而与ICAM-1表达下调、减轻再灌注后炎症反应有关，TNF-α诱导脑缺血耐受有剂量依赖性。     

脑缺血再灌注损伤大鼠血清细胞因子和内皮素水平变化及小牛血去蛋白注射液的干预作用

目的：观察小牛血去蛋白注射液对脑缺血再灌注损伤大鼠血清内皮素、肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的影响。 方法：实验于2004-10在锦州医学院药理教研室进行。取30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和小牛血去蛋白注射液组3组，每组10只。①假手术组和模型组灌胃给予生理盐水2mL／d，小牛血去蛋白注射液组灌胃给予小牛血去蛋白注射液2mL／d，连续5d。（爹给药5d后模型组和小牛血去蛋白注射液组采用右侧颈总动脉结扎法制作不完全性脑缺血60min再灌注模型，假手术组不结扎右侧颈总动脉。③再灌注60min后取血，利用放射免疫技术检测大鼠血清细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6和内皮素水平。 结果：30只大鼠全部进入结果分析。①肿瘤坏死因子α水平：小牛血去蛋白注射液组高于假手术组[（1．08&;#177;0．15），（0．84&;#177;0．08）mg／L，P〈0．05]，但显著低于模型组[（1．32&;#177;0．13）mg／L，P〈0．01]。（爹白细胞介素6水平：小牛血去蛋白注射液组高于假手术组[（117．10&;#177;14．72），（84．60&;#177;9．57）μg／L，P〈0．05]，但显著低于模型组[（140．70&;#177;16．32）μg／L，P〈0．01]。③内皮素水平：小牛血去蛋白注射液组高于假手术组[（166．30&;#177;6．36），（130．50&;#177;3．63）μg／L，P〈0．05]，但显著低于模型组[（171．00&;#177;4．74）μg／L，P〈0．01]。 结论：小牛血去蛋白注射液显著降低脑缺血再灌注大鼠血中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6及内皮素水平，保护脑结构。     

头穴百会透曲鬓对缺血再灌注大鼠脑皮质及纹状体内肿瘤坏死因子α表达的影响

背景：脑内肿瘤坏死因子α可通过诱导脑缺血再灌注时内皮细胞黏附分子的表达促进炎症反应及血栓形成。目的：观察头穴百会透曲鬓对缺血性脑损伤的良性调节，以及对脑内肿瘤坏死因子α过度表达的抑制作用。设计：随机对照实验。单位：青岛大学医学院附属医院急诊神经科。材料：实验于2002-08／2003-08在青岛大学医学院脑血管病研究所完成。清洁级雌性SD大鼠15只，体质量230-270g，随机分为假手术组、针剌组和对照组，5只／组。干预：①针刺组和对照组建立局灶性脑缺血再灌注模型，假手术组手术步骤同对照组，但不阻塞大脑中动脉。针刺组在缺血后10min给予针刺治疗，在大鼠头顶部相当于人体百会、风府穴常规剪毛消毒，用0．35mm&;#215;40mm毫针在皮下百会穴处左前下方相当于人体曲鬓穴处平刺，进针深度约0．8cm。另于风府穴直刺一针，深度约0．5cm。连接全能脉冲电疗仪，百会穴接阳极，风府穴接阴极，电针频率7HZ，强度6mA，时间30min。②脑片制备及肿瘤坏死因子α原位杂交检测：各组大鼠于缺血2h再灌注12h后深麻醉，左心室插管经升主动脉快速灌注生理盐水200mL，再持续灌注质量浓度40g／L多聚甲醛300mL，断头取脑，相同固定液后固定1h。自视交叉处开始向后取冠状切片，片厚约7μm。肿瘤坏死因子α阳性细胞胞浆着色呈棕黄色，阴性对照细胞不着色。应用VIDAS-21图像分析系统进行图像分析处理．结果用吸光度表示。③缺血脑组织病理学观察：常规苏木精-伊红染色，光镜下观察针刺组和对照组病变区病理变化。主要观察指标：①各组脑缺血再灌注后脑皮层及纹状体内肿瘤坏死因子α的表达。②针刺组和对照组缺血脑组织病理变化。结果：15只大鼠全部进入结果分析。①脑缺血再灌注大鼠脑皮质及纹状体内肿瘤坏死因子α的表达：与假手术组比较，对照组和针刺组表达明显增强（0．302&;#177;0．04，0．320&;#177;0．02：0．466&;#177;0．08，0．423&;#177;0．02；0．367&;#177;0．03，0．362&;#177;0．02；P〈0．05）；与对照组比较，针刺组表达明显降低（P〈0．05）。②缺血脑组织病理变化：对照组脑组织变性坏死程度较重，神经元变性坏死，胶质细胞呈空泡样变性，血管内有明显的白细胞聚集及附壁现象，血管周围亦有明显白细胞浸润；针刺组仅有少量神经元变性坏死及胶质细胞空泡样变性，血管内白细胞聚集减少。结论：脑缺血再灌注后脑皮层及纹状体内肿瘤坏死因子α水平升高，头曲鬓穴处平刺可明显抑制其表达，从而有效阻止炎性细胞因子过量表达及其生物学作用的发挥，减少脑缺血后的炎性损伤。     

