中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在急性肾损伤中的保护作用

急性肾损伤(AKI)在临床上较为常见,且预后较差,需及早干预,但是目前临床上常用的诊断方法主要依赖于功能性指标,如血清肌酐(SCr)检测。然而由于检测技术的局限,SCr异常出现较晚,且其检测结果亦有可能出现一定的偏差,这对于临床上及时诊断及干预AKI非常不利。因此迫切需要一种能明确早期肾脏损伤的生物标志物。近年来,许多学者在寻找早期AKI的生物学标记物方面做了一定的探索,逐渐发现一些有潜在应用价值的指标,如中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、肾损伤分子-1(KIM-1)、白细胞介素-18(IL-18)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)、肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)等,其中NGAL作为早期AKI生物标志物的研究倍受关注。一些研究显示NGAL在肾脏保护、炎症反应、肿瘤发生等方面亦发挥重要作用,但其具体作用机制目前尚未完全阐明。文章仅就NGAL在AKI发生过程中所发挥的保护作用及其参与机制做相关综述。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的研究进展

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neu-trophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)又称为脂质运载蛋白-2(lipocalin-2,Lcn-2)或噬铁蛋白(siderocalin),是lipocalin家族的成员之一。1993年,Kjeldsen等[1]在研究人类中性粒细胞92000明胶酶B[即基质金属蛋白酶9(MMP-9)]时发现,在培养的活化中性粒细胞的上清液中存在NGAL。随后,NGAL cDNA及全基因序列分别于     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在急性胰腺炎中的应用

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在急性胰腺炎(AP)中的应用价值。方法选取临床上被确诊为AP的患者74例作为AP组[轻度急性胰腺炎(MAP)组(34例)、重症急性胰腺炎(SAP)组(40例)],以20名体检健康者作为正常对照组。检测所有研究对象血清中NGAL、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、C反应蛋白(CRP)、淀粉酶(AMY)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清NGAL、AMY诊断AP的价值。结果 SAP组和MAP组血清NGAL、AMY、CRP水平均高于正常对照组(P0.05);SAP组血清NGAL、CRP水平高于MAP组(P0.05),2个组之间血清AMY水平差异无统计学意义(P0.05);SAP组、MAP组和正常对照组之间BUN、Cr水平差异均无统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析结果显示,NGAL、AMY诊断AP的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.722、0.784,最佳临界值分别为240 ng/mL、250 U/L,敏感性分别为90.0%、83.3%,特异性分别为55.4%、63.9%。结论血清NGAL检测对AP的辅助诊断有一定价值,且在一定程度上可反映AP的严重程度。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白与肾脏疾病

脂笼蛋白（lipocalin）作为生物化学标志物几乎被应用于临床医学的各个领域，诸如感染性疾病、肿瘤、脂类代谢紊乱、肝脏和肾脏损害。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白fneutrophil gelatinase-associated hpocalin，NGAL）是一新型的脂笼蛋白，是Kjeldsen等在1993年研究中性粒细胞内92000明胶酶。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白——一种新的肾损伤标志物

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase associated lipocalin,NGAL),又称人脂质运载蛋白2(lipocalin 2,Ln2)或噬铁蛋白(siderocalin),是人脂质运载蛋白家族中的一个新成员。近年来,NGAL作为一种新的肾损伤标志物倍受关注。本文就NGAL的生物学特性、临床检测     

儿童血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白正常参考值的建立

目的建立上海某儿童医院血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)正常参考值。方法选取2014年5-10月上海交通大学附属儿童医院健康儿童新鲜EDTA抗凝血浆183份和新鲜尿液125份,检测NGAL水平。根据CLSI C28-A2按年龄分组,取x±1.96s建立正常参考值。结果各年龄组之间正常参考值范围间差异具有统计学意义(P0.05)。健康儿童血浆NGAL正常参考值:0~7个月,291.28μg/L;7个月至5岁,150.87μg/L;5~9岁,127.93μg/L;9~≤16岁,161.74μg/L;健康儿童尿液NGAL正常参考值:0~7个月,257.31μg/L;7个月至5岁,201.55μg/L;5~9岁,197.69μg/L;9~≤16岁,151.46μg/L。0~7个月组血浆和尿液NGAL结果较其他3组高。结论建立儿童医院血浆和尿液NGAL的正常参考值,为儿科急性肾功能损伤的诊断和治疗提供临床依据。     

