内皮素受体阻断剂对糖尿病大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

目的：观察糖尿病大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ1型（AT1）受体的改变以及内皮素受体阻断剂bosentan对其影响。方法：将SD大鼠建成链脲佐菌素诱导的糖尿病模型,设非治疗组、bosentan治疗组和正常对照组。4周后采用免疫组织化学、Western blot及RT－PCR方法检测肾脏AT1受体基因和蛋白表达。结果：与SD对照组相比,糖尿病大鼠存在明显的蛋白尿和内生肌酐清除率升高,其肾脏AngⅡ水平明显升高,同时伴有AT1受体的mRNA和蛋白表达显著下降。bosentan能显著缓解上述异常。结论：糖尿病大鼠肾脏AngⅡ及AT1受体表达明显异常,bosentan具有治疗作用。     

血管紧张素1a型受体基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统的变化及其对糖尿病肾小球硬化的影响

目的 探讨血管紧张素1a型受体（AT1aR）基因敲除小鼠肾脏局部肾素-血管紧张素系统（RAS）的组分改变对糖尿病肾病（DN）肾小球硬化的影响及其可能机制。 方法 AT1aR基因敲除小鼠和野生型小鼠腹腔注射链脲佐菌素（STZ，300 mg/kg）诱导糖尿病模型12周后，取肾脏组织作冰冻组织切片，用激光捕获微切割技术分离肾小球，提取RNA。用实时定量PCR的方法检测肾小球内AT1aR、血管紧张素1b型受体（AT1bR）、血管紧张素2型受体（AT2R）、血管紧张素原、血管紧张素转化酶（ACE）、肾素、醛固酮合成酶（CYP11B2）的mRNA表达。PAS染色观察肾脏病理变化。免疫组化检测转化生长因子β1（TGF-β1）、1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、单核细胞趋化因子1(MCP-1)和肾素的表达。比较不同基因型小鼠肾小球细胞外基质和各细胞因子的表达变化。 结果 与野生型小鼠相比，AT1aR基因敲除小鼠肾小球内AT1bR、血管紧张素原、肾素、CYP11B2的表达明显上调（P < 0.05），AT2R表达下调，ACE无明显改变；AT1aR基因敲除小鼠肾小球细胞外基质明显增加（P < 0.05），TGF-β1、PAI-1、MCP-1和肾素的表达均明显增加（P < 0.05）。 结论 AT1aR基因敲除并不能使糖尿病小鼠肾脏病变改善。RAS组分的表达改变（AT1bR的上调和AT2 的下调，肾素的上调和CYP11B2的上调）参与糖尿病肾小球病变过程。     

抑制血管紧张素Ⅱ1型受体对血管紧张素Ⅱ诱导的高血压肾病中肾脏纤维化和足细胞损伤的作用研究

目的 探究靶向抑制血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AGTR1)对血管紧张素Ⅱ诱导的高血压肾病中肾脏纤维化和足细胞损伤的影响.方法 将40只健康小鼠按随机数字表法分成正常对照组、生理盐水组、模型组和药物组,每组10只小鼠,正常对照组不进行处理,生理盐水组进行单侧肾切除并用微渗...     

血管紧张素Ⅱ1型受体及其拮抗剂对肾脏损伤和高糖诱导巨噬细胞的影响

目的探究糖尿病肾病(DN)患者肾脏损伤与血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的表达及巨噬细胞浸润之间的关系,以及AT1R拮抗剂氯沙坦对巨噬细胞的调控作用。方法收集不同病理分期的DN患者肾穿刺样本,并收集肾癌患者的癌旁组织作为癌旁对照组,免疫组化法检测不同病理分期患者肾组织中AT1R的表达以及CD68阳性巨噬细胞的浸润;从医院HIS系统调取患者信息,比较肾穿刺前服用过血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(ARB)类药物的患者与未服用过ARB类药物的患者之间巨噬细胞浸润的改变。细胞实验以骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,不同浓度的氯沙坦作为干预因素;采用流式细胞术测定巨噬细胞的纯度、共刺激分子的表达以及吞噬能力;采用实时荧光定量PCR法以及Elisa法测定各组细胞中炎症因子、巨噬细胞分型标记物的mRNA及蛋白表达;应用一氧化氮(NO)试剂盒检测各组细胞培养上清液中NO的表达。结果与癌旁对照组相比,DNⅢ型和Ⅳ型患者的肾脏中AT1R的表达有明显上升趋势,差异具有统计学意义(P0.05)。随着DNⅢ型和Ⅳ型患者的肾脏中AT1R的表达上升,巨噬细胞浸润明显增加(P0.05)。此外,在相同病理分期的患者中,服用过ARB类药物的患者较未服用的患者其肾组织中的巨噬细胞浸润明显减少(P0.05)。细胞实验结果进一步证实使用氯沙坦干预后能显著减少巨噬细胞活化,抑制高糖诱导的巨噬细胞M1型分化。结论 AT1R在肾脏中的表达水平及巨噬细胞浸润程度与DN患者肾脏损伤程度成正相关,ARB类药物能减轻DN患者肾脏组织中巨噬细胞浸润及活化。     