高血糖状态下大鼠脑缺血再灌注后不同时限点细胞间黏附分子1及肿瘤坏死因子α表达的差异

目的：观察高血糖状态下大鼠脑缺血再灌注后炎症介导因子细胞间黏附分子1以及促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α在不同时限点的表达及其差异。方法：实验于2003-07／2004-03在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。36只雄性SD大鼠随机分成3组：正常血糖组16只、高血糖组16只和假手术组4只，其中高血糖组和正常血糖组又分为再灌注2，4，6，24h4个亚组。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，其中高血糖组在阻断大脑中动脉前30 min腹腔注射500g／L葡萄糖溶液（3g／kg），各组大鼠于麻醉状态下取脑组织制备冠状切片，观察脑组织细胞间黏附分子1、肿瘤坏死因子α表达采用免疫组织化学方法。结果：36只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织细胞间黏附分子1的表达：正常血糖组缺血2h再灌注2h可见细胞间黏附分子1表达[（18．13&;#177;2．16）个／视野]，再灌注24h达高峰[（59．50&;#177;2．25）个／视野]。与正常血糖组相比，高血糖组细胞问黏附分子1表达高峰提前至再灌注6h[（76．75&;#177;2．14）个／视野]。在再灌注2，4，6h高血糖组明显高于正常血糖组，再灌注24h时低于正常血糖组（P〈0．01）。②各组大鼠脑组织肿瘤坏死因子α的表达：正常血糖组和高血糖组均在缺血2h再灌注2h时可见肿瘤坏死因子α的表达[（7．81&;#177;1．60）个／视野。（11．65&;#177;1.90）个／视野，P〈0．01]，于再灌注24h达高峰[（26．25&;#177;1．81）个／视野，（35．00&;#177;228）个／视野，P〈0．01]。在同一再灌注时间点明显高于正常血糖组（P〈0．01）。结论：高血糖状态下细胞间黏附分子1及肿瘤坏死因子α均呈高表达，但细胞间黏附分子1的表达与肿瘤坏死因子α的表达具有时间上的差异。     