内毒素休克所致急性肾损伤家兔血和尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白变化

目的探讨内毒性休克所致急性肾损伤(AKI)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)变化的意义以及液体复苏对变化的影响。方法利用家兔耳缘静脉注射LPS造成脓毒症休克AKI模型。动物数字法随机分成空白对照组、模型组及液体复苏组,每组6只。在模型前基础状态(Tx)、成模时(T0)、成模后3 h(T3)及成模后6 h(T6)测定每一组的血流动力学指标及测定血、尿NGAL及肌酐,HE染色和透射电镜显微镜观察肾组织病理变化。结果各组动物血流动力学指标及肾功能在基础状态时无明显差异(P<0.05)。空白对照组不同时间的血流动力学及肾功能较基础状态时无明显差异(P<0.05)。模型组在T0、T3、T6,平均动脉压(MAP)及全身血管阻力指数(SVRI)均较基础状态(Tx)明显下降,在T3、T6时,HR及SVV升高,心脏指数(CI)、心舒张末期容量指数(GEDVI)、胸腔内血容量指数(ITBI)降低,较基础状态(Tx)比,差异有统计学意义(均P<0.05)。液体复苏后3 h及6 h后,与休克时(T0)相比,血流动力学指标改善,MAP、CI、SVRI、GEDVI、ITBI明显升高,SVV降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。模型组血肌酐明显升高,观察6 h与基础状态差异有统计学意义(P<0.05),液体复苏组和模型组比差异无统计学意义。模型组和液体复苏组尿NGAL在3 h,血清NGAL在观察6 h均明显高于基础状态(P<0.05)。尿和血清中NGAL在不同时间点无明显相关性(r=0.767、P=0.075;r=0.698、P=0.302)。HE染色镜下可见液体复苏组肾小球结构完整、肾间质炎细胞浸润、肾小管水肿、管腔变小,上皮细胞空泡样变性较模型组程度轻。应用透射电镜对各组肾小球、肾小管进行了观察,液体复苏组肾小球结构完整、肾间质炎细胞浸润、肾小管水肿、管腔变小,上皮细胞空泡样变性较模型组程度轻。结论尿和血清NGAL在内毒性休克所致AKI中明显升高,NGAL可能是早期诊断内毒素性休克所致AKI较好的生物学标志物。早期充分液体复苏可能有助于肾功能的改善。     

尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光检测方法的建立及性能评价

目的建立定量检测尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的化学发光法并评价。方法以辣根过氧化物酶标记NGAL单抗、磁微粒包被NGAL单抗,基于化学发光平台,采用双抗体夹心法模式,建立尿液NGAL定量检测方法,并评价空白限、线性范围、精密度、干扰、回收率和方法学等指标。结果空白限为0.1 ng/mL,线性范围为10～1 500 ng/mL,分析内和分析间精密度(CV)均小于8%,血红蛋白100 mg/dL、三酰甘油3 000 mg/dL、胆红素50 mg/dL、抗坏血酸10 mg/dL、肌酐1 000 mg/dL、尿素12.5 g/dL干扰率小于10%;回收率为90.9%～103.1%;第95位百分位数法确定本方法参考区间为0～111.08 ng/mL;与Abbott NGAL检测试剂进行方法学对比,相关系数(r)为0.990 5,总符合率为96.1%。结论本研究建立的尿液NGAL定量检测方法性能良好,具有一定的临床应用价值。     

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对感染性休克继发急性肾损伤患者的早期诊断价值

目的:探讨血清和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在预测感染性休克患者继发急性肾损伤(AKI)中的意义。方法:选择2016-05—2017-10期间收住我院重症医学科,符合感染性休克标准的患者295例。依据2012年KDIGO更新的AKI的诊断标准将入选患者分为AKI组(136例)和非AKI组(159例)。检测并比较两组患者入科后6h内血NGAL、尿NGAL、血肌酐等指标。绘制ROC曲线,确定NGAL的检测临界值以及对早期预测感染性休克患者继发急性肾损伤(AKI)的意义。结果:AKI组患者血肌酐、血NGAL、尿NGAL分别为(150±50)μmol/L、(239±147)ng/ml、(374±230)ng/ml,非AKI组患者分别为(75±32)μmol/L、(158±112)ng/ml、(353±275)ng/ml,AKI组患者的血肌酐、血NGAL水平显著高于非AKI组患者(均P<0.05),而两组尿NGAL水平的比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析,血肌酐曲线下面积为0.918,95%可信区间为0.865~0.970,敏感度88.9%,特异度81.4%,截断值为102.5μmol/L;血NGAL曲线下面积为0.667,95%可信区间为0.551~0.783,敏感度72.2%,特异度63.9%,截断值为138.5ng/ml。结论:血NGAL在预测感染性休克患者AKI的发生上表现出一定的敏感度和特异度,具备一定的临床早期诊断价值,尿NGAL在早期预测感染性休克患者AKI的发生上无明显临床价值。     