血管紧张素Ⅰ转化酶及血管紧张素Ⅱ受体1型基因多态性与糖尿病肾病的关联研究

目的探讨血管紧张素I转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)基因I/D多态性及血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)基因A1166C多态性与糖尿病肾病的关系。方法选择2013年4月至2015年10月在广东医科大学附属医院、东莞市塘厦医院和东莞市大朗医院住院2型糖尿病患者,研究对象分为2型糖尿病组(T2DM组)97例和正常对照组50例,其中T2DM组根据有无肾病分为52例糖尿病肾病(DN)组和45例糖尿病非肾病(非DN)组;采用标准的酚-氯仿-蛋白酶K法提取外周血DNA;分别用聚合酶链反应(PCR)技术、PCR-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)对ACE I/D、ATlR Al166C多态性进行检测。遗传平衡吻合度检验用HardyWeinberg平衡法。采用χ~2检验分析基因多态性与DN的相关性。结果 DN组和非DN组基线资料无统计学差异(P0.05)。经χ~2检验,DN组DD基因型频率32.6%(17/52)明显高于非DN组DD基因型频率20.0%(9/45)(χ~2=6.62,P0.05);DN组D等位基因频率58.7%(61/104)明显高于非DN组D基因型频率41.1%(37/90)(χ~2=5.94,P0.05)。DN组与非DN组AT1R Al166C各基因型分布频率无显著性差异(χ~2=0.22,P0.05);各等位基因频率分布亦无明显差异(χ~2=0.21,P0.05)。对照组与T2DM组ACE I/D和ATlR Al166C基因多态的基因型分布和等位基因频率均无显著性差异(P0.05)。结论 ACE基因I/D多态性与DN有关,携带DD基因型和D等位基因的T2DM患者是DN的易感人群。AT1R基因A1166C多态性与T2DM并发DN无关。     