鼠脑缺血再灌注时葛根素对核因子κB表达的影响

背景：近年研究证明，炎症反应是脑缺血再灌注损伤的主要机制之一，核因子κB作为一种转录因子在脑缺血再灌注炎症反应中起着调控多种炎性细胞因子表达的关键作用。先期实验表明，葛根素具有抗氧自由基和神经细胞凋亡的作用，如果还具有抗炎作用，则可进一步阐述葛根素的脑保护作用机制。目的：探讨葛根素在全脑缺血再灌注损伤中对核因子κB的影响。设计：随机平行对照设计。单位：卫生部北京医院急诊科、华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科、华中科技大学同济医学院的病理学教研室、实验动物中心和公共卫生学院卫生统计学教研室。材料：实验于2003—04／12在同济医学院病理学教研室进行。将健康清洁级的Wistar大鼠75只随机分为假手术组，脑缺血再灌注组和葛根素组3组各25只，每组按再灌注的时间又分为2，6，12，24和48h共5个观察时间点，每个时间点5只大鼠。方法：①假手术组：不电凝双侧椎动脉，分离双侧颈总动脉不夹闭，不给药。②脑缺血再灌注组：电凝双侧椎动脉后用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min后松开，行再灌注，在再灌注开始时腹腔注射1mL的生理盐水，以后每隔6h注射1次。③葛根素组：处理程序同脑缺血再灌注组，只是将生理盐水改为葛根素100mg／kg。主要观察指标：在大鼠全脑缺血10min后再灌注2，6，12，24和48h时，用免疫组织化学法检测海马CA1区核因子κB和抑制蛋白κB的活性；用原位杂交法检测肿瘤坏死因子αmRNA的表达，用苏木精-伊红染色检测存活神经元数目。结果：经补充后75只大鼠进入结果分析。①核因子κB的活性：脑缺血再灌注组再灌注2h即明显升高，6h达到高峰，48h仍高于假手术组（P均〈0．01）；葛根素组在各个时间点均低于脑缺血再灌注组（P〈0．01）。②肿瘤坏死因子αmRNA的表达：脑缺血再灌注组再灌注2h即明显升高，12h达到高峰，48h仍高于假手术组（P均〈0．01）；葛根素组在再灌注6～48h均低于脑缺血再灌注组（P〈0．01）。③抑制蛋白κB的活性：脑缺血再灌注组再灌注2h有明显下降，6h降至最低点，以后逐渐升至2h水平，葛根素组在各个时间点均高于脑缺血再灌注组（P〈0．01或0．05）。④存活神经元数目：脑缺血再灌注组随再灌注时间的延长而逐渐减少（P均〈0．01）。在各对应时间点，葛根素组均多于脑缺血再灌注组（P〈0．05或0．01）。结论：全脑缺血再灌注时，葛根素可通过抑制抑制蛋白κB的降解及核因子κB的活性，下调肿瘤坏死因子αmRNA的表达。抑制炎症反应而起到脑保护作用。     

高压氧预处理对体外大鼠脑小胶质细胞产生细胞因子的影响

背景：高压氧可以减轻脑组织的缺血再灌注损伤，这种作用与高压氧对小胶质细胞的调节作用有着密切的联系。目的：探讨高压氧对体外大鼠脑小胶质细胞活性、分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮的影响。设计：完全随机分组设计，对照实验。单位：上海第二军医大学海医系潜水医学教研室、免疫教研室、病理教研室、实验动物中心。材料：实验于1999—05／2000—01在解放军第二军医大学潜水医学实验室及免疫教研室完成。实验选用新生1日龄SD大鼠30只。方法：①用消化法培养新生SD大鼠的脑组织小胶质细胞。非特异性酯酶染色及细胞免疫化学染色鉴定小胶质细胞。②原代小胶质细胞按2&;#215;10^5/孔浓度接种于48孔培养板，将小胶质细胞随机分以下5组：对照组未经高压氧处理；高压氧（0．2MPa 1h）预适应3，7，10，14d组。经各时程高压氧处理后，随机分成2大组，其中一组细胞培养液添加细菌脂多糖（激活小胶质细胞）1mg／L，另一组则不添加。③白细胞介素1活性测定采用胸腺细胞增殖法。肿瘤坏死因子α活性测定采用L929细胞的细胞毒性试验。以Griess法测定亚硝酸的含量代表一氧化氮含量。④两样本比较采用未配对计量资料t检验。主要观察指标：不同时程高压氧预处理后大鼠脑小胶质细胞在静息和激活不同状态下白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量。结果：SD大鼠30只均进入结果分析。①静息小胶质细胞细胞外液白细胞介素1、肿瘤坏死因子α活性和一氧化氮含量：各组间差异不明显。②脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液白细胞介素1活性和一氧化氮含量：高压氧预处理10和14d组明显低于对照组[10d组：0．409&;#177;0．014，（5．21&;#177;0．77）μmol／L；14d组：0．381&;#177;0．004，（4．93&;#177;1．02）μmol／L，P〈0．05]。③脂多糖激活的小胶质细胞细胞外液肿瘤坏死因子活性：高压氧预处理14d组明显低于对照组[（51.20&;#177;1．13）％，（70．10&;#177;2．26）％，P〈0．05]。结论：0.2MPa的高压氧预处理可抑制活化小胶质细胞分泌产生白细胞介素1、肿瘤坏死因子α和一氧化氮，但对于静息小胶质细胞无明显作用。     