探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测对早期肾损伤辅助诊断的价值

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测对妊娠高血压综合征患者早期肾损伤辅助诊断的价值。方法选择2012年2月至2013年7月在本院门诊和住院确诊为妊娠高血压综合征并伴有肾损伤的患者120例设为实验组,按照病情严重程度分为轻度组、中度组和重度组,选择同期健康体检妊娠者40例设为对照组,均进行中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和胱抑素C浓度水平测定。结果与对照组比较,试验各组患者的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和胱抑素C浓度水平均有显著性提升,差异有统计学意义(P0.05),且随着患者病情加重,两项指标呈现逐步升高的趋势;试验各组患者的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白和胱抑素C阳性检出率均在85.00%以上,且各组患者两项指标阳性检出率两两比较,均无显著性差异(P0.05);中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测结果与以临床诊断结果作为金标准的结果一致性检验Kappa值为0.92。结论中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白是辅助诊断妊娠高血压综合征患者的早期肾损伤的一种良好血清指标,且对于患者病情监测也具有一定的临床价值,同胱抑素C一样具有较高的灵敏度,值得临床推广。     

Plasma neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a predictive biomarker for the detection of acute kidney injury in adult poisoning

Context: Acute kidney injury (AKI) is a serious complication in intoxicated patients. Recently, a new biomarker - neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) - was used to predict AKI in patients who were critically ill or had sepsis. Objective: To evaluate the utility of plasma NGAL as an early predictor of AKI in adults with acute poisoning. Materials and methods: This retrospective, observational, cohort study was conducted between December 2013 and November 2014. A total of 157 consecutive adult patients who presented to the emergency department (Level 1 regional center) of Kyungpook National University Hospital, a tertiary teaching hospital in Daegu, Korea, within 24 h of poisoning were included. Initial plasma NGAL levels and laboratory parameters were concurrently measured upon hospital arrival. AKI was defined according to Acute Kidney Injury Network criteria. Development of AKI was predicted using plasma NGAL levels and by analyzing the area under the receiver operating characteristic curve (AUC). Results: The overall rate of AKI was 14.6% (n?=?23). Plasma NGAL levels in the AKI group were higher than those in the non-AKI group (median, 310 vs. 86 ng/mL; p?<0.001). Additionally, baseline NGAL levels allowed for better prediction of AKI than initial creatinine levels. The AUC of plasma NGAL was 0.895 (95% confidence interval [CI]: 0.832–0.941), with a cut-off value of 227 ng/mL (sensitivity, 76.2%; specificity, 95.8%). Plasma NGAL had a higher predictive capacity for AKI than serum creatinine (AUC 0.741, 95% CI: 0.662–0.810), base deficit (AUC 0.795, 95% CI: 0.701–0.870), lactate (AUC 0.781, 95% CI: 0.690–0.856), and anion gap (AUC 0.636, 95% CI: 0.535–0.730). Conclusion: Plasma NGAL may serve as a good predictor of AKI in cases of adult poisoning.     

NGAL在成人心脏术后急性肾损伤中的早期应用价值探讨

目的探讨血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在成人心脏术后急性肾损伤(AKI)早期诊断中的应用价值。方法收集成人心脏手术患者62例,分别在其术前及术后6、24、48 h采集血液标本。采用酶法检测血清肌酐(SCr),并以48 h内SCr上升至≥26.5μmol/L作为AKI的诊断标准,其中23例发生AKI(AKI组)、39例未发生AKI(无AKI组)。应用乳胶增强免疫透射比浊法分别检测2组患者的血清NGAL和半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)水平。结果与术前比较,AKI组术后6、24、48 h血清NGAL水平均明显上升(P0.01);血清Cys C水平在术后24、48 h明显上升(P0.01)。无AKI组术后6、24、48 h血清NGAL水平差异均无统计学意义(P0.05);血清Cys C水平术后6、24 h差异无统计学意义(P0.05),术后48 h升高(P0.05)。结论血清NGAL水平在成人心脏术后发生AKI 6 h即明显上升,明显早于Cys C和SCr。血清NGAL可以作为早期诊断成人心脏术后AKI的标志物。     