细胞因子对大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

目的 探讨细胞因子对大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响.方法 原代体外培养的1月龄SD大鼠(体重120～130 g)胸主动脉血管平滑肌细胞,于无血清DMEM培养液中培养24 h后,在含10%胎牛血清的DMEM培养液中继续培养.采用随机数字表法,将细胞随机分为5组,对照组(C组)不给予任何处理,继续培养12 h;不同浓度细胞因子组分别加入10%细胞因子(L组)、50%细胞因子(N组)、100%细胞因子(H组)孵育12 h,细胞因子包括IL-1β50 ng/ml+TNF-α 100ng/ml+干扰素γ(IFN-γ)500 ng/ml;L-精氨酸甲酯(L-NAME)组加入100%细胞因子+一氧化氮合酶抑制剂L-NAME 5 mmol/L孵育12 h.每组均重复6次.采用RT-PCR法检测AT1R mRNA的表达;采用Western blot法检测AT1R蛋白的表达.结果 与C组比较,L组、N组和H组血管平滑肌细胞AT1R mRNA和蛋白表达均下调,且呈浓度依赖性(P＜0.05或0.01),L-NAME组差异无统计学意义(P＞0.05);与L-NAME组比较,H组血管平滑肌细胞AT1R mRNA和蛋白表达均下凋(P＜0.01).结论 细胞因子可下凋大鼠血管平滑肌细胞AT1R的表达,其机制与促进一氧化氮的合成有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of cytokines on the expression of angiotensin Ⅱ type 1 receptor (AT1R) in vascular smooth muscle cells (VSMCs) in rats. Methods Primary cultured VSMCs from SD rat thoracic aorta were cultured in serum-free DMEM for 24 h, and then in DMEM supplemented with 10% fetal bovine serum for another 12 h. The cultured VSMCs were randomly divided into 5 groups (n =6 each): control group (group C); 10% cytokine group (group L); 50% cytokine group (group N); 100% cytokine group (group H) and L-arginine methy ester (L-NAME), an inhibitor of nitric oxide synthase) group. In group C, the cellswere cultured continuously for 12 h. In L, N and H groups, 10%, 50% and 100% cytokines (IL-1β 50 ng/ml +TNF-α 100 ng/ml + IFN-γ 500 ng/ml) were added to the culture medium respectively and the cells were then incubated for 12 h. In group L-NAME, 100% cytokines + L-NAME 5 mmol/L were added to the culture medium and the cells were then incubated for 12 h. The expression of AT1R mPNA and protin was determined by RT-PCR and Western blot respectively.Results Cytokines down-regulated AT1R mRNA and protein expression in a concentration-dependent manner (P ＜ 0.05 or 0.01). L-NAME reversed cytokines-induced changes in AT1R mRNA and protein expression ( P ＜ 0.01). Conclusion Cytokines can down-regulate the expression of AT1R in rat VSMCs and the mechanism is related to the NO synthesis.     

血管紧张素Ⅱ-1型受体基因多态性与肾疾病1型受体拮抗剂疗效的影响

血管紧张素Ⅱ-1型受体拮抗剂(AT1RA)有确切的肾保护作用.目前正逐步广泛用于肾疾病的治疗,且在某些方面较ACEI有着无法比拟的优势.不同的基因型人群其AT1R基因循环中的水平存在着明显差异[1],研究发现,AT1R基因A 1166 C存在变异,可分为AA/AC/CC三种基因型,与一些疾病的发生发展有关联,而且AT1RA应用于不同个体,其效果不完全相同.     

血管紧张素受体阻滞剂与糖尿病

目的:评价糖尿病患者使用血管紧张素Ⅱ 1型受体阻滞剂(ARBs)治疗高血压时,对降低各种原因所致的死亡率、心血管病及终末期肾脏病的发病率的影响. 方法:全面回顾并荟萃分析那些比较ARBs与安慰剂或标准抗高血压药物(如A CEI、β阻滞剂、利尿剂、钙通道阻滞剂)之间的,观察期在1年以上的随机、双盲对照研究 ,评价的主要指标是各种原因所致的死亡率、心血管病的发生率、死亡率以及终末期肾脏病的发生率.     

12-脂氧化酶对系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体表达的影响

目的 探讨12-脂氧化酶(12-LO)对系膜细胞血管紧张素(Ang)Ⅱ1型受体(AT1R)表达的影响。方法 用AngⅡ刺激正常和12-LO基因敲除小鼠肾系膜细胞后，观察p38 MAPK活性和细胞外基质(ECM)蛋白的变化。用12-LO的作用产物12(S)-HETE刺激的系膜细胞、转染12-LO基因的系膜细胞和采用显微切割法从正常和12-LO基因敲除小鼠肾脏提取的肾小球来观察AT1R的表达。采用RT-PCR和Western印迹分别检测目标基因mRNA和蛋白的表达。结果 AngⅡ的刺激可诱导正常系膜细胞p38 MAPK活性和ECM蛋白表达增高。然而，AngⅡ的刺激不能诱导12-LO基因敲除小鼠系膜细胞p38 MAPK活性和ECM蛋白表达升高。剂量依赖性和时间依赖性实验结果表明12(S)-HETE刺激可引起系膜细胞AT1蛋白水平增高，且AT1R mRNA水平升高有统计学意义(P < 0.01)。敲除肾小球内12-LO基因可有效地降低AT1R mRNA的表达(P < 0.01)，转染12-LO基因至系膜细胞使AT1R蛋白和mRNA的表达明显增多(P < 0.01)。结论 12-LO可上调系膜细胞AT1R的表达。     