通心络对大鼠脑缺血再灌注模型微血管细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1表达的影响

背景：现代医学发现通心络制剂除了具有抗凝和抑制血小板聚集作用外，对血管内皮细胞有一定的保护作用。目的：观察中药复方制剂通心络是否影响脑缺血再灌注动物模型黏附分子的表达。设计：随机对照实验。单位：解放军第二军医大学长征医院神经内科。材料：实验于2002—10／2003—01在解放军第二军医大学长征医院神经内科实验室完成。选择雄性SD大鼠25只，随机分为假手术组5只、模型组10只和通心络组10只。方法：线栓法制备大鼠大脑中动脉脑局灶性脑缺血再灌注模型，假手术组除将尼龙线插在颈外动脉接近颈内动脉分叉处外，其余同模型组。通心络组大鼠在缺血再灌注前给予通-15,络粉剂1．0g／（kg-d），溶在生理盐水中灌胃1周。模型组和假手术组灌胃等剂量生理盐水。各组大鼠麻醉后取脑制备切片．行常规苏木精-伊红染色、免疫组化及原位杂交染色。主要观察指标：①缺血再灌注后细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1阳性微血管表达数目。②缺血再灌注后细胞间黏附分子1mRNA阳性微血管表达数目。结果：①假手术组手术侧大脑半球皮质和基底节区未见细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子1蛋白和细胞间黏附分子1mRNA阳性微血管表达。②模型组大鼠缺血2h再灌注6h后，缺血侧大脑细胞间黏附分子1、血管细胞黏附分子-1蛋白表达水平和细胞间黏附分子1mRNA表达水平显著升高。③通心络组缺血侧大脑半球皮质和基底节区蛋白和mRNA阳性微血管数较模型组显著降低[（10．42&;#177;1．98），（12．42&;#177;2．14）／高倍视野；（8．54&;#177;2．00），（11．12&;#177;1．56）／高倍视野]（P〈0．05），血管细胞黏附分子1蛋白阳性微血管表达数目无显著变化（P〉0．05）。结论：通心络可以降低大鼠脑缺血再灌注后细胞间黏附分子1的转录和翻译过程，有助于减轻脑缺血后的炎症性损伤过程。     