免疫增强比浊法和免疫荧光法测定血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的比较及诊断脓毒症急性肾损伤的价值

目的比较免疫增强比浊法和免疫荧光法在测定患者血浆和尿液中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的差异,评估血浆和尿液NGAL值对诊断脓毒症患者发生急性肾损伤(AKI)的价值。方法选择脓毒症患者35例,根据是否发生AKI分为脓毒症AKI组(n=12)和脓毒症非AKI组(n=23)。另选取同期健康体检人群8例作为对照组。留取入院24 h内的血浆和尿液标本。采用免疫增强比浊法和免疫荧光法分别测定血浆和尿液标本的NGAL值。绘制ROC曲线评估血浆NGAL值预测脓毒症AKI的诊断效率。结果采用免疫增强比浊法进行测定,脓毒症组血浆和尿NGAL值均显著高于对照组(P0.01)。脓毒症AKI组血浆NGAL显著高于脓毒症非AKI组(P0.05),但2组尿NGAL值差异无统计学意义(P0.01)。采用免疫荧光法进行测定,脓毒症组血浆NGAL值显著高于对照组(P0.01),脓毒症AKI组血浆NGAL值显著高于脓毒症非AKI组(P0.05)。ROC分析表明,免疫增强比浊法曲线下面积0.785(95%CI:0.642~0.928),免疫荧光法曲线下面积为0.853(95%CI:0.729~0.977),约登指数最大时的判断点分别为0.575和0.567。结论血浆NGAL值可判断脓毒症AKI的发生,免疫荧光法较免疫增强比浊法更为准确。     

Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) for the early detection of cardiac surgery associated acute kidney injury

Abstract

Background. Acute kidney injury (AKI) is a common complication after cardiac surgery. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) may be an early biomarker for cardiac surgery–associated (CSA) AKI. We investigated whether increased urinary NGAL concentrations were predictive of AKI within 4 days after surgery and of mortality within 9 months. Methods. Consecutive patients (n = 141) undergoing major cardiac surgery were included. Creatinine, blood urea nitrogen, cystatin C and urinary NGAL were measured before, 4 hours and 4 days after extracorporeal circulation. Results. AKI was observed in 47 (33.3%) patients. The 4-hour urinary NGAL measurement was an independent predictor of stage 2 and 3 AKI (AUC 0.901; 95% CI 0.81–0.99). Patients with AKI had a higher 9-month mortality rate (19.1% vs. 3.2%; logrank 10.9; P = 0.001; HR 19.8; 95% CI 3.7–107.1). Urinary NGAL was not predictive of mortality within 9 months after surgery. Conclusion. Urinary NGAL is a biomarker for very early risk stratification of AKI after cardiac surgery and may be useful as a basis for early interventional strategies to prevent CSA-AKI.     

羟基红花黄色素A对人肾小管上皮细胞冷缺氧/复氧凋亡的影响

目的:探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)预处理组对人肾小管上皮细胞(HK2细胞)冷缺氧/复氧(冷H/R)损伤导致的细胞凋亡的影响。方法:HK2细胞株消化传代后采用计算机随机方法分为sham组(对照组)、冷缺氧/复氧组(冷H/R组,细胞冷缺氧4 h,复氧4 h)、HSYA预处...     

缺氧预适应对缺氧复氧诱导内皮细胞-中性粒细胞黏附的影响

目的：观察缺氧预适应对缺氧／复氧后血管内皮细胞表面黏附分子的表达以及中性粒细胞－内皮细胞黏附的影响。方法：采用β－N－乙酰氨基己糖苷酶比色法检测黏附率;流式细胞术检测内皮细胞表面黏附分子E－选择素、细胞间黏附分子－1（ICAM－1）的表达;苔盼蓝摄取法检测细胞存活率;常规生化法检测乳酸脱氢酶活性。结果：血管内皮细胞经缺氧／复氧处理后,苔盼蓝摄取率,乳酸脱氢酶活性均明显增高,E－选择素、ICAM－1表达明显上调,其表面中性粒细胞的黏附增加,缺氧预适应显著抑制缺氧／复氧的上述作用。结论：缺氧预适应通过调节内皮细胞表面黏附分子的表达,抑制缺氧／复氧诱导的内皮细胞－中性粒细胞黏附。     