血管紧张素Ⅱ1型受体在人胃癌细胞株中的表达及血管紧张素Ⅱ对MKN-28细胞增殖和周期的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)在人胃癌细胞株中的表达及AngⅡ对AT1R高表达胃癌细胞(MKN-28)增殖和周期的影响。方法 :采用Western印迹法检测AT1R在胃癌细胞中的表达。应用不同浓度的AngⅡ(10-10~10-5mol/L)、AT1R阻滞剂(氯沙坦)以及AngⅡ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)阻滞剂(PD123319)作用于MKN-28细胞,以CCK-8法测定各处理组细胞的相对数目,计算增殖促进效应;应用流式细胞仪检测各处理组细胞周期变化,计算各处理因素对细胞周期的影响。结果:AT1R在多数胃癌细胞株中表达,其中MKN-28细胞株表达量最高,AngⅡ可明显促进MKN-28细胞增殖以及G1期细胞向S、G2期转化,氯沙坦可明显抑制AngⅡ对MKN-28细胞的促增殖及促进G1期细胞向S、G2期转化的作用,PD123319无此作用。结论:AngⅡ通过AT1R明显促进MKN-28细胞增殖,促进G1期细胞向S、G2期转化。     

Relationship of angiotensin II type 1 receptor autoantibody and renal cell apoptosis induced by caspase-12 in diabetic nephropathy rats

Objective To study the relationship of angiotensin II type 1 receptor (AT1R) autoantibody (AT1-AA) and renal cell apoptosis induced by caspase-12 in diabetic nephropathy (DN) rats. Methods High-sucrose and high-fat diet and intraperitoneal injection of streptozotocin (35 mg/kg) were utilized to establish DN rat model. Serum AT1-AA was detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and renal cell apoptosis was detected by TUNEL staining. Furthermore, the mRNA levels of the endoplasmic reticulum stress (ERS) chaperone protein glucose regulated protein 78 (GRP78) and ERS-associated apoptosis protein caspase-12 were measured by real-time quantitative PCR. Additionally, the levels of GRP78 and caspase-12 protein were measured by Western blotting. Results The renal cell apoptosis rate in DN group was increased significantly (P＜0.01), and the renal cells apoptosis rate in AT1-AA positive DN group was higher than that in AT1-AA negative DN group [(20.05±1.71)% vs (13.24±4.93)%, P＜0.01]. The mRNA expressions of GRP78 and caspase-12 in DN group, in comparison to NC group, were increased significantly (P＜0.01), as well as the proteins (P＜0.01). And the expression of these mRNA and proteins had significant increment in AT1-AA positive DN rats when compared with AT1-AA negative DN rats (P＜0.05). Conclusions AT1-AA can induce ERS in the renal tissue of DN rats, and promote renal cell apoptosis likely via the modulation of caspase-12 signaling pathway.     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对5/6肾切除鼠的肾脏保护作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂氯沙坦对5/6肾切除大鼠肾脏病变的保护作用。方法将5/6肾切除鼠分为氯沙坦治疗组和对照组，设假手术组为正常对照。检测各组术后第2、4、6周的尿蛋白及第6周的血清尿素氮、肌酐、总蛋白、白蛋白，观察第6周肾组织病理改变，并应用免疫组织化学方法检测肾组织内纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原在肾小球的沉积。结果氯沙坦治疗组比对照组尿蛋白排泄量明显减少(P<0.01)，血肌酐、尿素氮水平下降(P<0.01)，肾小球增生、硬化程度明显减轻；免疫组织化学显示，对照组肾小球内FN和Ⅳ型胶原沉积增多，治疗组FN和IV型胶原沉积比对照组减少(P<0.01)。结论氯沙坦对5/6肾切除鼠肾脏病变有部分保护作用。     