大鼠脑缺血再灌注损伤中肿瘤坏死因子α预处理的作用

背景目前,有很多关于预处理诱导脑缺血耐受及其可能机制的报道,如脑缺血预处理、吸氧、针灸、异氟醚预处理等,国外一些研究也已证实肿瘤坏死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)能诱导脑缺血,但机制尚未阐明.迄今,大鼠脑缺血再灌注损伤中TNF-α预处理的影响作用及其机制尚不十分清楚.目的探讨TNF-α预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及可能机制.设计完全随机设计,对照实验研究.地点和材料实验地点为哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心.材料健康雄性Wistar大鼠60只,体质量200～300 g,完全随机分为TNF-α0.05μg组、0.5μg组、1.0μg组及对照组,每组15只大鼠.实验动物由哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心提供,显微器械、25μL微量进样器及微动脉夹均购自上海仪欣医疗器械公司,日本产钓鱼线(直径0.17 mm),恒温箱,数码相机,北航图像分析系统,PBS液,重组大鼠肿瘤坏死因子-α(购自美国Sigma公司),CD54,GFAP试剂盒、相应二抗及DAB染色试剂盒皆购自武汉博士德生物工程有限公司,10 g/L四氮唑红(TTC)及实验室常规使用材料等.干预采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型(阻断大鼠大脑中动脉血流),并予以改良.在脑缺血前48 h,给大鼠小脑延髓池内注射不同剂量的TNF-α(0.05 μg,0.5μg,1.0μg)或PBS液(对照组),缺血2 h后再灌注22 h,处死大鼠.主要观察指标脑梗死体积百分比,病理学观察,免疫组化法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和细胞间粘附分子-1(Intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达情况.结果与对照组相比,0.05μg组各指标差异无显著性意义(均P＞0.05,脑梗死体积百分比t=1.52,患侧GFAP t=0.93,ICAM-1 t=0.82),0.5μg组及1.0μg组脑梗死体积显著减小(均P＜0.001,0.5μg组t=18.76,1.0μg组t=13.44),脑组织变性坏死程度减轻,患侧GFAP阳性的星形胶质细胞减少(均P＜0.001,0.5μg组t=5.82,1.0μg组t=6.84),ICAM-1阳性的血管内皮细胞减少(均P＜0.001,0.5μg组t=6.80,1.0 μg组t=7.08).结论TNF-α可诱导脑缺血耐受,与星形胶质细胞的修复作用无关,而与ICAM-1表达下调、减轻再灌注后炎症反应有关,TNF-α诱导脑缺血耐受有剂量依赖性.     

高血糖状态下大鼠脑缺血再灌注后不同时限点细胞间黏附分子1及肿瘤坏死因子α表达的差异

目的:观察高血糖状态下大鼠脑缺血再灌注后炎症介导因子细胞间黏附分子1以及促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α在不同时限点的表达及其差异。方法:实验于2003-07/2004-03在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成。36只雄性SD大鼠随机分成3组:正常血糖组16只、高血糖组16只和假手术组4只,其中高血糖组和正常血糖组又分为再灌注2,4,6,24h4个亚组。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,其中高血糖组在阻断大脑中动脉前30min腹腔注射500g/L葡萄糖溶液(3g/kg),各组大鼠于麻醉状态下取脑组织制备冠状切片,观察脑组织细胞间黏附分子1、肿瘤坏死因子α表达采用免疫组织化学方法。结果:36只大鼠均进入结果分析。①各组大鼠脑组织细胞间黏附分子-1的表达:正常血糖组缺血2h再灌注2h可见细胞间黏附分子1表达犤(18.13±2.16)个/视野犦,再灌注24h达高峰犤(59.50±2.25)个/视野犦。与正常血糖组相比,高血糖组细胞间黏附分子1表达高峰提前至再灌注6h犤(76.75±2.14)个/视野犦。在再灌注2,4,6h高血糖组明显高于正常血糖组,再灌注24h时低于正常血糖组(P<0.01)。②各组大鼠脑组织肿瘤坏死因子α的表达:正常血糖组和高血糖组均在缺血2h再灌注2h时可见肿瘤坏死因子α的表达犤(7.81±1.60)个/视野,(11.65±1.90)个/视野,P<0.01犦,于再灌注24h达高峰犤(26.25±1.81)个/视野,(35.00±2.28)个/视野,P<0.01犦。在同一再灌注时间点明显高于正常血糖组(P<0.01)。结论:高血糖状态下细胞间黏附分子1及肿瘤坏死因子α均呈高表达,但细胞间黏附分子1的表达与肿瘤坏死因子α的表达具有时间上的差异。