尿肾损伤分子1和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对脓毒症合并急性肾损伤患者早期连续性肾脏替代治疗的预测价值

目的探讨尿肾损伤分子1（KIM-1）及中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）对脓毒症合并急性肾损伤（AKI）患者早期连续性肾脏替代治疗（CRRT）的预测价值。 方法选择温州市人民医院2012年7月至2015年11月收治的脓毒症合并AKI的患者159例,根据是否CRRT治疗,分为非CRRT组（92例）及CRRT组（67例）。收集所有患者尿液标本,采用酶联免疫吸附测定法检测尿KIM-1及NGAL水平。对两组患者的一般资料进行比较,并采用Logistic回归分析影响脓毒症合并AKI患者早期CRRT治疗的相关因素。同时通过受试者工作特征曲线（ROC）评价尿KIM-1、NGAL浓度在预测脓毒症AKI患者需CRRT的价值。 结果非CRRT组及CRRT组患者在年龄[（65 ± 18）岁vs.（77 ± 11）岁,t=26.380,P<0.001]、腹腔感染[8/92 vs. 23/67,χ²=16.228,P<0.001]、四肢皮肤软组织感染[19/92 vs. 2/67,χ²=10.556,P<0.001]、冠心病[46/92 vs. 50/67,χ²=9.828,P=0.002]、糖尿病[24/92 vs. 38/67,χ²=15.289,P<0.001]、慢性心功能不全[36/92 vs. 52/67,χ²=23.229,P<0.001]、气管插管留置>48 h [32/92 vs. 35/67,χ²=5.239,P=0.024]、急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分[（16 ± 6）分vs.（22 ± 5）分,t=40.671,P<0.001]、尿KIM-1 [（17 ± 4）ng·L^-1·Cr^-1 vs.（29 ± 19）ng·L^-1·Cr^-1,t=34.849,P<0.001]及NGAL水平[（5.7 ± 1.4）ng·L^-1·Cr^-1 vs.（7.7 ± 1.6）ng·L^-1·Cr^-1,t=65.483,P<0.001]的比较差异均有统计学意义。Logistic回归分析统计结果显示：糖尿病、慢性心功能不全、APACHEⅡ评分>18分、尿KIM-1浓度>21.0 ng·L^-1·Cr^-1及NGAL浓度>6.5 ng·L^-1·Cr^-1是影响脓毒症AKI患者选择CRRT治疗的相关因素;尿KIM-1、NGAL水平及两者联合预测患者需CRRT治疗的ROC曲线下面积分别为：0.783（95%CI：0.702~0.864,P<0.05）、0.819（95%CI：0.753~0.886,P<0.05）及0.867（95%CI：0.810~0.923,P<0.05）;NGAL及KIM-1的约登指数分别为0.465和0.502,两者联合后,约登指数为0.603。 结论尿KIM-1及NGAL水平对早期预测脓毒症合并AKI患者介入CRRT治疗有一定的应用价值,且两者联合检测更具有预测价值。     

高压氧对缺氧/复氧模型下大鼠骨髓间充质干细胞的影响及其相关机制

目的:探讨高压氧对缺氧/复氧模型下大鼠骨髓间充质干细胞的影响及其相关机制。方法:选取3—4周龄SD雄性大鼠,采用全骨髓贴壁法培养至P3代,随机分为正常组A(细胞置于常规培养箱内培养)、缺氧/复氧组B(置于95%N2、5%CO_2密闭培养箱中培养9h,复氧6h)、缺氧/复氧+高压氧组C(90%O_2,2.5ATA、90min)、缺氧/复氧+高压氧+YC-1组D,实验组其余时间处理和正常组相同。A、B、C、D组均于处理结束12h后行CCK-8比色法、流式细胞仪检测细胞存活率及凋亡率。Western blot检测HIF-1α、β-catenin、LEF-1蛋白表达水平。结果:(1)与A组相比,缺氧/复氧后B、C、D组细胞存活率明显降低,差异具有显著性意义(P0.05),给予高压氧后C组存活率比B组升高,D组存活率较C组降低(P0.05)。(2)实验组B、C相比,C组中HIF-1α、β-catenin、LEF-1蛋白表达水平升高(P0.05)。(3)实验组C、D组相比,给予YC-1阻断剂后HIF-1α、β-catenin、LEF-1蛋白表达减少(P0.05)。结论:高压氧能够提高缺氧环境下骨髓间充质干细胞存活率,其机制可能与调控HIF-1α介导的Wnt通路有关。