NADPH氧化酶抑制剂apocynin对大鼠糖尿病肾小球细胞外基质代谢的影响

目的探讨NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA在糖尿病大鼠肾脏表达时间模式及抑制NADPH氧化酶活性对肾小球细胞外基质(ECM)代谢的影响。方法链脲佐菌素诱导的大鼠糖尿病模型随机地分为糖尿病非治疗组(DM),观察12周;NADPH氧化酶抑制剂apocynin治疗组(DM+Apo,0.2g·kg-1·d-1),疗程8周。用RT-PCR检测肾脏NADPH氧化酶亚基p22phoxmRNA的表达。免疫组织化学检测肾脏纤连蛋白(FN)表达。白明胶酶谱法(zymography)检测肾脏基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性。并测定Scr、尿蛋白量和肾重指数。结果DM组肾脏p22phoxmRNA的表达在4、6和8周时较正常对照组(C)明显升高(P<0.05);12周时降低至正常水平。DM+Apo组肾脏p22phoxmRNA的表达与DM组差异无统计学意义(P>0.05),但可显著逆转由糖尿病导致的肾小球体积、肾小球FN表达、肾小球ECM含量、Scr、尿蛋白量和肾重指数的升高(P<0.05),并显著提高肾脏MMP-9活性(P<0.05)。结论NADPH氧化酶的过度表达在糖尿病肾病(DN)发病的早期阶段起重要作用。抑制NADPH氧化酶活性的治疗措施可减少DN肾小球ECM积聚、延缓DN的发生和发展。     

p21反义寡核苷酸对高糖培养人系膜细胞p21蛋白和细胞外基质表达的影响

目的 探讨体外转染p21反义寡核苷酸(p21 ASODN)对高糖培养的人肾小球系膜细胞p21蛋白及细胞外基质表达的作用。 方法 体外培养的人肾小球系膜细胞(HGMC)应用Lipofectamine 2000分别转染50 nmol/L或100 nmol/L的p21 ASODN或随机序列寡核苷酸(SCODN)。予高糖(30 mmol/L葡萄糖)培养液处理不同时间后收集HGMC及其培养液上清。用Western印迹检测系膜细胞p21蛋白、纤连蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的表达。用ELISA法检测培养液上清中FN和LN含量。 结果 高糖呈时间依赖性地促进体外培养的HGMC p21蛋白表达，并使FN及LN等细胞外基质合成与分泌增加。HGMC转染p21 ASODN后呈浓度依赖性抑制高糖所致p21表达增加，同时明显减少系膜细胞及其培养液上清中FN和LN的合成与分泌，而SCODN对p21表达或FN和LN的合成与分泌无明显影响。 结论 高糖培养可促使HGMC p21蛋白以及FN与LN表达增加，转染p21 ASODN可抑制上述高糖的作用。调控HGMC p21的表达水平可能成为防治糖尿病肾病、特别是早期病变的有效途经之一。     

Adonesine A1 receptor and megalin defect in diabetic mice with early kidney disease

Objective To observe the effect of adenosine A1 receptor (A1AR) on the megalin defect in type 1 diabetic mice with early kidney disease. Methods 7-8 week-old, baseline body weight and fasting blood glucose matched wild type (WT) C57BL/6J mice were selected, and randomly divided into two groups: control group (n=6) and WT DM group (n=6). In the same way, male A1AR knock-out C57BL/6J mice were selected as A1AR-/- DM group (n=6). DM model was established by intraperitoneal injection of streptozocin. The blood glucose (BG), body weight (BW), kidney weight (KW), 24 h proteinuria (24hUP) and albumin creatine ratio (ACR) were measured at 4 weeks. The renal pathological lesion was observed and the expression of megalin in proximal tubules was examined by immunohistochemistry. The expression of caspase-1, IL-18 and A1AR were detected by Western blotting. Results At 4th week, compared with WT control mice, the BG, BW, KW and 24hUP of WT DM mice were increased significantly (n=6, P＜0.01), with the pathological glomerular enlargement, mesangial cell proliferation, extracellular matrix accumulation and renal tubule hypertrophy being observed. Immunohistochemistry revealed decreased expression of megalin, an important multiligand protein receptor on the brush border of proximal tubular epithelial cells in WT DM mice, which was correlated with 24hUP (r=-0.645, P＜0.01). Compared with the control mice, the expressions of caspase-1, IL-18 and A1AR were significantly increased in WT DM mice (P＜0.05). For A1AR-/- DM mice, more serious pathological lesion and megalin defect, together with increasing of casapase-1 and heavier proteinuria were observed than those in WT DM mice. Conclusion A1AR may play a protective role in megalin expression of diabetic mice with early kidney disease, in which the mechanism may be associated with caspase-1 related pyroptosis pathway. The details need further exploration.     

胰岛素样生长因子1受体抑制剂可减轻糖尿病肾病小鼠肾小管病变

目的探讨胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)抑制剂在缓解糖尿病肾病(DKD)小鼠肾小管病变中的作用。方法C57BL/6J雄性小鼠被随机分为正常对照组(n=10)和DKD模型组(n=30)。用单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,150 mg/kg)的方法建立糖尿病肾病模型。建模成功后,DKD模型组小鼠被随机分为DKD组(n=10)、贝那普利组(n=10)和IGF-1R抑制剂组(n=10)。IGF-1R抑制剂组给予30 mg·kg-1·d-1 IGF-1R抑制剂灌胃;贝那普利组给予30 mg·kg-1·d-1贝那普利灌胃;正常对照组和DKD组分别给予等量生理盐水灌胃。8周后处死小鼠,记录小鼠体重、肾重。收集小鼠血清、尿液和肾脏样本。自动生化仪上测定血糖、尿白蛋白等生化指标,计算尿白蛋白排泄率。HE、PAS染色法观察小鼠肾脏病理改变。免疫组化、Western印迹法测定肾组织磷酸化(p)IGF-1R的表达。结果与正常对照组比较,DKD组小鼠的随机血糖、肾重/体重、尿白蛋白排泄率明显升高(均P<0.01)。DKD组小鼠肾脏病理表现为肾小球增大,肾小管管腔狭窄,肾小管肿胀、萎缩;近端小管上皮(PTE)细胞数目减少,肾小管损伤评分增加,平均肾小球体积增大,肾组织pIGF-1R表达增加(均P<0.05)。与DKD组相比,IGF-1R抑制剂组和贝那普利组小鼠尿白蛋白排泄率显著降低(P<0.01),肾脏病理改变减轻,且IGF-1R抑制剂组的作用效果更加显著。与DKD组相比,IGF-1R抑制剂组肾组织pIGF-1R蛋白表达减少(P<0.05);与贝那普利组相比,IGF-1R抑制剂组肾组织pIGF-1R蛋白表达减少(P<0.05)。结论IGF-1R抑制剂能减轻DKD小鼠肾小管病变,且效果优于贝那普利。     

钙三醇抑制肾间质成纤维细胞的活化

目的 通过观察钙三醇对肾间质成纤维细胞增殖和凋亡的影响，及其对转化生长因子（TGF）β1诱导的成纤维细胞转分化和细胞外基质(ECM)合成的干预作用，旨在探讨钙三醇抗肾间质纤维化的潜在效应及相关机制。 方法 体外培养大鼠肾间质成纤维细胞NRK-49F，分别以不同浓度TGF-β1（1、2、5和10 μg/L）和（或）不同浓度钙三醇（10－4、10－5、10－6、10－7、和10－8 mmol/L）进行干扰。MTT法观察细胞增殖情况；流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡改变；实时定量PCR和Western印迹法分别检测细胞内α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、结缔组织生成因子（CTGF）及纤连蛋白（FN）的mRNA和蛋白表达。 结果 钙三醇能明显抑制正常和TGF-β1（5 μg/L）诱导的NRK-49F细胞增殖（P < 0.01）。经不同浓度钙三醇（10－4、10－5、10－6、10－7、和10－8 mmol/L）作用48 h后，NRK-49F细胞G2/S期细胞比例较TGF-β1刺激组均明显减少（分别为25.88%、21.81%、21.73%、23.28%、23.61%比27.42%，均P < 0.05），但对细胞凋亡无明显影响。NRK-49F细胞经TGF-β1刺激后，其α-SMA、CTGF、FN mRNA表达量显著上升，并在TGF-β1 1~5 μg/L的范围内呈剂量依赖效应。钙三醇能明显抑制TGF-β1诱导的α-SMA、CTGF、FN mRNA表达上调（均P < 0.05），而不同钙三醇浓度干预组之间差异无统计学意义。钙三醇能显著降低TGF-β1诱导的α-SMA和FN蛋白表达（P < 0.05）。 结论 钙三醇可通过G1期停滞抑制大鼠肾间质成纤维细胞增殖，但不影响凋亡。钙三醇具有拮抗 TGF-β1致肾间质纤维化的潜在作用。